层析系统介绍
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层析的概念和分类
层析(chromatography)是一种利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术,用于分离混合物中的各个组分。
层析系统由两个相组成:固定相和流动相。
当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同。
随流动相向前移动,各组分不断地在两相中进行再分配。
分部收集流出液,可得到样品中所含的各单一组分,从而达到将各组分分离的目的。
根据不同的分类标准,层析可以分为多种类型:
1. 根据固定相的形式,层析可以分为柱层析和平板层析。
柱层析是待分离物质在柱状固定相中进行的层析分离技术,而平板层析则是在平板型固定相中进行的分离技术。
2. 根据流动相的组成,层析可以分为有机层析和无机层析。
有机层析是利用有机溶剂作为流动相的层析技术,而无机层析则是利用无机溶剂或无机盐溶液作为流动相的层析技术。
3. 根据分离原理,层析可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等。
以上信息仅供参考,如有需要,建议查阅化学书籍或咨询化学专家。
层析系统操作方法
层析系统是一种高效的分离、纯化、分析化合物的方法。
其操作方法如下:
1. 样品的制备:将待分析的化合物或混合物溶解或悬浮于适当的溶剂中,以备注入样品进样口。
2. 进样:将样品注入样品进样口。
通常,进样口位于柱子的顶部或侧面,具体位置根据不同型号的层析柱而定。
3. 选择移动相:选择适当的移动相。
通常有两种移动相,一种是常规液相,另一种是气相。
4. 开始层析:开启泵,让移动相流经层析柱,分离化合物。
移动相会使得不同化合物在柱子内产生不同的扩散速度,从而分离。
5. 收集分离后的化合物:化合物随着移动相流出层析柱,通过检测器进行检测并记录。
对于需要进一步分析的化合物,可以通过收集样品进行后续的调查研究。
6. 停止层析:关闭泵,停止层析操作,清洗设备。
需要注意的是,在进行层析操作之前,需要根据不同的化合物选择不同的适宜移动相,从而实现更好的分离效果。
蛋白层析系统
蛋白层析系统是一种常用的分离和纯化蛋白质的方法。
它
基于蛋白质在不同条件下(如pH、离子强度、阳离子或阴离子)的亲和性差异来实现分离。
蛋白层析系统通常由以下几个组成部分构成:
1. 层析柱:通常是一种中空管状结构,内部填充有固定相,如树脂或凝胶。
树脂可根据蛋白质的特性选择不同的类型,如亲和树脂、离子交换树脂、尺寸排阻树脂等。
2. 层析缓冲液系统:用于控制层析液的化学环境,如pH
和离子强度等。
不同的蛋白质可能对环境要求不同,因此
需要选择合适的缓冲液组合。
3. 进样系统:用于将待纯化的蛋白质样品引入层析柱中。
通常使用注射器或自动进样器来实现。
4. 洗脱系统:用于洗脱非目标蛋白质和杂质。
洗脱液通常
是一种具有高亲和性的溶剂或溶液,能够解除蛋白质与固
定相之间的结合。
5. 监测系统:用于监测样品在层析柱中的行为和纯化程度。
常用的监测方法包括吸光光谱、荧光探针标记和凝胶电泳等。
蛋白层析系统可用于从复杂的混合物中纯化目标蛋白质,
是生物化学、分子生物学和生物制药领域中常用的方法之一。
AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作,特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容,可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵:(system pump)双泵(A、B泵),缓冲液及大体积样品输送。
上样泵:(sample pump)样品输送。
(2) 阀 Valve七通阀:(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve),用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换;2. 流向切换阀(flow direction valve),用于层析柱流向切换(downflow/upflow)。
(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。
2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合,协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液,由A、B泵的流速变化产生梯度。
(2) 层析柱柱顶连接进样(七通)阀1号口,柱后连接紫外流通池。
(3) 上样上样阀上样:将样品储存在样品环(Sample loop),再由阀门切换将样品带入层析柱;系统泵上样:由系统泵将样品泵入层析柱。
(4) 收集 (选购)收集器收集:设置收集体积(Frac size),可自动按条件收集。
二开机程序1 开启电脑;2打开AKTAbasic电源;3启动UNICORN软件,输入用户名( User name) 和密码(Password),默认用户(default) 密码为 default,待AKTA自检结束后,在system control窗口中显示系统准备就绪(Instruments are ready) 。
三 UUNICORN 软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口,其主要功能分别如下:Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off);2. 系统管理的设定,如用户名、密码、文件和使用权限等设定,系统日志等;3. 文件管理,如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等;4. 方法组编辑(MethodQueues),将几个方法组合在一起,依次运行。
蛋白质纯化系统
概况
蛋白质纯化系统是我们开发的具有自主知识产权的产品,主要包括高压梯度层析泵、进样阀、多波长紫外检测器、电导、pH、温度检测器等硬件,以及用于仪器控制、方法编辑、数据及用户管理的多界面智能化计算机软件。
可进行离子交换层析、疏水作用层析、反相层析、亲和层析等不同层析模式操作,用于各类疫苗、抗体药物、酶、天然产物有效成分等的分离纯化。
Protein purification system, the product with independent enzyme and the active ingredients in natural product. intellectual property rights, is developed by ourselves. It consists of high-pressure gradient pump, sample valve, multi-wavelength UV detector, sensors (conductivity, pH and temperature) and other hardware, as well as the intelligent software for instruments control, method edit, data and user management. The system could be operated with various chromatography mode, including ion-exchange, hydrophobic interaction, affinity, reversed phase, etc., for the separation and purification of vaccine, antibody,
产品优势
•生物兼容性高压梯度泵
•3波长同时在线紫外检测
•网络化数据通讯模块
•全流路参数在线显示,计算机在线操作
•High pressure gradient pump with biological compatibility
•Three wavelengths UV detectionsimultaneously
•Networked data communication module
•Parameters of the whole flow-pathdisplayed on-line
•On-line operation with computer
技术规格。