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Waters高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i 手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
BioLogic DuoFlow 10/40 System标准操作规程1、目的：正确使用DuoFlow层析系统，确保DuoFlow层析系统正常使用。
2、适用范围：BioLogic DuoFlow 10/40 System层析系统。
3、责任人：层析系统操作人员。
4、程序：4.1 准备工作与仪器预查4.1.1 所有用于该层析系统的水，缓冲液等试剂溶液和所有样品在使用前均必须以0.22μm 或0.45μm微孔滤膜过滤，并以真空抽气装置或超声波对以上各试剂溶液和样品脱气，以确保溶液和样品中无微颗粒和溶解气体；由自动进样环进样的少量样品（<5mL）可以以10000rpm离心5分钟后，吸取上清液直接使用。
4.1.2 将输液管路终端浸入各选用的溶液中。
4.1.3 检查层析系统信号线和流通管路等各部分线路是否连接完好，若无异常情况可准备开机。
4.2 开机4.2.1 插上系统各部分电源插头，开启组分收集器开关，然后开启层析系统主机左下方电源开关，再打开电脑监视器的电源开关，进入Windows系统。
用鼠标双击Windows桌面的“BioLogic Configuration”图标，在弹出窗口中确认不选择“Maximizer is install”，选择BioFrac 组分收集器，根据泵头配置选择F10或F40泵头，最后鼠标点击“OK”确认。
4.2.2 鼠标双击Windows桌面的“BioLogic DuoFlow”快捷键，进入层析系统“Manual”监视界面，检查该界面系统各部分和阀门的状态，在“UV Detector”控制面板上点击“ON”，打开紫外灯。
4.2.3 用洁净针筒插入主机A泵前下方的“Priming”接口，旋松该接口，用针筒抽出泵中的溶液，旋紧接口，再重复上述操作，直到抽出溶液不含气泡，最后旋紧接口；B泵也如同上述操作，确保A、B泵中没有气泡。
4.2.4 鼠标选择Manual界面中“Workstation Valves”的A VR7-3阀门的“P”位置，使阀门转到Purge位，打开主机左下方“Purge”下的“A”按钮，开始以所选A液冲洗A泵管道，约2分钟后再按该按钮停止Purge，然后按“B”按钮，以所选B液冲洗B泵管道，同样冲洗2分钟。
欢迎阅读AKTApurifier层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1系统组件(1)泵Pump(2)阀(3)(4)pH电导仪2(1)(a)梯度制备(Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(b)自动缓冲液pH及梯度制备(BufferPrep)根据所用缓冲液配方，分别将A1、A2、B1、B2放入相应的溶液，由A泵及其三通阀调配缓冲pH，由B泵及其三通阀调配梯度。
(2)上样上样阀上样：将样品经进样阀3号口注入储存在样品环(Sampleloop)内，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由三通阀选择进样管道，由系统泵将样品泵入层析柱。
(4)收集收集器收集：设置收集体积(Fracsize)，可自动按条件收集。
出口阀收集：按需要选择不同出口管收集。
二开机程序1开启电脑；2打开AKTApurifier电源；3启动UNICORN软件，输入用户名(Username)和密码(Password)，默认用户三；四系统控制(SystemContral)1手动操作(Manual)1.1手动操作命令简介(1)Pump泵Flow:设定系统泵流速Gradient:梯度设定BufferPrep_pH:使用缓冲液配制功能时，设定pH值SampleFlow:设定样品泵流速PumpWashpurfier:系统泵清洗(2)Flowpath流路PumpAInlet:A泵入口三通阀切换PumpBInlet:B泵入口三通阀切换InjectionValve:上样阀切换OutletValve:收集出口阀切换InjectionMark:插入记号(3)Alarm&Mon报警、检测WaveLength:选择监测波长（1-3个）(4)FracBufferPrepRecipe:选择缓冲液配方Set_Mark:插入提示语End_Timer:设定结束运行时间Recordon/off:手动运行时开始或结束数据记录1.2手动操作示例(1)梯度洗脱设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。
9种层析分离纯化方法详解层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。
所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶媒。
当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。
与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。
反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。
分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。
按层析原理可将层析分为以下9种：1、亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力，从而达到分离的目的。
将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂，当含混合组分的样品通过此固定相时，只有和固定相分子有特异亲和力的物质，才能被固定相吸附结合，性无关组分随流动相流出。
改变流动相组分，可将结合的亲和物洗脱下来。
亲和层析中所用的载体称为基质，与基质共价连接的化合物称配基。
具有专一亲和力的生物分子对主要有：抗原与抗体，DNA与互补DNA或RNA，酶与底物、激素与受体、维生素与特异结合蛋白、糖蛋白与植物凝集素等。
亲和层析可用于纯化生物大分子、稀释液的浓缩、不稳定蛋白质的贮藏、分离核酸等。
亲和层析纯化的分离原理特点：亲和层析具有高选择性、高纯度、快速、浓缩等特点，在重组蛋白的分离中多作为第一步的粗纯，实现对绝大部分杂质蛋白的去除。
2、离子交换层析采用具有离子交换性能的物质作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆交换的性质来分离离子型化合物的方法。
主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其他带电荷的生物分子。
不同蛋白质的等电点（pI，isoelectric point）特性，使在不同pH缓冲液条件下所带正/负净电荷不同，选择不同的离子交换柱实现分离。
AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。
上样泵：(sample pump)样品输送。
(2) 阀 Valve七通阀：(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换；2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换(downflow/upflow)。
(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。
2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(2) 层析柱柱顶连接进样（七通）阀1号口，柱后连接紫外流通池。
(3) 上样上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop)，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。
(4) 收集 (选购)收集器收集：设置收集体积(Frac size)，可自动按条件收集。
二开机程序1 开启电脑；2打开AKTAbasic电源；3启动UNICORN软件，输入用户名( User name) 和密码(Password)，默认用户(default) 密码为 default，待AKTA自检结束后，在system control窗口中显示系统准备就绪（Instruments are ready) 。
三 UUNICORN 软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)；2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4. 方法组编辑(MethodQueues)，将几个方法组合在一起，依次运行。
BioLogic LP层析系统简明使用教程BioLogic LP 层析系统一、 仪器名称：BioLogic LP 层析系统 二、 规格型号：BioLogic LP 三、 生产厂家：Bio-Rad Laboratories, Inc 四、 产品简介 随着生命科学研究进入后基因组时代，以蛋白质为主要对象的研究成为各实验室研究的主 题，其中，对单个蛋白质的分离纯化是蛋白质研究的基础工作，也是非常重要的工作。
对纯度均 一蛋白质的研究是揭示生命规律的重要手段，也是新药研发的必要途径，因为只有获得一定量的 蛋白质纯品，才能满足结构和功能的分析、物理化学参数测定、生物活性、毒理和药理实验等等， 乃至大量制备用于诊断和治疗。
蛋白质分离纯化的重要问题是如何在纯化过程中保持温和的条件，从而保证在此过程中蛋白 质的结构和活性不受影响。
层析技术（Chromatography）为蛋白质纯化提供了这样的条件，大都 在室温或低温下操作，所用的流动相可以是与生理液相似的具有一定 pH 值、离子强度的缓冲水 溶液，所用的填料表面修饰各种基团，可与蛋白质分子温和接触，从而保持了蛋白质分子的原有 构象和生物活性。
层析系统以及各种分离纯化所需的填料和层析柱是保证该纯化过程的稳定性、 重现性和自动化进行所必需的设备。
五、 技术原理 将一种混合物分成单个组份是一个熵减的过程，故外界必须要给此过程提供能量。
如下图所 示，完整的层析系统主要包含泵、各种阀门、层析柱、各种在位检测器和收集器。
其主要过程是：由蠕动泵推动溶液；各种阀门控制溶液流向，或者进样，或者洗脱层析柱； 样品经过层析柱并洗脱后，以样品各组分在流动相和固定相（层析介质）中的分配系数不同而 保留不同，从而分开；不同组分经过各种在位检测器，如紫外检测器、电导检测器、pH 检测器 等确定各组分的位置和浓度；最后各组分由收集器自动收集。
其中，泵是层析系统的心脏，用以推动溶液流动，LP 的泵是双通道蠕动泵，可提供精确稳 定，双向变速可调的液流，可配不同直径蠕动管，流速范围为 0.01-40mL/min。
甲乙流操作简易流程甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂（胶体金法）操作简易流程【检验原理】本品利用免疫层析技术，采用双抗体夹心法检测甲型和乙型流感病毒抗原。
【储存条件及有效期】4℃～30℃保存，产品有效期24个月。
铝箔袋开封后，测试卡应在1小时内尽快使用。
样本提取液使用后应立即加盖，并置于阴凉处或冰箱内，请在有效期内使用。
【样本要求】采集样本的无菌拭子推荐使用PP（聚丙烯）杆的聚酯海绵拭子。
1. 2.2.标本采集后应尽快采用病毒采样液或本试剂盒提供的样本提取液进行处理。
如不能立即处理，标本应立即置于干燥、消毒并严格密封的塑料管内储存，2℃～8℃下可保存8小时，-70℃可长期保存。
【检验方法的局限性】1. 本试剂仅供检测鼻咽拭子和口咽拭子的呼吸道分泌物。
2. 测试的准确性取决于采集样本过程，样本采集不当、样本储存不当、样本不新鲜或样本反复冻融均会影响检测结果。
3. 采集的样本若存在个别药物如高浓度的非处方药和处方药（鼻腔喷雾剂）会干扰结果。
若结果可疑，请重新测试。
5. 本试剂的检测结果仅供临床参考，不得作为临床诊治的唯一依据，对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。
6. 受抗原类检测试剂方法学的限制，其分析灵敏度普遍较核酸类试剂低，故实验人员应对阴性结果给予更多的关注，需结合其它检测结果综合判断，建议对有疑问的阴性结果采用核酸检测或病毒培养鉴定方法进行复核。
7. 对甲型流感病毒的检测，建议对阳性结果进一步实验以确认甲型流感病毒的亚型，并向当地公共卫生预防机构咨询协商处理。
8. 有关假阴性结果的可能性分析：①不合理的样本采集、转运及处理、样本中病毒滴度过低均有可能导致假阴性结果。
②病毒基因变异可能导致抗原决定簇的改变，从而造成假阴性结果，使用单克隆抗体的试剂更易发生此类情况。
③最适样本类型以及感染后的最佳采样时间（病毒滴度峰值）未经验证，因此，在同一患者分次、多部位采集样本可能会避免假阴性。
