乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分析
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C反应蛋白的检测与临床应用进展C反应蛋白( CRP) 是人体急性时相蛋白( APP) 中最主要、最敏感的标志物之一。
在临床上常作为一种检测感染过程和自身免疫疾病的工具, 如病毒与细菌的鉴别诊断、疾病治疗监测、系统性红斑狼疮( SLE) 等。
近年来, 随着研究的不断深入和 CRP 检测手段的不断改善, 特别是运用高敏感方法测出的超敏C反应蛋白( hs CRP) 可作为冠状动脉疾病( CVD)的一种独立危险因素, 也可作为心血管疾病和动脉硬化的预测指标] , CRP已逐渐引起临床的重视。
现对 CRP 的生物化学特征、检测方法及临床应用等进行综述如下。
1 CRP 的生物化学特征1.CRP的发现 CRP是1930年由Tillett和Francis发现的肺炎患者血清中一种与肺炎球菌(现称肺炎链球菌)非特异性的菌体多糖成分C多糖(CPS)发生沉淀反应的物质。
CRP的来源与分布 CRP主要由肝细胞在白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子刺激下合成, 炎性反应局部巨噬细胞也可少量产生。
正常合成率 1~ 10 mg/ d, 急性炎性反应时每天合成大于1 g。
CRP不能通过胎盘, 在体内分布甚广, 除血液外, 胸腔积液、腹水、心包液、关节液中均可测出。
2 常用检测方法目前, CPR 的检测方法一般分为定性和定量两类。
常用的检测方法有免疫扩散法, 乳胶凝集试验, 放射免疫法测定( RIA) 及酶联免疫吸附试验( ELISA) 等。
2. 1 ELISA 法该检测采用双抗夹心法, 将检测缓冲液和血液样本在检测瓶中进行混合, 荧光标记缓冲液中的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物, 当混合样品被放到检测板的样本上并且通过毛细血管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上, 该复合物被测试带上的抗CRP抗体所捕获, 荧光抗体的信号强度反映了被捕获的CRP数量, 经过免疫荧光分析仪的检测, 能够反映出血中CRP的浓度。
两种检测方法测定C反应蛋白的对比分析发表时间:2015-07-06T11:26:19.993Z 来源:《医药前沿》2015年第5期供稿作者:刘雍吴玉双蔡怀英[导读] 金标法虽然有准确性较好、快速方便、用血量少等优点,但受标本和操作的影响因素非常大。
刘雍吴玉双蔡怀英(贵州省六盘水市水城县人民医院检验科贵州六盘水 553006)【摘要】目的:乳胶增强散射免疫比浊法和胶体金法检测C反应蛋白(CRP)的结果比较分析。
方法:分别采用雅培C8000型全自动生化分析仪与南京基蛋生物科技FiA8000免疫定量分析仪在5个浓度阶段检测水平的C反应蛋白标本结果。
结果:CRP浓度为3.0~80.0mg/L,对2种方法检测干扰10%,在可接受范围内。
乳糜微粒≤3000mg/dl时免疫定量分析仪不受影响(干扰10%)。
相关分析的结果显示两种方法5个浓度阶段检测结果的相关性良好(r=0.98,P=0.01)。
结论:乳胶增强散射免疫比浊法和胶体金法在线性范围内的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。
虽然系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。
【关键词】 C反应蛋白;乳胶增强散射免疫比浊法;比对试验【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2015)05-0144-02Two kinds of detection method was developed for the determination of CRP Liu Yong, Wu Yushuang, Cai Huaiying. Shuicheng county People's Hospital of Liupanshui, in Guizhou province, Liupanshui 553006, China【Abstract】Objective Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and colloidal gold method detection of c-reactive protein (CRP) as a result of the comparative analysis. Methods With abbott C8000 type full automatic biochemical analyzer with nanjing egg biotechnology FiA8000 immune quantitative analyzer in five concentration phase detection levels of c-reactive protein specimen results. Results CRP concentration is 3.0 ~ 80.0 mg/L, the interference of two methods is 10%, within the acceptable range. Chyle particles 3000 mg/dl or less quantitative analyzer is not affected when immune interference (10%). Correlation analysis results show that the two methods of five phase concentration detection results of good correlation (r = 0.98, P0.01). Conclusions Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and the precision of the colloidal gold method in linear range, anti-interference, linear range meets the requirements. Although the system have a certain bias between the determination results, but also meet the requirements of clinical testing.【Key words】C-reactive protein; Latex enhanced scattering Immune turbidimetry; The comparison testC反应蛋白(CRP)是一种炎症急性识相反应物,它是由肝细胞合成的一种急性反应蛋白,是内源性免疫反应蛋白五聚环蛋白家族成员[1]。
C反应蛋白在指导抗生素使用中的意义C–反应蛋白是是人类重要的炎症急性期反应蛋白,是临床上最常用的炎症急性时相反应指标,作为预测细菌感染和指导抗生素使用具有重要意义。
一、抗生素的使用1. 抗生素的使用现状自青霉素被发现以来,人类就进人使用抗生素时代。
应用抗生素已成为治疗细菌感染首选药物,使多数细菌感染得到有效地抑制。
人们曾乐观地认为征服感染性疾病将成为可能,由于没有有效的鉴别细菌性感染和病毒性感染的方法,在使用抗生素的过程中出现抗生素不合理使用和滥用,细菌耐药同步出现和升高,且日渐突出,成为世界医疗中存在的大问题[1]。
世界卫生组织(WHO)通过对世界各地不同地区的监测指出,各国都存在一定程度的抗生素不合理应用,我国尤为严重。
医院术后应用抗生素和抗菌药物的处方数都明显高于欧美发达国家,抗生素率使用不当率高80%[2]。
抗生素应用混乱和滥用后果最明显的就是强耐药菌株的出现导致细菌耐药性快速增长、药源性疾病日渐增多,到最后出现“超级细菌”,导致无药可治。
因此,严格掌握抗生素的治疗指征及疗程显得非常重要。
2.抗生素使用管理2011年卫生部颁布的《抗菌药物临床应用管理办法》(以下简称《办法》)被称为“史上最严限止抗生素使用令”,其以安全性、有效性、细菌耐药情况和价格因素4个方面为基本原则,将抗菌药物分为非限制使用、限制使用与特殊使用三级管理。
其中明确规定了不同等级医生的开药权限。
严重违规使用抗菌药物的医生将被吊销执业证书。
根据《办法》规定,医生必须根据患者的症状、体征以及血常规、尿常规等实验结果,初步判定是细菌性感染的才能够使用抗菌性药物,而缺乏细菌感染的证据以及病毒性感染的病人就不能够使用抗菌性药物。
二、C反应蛋白在细菌性感染判断中的应用感染性疾病最常用的实验室依据是血常规,但WBC受很多因素影响,年龄、环境、生理状况、治疗干预等都可以使WBC发生改变,从而影响医生的正确判断[3]。
C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是人类重要的急性期反应蛋白,循环中的 CRP 半衰期为19h。
1性能指标
1.1外观
a)试剂应为乳白色悬浊液,无异物和凝集物;
b)试剂盒应组分齐全,内外包装均应完整,标签清晰;
c)液体试剂无渗漏。
1.2净含量
试剂的净含量应不少于单瓶规格对应的单瓶净含量体积。
1.3检出限
不高于0.50mg/L。
1.4准确度
准确度应符合如下要求:
企业参考品测试:对具有溯源性的企业参考品进行检查,其测量结果的相对偏差
应不超过±10.0%。
1.5线性
试剂盒在(0.20~320.00)mg/L范围内:
a) 线性相关系数r应不小于0.990;
b)(0.20~10.00)mg/L范围内,线性绝对偏差应不大于±1.00mg/L;(10.00~100.00)mg/L范围内,线性相对偏差应不大于±15.0%;(100.00~320.00)mg/L 范围内,线性相对偏差应不大于±20.0%。
1.6重复性
选择2个不同浓度水平的样本,各重复测试10次,检测结果CV≤10%。
1.7批间差
用3 个CRP 批号试剂盒分别选择 2 个不同浓度水平的样本,则 3 个CRP 批号试剂盒之间的批间相对极差不大于 15%。
严重烧伤患者血清IL-6、CRP和SAA水平变化徐忠玉;邓小军;林香【摘要】目的探讨严重烧伤患者血清IL-6、CRP和SAA水平变化及临床意义.方法对35例严重烧伤患者,应用ELISA法检测血清IL-6含量和乳胶增强的速率散射比浊法定量检测血清SAA和CRP含量.结果严重烧伤患者血清IL-6、CRP和SAA 水平均显著高于正常对照组,大部分患者第3天左右达到或接近高峰,CRP、SAA变化与IL-6水平呈正相关.结论严重烧伤患者血清IL-6、CRP、SAA水平变化与其伤情及预后密切相关.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2011(029)003【总页数】2页(P242-243)【关键词】严重烧伤;白细胞介素6;C反应蛋白;血清淀粉样蛋白A【作者】徐忠玉;邓小军;林香【作者单位】解放军第一七五医院检验科,福建,漳州,363000;解放军第一七五医院检验科,福建,漳州,363000;解放军第一七五医院检验科,福建,漳州,363000【正文语种】中文【中图分类】R446.62;R644;R826.5白细胞介素6(IL-6)主要是由单核巨噬细胞、成纤维细胞和内皮细胞产生,具有多种生物学功能的细胞因子。
近年来的研究发现,IL-6是介导免疫、炎症等急性期反应最为重要的细胞因子之一,能诱导肝细胞产生C-反应蛋白(CRP)和血清淀粉样蛋白A(SAA)等急性时相蛋白,它还是参与烧伤病理生理过程的重要介质之一。
本文通过对严重烧伤患者血中IL-6、CRP和SAA水平的动态观察,旨在探讨它们烧伤后病情发展中作用和意义。
1 对象与方法1.1 对象本院住院的严重烧伤患者35例,其中男性28例,女性7例,年龄19~75岁,烧伤面积30%~0%,生存期大于30d。
正常对照30例,均为健康体检者。
1.2 标本收集分别在烧伤后第 1、3、7、14、21、28天空腹采集静脉血,分离血清,置-80℃低温冰箱保存,批量检测。
1.3方法1.3 .1血清SAA和CRP定量检测应用BN ProSpec特定蛋白分析仪和配套试剂,乳胶增强的速率散射比浊法。
C-反应蛋白(CRP)测定试剂盒(胶乳增强比浊法)使用说明书【产品名称】通用名称:C-反应蛋白(CRP)测定试剂盒(胶乳增强比浊法)英文名称:C-Reactive Protein Test Kit(Latex-Enhanced Turbidimetric Assay)【包装规格】50人份/盒;200人份/盒【预期用途】用于体外定量检测人全血/血清/血浆中的C反应蛋白含量。
【检验原理】血液中的CRP抗原与结合在胶乳颗粒表面的抗人CRP多克隆抗体结合,发生抗原抗体反应,形成胶乳-抗体-抗原结合物。
测定此结合物在630nm处的浊度,当光线通过反应悬液时发生散射并由特定蛋白分析仪检测到,散射强度与抗原抗体免疫复合物的含量成正比。
【储存条件及有效期】1、试剂盒于2℃~8℃密封保存,不得冷冻。
2、试剂盒有效期为12个月。
【适用仪器】本公司生产的QR系列特定蛋白分析仪器。
【样本要求】1、指2、血用采血针刺破手指,擦去第一滴血,从第二滴起用玻璃毛细管吸取10μl。
3、抗凝全血全血可收集在用EDTA和肝素抗凝的小管内,颠倒混匀,并按测试程序进行分析,如果测试不能立即执行,全血可以在2-8℃下贮存48小时。
3、血清取静脉血标本并分离血清,如果不立即分析,血清在2-8℃可贮存7天,在-20℃以下可贮存7个月。
4、血浆将全血标本收集到含抗凝剂(如EDTA、肝素)的试管内,从全血细胞内分离血浆应避免溶血,微量溶血不影响测试结果【检测方法】1、测量杯中应加入的试剂量2、操作步骤:(1)开机显示“请读卡”,将对应批号的磁卡置于读卡槽,读卡正确后屏幕显示该试剂名称及批号,仪器状态指示灯亮(黄绿色)。
请仔细核对。
(2)批号试剂确认后,将10μl样本加入到装有400μl反应缓冲液(R1)和搅拌子的比色杯中。
加样品时注意尽量不要产生气泡。
(3)将比色杯放入检测口,轻轻按压比色杯直到其接触到底部。
仪器自动检测到比色杯后状态指示灯灭。
(4) 当仪器显示“加入试剂[R2]”时,将80μl CRP抗体胶乳结合物(R2)加入到比色杯中。
CRP和hs-CRP在儿童感染疾病的临床应用价值摘要】儿童感染病发生率高、可致死,早期感染患儿没有典型症状表现,一般的血常规检查等手段对感染反映效果不理想,而血、痰、尿及细菌培养等检测手段用时长。
CRP(C反应蛋白)指标会受缺血、外伤、炎症、感染影响,hs-CRP(超敏C反应蛋白)指标在儿童早期感染阶段会有变化。
临床上可规范检测CRP、hs-CRP指标,联合血小板、血培养及血常规检测结果指导临床诊断和治疗工作。
【关键词】CRP hs-CRP 儿童感染疾病应用价值【中图分类号】R725 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)15-0285-02C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)为急性时相反应蛋白,感染、炎症状态下的该项指标会异常升高,属于主要炎症敏感指标[1]。
超敏C反应蛋白(highly sensitive C-reactive protein, hs-CRP)是以敏感度更高的乳胶增强透射比浊法检测所得,此种检测方式可与血常规检测同时完成,用时短、效率高、血量少[2]。
本文综述了CRP、hs-CRP检测在儿童感染疾病临床诊疗工作中的应用特点及价值。
1 CRP检测方式及价值采集2mL的静脉血标本、置于肝素抗凝管内保存,以日本常光艾瑞德快速免疫分析仪(i-Reader) 及相应检测用试剂对静脉血标本中的CRP水平进行检测分析。
也有研究以胶体金双抗体夹心法测定CRP水平,完成静脉血标本采集和处理后,以特定蛋白金标检测仪测定CRP水平,正常的CRP水平为0~10mg/L。
在行CRP测定的同时,开展白细胞计数、血、痰、图片镜检、细菌培养检查,其中的白细胞计数检测借助血球计数仪及配套试剂完成。
感染疾病患儿血标本CRP>10mg/L的阳性率在95%左右,而健康儿童静脉血标本的CRP水平均<10mg/L,感染疾病患儿CRP水平明显高于健康儿童[3];且CRP检测儿童感染疾病的检出率明显高于白细胞计数法的检出率。
【摘要】目的:评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性。
方法:用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP 浓度。
结果:两种方法在8—20mg/L、20~40mg/L、40~80mg/L、80~160mg/L、160~300mg/L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997.说明两种方法的相关性是良好的,而在低值1~8mg/L的测定中两方法的相关系数为0.928.结论:速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果。
【关键词】透射免疫比浊法散射免疫比浊法C反应蛋白在急性应急性疾病时如大手术、重度创伤、心肌梗死、严重感染、肿瘤等,血浆中某些蛋白浓度可明显增高或降低,这种现象称为急性时相反应,这些蛋白统称为急性时相反应蛋白。
最具有代表性的急性时相蛋白首推C反应蛋白(CRP),CRP是目前临床上最有用的急性时相反应的一个敏感指标。
CRP作为炎症标志物,本身尽管为非特异性的,但对于细菌感染、各种炎症过程及组织坏死与损伤及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效判断,都具有重要的意义J。
CRP的检测方法目前使用比较多的有胶乳凝集试验、免疫沉淀法、免疫浊度法和标记免疫测定法等,而其中的透射免疫比浊法和速率散射比浊法是目前公认为检测CRP较为精确的两种方法。
为了评估两种方法的灵敏度和特异性,我们收集了80份血清,用免疫透射比浊法和速率散射比浊法分别进行CRP的检测,并作了结果比较。
一、材料与方法1、标本来源样本血清来源于80例本院门诊和住院病人,其中骨折病员21例,确诊的恶性肿瘤病人15例,急性肺炎病员22例,冠心病病人10例,外科手术病员12例。
采集空腹血后及时分离血清,并置-20℃保存备用。
2、仪器日立7170型自动生化分析仪,BeckmanArray 360特定蛋白检测系统。
3、试剂透射免疫比浊法试剂盒及配套的校准品由上海基恩科技有限公司提供,批号为ISEP03。
几种方法检测C反应蛋白的调查分析
周志芳
【期刊名称】《中国医药指南》
【年(卷),期】2012(10)13
【摘要】目的就几种方法检测C反应蛋白进行调查分析.方法选取我院2007 年12 月至2009 年12 月进行血清及全血样本测定的患者100 例,年龄10 ~ 63 岁,平均38.5 岁,女45 例,男55 例,阳性32 例,阳性率32%.我科用的是迈克的试剂,仪器为UA400.分别采用乳胶增强免疫透射比浊法和速率散射免疫比浊法.结果在低值和高值测定中,乳胶增强透射免疫比浊法劣于速率散射免疫比浊法.结论 hs-CRP 是一个心血管事件较好的预测指标,个体生理和日间变异较少,测定方法简便,美国等发达国家已经把hs-CRP 检测作为每年健康体检的内容之一.CRP 定量试验在支持诊断、检测病情、估价预后等方面均有不可估量的价值,速度快、简便实用、可靠性强,值得临床上推广应用.
【总页数】2页(P243-244)
【作者】周志芳
【作者单位】新疆农一师阿拉尔市医院,新疆,阿拉尔,844300
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11
【相关文献】
1.几种检测方法在食品农药残留检测中的应用 [J], 闫冰
2.浅谈基桩检测中桩身完整性检测的几种方法及选用 [J], 冯建国
3.浅谈在检测机构检测质量控制中常用的几种方法 [J], 曹伟
4.两种方法检测血清C反应蛋白结果比对与一致性评价方法探讨 [J], 徐东江;张会英;吴俊
5.几种无损检测方法在混凝土强度检测中的应用研究 [J], 张兵
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C反应蛋白CRP测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确2 原理免疫透射比浊法样品和试剂R1加入加入试剂R2启动反应包被在乳胶上的抗C反应蛋白抗体和样本中的抗体形成抗原抗体复合物,出现凝集,进行透射比浊检测。
3 标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,2天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司CRP试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014)4.1.1试剂组成:R1:TRIS 缓冲液:16 mmol/l,pH 7.4;防腐剂。
R2:包被抗CRP鼠单克隆抗体的乳胶颗粒:0.1%;氨基乙酸缓冲液:50 mmol/L,pH 8.0;防腐剂。
4.1.2试剂准备:可随时取用, 2-80C可稳定到有效期,试剂避免冷冻。
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8°C下保存期限:见试剂标签上的有效期. 机上稳定期:90天4.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染则试剂不能使用。
4.1.5注意事项:试剂中含防腐剂,稳定剂,避免接触皮肤及粘膜。
4.2 校准品:使用罗氏多项生化校准品提供的CRP校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
超敏C反应蛋白检测 (免疫散射比浊法)作业指导书1。
目的用于超敏C反应蛋白检测,确保检测结果的准确。
2. 检验原理试剂盒采用散射比浊法.散射比浊法,是根据待验样品在反应过程中散射光的强度变化来确定CRP的浓度。
在该方法使用抗人CRP抗体包被的胶乳颗粒和样品中的CRP进行抗原—抗体反应。
反应完成后,用透射比浊法检测吸光度的变化反映CRP浓度,散射光的强度与hs—CRP的含量呈正比.3。
主要组成成份PA900特定蛋白分析仪配套试剂:由CRP抗血清(兔抗人CRP抗体)、反应液(含溶血素的磷酸盐缓冲液)、清洗液(含吐温20的磷酸盐缓冲液)、CRP RFID卡和说明书组成。
4. 储存条件及有效期试剂2-30℃干燥处保存,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻!5。
样本要求5。
1肝素或EDTA全血。
不可反复冻融。
不可使用已被污染的标本。
5。
2 样本应该当天进行检测;当天不能检测的样本,需低温保存.稳定性:2~8℃保存可稳定8 天。
6. 检验方法6。
1:首先要确保仪器在检测界面而不是待机界面。
如果是待机界面,点击仪器屏幕任意处,仪器操作并保养进入待机状态。
确保已完成刷卡,并且已更换试剂(无需更换试剂的情况除外)、比色杯状态正常(如果比色杯异常,请更换比色杯),刷卡及更换试剂、比色杯。
6。
2: 点击界面中的“设置”,仪器进入“设置”界面,设置样本类型、HCT值、参考值范围等项目系统参数,选择相应的样本来源,如果样本已预稀释,则还需设置预稀释比例.6.3:点击界面中的“分析",进入“分析”界面;图7-1 样本分析界面6。
4:用条码扫描仪扫描待测样本的编号,如果样本没有条码,同时又需要连接LIS,可将样本条码扫描入LIS系统,查看LIS系统内相对应的样本编号,在屏幕的“当前样本编号"内,用扫描仪扫描输入或手工输入和LIS系统内一致的样本编号。
将实时显示在如上图7—1所示的当前样本编号区域,如果扫描错误,或者需要重新手动编号,只需要在未启动分析之前,修改当前样本编号即可(重新扫描或手动输入修改);混匀全血,打开试管盖。
乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分析作者:蒋红梅王永平来源:《医学信息》2015年第09期摘要:目的乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析;方法随机收集239例住院患者,采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度,并比较其检测结果相关性;结果当C-反应蛋白浓度>20mg/L(r=0.944)时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度关键词:C反应蛋白;相关性分析C-反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是一种急性时相反应蛋白,在发生时相反应时其变化显著、迅速,在感染疾病、动脉粥样硬化以及肿瘤等疾病中均有所表达[1]。
近年来,C反应蛋白在临床预测和评估疾病的进展中得以广泛应用[2],故CRP检测方法及其检测结果的准确性也受到越来越多的重视。
目前CRP检测方法主要有单向免疫扩散法、乳胶增强透射免疫比浊法、乳胶凝集试验、速率散射法、免疫沉淀法、免疫浊度法和免疫标记测定法等。
其中,乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法是目前认为检测有效率较高的两种方法[3]。
本文就此两种检测方法作对比,探讨不同方法检测CRP的相关性。
1资料与方法1.1一般资料随机选取住院患者239例,其中男134例,女105例;年龄16~65岁,平均42岁。
收集所有入选者清晨空腹肘静脉血分别于肝素钠抗凝管和EDTA抗凝试管中,前者分离血浆之后与EDTA抗凝全血保存于4℃冰箱,进行统一检测。
1.2仪器与试剂日立7600全自动生化检测仪(日本),Radim公司delta全自动全血超敏CRP检测仪(中国上海)。
乳胶增强透射比浊法检测试剂盒由上海德赛诊断系统有限公司提供,最低检测值为0.3mg/L,线性范围为0.3~350mg/L,按照配套标准品使用要求,用9g/l氯化钠溶液为空白,5个不同水平的校准液经过测定,仪器拟合标准曲线;速率散射比浊法检测试剂盒由Radim公司提供,最低检测值为0.6mg/L,高值自动稀释(稀释倍数1:1-1:64000倍),刷入每批试剂的标准曲线于仪器内,每天用质控血浆同标本一起检测,均在限值范围内。
早期监测CRP、尿微量清蛋白与血脂水平对心血管疾病的诊断价值【摘要】目的分析早期监测crp、尿微量清蛋白与血脂水平对心血管疾病的诊断价值。
方法选取我院心血管内科从2011年11月至2012年11月间收治的80例心血管疾病患者,依照患者的不同病症反应,将其均分为治疗组a与治疗组b,治疗组a为急性心肌梗死患者,治疗组b为高血压患者;同时选取同期来我院行健康体检的正常受检者40例,作为对照组c。
以上患者在检测之前的8小时需要禁食;对于受检者的crp,一般留取患者的24小时的尿液,对其尿微量清蛋白进行测定。
结果在对患者的以上指标进行测定之后,这三组的crp、malb及血脂水平检出率均有所不同,其中对照组c的检出率最低,每组之间相互比较,具有显著的差异,有统计学意义(p<0.05)。
结论对心血管疾病患者进行早期监测crp、尿微量清蛋白与血脂水平,有助于判定心血管疾病类型,这对疾病以后的诊断有着重大指导意义。
【关键词】心血管疾病;急性心肌梗死;高血压;尿微量清蛋;诊断价值doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.09.749 文章编号:1004-7484(2013)-09-5400-02近些年来,随着医疗技术的飞速发展,一些新的检测手段与仪器被应用于心血管疾病诊断中。
近期,多家权威医疗研究机构证实c 反应蛋白(crp)为慢性炎症疾病的标志物,同时与心血管疾病有着较为紧密的联系。
尿微量清蛋白为动脉硬化的早期表现,也与一般性的心血管疾病有着较为紧密的联系。
其中血脂水平高低也是临床诊断心血管疾病的一大指标。
对此,本文选取我院心血管内科从2011年11月至2012年11月间收治的80例心血管疾病患者的临床资料进行分析。
现报告如下:1 资料与方法1.1 临床资料选取我院心血管内科从2011年11月至2012年11月间收治的80例心血管疾病患者,依照患者的不同病症反应,将其均分为治疗组a与治疗组b,治疗组a为急性心肌梗死患者,治疗组b为高血压患者;同时选取同期来我院行健康体检的正常受检者40例,作为对照组c。
乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分
析
目的乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析;方法随机收集239例住院患者,采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度,并比较其检测结果相关性;结果当C-反应蛋白浓度>20mg/L(r=0.944)时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度20mg/L)86例进行统计分析。
1.4统计方法计量资料用x±s表示,采用SPSS19.0对数据进行统计分析。
2结果
两种方法对不同浓度的CRP检测比较,由表1可见,在低、中值时,全血CRP与血浆CRP相关性不如高值相关性好,相关系数分别为r=0.786、0.822、0.944。
具有统计学意义,见表1。
表1可得:不同的方法检测CRP结果有一定的差异,需要早日完善其检测的标准化,当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确,可认为两种检测方法测定CRP结果有差异。
3讨论
CRP是由肝脏细胞合成和分泌的非特异性炎症反应因子。
IL-6、IL-1、TNF-a 等能够调节其生成。
CRP的高低与急性冠脉综合征病情的严重程度存在一定的相关性,可作为监测病情、预测冠心病严重性的常规指标之一,对观察疗效、判断预后也具有重要意义[4],同时,血浆CRP水平与青年脑梗死患者病情的发展、预后也密切相关,是青年脑梗死的危险因素,检测其含量可判断患者脑梗死的严重程度及预后[5]。
乳胶增强透射免疫比浊法基本原理是将抗体吸附于乳胶颗粒上,当抗原抗体结合时,乳胶随之发生凝集反应,形成不同大小的乳胶颗粒,从而阻断光线的透射,通过透射光线的减弱程度判断乳胶凝集的程度。
其具有快速、准确和简便的特点[6]。
速率散射免疫比浊法是以一定波长的光沿水平轴照射,当碰到免疫复合物后将可导致光线的散射,抗原抗体复合物的形成速率与光的散射强度成正比,还能动态测定抗原抗体结合反应效率。
在本研究中发现,当CRP浓度小于20mg/l时,乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白相关性低,P<0.05,具有统计学意义,两种方法检测CRP结果具有显著差异。
当CRP浓度大于20mg/l时,二者检测方法相关系数为0.944,说明这两种检测方法的检测效率有所提高。
根据以往的文献报道及本实验室经验,我们认为当CRP低浓度表达时,乳胶增强透射免疫比
浊法由于抗原抗体结合较少,乳胶凝集物形成较小,对光线的阻断能力较弱,而速率散射免疫比浊法可以通过检测抗原抗体结合速率,而不依赖于凝集物的大小来评估CRP的浓度,这也与本实验中随着CRP浓度的升高,两种检测方法的相关系数增大相吻合,所以我们认为低浓度的CRP表达,速率散射免疫比浊法较乳胶增强透射免疫比浊法更敏感和准确。
目前,临床应用的测定CRP方法较多,但不同检测方法之间,不同测定仪之间存在着差异,这不利于临床对该指标的有效应用。
此外,实验室诊断某个体是否处于健康状态,其判断依据是指标的临界值。
然而,不同的检测体系中参考值的范围不一致,这也会给临床诊断造成困难。
因此,CRP测定方法标准化问题有待于医学工作者进一步的研究和探讨。
美国CAP室间质评也将引入hs-CRP 作为一个独立的分析调查项目,美国CDC目前正在进行hs-CRP免疫测定的标准化工作,WHO已有CRP免疫测定的国际参考标准85/506,IFCC/ BCR/ CAP 已有次级标准-血浆蛋白CRM 470(CRP是其中14种项目之一,美国Dade Behring 公司生产),这些都为国内外开展hs-CRP测定的标准化工作提供了条件。
参考文献:
[1]Yeh ET,Anderson HV,Pasceri V,et al.C-reactive protein:linking inflammatiom to cardiovascular complications[J].circulation,2001,104(9):974-975.
[2]黄小兵,冯丽春,谭志坚.血浆CRP作为感染性标志物的临床应用与研究[J].右江民族医学院学,2002,24(2):271-272.
[3]陈晓玲,兰庆平.散射比浊法与乳胶凝集法检测血浆C-反应蛋白的评价[J].上海医学检验杂志,2002,17(3):141-145.
[4]周建华.老年冠心病患者与健康老年人血浆中C-反应蛋白的比较[J].分子诊断与治疗杂志,2009,1(2):118-119.
[5]朱海生,王振贤,段香芬,等.超敏C-反应蛋白与青年脑梗死患者关系的探讨[J].西部医学,2012,24(2):87-89.
[6]袁斌,许荣.两种定标方法检测C-反应蛋白及快速C-反应蛋白检测结果的对比和评价[J].检验医学,2005,20(4):382-384.编辑/申磊。