中高压层析系统
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层析的概念和分类
层析(chromatography)是一种利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术,用于分离混合物中的各个组分。
层析系统由两个相组成:固定相和流动相。
当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同。
随流动相向前移动,各组分不断地在两相中进行再分配。
分部收集流出液,可得到样品中所含的各单一组分,从而达到将各组分分离的目的。
根据不同的分类标准,层析可以分为多种类型:
1. 根据固定相的形式,层析可以分为柱层析和平板层析。
柱层析是待分离物质在柱状固定相中进行的层析分离技术,而平板层析则是在平板型固定相中进行的分离技术。
2. 根据流动相的组成,层析可以分为有机层析和无机层析。
有机层析是利用有机溶剂作为流动相的层析技术,而无机层析则是利用无机溶剂或无机盐溶液作为流动相的层析技术。
3. 根据分离原理,层析可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等。
以上信息仅供参考,如有需要,建议查阅化学书籍或咨询化学专家。
层析系统操作方法
层析系统是一种高效的分离、纯化、分析化合物的方法。
其操作方法如下:
1. 样品的制备:将待分析的化合物或混合物溶解或悬浮于适当的溶剂中,以备注入样品进样口。
2. 进样:将样品注入样品进样口。
通常,进样口位于柱子的顶部或侧面,具体位置根据不同型号的层析柱而定。
3. 选择移动相:选择适当的移动相。
通常有两种移动相,一种是常规液相,另一种是气相。
4. 开始层析:开启泵,让移动相流经层析柱,分离化合物。
移动相会使得不同化合物在柱子内产生不同的扩散速度,从而分离。
5. 收集分离后的化合物:化合物随着移动相流出层析柱,通过检测器进行检测并记录。
对于需要进一步分析的化合物,可以通过收集样品进行后续的调查研究。
6. 停止层析:关闭泵,停止层析操作,清洗设备。
需要注意的是,在进行层析操作之前,需要根据不同的化合物选择不同的适宜移动相,从而实现更好的分离效果。
蛋白质纯化系统概况蛋白质纯化系统是我们开发的具有自主知识产权的产品,主要包括高压梯度层析泵、进样阀、多波长紫外检测器、电导、pH、温度检测器等硬件,以及用于仪器控制、方法编辑、数据及用户管理的多界面智能化计算机软件。
可进行离子交换层析、疏水作用层析、反相层析、亲和层析等不同层析模式操作,用于各类疫苗、抗体药物、酶、天然产物有效成分等的分离纯化。
Protein purification system, the product with independent enzyme and the active ingredients in natural product. intellectual property rights, is developed by ourselves. It consists of high-pressure gradient pump, sample valve, multi-wavelength UV detector, sensors (conductivity, pH and temperature) and other hardware, as well as the intelligent software for instruments control, method edit, data and user management. The system could be operated with various chromatography mode, including ion-exchange, hydrophobic interaction, affinity, reversed phase, etc., for the separation and purification of vaccine, antibody,产品优势•生物兼容性高压梯度泵•3波长同时在线紫外检测•网络化数据通讯模块•全流路参数在线显示,计算机在线操作•High pressure gradient pump with biological compatibility•Three wavelengths UV detectionsimultaneously•Networked data communication module•Parameters of the whole flow-pathdisplayed on-line•On-line operation with computer技术规格。
omnifit层析柱
Omnifit层析柱是一种进口玻璃中压层析色谱柱,由英国豪迈集团子公司迪贝流体控制有限公司收购的豪迈旗下另一子公司百柯流体公司下属的Omnifit品牌研发生产。
Omnifit层析柱装填的层析填料粒径≤50 µm,具有一个可调终端片,可快速方便地进行高度调整。
该层析柱具有耐用性和简易性,可用于大多数低压及中压液相层析,对于蛋白纯化层析系统、中低压液相色谱或连续流化学应用等有良好的性能。
Omnifit层析柱的尺寸范围广泛,包括从小于1毫升到940毫升、内径从5mm到50mm、高端从50mm到500mm等。
该层析柱的适用压力范围广,化学兼容性好,额定温度高,可以和GE AKTA系列蛋白纯化系统、Sanotac Biolot 蛋白纯化系统、Biorad NGC高压层析系统等蛋白分离纯化系统和制备液相色谱系统配套使用。
浅谈低压、中压、高压液相色谱制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。
低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。
1. 快速色谱柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混合物,由于快速色谱具有操作简便、经济等优点,常常是实验室的首选。
但快速色谱不同于一般的层析分离,这种分离没有压力,而快速分离通常使用瓶装氮气加压,使流动相具有一定的流速,从而缩短了分离时间。
Still等人率先于1978年详细研究了快速色谱,并于1981年获得了专利保护(美国专利4,293,422)。
快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱,柱直径为3~10cm.长度为7~15cm。
快速色谱中使用最广泛的固定相为硅胶。
采用的粒径通常为:25~40um,40~63um或63~200um的球形固定相。
其它如键合相、氧化铝、聚酰胺吸附剂也常用作快速色谱的固定相使用。
2. 低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。
低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。
色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。
对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。
填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般为40-60um。
3. 中压液相色谱(MPLC)柱压在5-20bar(或75-300psi)之间,广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等——往往需要经过滤膜作初级净化)的处理,以提取或纯化所需的产品。
中压液相制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等,比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱,其输液泵最大流速可达156mL/min,并配有阻尼器,以保证液流的稳定;进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管;检测器有紫外和示差折光检测器,流通池体积比较大,允许大流量流动相通过而无需分流;馏分收集器有原盘式和排式两种,原盘式的接收管最多达80个,而后者则更多;色谱柱内径9-105mm,长度250-1760mm 不等。
9种层析分离纯化方法详解层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。
所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分;另一是流动相,即可以流动的物质,如水和各种溶媒。
当待分离的混合物随溶媒(流动相)通过固定相时,由于各组份的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量对比)不同,而且随溶媒向前移动,各组份不断地在两相中进行再分配。
与固定相相互作用力越弱的组份,随流动相移动时受到的阻滞作用小,向前移动的速度快。
反之,与固定相相互作用越强的组份,向前移动速度越慢。
分部收集流出液,可得到样品中所含的各单一组份,从而达到将各组份分离的目的。
按层析原理可将层析分为以下9种:1、亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离的目的。
将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含混合组分的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异亲和力的物质,才能被固定相吸附结合,性无关组分随流动相流出。
改变流动相组分,可将结合的亲和物洗脱下来。
亲和层析中所用的载体称为基质,与基质共价连接的化合物称配基。
具有专一亲和力的生物分子对主要有:抗原与抗体,DNA与互补DNA或RNA,酶与底物、激素与受体、维生素与特异结合蛋白、糖蛋白与植物凝集素等。
亲和层析可用于纯化生物大分子、稀释液的浓缩、不稳定蛋白质的贮藏、分离核酸等。
亲和层析纯化的分离原理特点:亲和层析具有高选择性、高纯度、快速、浓缩等特点,在重组蛋白的分离中多作为第一步的粗纯,实现对绝大部分杂质蛋白的去除。
2、离子交换层析采用具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆交换的性质来分离离子型化合物的方法。
主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其他带电荷的生物分子。
不同蛋白质的等电点(pI,isoelectric point)特性,使在不同pH缓冲液条件下所带正/负净电荷不同,选择不同的离子交换柱实现分离。
加压层析柱
加压层析柱(Preparative HPLC)是一种用于纯化化合物的分离技术,它通过高效液相色谱技术(HPLC)将混合物中的化合物分离开来。
加压层析柱通常用于分离和纯化实验室中的化合物,尤其在制药、生物技术和化工行业中得到广泛应用。
加压层析柱的工作原理是利用高压将混合物溶解在流动相中,然后通过柱子内填充的固定相进行分离。
在经过柱子后,不同化合物会因其在固定相上的亲和力差异而分离开来。
这种技术可以分离出高纯度的目标化合物,通常用于从天然产物中提取有机化合物、合成化合物的纯化和分离。
加压层析柱的优势在于其分离效率高,分离速度快,且对样品的需求量较小。
此外,加压层析柱还可以通过改变流动相、柱子填充物和操作条件来适应不同化合物的分离要求。
因此,它被广泛应用于各种类型的化合物分离和纯化过程中。
在制药行业中,加压层析柱被用于分离和纯化药物的原料药,以确保药物的纯度和质量。
在生物技术领域,加压层析柱可以用于分离和纯化蛋白质和多肽等生物大分子。
在化工行业中,加压层析柱则被用于从复杂混合物中纯化出特定化合物,以满足工业生产的需求。
总之,加压层析柱作为一种高效的分离技术,在化学、生物和制药领域中扮演着重要的角色。
随着技术的不断进步,相信加压层析柱在纯化领域中会有更广泛的应用和发展。