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蛋白层析仪器系统PPT课件

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蛋白层析仪器系统原理讲座

蛋白层析仪器系统原理讲座

缺点：
× 精度差 × 脉动大 × 压力低
蠕动泵类型
单通道泵
多通道泵
柱塞往复泵特点

耐高压 脉冲小 流量宽、无极可调 重复性好、准确度高
柱塞泵工作原理
单向阀结构
宝石球
工作原理
吸液冲程
出口单向阀
排液冲程
抛光面
泵头 球座 流动相 进口单向阀
柱塞泵分类

按柱塞个数

单柱塞 双柱塞 三柱塞
1996年－2000年，北京化工大学，化学工程系生物化工专业，本科 2000年-2005年，北京化工大学，生命科学与技术学院，生物化工专业，博士，2006年至今，中国科学院过程工程研究所，生化工程国家重点实验室
成果 发表论文26篇，其中，SCI收录论文21篇，申请专利9项，授权2项。 “多柱组合色谱高通量蛋白质分离设备及层析柱”获得2011中国仪器仪表协会科 技创新奖（第三获奖人）； “以保护活性为目标的生物技术药物层析分离纯化技术”获得2013中国分析测试 协会科学技术奖“CAIA奖”一等奖（第三获奖人）。
简单整合型
BioLogic LP (Bio Rad)
AKTA Prime (GE)
复杂整合型
AKTA Explorer (GE)
BioLogic LP (Bio Rad)
按规模分
实验室规模 AKTA pure 流速<150mL/min
中试规模 AKTA pilot 流速4-400mL/min
生产规模 AKTA process 流速0.75-30L/min
AKTA梯度性能考察
A：水 B：0.5-1.0%(v/v)丙酮
蛋白质的梯度洗脱注意事项

层析过程优化采取梯度洗脱或者阶越式洗脱方式； 反相层析探索条件时，梯度应尽可能长（>20个柱 体积）；

实验一凝胶过滤层析分离蛋白质 ppt课件

实验一凝胶过滤层析分离蛋白质 ppt课件

吸水能力，每g干胶吸水量的10倍
数字愈小,交联度越大,被筛分物质的分子量也愈小
例：
Sephadex G-50：
对多肽及蛋白质的筛分范围(分子量)为: 1500 – 30000
Sephadex G-200：
对多肽及蛋白质的筛分范围(分子量)为: 5000 – 80000
B. 琼脂糖凝胶
( 商品名: Sepharose , Bio- gel – A ) 对实验条件要求高 ( 温度, pH )
实验一凝胶过滤层析分离蛋白质
一、 实验目的
1.掌握凝胶过滤层析法的基本原理； 2.掌握凝胶过滤层析法分离蛋白质的过程。
实验一凝胶过滤层析分离蛋白质
1. 常用生化实验技术
分光光度技术 电泳技术 离心技术 层析技术
实验一凝胶过滤层析分离蛋白质
是利用混合物中各组分的理化性质差异（吸附 力、溶解度、分子形状和大小、分子极性、分子亲 和力等）建立起来的技术。
注意：
防止床面干涸，可适当补充蒸馏水
实验一凝胶过滤层析分离蛋白质
① 加样前打开出口，使床面的蒸馏水流出，正好露 出床面时，立即关闭出口（将干未干）
② 用滴管将混合样品(0.6ml，即血红蛋白和溶菌酶 各0.3ml)缓缓沿柱内壁小心加于床表面
③ 打开出口，使样品进入床内，直到床面重新露出, 立即加入1~2倍于样品体积的蒸馏水
名称
操作形式
柱层析法
固定相装于层析柱内，使样品沿着一个方 向前移而达分离的层析法，包括一般柱层 析法、毛细管层析法和微粒填充柱层析法
平面层析法 层析过程在固定相构成的平面层内进行的 层析法，包括纸层析法、薄层层析法和薄 膜层析法
实验一凝胶过滤层析分离蛋白质
分离效率高 分析速度快 具有极高的灵敏度 应用范围广

蛋白质层析技术PPT课件

蛋白质层析技术PPT课件
2
蛋白质结构组计划
• 目标：用十年的时间获得一万种蛋白的三 维结构。
• 但是只有57%被克隆的蛋白能够成功表达。 • 而且在这些表达的蛋白中，只有 28% 的重
组蛋白能够被纯化出来。 • 最终，只有2%-10%的最初的目标蛋白被成
功的建立。
3
蛋白质层析分离纯化机制
• 电荷不同：离子交换层析 • 大小、形状：凝胶过滤层析 • 疏水区域：疏水层析 • 特异性：亲和层析 （选择性是最优秀
• FDA规定: 一个生产程序,每次必须产出相同 数量和品质的产品, 否则不会被认可;
• FDA规定: 必须进行蛋白质产品的生物活性 测定 ,测定方法必须证明是规范和有效的,并 且要确保每次生产的产品最后的活性和效 用是一致的;
• FDA规定: 产品必须有确切的可以耐受运输 时间和货架时间;
54
FDA 关于蛋白质产品的重要规定
的）
4
层析介质
• 生物兼容性：亲水性，大孔径，不会使生
物大分子失活，没有生物化学毒性—过强 吸附、泄露。
• 化学稳定性：在生物大分子存在的化学条
件下是稳定的。
• 必要的机械性能：流体中的耐压性、弹
性。
5
化学组成：亲水多孔高聚物等
亲水的介质对蛋白有吸附作用，因此要在层析 溶液中加一定浓度的盐。
6
聚合物机体孔的结构
27
平台的操作（软件：知识结构）
• 实验室规模的层析应采用不大于50 µm的离 子交换或疏水介质，应具有10 cm左右，则 不少于 600个理论塔板。
• 精制：高效预装柱1 - 5 ml，10 µm左右粒 度，如Mono系列等。
• 通常条件下，采用15 µm的 Resource精制 也可以达到较好效果。

蛋白质化学中的层析技术PPT课件

蛋白质化学中的层析技术PPT课件

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感谢聆听
蛋白质化学中的层析技术PPT 课件
目
CONTENCT
录
• 层析技术简介 • 层析技术在蛋白质分离纯化中的应
用 • 层析技术原理 • 层析技术的应用实例 • 层析技术的优缺点及展望
01
层析技术简介
层析技术的定义
层析技术
是一种分离和纯化混合物中各组分的方法，基于各 组分在固定相和流动相之间的分配差异进行分离。
05
层析技术的优缺点及展望
层析技术的优点
分离效果好
层析技术能够根据分子间的吸附、分配等作用力 的差异，将混合物中的组分进行有效的分离，得 到高纯度的产物。
适用范围广
层析技术可以应用于不同性质的混合物分离，如 有机物、无机物、离子、蛋白质等，具有广泛的 适用范围。
分离过程可重复
层析技术是一种物理分离方法，不涉及化学反应 ，因此分离过程可以重复进行，适用于大规模分 离和制备。
凝胶过滤层析原理
原理概述
凝胶过滤层析是一种基于分子 大小差异的分离技术。通过不 同孔径的凝胶介质，不同大小 的分子会以不同的速度通过凝 胶，从而实现分离。
应用范围
凝胶过滤层析常用于蛋白质、 多糖等大分子物质的分离和纯 化。
技术特点
操作简便、分离效果好、分辨 率高。
离子交换层析原理
01 02
原理概述
1950年代
随着凝胶技术的发展，凝胶层 析、电泳等新型层析技术逐渐 兴起。
1970年代至今
层析技术不断改进和创新，应 用范围越来越广泛，成为生物 化学领域中重要的分离分析方 法。
层析技术的分类
根据固定相和流动相的物理状态
可分为液相层析和气相层析。液相层析又可分为液-固层析和液液层析，是生物分子分离纯化中最常用的技术。

蛋白质分离纯化PPT课件

蛋白质分离纯化PPT课件

低速离心机 高速离心机 超速离心机
2021/3/12
12
离心操作要领
根据待离心的溶液性质和体积选择合 适的离心管 离心管连外套管一起平衡
对称方向放入离心机中（转子对角线）
当离心速度减为零时，方可打开离心 机盖
2021/3/12
13
离心操作要领
离心前一定要配平，配平后放入离心机转子对角线
2021/3/12
中性盐： (NH4)2SO4、 Na2SO4、 NaCl 优点：蛋白质不变性
2021/3/12
8
1 盐析法
蛋白质分子颗粒大小和亲水程
影响因素：
度不同 相对分子质量和所带电荷不同
➢ pH值：被分离的蛋白质在其等电点附近效果最好
➢ 盐的饱和度：盐的饱和度不同析出的蛋白质也不相同
100% (NH4 )2SO4 ：主要清蛋白沉淀 50% (NH4 )2SO4 ：主要球蛋白都沉淀 33% (NH4 )2SO4：主要γ -球蛋白沉淀
16
人血清中几种主要蛋白质组分*
血清蛋白 质
清蛋白
等电点 4.64
分子量 69,000
占蛋白质 总量%
57～72
α1-球蛋白 5.06
200,000
2～5
α2-球蛋白 5.06 β-球蛋白 5.12
300,000
90,000～ 150,000
4～9 6.5～12
γ-球蛋白
6.85～ 7.3
156,000～ 950,000
基本操作
玻璃仪器的洗涤
➢ 需要清洗的玻璃仪器：
试管、烧杯、比色盘、乳头吸管、层析柱等
➢ 洗涤方法：
自来水（＞7次）蒸馏水（＞3次）干燥备用
清洁标准

实验一凝胶过滤层析分离蛋白质PPT讲稿

实验一凝胶过滤层析分离蛋白质PPT讲稿

• 制备：
• 将干胶颗粒悬浮于5 ~ 10倍的蒸馏水或洗脱液
中
• 充分溶胀，溶胀之后将极细的小颗粒倾泻出去
3. 凝胶装柱
• ①柱固定于架子上，垂直放置，关住出口 • ②自顶部缓缓加入葡聚糖悬液，使G-50 开始下沉， • 至1 ~2cm时，打开出口 • ③凝胶逐层上升，至顶部 2-3cm时，关闭出口
名称
操作形式
柱层析法
固定相装于层析柱内，使样品沿着一个方 向前移而达分离的层析法，包括一般柱层 析法、毛细管层析法和微粒填充柱层析法
平面层析法 层析过程在固定相构成的平面层内进行的 层析法，包括纸层析法、薄层层析法和薄 膜层析法
（3）层析技术的优点
分离效率高 分析速度快 具有极高的灵敏度 应用范围广
注意点：
垂直放置 防止气泡产生 防止柱的分层
4. 平衡
• 放置一段时间，约40分钟（使凝胶更好的压实）
注意：
防止床面干涸，可适当补充蒸馏水
5. 加样
• ① 加样前打开出口，使床面的蒸馏水流出，正好
露
• 出床面时，立即关闭出口（将干未干） • ② 用滴管将混合样品(0.6ml，即血红蛋白和溶菌酶 • 各0.3ml)缓缓沿柱内壁小心加于床表面 • ③ 打开出口，使样品进入床内，直到床面重新露
出,
• 立即加入1~2倍于样品体积的蒸馏水
6. 洗脱
① 当此少量蒸馏水接近流干时，反复多次加入蒸
•
馏水，进行洗脱，直到两带分开
② 检查Hb在层析床中色带位置，待Hb洗脱完后，
•
用试管分步收集洗脱液
• ③ 10d/管，每管加NaOH 2d，CuSO4 2d • ④ 检查溶菌酶洗脱情况，若为紫色，则为（+）

实验一凝胶过滤层析分离蛋白质PPT课件

7
（1）层析系统的基本组成
固定相 + 流动相
固体物质 / 固定于固体物质的成分
可以流动的物质： 如水和各种溶媒
8
待分离混合物（A、B）随流动相通过固定相
由于理化性质差异，与两相发生相互作用（吸附、 溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含 量对比）不同
与固定相相互作用力越弱的组分，随流动相移动时 受到的阻滞作用小，移动速度快
23
3. 凝胶装柱
①柱固定于架子上，垂直放置，关住出口 ②自顶部缓缓加入葡聚糖悬液，使G-50 开始下沉，
至1 ~2cm时，打开出口 ③凝胶逐层上升，至顶部 2-3cm时，关闭出口
24
注意点：
垂直放置 防止气泡产生 防止柱的分层
25
4. 平衡
放置一段时间，约40分钟（使凝胶更好的压实）
14
15
（2）凝胶的特点
属于惰性载体，不带电荷，吸附力弱，操作条 件较温和，可在相当广的温度范围内进行，不需要
有机溶剂，对于高分胶
16
（3）凝胶的选择 多孔网孔结构
A. 葡聚糖凝胶 (商品名: Sephadex， Dextran) 型号: G-10 – G-200
CuSO4 碱性
肽键
紫 红色
29
四、实验结果
绘制洗脱结果示意图，并分析所得结果
五、讨论
下次实验：
《碱性磷酸酶的提取及其比活性的测定》 时间：4月18日上午9：00开始
30
2019/12/14
.
31
适用：
杂质多、含量少的复杂样品分析，尤其适用于生 物样品的分离分析
13
3. 凝胶过滤层析法 （gel filtration chromatography） （1）原理：

全国各类蛋白仪分解课件

全自动特定(tèdìng)蛋白分析仪
❖ 贝克曼 Array 360 ❖ 贝克曼 ICS-II ❖ 西门子（原德灵）BNP/BN
❖ 法国赛诺菲QM300 特定(tèdìng)蛋白 ❖ 雅培AXSYM 免疫分析仪
❖ 雅培IMX 免疫分析仪
第二页，共二十四页。
贝克曼ARRAY360特定(tèdìng)蛋白分析仪
原理：采用红色激光，散色比浊原理全定量
快速：最快的15秒出结果 经济：仪器试剂(shìjì)成本低 简便：操作简单5步完成 独特项目：可检测lgG亚类
（lgG1、lgG2、 lgG3、lgG4）和 lgGA 亚类（lgA1、lgA2）等 检测项目：可检测26个项目
第十页，共二十四页。
全定量特种蛋白(dànbái)金标检测仪[小旋风]
第二十一页，共二十四页。
西门子DCA Vantage 糖化(tánghuà)血红蛋白仪
❖ 仪器概述:POCT免疫测定仪
❖ 测试原理:单克隆抗体凝集反应,Benedict Behre化学反 应
❖ 检测项目:定量检测糖化血红蛋白(xuèhóng dànbái),尿微量 蛋白,肌酐,尿白蛋白/肌酐比值
❖ 报告时间:6-7分钟
第十三页，共二十四页。
韩国(hán ɡuó)i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪
检测(jiǎn cè)CRP（含超敏CRP、常规CRP）、HbA1c、MAU、PSA、 AFP、CEA、cTnI
检测项目均在3～15分钟内完成，检测速度13秒/测试
第十四页，共二十四页。
Delta四通道特定(tèdìng)蛋白仪
用血量：只需滴加10ul末梢血或静脉血， 方法：按照仪器的鸣叫提示，旋转试剂筒一周(yī zhōu)，

蛋白层析仪器系统PPT课件

高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效 分离分析方法
层析分类
特性 层析分类
低压
中压
高压
介质粒度 (μ m)
40 ~ 200
25 ~ 40
操作压力 (MPa)
不明显高于 1atm
0.5 ~ 4
3 ~ 10
4 ~ 20
2. 蛋白层析系统的构造
▪ 输液系统：
▪ (1)提供连续、稳定而精确的流量； ▪ (2)进行梯度洗脱；
◇ 检查泵头单向阀工作是否正常。
在位清洗
根据样品的脏/干净的程度，可按软件中CIP程序定期清洗 系统，防止系统管道被堵，压力增高。11
维护——每半年
压力检测器
零点校正（pressure offset)。
紫外可见检测器
◇用注射器推10%的表面活性剂SDS注入紫外流动池
停留20分钟，用水冲洗。
◇用用注射器推甲醇或1M NaOH注入紫外流动池，停留20分钟，用水冲洗。
为节省操作费用，必须注意：
装填、平衡或者冲洗层析柱时不需要开灯； 完成实验后冲洗系统前把紫外灯关闭；
AKTA紫外可见检测器 操作注意事项
汞灯、氘灯、钨灯使用寿命和点燃次数相关 氙灯寿命与使用时间有关，和点燃次数无关
因此，在不必要的时候，例如装填、平衡或 者冲洗层析柱时随手关灯
多波长检测时，光栅一直处于旋转状态，两个 波长差别越大，旋转角度越大，影响寿命 因此，如无特殊需要，最好使用单波长检测
3500
20~30 13,000
2000
10~20
3,000
氙灯 AKTA Purifier/Explorer
2000
0 40,000
一台AKTA 开灯后，每小时光源烧掉10元，如果加上光栅的损耗（60,000 元/3000 hr）， 每小时耗费30元，一天（8小时）为240元，一个月（20天）为4800元；

最新分子医学技能06 分子筛层析蛋白质定量ppt课件


DNA的吸收峰
Solar ultraviolet radiation effects on biological systems
B L Diffey Regional Medical Physics Department, Dryburn Hospital, Durham DH1 5TW, UK /docs/001-503/001-503.html
紫外吸收测定蛋白质含量
利用经验公式直接计算样本蛋白质含量 （P130）
蛋白质的吸收峰
Solar ultraviolet radiation effects on biological systems
B L Diffey Regional Medical Physics Department, Dryburn Hospital, Durham DH1 5TW, UK /docs/001-503/001-503.html
本实验的固相载体是葡聚糖凝胶 G-50 ， 它 适 用 于 分 子 量 范 围 在 1,500-20,000 Da之间的多肽与蛋 白质的分离。
被分离的样品有： • 蓝色葡聚糖2000，分子量为2,000,000Da • 血红蛋白A，分子量为17,000Da • 2,4-二甲基苯酚（DNP）-天门冬氨酸，分子量500Da
近光红谱外。光 紫外光区——氢灯、氘灯
光→电
吸光度与浓度的关系 A = bc
吸光度
0.00
光源
检测器 吸光度
0.22
b
检测器
吸光度 b
0.42
光源 光源
检测器
微量测量方法
▪ 举例：NanoDrop 2000c Spectrophotometer,
Thermo Scientific ▪ /video/2891/-advertisement
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存 使用完高盐溶液后用纯水冲洗 至少半个小时
定子（Stator） 转子（Rotor）
自动进样
▪ 进样动态范围广 ▪ 样品残留少(连续洗针系统) ▪ 延迟体积少 ▪ 进样重复性高(< 0.5% RSD) ▪ 主要应用于分析型色谱
泵进料
针对料液中目标产物浓度极低，料液体积较大的 情况（如用离子交换捕捉发酵液中表达量非常低 的基因工程蛋白质）；
高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效 分离分析方法
层析分类
特性 层析分类
低压
中压
高压
介质粒度 (μ m)
40 ~ 200
25 ~ 40
操作压力 (MPa)
不明显高于 1atm
0.5 ~ 4
3 ~ 10
4 ~ 20
2. 蛋白层析系统的构造
▪ 输液系统：
▪ (1)提供连续、稳定而精确的流量； ▪ (2)进行梯度洗脱；
并联泵 串联泵
偏心轮双柱塞并联泵
偏心轮
e 2.15
R 17.50
θ S
通过每圈不同阶段电机转速控制
V
V0 VB
2
1
0
-1
-2
-50
0
50 100 150 200 250 300 350 400
TIME
控制要求较高 AKTA做到了
凸轮双柱塞并联泵
理论速度曲线 加工精度要求较高 加工精度为0.01mm时的速度曲线
缺点：
× 精度差 × 脉动大 × 压力低
蠕动泵类型
单通道泵
多通道泵
柱塞往复泵特点
耐高压 脉冲小 流量宽、无极可调 重复性好、准确度高
柱塞泵工作原理
单向阀结构
宝石球
工作原理
吸液冲程
排液冲程
出口单向阀
抛光面
球座 流动相
泵头 进口单向阀
柱塞泵分类
按柱塞个数
单柱塞 双柱塞 三柱塞
按工作方式
AKTA梯度性能考察
A：水 B：0.5-1.0%(v/v)丙酮
蛋白质的梯度洗脱注意事项
层析过程优化采取梯度洗脱或者阶越式洗脱方式； 反相层析探索条件时，梯度应尽可能长（>20个柱
体积）； 当发现进错样时，不可以为了节约时间，而直接用
100%流动相B（有机相）洗脱，否则会不可逆地损 坏层析柱。
4 进样系统
手动进样
❖ 直接倒入柱子顶部 ❖ 进样阀进样
自动进样 泵进样 柱切换进样
进样阀
手动进样阀 自动进样阀
定子（Stator） 转子（Rotor）
AKTA进样阀操作
手动进样注意事项
进样动作：Load状态时平缓推针，切换到Inject后再拔针以防倒 吸
清洗：在Inject状态清洗进样口 对于Rheodyne进样器
一定要使用合规格的进样器，规格为外径0.028英寸，长2英寸的平 头针。一定不能使用尖针，它会严重刮坏转子垫圈。
废液口：出口末端应与进针口水平以防倒吸或虹吸
进样阀操作注意事项
进样阀靠转子和定子的面密封，无法保证100%不泄露 缓冲液泄露会导致盐析出，损伤密封面和导流槽，严重时造
成漏液和两个导流槽之间短路 实验完成后用纯水在load和inject状态下清洗，20%乙醇保
料液前处理非常重要，进料前必须用0.45 μm或 更小孔径滤膜严格过滤；
进料过程必须密切注意压力变化； 推荐使用蠕动泵进料。
柱切换进料
解决下列问题
人工换柱带来的泄漏和污染 周期长导致蛋白质失活 通量低和收率低
隔膜泵
AKTA process三元隔膜泵 德国QuattroFlow四元隔膜泵
梯度洗脱系统
BA
磁力搅拌器
梯度混合器
比例阀
BA
脱气机
低压梯度
BA
高压梯度
梯度混合器
B
A
磁力搅拌器
两杯液位始终保持平衡； 两杯溶液混合速度以及输出流量均可调节，可以作出各种不同斜率的线性梯度； 按不同阶段的时间作适当的输出流量调节，还可以做出各种不同的台阶形梯度。
▪ 进样系统：引入样品 ▪ 层析柱 ▪ 检测系统：对分离后各组份进行检测给出响应信号，
并进行处理 ▪ 产品收集系统：收集分离产物
构造简图
梯度 混合
计量泵
六通阀
进样环
流动相贮罐
流动相输送系统
层析柱
Байду номын сангаас工作站
进样系统
检测系统
检测器
分部收集器
AKTA组成示意图
堆积型
国产
GradiFrac (GE)
简单整合型
低压梯度
低压梯度比例阀 A B
脱气机
通过电磁阀的分时切换来实现流动相梯度
高压梯度
如何考察梯度混合性能
简单判断梯度比例阀是否泄漏——
设定泵使用一个单独通路（如A），泵出口排空，开大流速，观察其他通 路（B等）的流动相是否流动，正常时均不应流动。
综合考察梯度性能——
流动相A：水；流动相B：1%丙酮 不接层析柱，280nm检测，编辑梯度，设定流速，不进样进行检测
3 输液系统
流动相输送方式
梯度混合方式
高位槽
梯度混合器
气体压力 出口抽真空
电磁阀（低压梯度） 高压梯度
泵送系统
蠕动泵 柱塞往复泵
最常用
其他类型的泵，如隔膜泵
最简单的方式
压力
高位槽
蠕动泵
真空
蠕动泵（软管泵）工作原理
优点：
✓ 结构简单，无密封件，无阀门 ✓ 维护方便，易于清洗和清洁 ✓ 可输送含颗粒液体以及高粘流体 ✓ 很好的自吸功能，可干转 ✓ 剪切力小，适合输送对剪切力敏感的 物料
BioLogic LP (Bio Rad)
AKTA Prime (GE)
复杂整合型
AKTA Explorer (GE)
BioLogic LP (Bio Rad)
按规模分
实验室规模 AKTA pure 流速<150mL/min
中试规模 AKTA pilot 流速4-400mL/min
生产规模 AKTA process 流速0.75-30L/min
蛋白层析系统
李秀男
Email:xnli@ 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室
主要内容
1.概述 2.蛋白层析系统的组成 3.输液系统 4.进样系统 5.检测系统 6.日常维护 7.选型购买
1 概述
液相色谱（层析）的发展
古罗马时期人们用布或纸分析染料与色素； 1903年，Tsweet发表首篇有关层析的论文； 1960s, HPLC商用仪器出现
柱塞泵的操作注意事项
柱塞杆和密封圈
缓冲液泄露会导致盐析出，损伤柱塞杆和密封圈 使用20%乙醇作为泵后清洗液 保持流动，并定期检查是否流空或者长菌 使用完高盐溶液后用纯水冲洗至少半个小时
单向阀
最怕堵塞 流动相用0.45um膜过滤 超纯水和色谱纯试剂可以直接使用
生产规模设备常用
特点：低剪切、大流量