猪皮提取氨基酸的原理是

猪5种最必须氨基酸
猪是人类常见的畜肉来源之一，因其生长速度快、肉质细嫩、口感鲜美而备受大家的喜爱。

而在肉类质量方面，氨基酸是影响肉品质量的一项关键指标，其中必需的氨基酸需要从饲料中获取，无法由猪自身合成。

以下是猪5种最为必须的氨基酸。

1. 赖氨酸
赖氨酸是维持猪体正常生理功能不可缺少的必须氨基酸之一。

猪的新陈代谢需要赖氨酸作为能量的来源，同时赖氨酸还能够提高猪肉的风味和营养价值。

当饲料中赖氨酸含量不足时，会导致猪生长缓慢、肌肉萎缩等问题。

色氨酸是猪身体内的必需氨基酸之一，它对于维持猪的生长、发育、生殖和免疫系统健康都非常重要。

色氨酸在饲料中的含量过低，会导致猪出现红眼病、皮肤炎症、食欲减退等问题。

异亮氨酸是一种非极性氨基酸，是猪体内重要的营养物质之一。

它能够加强猪肉的风味和色泽，同时还能够提高猪的免疫功能，防止猪体贫血。

如果饲料中缺乏异亮氨酸，会导致猪生长缓慢、免疫力下降等问题。

蛋氨酸是一种有机硫化合物，是猪体内必不可少的营养物质之一。

它可以帮助猪体正常生长发育，同时也能够保护猪体免受环境压力和疾病的侵袭。

当饲料中蛋氨酸含量不足时，会导致猪的毛发稀疏、生长缓慢等问题。

总之，猪体内的氨基酸是维持猪体生长、维持正常生理功能和健康的必不可少的营养物质之一。

想要养殖出高品质猪肉，需要给猪提供充足、均衡的饲料，在其中适当添加以上五种必须氨基酸，才能够实现这一目标。

天然产物研究与开发N at Prod Res D ev 2009,21:1222124,182文章编号:100126880(2009)0120122204　收稿日期:2007210219 接受日期:2007212229　基金项目:上海市食品研究所项目基金(技04252)3通讯作者E 2mail:pgzhou@shfu .edu .cn猪皮胶原蛋白水解产物中的抗氧化活性肽的分离及其氨基酸组分朱夕波,周培根3,李　燕,张　艳上海水产大学食品学院,上海200090摘　要:利用不同蛋白酶水解猪皮胶原蛋白,根据水解产物对自由基的清除率,筛选最适蛋白酶的组合,筛选抗氧化活性较高的肽类,并进行氨基酸分析。

结果表明:胃蛋白酶→木瓜蛋白酶→菠萝蛋白酶为酶解胶原蛋白的最佳组合;分离纯化得到了三种具有较高抗氧化活性的肽;氨基酸组分分析显示:P1′、P2′和P3′组分具有自由基清除作用的关键氨基酸甲硫氨酸、酪氨酸和组氨酸等。

关键词:胶原蛋白;水解;多肽;抗氧化活性;氨基酸中图分类号:R282.71/.77⑨05;TS251文献标识码:ASepara ti on of An ti ox i da ti ve Pepti des fro m Porc i n e Coll agen Hydrolysis and Its Ana lysis of Am i n o Ac i d Co m positi onZHU Xi 2bo,ZHOU Pei 2gen 3,L I Yan,ZHANG YanCollege of Food Science,Shanghai Fisheries U niversity,Shanghai 200090,ChinaAbstract:The combinati on of the different p r oteases,used f or hydr olyzing of the porcine collagen,and the anti oxidative pep tides were selected fr om hydr olysates based on the scavenging effect of the free radicalDPPH ・,and their a m ino acid compositi on of the pep tides was analyzed .The results showed that the combinati on of pep sin,papain and br omelain was op ti m u m f or hydr olysis of the collagen,and three kinds of the anti oxidative pep tides were purified .The assay of their a m i 2no acid compositi ons indicated that they contained the key a m ino acid f or the anti oxidati on,such asMet,Lyr,H is,et al .Key words:collagen;hydr olysis;pep tide;anti oxidati on;am ino acid analysis 胶原蛋白是构成胶原纤维、弹性纤维和网状纤维的蛋白质,是动物结缔组织的主要成分之一[1,2]。

猪皮中胶原蛋白美容价值的分析乔淑丽;贾建河【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2015(000)030【总页数】2页(P78-79)【作者】乔淑丽;贾建河【作者单位】山西师范大学;山西师范大学【正文语种】中文本实验以带皮的新鲜猪肉为原料，采用盐析法提取蛋白质、用酸解法水解蛋白质，用纸层析法研究其降解产物中必需氨基酸的组成，并用茚三酮显色法比较其相对含量。

实验结果表明：猪皮中胶原蛋白必需氨基酸的种类和含量均比猪肉蛋白质中少。

由此可见，靠食用猪皮来补充人体皮肤的胶原蛋白，以达到护肤、养颜、抗衰老的美容效果是不科学的。

猪皮是由表皮、真皮层、皮下结蹄组织构成，在真皮层含有大量的胶原蛋白纤维，其含量可占干物质的99%。

猪皮中蛋白质含量可高达33%，其中胶原蛋白含量为87.8%。

胶原蛋白是一种高分子蛋白质，由18种氨基酸组成，其中甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸含量比较高，是由3条肽链拧成螺旋形的纤维状蛋白质，胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白质，占全身总蛋白质的30%以上。

主要存在于人体皮肤、骨骼、眼睛、牙齿、肌腱、内脏（包括心、胃、肠、血管）等部位。

在人体皮肤中，其可与水结合，具有很好的保水保湿作用，它与弹力纤维合力构成网状支撑体，提供真皮层坚定有力的支撑，能使皮肤保持结实而有弹性。

其功能是维持皮肤和组织器官的形态和结构，也是修复各损伤组织的重要原料物质。

随着年龄的增长，胶原蛋白逐渐变性、断裂，含量减少，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性并变薄等衰老现象。

因此说人的皮肤老化的确与胶原蛋白流失有密切的关系。

中国有句俗语“吃什么，补什么”，因此常理认为，吃了富含胶原蛋白的牛蹄筋、猪蹄、猪皮、鸡翅、鸡皮、鱼皮及软骨等就等于吃到了胶原蛋白，因此每次外出赴宴，都会有人指着那盘猪蹄或猪肘子殷勤地对同桌的女士说：“女士多吃点好，能美容。

”这种说法是否正确？本实验试图通过对猪皮和猪肉中蛋白质必需氨基酸种类与含量的分析比较，揭示食用猪皮能否直接高效补充人体皮肤的胶原蛋白，促使人们能够形成正确健康的膳食美容观念。

第２６卷第３期２００８年９月胶体与聚合物ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｌｌｏｉｄ＆ｐｏｌｙｍｅｒＶｏｌ．２６Ｎｏ．３Ｓｅｐ．２００８胶原具有生物相容性、可生物降解性以及生物活性如低抗原性、在体内易被人体吸收、能促进细胞成活与生长、促进血小板凝结等。

胶原经特殊处理后可用于美容、烧伤和创伤治疗、矫形、组织修复、创面止血等医药卫生领域。

胶原及其降解产物与人皮肤胶原的结构相似、相容性好，存在着离子键、氢键等相互作用，由其制备的化妆品材料，可以渗透到皮肤的深层，对皮肤没有刺激作用，是一类十分有效的化妆品添加剂或原料［１］。

胶原、明胶、胶原多肽虽然都可以从动物同一组织获得，但制备工艺不同使它们具有不同的分子结构和理化性能［２］。

研究表明，胶原、明胶和水解胶原蛋白中只有胶原具有明显促进角质形成细胞生长繁殖的生理活性，并且由于胶原具有特殊的三股螺旋结构，其保湿性、吸湿性及组织修复性要优于明胶和胶原多肽［３，４］。

鉴于天然胶原的分子量非常大，难以被皮肤表皮充分吸收，而胶原及降解产物对温度较敏感。

本文探讨了活性胶原的提取及通过低温酶解得到相对分子量小、具有三股螺旋结构的活性降解产物。

１实验部分１．１主要仪器及试剂冷冻离心机，科大创新股份有限公司；冷冻干燥机，宁波新芝仪器有限公司；匀浆机，Ｗａｒｎ－ｉｎｇ，ＵＳＡ；电泳仪，北京六一电泳仪器厂；傅立叶红外（ＮｉｃｏｌｅｔＡｖａｔａｒ３７０），ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏｎｃｏｒｐｏ－ｒａｔｉｏｎ；新鲜猪皮（市售），胃蛋白酶（１∶３０００，Ｓｉｇ－ｍａ），细菌胶原酶（ＥＣ３．４．２４．３，Ｓｉｇｍａ），透析膜（截留值５０００，Ｓｉｇｍａ），市售胶原多肽粉末，其他药品均为分析纯．１．２胶原的提取［５，６］新鲜猪皮经除皮下脂肪、脱毛、切碎、盐溶液浸泡、酸／胃蛋白酶处理、过滤、盐析、离心、醋酸溶解、透析、冷冻干燥顺序提取。

１．３胶原酶解产物的制备［７］用ＮａＣｌ、ＣａＣｌ２、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ７．５配降解所需缓冲液，将胶原酶与胶原以质量比１／２０加入到降解缓冲液中，其中胶原浓度６ｍｇ／ｍｌ，置于２０℃下降解４ｈ。

猪皮胶原多肽增加骨密度作用机制及其对骨生物力学性质影响钙元素的缺乏容易引起多种疾病,儿童钙缺乏会引起生长发育缓慢等疾病,成人钙缺乏会导致骨质疏松和骨折等。

促使机体钙质缺乏的主要因素有两个,一是机体内钙质的量不足;另一个是人体内骨胶原含量不足,使摄入到体内的钙无法被固定。

因此,补充矿物元素钙和补充骨胶原同等重要。

目前,国内市场补钙制剂从钙源组成进行分类包括:无机钙和有机酸钙,它们是通过人体内维生素D的诱导和胃部的酸化从而被机体吸收。

两类钙制剂都存在生物利用度低、有副作用、与体内元素之间容易出现拮抗作用等缺陷。

因此,开发一种新型补钙制剂非常必要。

胶原多肽生物钙制剂可以为人体提供钙源,且钙吸收和利用过程不依赖维生素D的诱导,富含的多肽能够促进人体内的骨胶原的形成。

本论文以猪皮明胶为原料制备胶原多肽,对猪皮胶原多肽增加骨密度作用机制及其对骨生物力学性质影响进行了研究。

1.采用凯氏定氮法测定食品级猪皮明胶中蛋白质含量,发现所选用的猪皮明胶蛋白质含量较高,粗蛋白含量占90.75%。

使用全自动氨基酸分析仪对猪皮明胶的氨基酸成分进行了分析,结果显示猪皮明胶中含有16种氨基酸。

2.本论文选取碱性蛋白酶、胃蛋白酶、酸性蛋白酶等三种酶优化单酶酶解猪皮明胶工艺,并选取胃蛋白酶和酸性蛋白酶优化双酶体系的猪皮明胶酶解工艺,优化后猪皮明胶最佳酶解条件为A₂B₃C₁D₂,即酸性蛋白酶酶解温度50℃,酶解溶液p H6.0,胃蛋白酶酶解温度45℃,酶解溶液p H3.0,在此条件下猪皮明胶水解度为17.56%。

聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）试验表明,双酶体系酶解猪皮明胶产物中分子量小于5KDa组分含量的相对比率高于碱性蛋白酶酶解产物、胃蛋白酶酶解产物和酸性蛋白酶酶解产物。

——资料摘选自东莞市华康胶水厂猪皮生产明胶的工艺技术明胶是一种用途极为广泛的动物胶，属于高蛋白生物化工产品的食用明胶，广泛应用于食品和医药行业。

如各种软糖，冰淇淋、雪糕、奶油、葡萄糖及各种医药胶丸，胶囊等。

食用明胶目前国内外生产主要采用的方法有4种，即碱法、酸法、盐酸法和酶法。

现将碱法和土法生产明胶生产过程作一介绍。

(一)碱法生产明胶1.碱处理猪皮将切成小块的猪皮用氢氧化钙溶液浸泡，浸泡时间可根据气温而定，一般为15～20℃时，需浸泡12～35天。

浸泡时，可将猪皮放入水泥地、木桶或瓷缸内进行。

经过浸泡后的原料，用清水充分洗涤，除去碱液，最后使pH值为9.2左右，呈弱碱性，然后使pH值呈酸性，最后排出酸水，再用清水洗涤多次即可。

2.提胶将处理好的猪皮放入锅内，加清水浸泡猪皮，并搅拌，使结团的猪皮散开，然后缓慢地用火升温至60～70℃，保持3～6个小时后将第1批胶液放出，再加入适量的清水，再加热一段时间后，又可放出第2批胶液。

依此类推，直到将猪皮基本化完为止。

3.制胶将每次放出的胶液混合后，加温浓缩，但应注意不能煮沸，温度最好不要超过75℃，否则将会严重影响明胶的质量和色泽，经浓缩后，趁热向胶内加入适量的漂白剂和防腐剂，混匀后立即将胶液倒入金属盘或瓷盘中，放在无灰尘的地方，待冷却后，就可得明胶冻。

4.切胶再干燥将盘中的明胶冻，按需要切成适当大小的薄片或碎块，再经过热风干燥，使明胶的含水量为10%～12%。

(二)土法制作食用明胶1.原料处理将猪新鲜皮或干皮清洗干净，除去皮上猪毛，然后刮去猪皮内面的脂肪层。

干猪皮要先用水泡软后，再除去毛和脂肪层。

最后用碱液浸泡一段时间，分割成3厘米×3厘米的均匀小块，放置缸中用1%的石灰水浸渍，同时冲洗掉污物与脂肪。

再用石灰水浸渍，pH值控制在pH 9～9.5之间，反复数次，直至酸碱度升至pH 12～12.5时，用酸中和，将浓盐酸(30%)稀释加入水中，把酸碱度调至2.5～3.3之间为宜。

在猪皮中的胶原蛋白含量其实是挺高的。

猪皮是一种蛋白质含量很高的肉制品原料，蛋白质含量是猪肉的2.5倍，而蛋白质的主要成分胶原蛋白，约占百分之八十五，其次为弹性蛋白。

猪肉的胶原蛋白含量不高；猪肉主要含有脂肪，胶原蛋白少，胶原蛋白多在皮肤和肌腱中；猪皮里蛋白质含量是猪肉的2、5倍，炭水化合物的含量比猪肉高4倍多，而脂肪含量只有猪肉的一半。

从某种意义上来说猪皮、鸡皮、鱼皮中都有很多胶原蛋白。

但是，并不是说吃下胶原蛋白，就一定能变成皮肤里的胶原蛋白。

蛋白质（包括胶原蛋白）是无数氨基酸组成的链式结构，无法直接被人体吸收利用，所以蛋白质吃下去以后都要消化，变成单个的氨基酸（这个时候已经完全没有胶原蛋白的样子了）才能被小肠吸收，然后人体利用这些“原材料”，重新组合成人体需要的各种蛋白质。

你的头发、肌肉、皮肤、骨骼都需要蛋白质来构成，所以，虽然吃下去的是胶原蛋白，最后到底能不能变成皮肤中的胶原蛋白就不得而知了。

猪表皮富含胶原蛋白，能改善机体生理功能，增强皮肤细胞的蓄水功能，能起到滋润皮肤，延缓皮肤衰老的作用，对紧致皮肤，美容养颜都有很好的效果，但是也不能全靠猪皮来补充胶原蛋白。

黄豆猪皮的功效与作用黄豆猪皮，是一道具有多种营养成分及功效的美食。

它以黄豆和猪皮为主要原料，经过一系列的加工制作而成。

在中国，黄豆猪皮已有悠久的历史，并在传统中医理论中有着重要的地位。

本文将详细介绍黄豆猪皮的功效与作用，并对其营养成分进行分析。

黄豆猪皮富含丰富的营养成分，主要包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、膳食纤维及维生素等。

黄豆是一种优质的植物蛋白来源，富含人体所需的氨基酸。

而猪皮则含有丰富的胶原蛋白，具有促进皮肤弹性、延缓衰老的作用。

此外，黄豆猪皮中还含有维生素A、维生素B、维生素C、维生素E等多种维生素，对于保持身体健康至关重要。

黄豆猪皮的主要功效可以总结为以下几个方面：1. 维护皮肤健康：黄豆猪皮富含胶原蛋白，可以提高皮肤的弹性和光滑度，减少皮肤松弛及皱纹的出现。

同时，维生素E的含量也有助于保护皮肤免受自由基的侵害，减缓皮肤衰老的过程。

因此，经常食用黄豆猪皮可以促进皮肤健康，使肌肤更加紧致有弹性。

2. 强化骨骼：黄豆猪皮中富含的蛋白质和钙等矿物质对于骨骼的健康至关重要。

蛋白质是构成骨骼组织的基本成分，而钙则是骨骼的主要成分。

黄豆猪皮中的胶原蛋白可以增加骨骼的强度和弹性，同时提供了较高的蛋白质含量，对于骨骼生长和修复起到了重要的作用。

3. 促进消化：黄豆猪皮中富含膳食纤维，可以增加食物的体积，加快肠道蠕动，促进消化。

膳食纤维还可以吸收水分，增加粪便的体积，促进排便，预防便秘的发生。

同时，黄豆猪皮中的蛋白质和胶原蛋白可以增加食物的口感，增强食欲，有助于消化吸收。

4. 降低血脂：黄豆猪皮中的脂肪含量较低，而蛋白质含量较高。

蛋白质是若干种脂肪酶的基本成分，可以降低血清胆固醇的含量，减少血脂的积累。

此外，黄豆猪皮中的纤维素可以增加胆酸的排泄，减少对胆固醇的吸收，从而起到降低血脂的作用。

5. 增强免疫力：黄豆猪皮中含有丰富的维生素C和维生素E等抗氧化物质，可以增强免疫力，预防感染和疾病。

维生素C 是一种重要的抗氧化剂，可以中和自由基，提高免疫系统对抗病原体的能力。

收稿日期:20050627作者简介:胡二坤(1981),女,河南济源人,硕士;主要从事蛋白资源的研究和综合利用.文章编号:16732383(2006)01005004猪皮中胶原蛋白的提取胡二坤,郭兴凤,谭凤艳,李中皓(河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450052)摘要:对猪皮中胶原蛋白进行提取.用枯草杆菌中性蛋白酶预处理猪皮,再用水抽提的方法提取胶原蛋白.在单因素试验的基础上,通过正交实验确定了胶原蛋白提取的最佳条件:酶处理pH 6,加酶量(E/S )400U/g ,温度35℃,处理时间2h ;水抽提时间4h ,水抽提固液比(g/m L )1∶6.对比试验结果表明:从经过酶处理和未经酶处理的猪皮中提取胶原蛋白,前者的提取率大大高于后者.关键词:胶原蛋白;酶处理;提取率中图分类号:TS20112 文献标识码:B0　前言猪皮中的蛋白质含量高达33%,其中胶原蛋白含量为8718%[1],而瘦猪肉的蛋白含量仅为18%左右.由此看来猪皮中的蛋白质含量远高于瘦猪肉,其营养价值十分可观.此外胶原蛋白具有特殊的结构与功能,并具有广泛的用途,开发胶原蛋白产品已经成为人们研究的热点[2].随着生物和高分子科学的不断发展,人们会对此有更深的了解和认识,因此开发胶原蛋白资源具有广阔的前景[2].本研究主要利用蛋白酶预处理猪皮之后采用水抽提的方法提取猪皮中的胶原蛋白.在单因素分析的基础上采用正交实验确定了胶原蛋白提取的最佳条件,是对胶原蛋白的提取进行的基础性研究工作.1　实验材料及方法111　实验材料和实验仪器11111　实验材料猪皮:购于郑州双汇肉店.枯草杆菌中性蛋白酶:无锡星达酶制剂公司,酶活40000U/g.11112　实验仪器H J —6A 数显多头恒温磁力搅拌器,电动搅拌器,旋转蒸发器,真空干燥箱,LI BROR AE L —200电子天平等.112　实验方法11211　猪皮的简单预处理[3]将皮下脂肪剔除,切成10mm ×10mm 的小块,用35℃的清水洗2次,再用4～5倍40℃温水和脱脂液(8%Na 2C O 3溶液)(2∶1,V ∶V )洗1次,10min 后滤去温水,再重复一次.最后用清水再洗2次.11212　猪皮的酶处理和水抽提称取一定量经简单预处理的皮块于烧杯中,加入相应量的酶并用缓冲溶液控制pH 值,在一定温度下搅拌一定时间,弃去酶溶液,用含NaCl 的稀盐酸溶液灭酶,至皮内残存酶全部失活[4].水洗2次,然后加入一定量蒸馏水并调节水pH 至中性,65℃水浴中搅拌一定时间[5],趁热用纱布过滤得水抽提产物.11213　水抽提物的浓缩和粉碎用旋转蒸发器将水抽提产物浓缩,在真空条件下干燥并超微粉碎.11214　蛋白质含量的测定微量凯氏定氮[6].11215　胶原蛋白提取率的计算提取率=水抽提得到的胶原蛋白的量猪皮中胶原蛋白总量×100%第27卷第1期河南工业大学学报(自然科学版)V ol.27,N o.12006年2月Journal of Henan University of T echnology (Natural Science Edition )Feb.20062　结果与讨论211　酶处理条件对胶原蛋白提取率的影响 称取一定量经简单预处理的猪皮,在不同条件下进行酶处理,之后进行水抽提,水抽提时间4h 、温度65℃、固液比1∶6.21111　酶处理pH值对胶原蛋白提取率的影响称取一定量经简单预处理的猪皮,在不同pH 的缓冲溶液体系下进行酶处理,酶处理温度35℃、酶处理时间2h 、加酶量400U/g.之后进行水抽提,实验结果见图1.图1　酶处理时pH 对提取率的影响 从图1可以看出,胶原蛋白的提取率在pH 值615时最大.而在两边区域,提取率均有所降低.这说明对于枯草杆菌中性蛋白酶而言,在pH 615时,对猪皮的处理效果最好.21112　酶处理时间对胶原蛋白提取率的影响称取一定量经简单预处理的猪皮,用酶处理不同的时间,酶处理温度35℃、pH 615、加酶量400U/g.之后进行水抽提,实验结果见图2.图2　酶处理时间对提取率的影响 从图2可以看出,胶原蛋白的提取率在酶处理时间为2h 时出现最高值.而在两边区域,提取率均有所降低,酶处理时间过短,不能充分疏松猪皮表层结构、除去非纤维蛋白中的球状蛋白、软化胶原蛋白的皮层,水抽提时也不能充分提取胶原蛋白.酶处理时间过长,猪皮中部分胶原蛋白可能溶于缓冲溶液中,导致猪皮中胶原蛋白溶失[7],胶原蛋白提取率降低.因此酶处理时间过长或过短,都会影响胶原蛋白的提取率.21113　酶处理温度对提取率的影响称取一定量经简单预处理的猪皮,在不同温度下进行酶处理,酶处理时间2h 、pH 615、加酶量400U/g.之后水抽提提取胶原蛋白,实验结果见图3.图3　酶处理温度对提取率的影响 从图3可以看出,胶原蛋白的提取率在酶处理温度40℃时出现最高值.而在两边区域,提取率均有所降低.说明枯草杆菌中性蛋白酶在40℃时酶处理效果最好,过高或者过低的温度都可能导致酶活性的降低,甚至失活,从而影响酶处理的效果.21114　加酶量对胶原蛋白提取率的影响称取一定量经简单预处理的猪皮,采用不同的加酶量对猪皮进行酶处理,酶处理温度40℃、pH 615、时间2h.之后进行水抽提,实验结果见图4.图4　加酶量对提取率的影响第1期胡二坤等:猪皮中胶原蛋白的提取51 从图4可以看出,胶原蛋白的提取率在加酶量400U ・g -1时出现最高值.而在两边区域,提取率均有所降低.这是由于枯草杆菌中性蛋白酶作为一种生物催化剂,对底物的吸附作用有一定的饱和度,随着加酶量的增加,与底物的结合是逐渐饱和的,因此提取率逐渐增加;然而,当酶用量增大到饱和值后,猪皮中一部分胶原蛋白由于受酶作用而被缓冲溶液溶解,所以导致提取率略有下降.212　水抽提条件对胶原蛋白提取率的影响 酶处理条件为加酶量(E/S )400U/g ,pH 615,酶处理温度40℃,酶处理时间2h.水抽提过程中为了最大限度的保证胶原蛋白的结构不被破坏,又有利于胶原蛋白的提取,温度选择65℃[1].21211　水抽提液固比对胶原蛋白提取率的影响不同液固比(mL/g )对胶原蛋白的提取率的影响结果见图5,其中液固比2∶1图中表示为2,依次类推.图5　水抽提液固比对提取率的影响 从图5可以看出,胶原蛋白的抽提率在5∶1之前变化很缓慢,然而在5∶1～6∶1之间迅速提高,而到6∶1之后就接近平缓.这说明本实验在液固比为5∶1之前和6∶1之后的抽提率变化不大,这是因为在水抽提胶原蛋白的过程中,由于胶原蛋白的胶体性质,溶液的粘度越来越大,自由状态下的水饱和程度越来越高,膨胀水的溶解性越来越弱[4],在水量不足的条件下,导致胶原蛋白的提取率下降,当加水量增加到一定数值,水对于胶原蛋白的溶解性会大大提高,从而导致提取率提高.当胶原蛋白基本被抽提完全后,增加水用量对胶原蛋白的提取率基本不再发生变化.21212　水抽提时间对胶原蛋白提取率的影响 不同的抽提时间对胶原蛋白提取率的影响的实验结果见图6.从图6可以看出,胶原蛋白的提取率随水抽提时间的延长而不断提高,达到4h 后,提取率变化不显著.这是由于4h 之后,猪皮中胶原蛋白已经基本被提取完全,所以提取率变化很小.图6　水抽提时间对提取率的影响213　胶原蛋白提取正交实验结果 单因素实验结果显示酶处理胶原蛋白提取率影响较大,因此选择酶处理时pH 、温度、酶处理时间进行酶处理水抽提猪皮中胶原蛋白的3因素3水平的正交实验,按L 9(34)正交表设计表(见表1).实验中水抽提胶原蛋白的实验条件为:水浴温度65℃、抽提时间4h 、抽提时液固比1∶6.正交实验结果及数据分析见表21由正交实验结果可以看出,对胶原蛋白提取率影响最大的是酶处理时的pH 值,然后依次是酶处理时间、酶处理温度.综合分析最终确定了最佳提取条件是酶处理pH 6,酶处理温度40℃,加酶量400U/g ,酶处理时间2h ;水抽提条件:固液比1∶6,水浴温度65℃,抽提时间4h.表1　因素与水平水平pH 温度/℃时间/h123610615710354045123214　对比实验 实验过程中为了验证酶处理的效果,取5g 经简单预处理过的猪皮,而不进行酶处理,直接在65℃、固液比1∶6的条件下抽提4h.结果表明胶原蛋白提取率仅为29%,低于正交实验中任何一个结果,说明水抽提之前进行酶处理可以提高胶原蛋白的提取率.在最佳条件下进行胶原蛋白提取实验,提取率为70154%,高于正交实验中任何一组的结果.52　河南工业大学学报(自然科学版)第27卷表2　正交实验结果及极差分析序号pH 温度/℃时间/h提取率/%123456789111222333123123123123231312681487010368130631755316054175511255015051125k1k2k3R68194571375110017194611165810458110311257191611685717331963　结论采用酶法预处理再用水抽提提取猪皮中胶原蛋白的最佳工艺条件是酶处理pH 610、处理温度40℃、加酶量(E/S )400U/g 、处理时间2h ;水抽提时固液比1∶6、水浴温度65℃、抽提时间4h.通过对比实验可以得出结论:用酶法预处理有利于疏松猪皮表层结构,除去非纤维蛋白中的球状蛋白,促使内容物的溶出,软化胶原蛋白的皮层,可以大大提高胶原蛋白的提取率.参考文献:[1]　李开雄,赵志远,刘霞1猪皮中胶原蛋白的提取及其应用[J 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time 4h ,the ratio of liquid and s olid 6∶11The com paris on experiment was done and it showed that after the enzymatic treatment the yield ratio was signif 2icantly im proved 1K ey w ords :collagen protein ;enzymatic treatment ;yield ratio第1期胡二坤等:猪皮中胶原蛋白的提取53。