超声波提取苦瓜总皂苷的研究

苦瓜中提取苦瓜皂苷的工艺研究陈鋆;刘振香;吴昌胜【摘要】研究了苦瓜皂苷的提取工艺,以粗苦瓜可皂苷收率为考察指标,以提取温度、提取次数、回流时间、乙醇浓度、料液比为考察因素,通过单因素实验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%,提取次数2次,温度60℃,回流时间1.5 h,料液比1:15.并经放大十倍的重现性试验,结果皂苷提取率3.20%.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2010(038)001【总页数】3页(P59-61)【关键词】苦瓜皂苷;提取;重现性试验【作者】陈鋆;刘振香;吴昌胜【作者单位】金华职业技术学院化工与制药学院,浙江,金华,321007;金华职业技术学院化工与制药学院,浙江,金华,321007;金华职业技术学院化工与制药学院,浙江,金华,321007【正文语种】中文苦瓜为葫芦科植物的果实,别名锦荔枝、癞葡萄、凉瓜,因具有苦味而得名.它是夏令的佳菜,其营养成分全面而独特,不仅有良好的食用价值,而且还有明显的药用功效,素有"药用蔬菜"之称.《本草纲目》曰:"去邪热,解劳乏,清心明目".苦瓜味苦性寒,具有清热解毒、滋养强壮等功效[1].现代研究证明,苦瓜的根、茎、叶、花、果实及种子皆可药用.苦瓜中的苦瓜皂苷具有降血糖、抗肿瘤、抗艾滋病、抗氧化、抗生育、抗菌、抗病毒以及提高人体免疫性等药理作用[2-3].苦瓜营养成分丰富,含有苦瓜多糖、苦瓜皂昔、苦瓜黄酮等多种生理活性物质,具有极高的药用和食用价值,在医药和食品领域中有着广泛的用途.本文以苦瓜为原料,采用乙醇回流提取苦瓜皂苷[4-5],对苦瓜皂苷的提取工艺条件与苦瓜皂苷测定方法进行研究,确定提取工艺参数,为苦瓜皂苷工业化提取工艺的提供依据.420数显三用恒温水箱,金坛市城西天宏实验仪器厂;水循环真空泵,SHZ-DⅢ;紫外-可见分光光度计,北京普析通用有限公司;超声波清洗器,上海杰恩普超声设备有限公司;旋转蒸发仪,上海精科实业有限公司;XYJ80-2离心机,江苏医疗仪器厂;微电脑真空干燥箱,上海精科实业有限公司.(1)对照品:人参皂苷Rgl,中国生物制品检定所提供;(2)试剂及药品:香草醛,高氯酸,硫酸,冰醋酸,甲醇,乙醇,石油醚,正丁醇,丙酮等试剂及药品均为分析纯;(3)原料:市售新鲜苦瓜,自制苦瓜干.1.3.1 苦瓜皂苷的提取纯化将鲜苦瓜全果切片,60℃下真空烘干,研磨成细粉,用不同浓度乙醇回流提取4h,取滤液回收乙醇至无醇味,用石油醚萃取两次,合并石油醚层,用少量水洗石油醚层,水层及洗液合并,离心,取上清液,减压浓缩至粘稠状,用等量正丁醇萃取3次,合并萃取液并减压浓缩至干,加入甲醇溶解,离心,除去不溶物,上清液加入10倍量丙酮,充分搅拌使之产生沉淀,沉淀完全后,离心,固体置于水浴中挥干溶剂,即为苦瓜粗皂苷样品.1.3.2 苦瓜皂苷的定性分析(1)取苦瓜粗皂苷5mg,置于蒸发皿中,加入醋酸0.4mL,用玻璃棒研磨使其充分溶解,沿蒸发皿壁滴加硫酸试液2滴,接触处立即显红色为苦瓜皂苷.(2)取苦瓜粗皂苷5mg,置于具塞试管中,加入蒸馏水3mL,强力摇动1 min,在10min之内产生大量持续泡沫为苦瓜皂苷.1.3.3 苦瓜皂苷的定量分析采用紫外可见分光光度法测定苦瓜皂苷含量.(1)对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的人参皂苷对照品5mg,置于5mL容量瓶中,加入甲醇溶解,定容至刻度,得到含量为1 mg/mL的人参皂苷对照品溶液.(2)样品溶液的制备:提取苦瓜粗皂苷约5mg,用5mL甲醇定容.(3)最大吸收波长的选择:取人参皂苷对照品溶液0.15mL,供试样品溶液0.2mL,分别加入具塞试管中,水浴中挥干溶剂,加入新配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL,密塞,摇匀.在60℃水浴中加热显色.显色完全后,以不加对照品的甲醇同法操作,作为空白,用紫外-可见分光光度计于400～700nm范围内进行波谱扫描,结果显示对照品溶液在552nm处出现最大吸收峰,供试样品在552～556nm之间出现最大吸收峰.最大吸收波长光谱扫描图见图1和图2.根据试验结果选择552nm 作为测定波长.(4)标准曲线的建立:分别精密量取对照品溶液30,60,90, 120,150,180μL于具塞试管中,水浴挥干溶剂,加入新配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL,密塞,摇匀.在60℃水浴中加热显色.显色完全后,以不加对照品的甲醇同法操作,作为随行空白,在552nm处测定吸光度,记录吸光度值与含量的关系,以对照品含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线用以考察线性关系.标准方程为Y=0.0995X-0.0273,R=0.994,其中X=C/30线性范围为30.0～180.0mg/L,其中A表示溶液吸光度,C表示对照品含量.标准曲线如图3.(5)样品含量测定:提取的苦瓜粗皂苷,取约10mg,用5mL甲醇定容,按1.3.3(3)显色完全后,于最大吸收波长处测定显色溶液吸光度,通过标准曲线线性回归计算供试样品中苦瓜皂苷的含量.(1)原料预处理:鲜苦瓜切片,60℃烘干后,粉碎过60目,得到苦瓜粉.(2)提取:称取50 g干燥苦瓜粉,70%乙醇溶液搅拌下回流提取2～3次,每次回流2小时,过滤,滤液减压回收乙醇并浓缩至粘稠状液体.(3)纯化:浓缩液用30 mL饱和正丁醇萃取,水层再用饱和30 mL正丁醇萃取两次,合并正丁醇相,浓缩至呈棕黄色粘稠状时,稍冷,搅拌下加入少量无水乙醇使刚好溶解,蒸去乙醇,得干燥粗皂苷,称重,按1.3.3方法测定苦瓜皂苷含量,计算苦瓜皂苷提取率. 在苦瓜皂苷提取过程中,影响苦瓜皂苷提取率的因素很多,通过对各因素的分析及初步试验,在充分搅拌前提下,选择提取温度、乙醇的浓度、回流时间、料液比作为主要影响因素,以粗皂苷中苦瓜皂苷含量为指标,对提取工艺参数进行优化.在单因素实验优化工艺参数的基础上,进行放大10倍的重现性实验.提取温度对提取率产生影响较大,提取温度越低能耗越少,有效成分不会被破坏,但是提取温度过低会造成提取不充分,因此需要确定合适的提取温度,如果提取率相当,应尽量采用较低温度.试验设定5个提取温度,分别为50,60,70,80,90℃,进行平行试验,测定粗苦瓜皂苷中的苦瓜皂苷含量,计算总皂苷的提取率,各温度对苦瓜皂苷提取率的影响见表1.结果表明:70℃以下苦瓜皂苷提取不充分,80℃时提取率最大,但较70℃时提取率没有明显增大,当温度90℃时,粗皂苷量增加,但含量反而有所下降,可能是温度过高导致其他组分溶出,皂苷分解,因此,提取温度不宜过高,控制在70℃～80℃为宜.选择浓度适宜的乙醇会增加有效成分的溶解性,从而缩短回流时间,简化提取过程.在充分搅拌和回流前提下,选择30%,40%,50%,60%,70%,80%,90%的乙醇进行试验,考察其对提取率的影响,第一次提取料液比为1:8,第二次提取料液比为1:6,分别回流2h,根据总皂苷的提取率,确定最佳乙醇提取浓度.由表2结果可知,在同样条件下,乙醇浓度在30%～70%之间,皂苷的提取率是逐步增大,80%反而有所下降,90%时下降较大,乙醇浓度过小,苦瓜中的多糖溶出增加,影响提取纯化难度,总皂苷提取率低;乙醇浓度过高,脂溶性成分溶出增多,影响粗苦瓜皂苷的纯度.因此,乙醇浓度在70%时,皂苷提取效果较好.在充分搅拌和回流前提下,以总料液比1:14,乙醇浓度70%,回流2次,每次分别回流0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0h,测定粗苦瓜皂苷中的苦瓜皂苷含量,计算总皂苷的提取率,确定较佳回流时间.由表3结果可知,在同样条件下,苦瓜皂苷每次提取时间为2.0h,总提取时间为4h时,皂苷提取效果最好.提取时间小于4h,苦瓜苷不能完全溶解出来,时间过长,其他组份被提取出来,影响吸光度和提取的苦瓜苷纯度,提取率反而有所下降.在充分搅拌和回流前提下,以70%乙醇浓度为溶剂,以不同总料液比:1:8、1:10、1:12、1:15、1:18回流2次,分别回流2.0h,测定粗苦瓜皂苷中的苦瓜皂苷含量,计算总皂苷的提取率,确定不同料液比和提取率的关系.由表4可知,在相同的乙醇浓度和回流时间条件下,料液比小于1:14时,皂苷提取率随料液比增加而增大,料液比小于1:12时,苦瓜皂苷不能完全提取出来;料液比大于1:14时,提取率没有明显变化,料液比过大,其他组份被提取可能性增大,粗皂苷量增加,但含量有所下降.根据单因素实验结果,投料量放大至每次500g苦瓜干,以乙醇浓度为75%,回流时间为2X2小时,料液比为1:14,在70℃下回流进行重现实验,平行3次.结果见表5.重现性实验结果显示,苦瓜皂苷提取率达3.20%,苦瓜皂苷含量接近10%.本文对苦瓜中主要功能性成分皂苷进行提取,采用了分光光度法测定苦瓜皂苷含量,建立了快速、简单、准确的苦瓜皂苷的含量测定方法,通过单因素实验确定了苦瓜干中苦瓜皂苷最优提取工艺为75%乙醇作溶剂,固液比为1:14,70℃回流提取4h,通过三批放大重现性验证实验表明,在此条件下可得到的苦瓜皂苷粗品提取率达3.20%.【相关文献】[1] 潘辉,赵余庆.苦瓜化学成分研究进展[J].中药研究与信息,2005, 7(7):24-26.[2] 沈旭丽,金锋.苦瓜的保健药用价值[J].四川食品与发酵,2005,4: 43-44.[3] 孔繁明.苦瓜的药理作用[J].总装备部医学学报,2001,1(3):43 -44.[4] 李健,张令文,等.苦瓜总皂苷提取工艺的研究[J].食品工业科技, 2005,10:117-119.[5] 姚毅,姚惠源,等.苦瓜皂苷提取工艺的比较研究[J].中成药, 2006,9(28):1375-1377.。

乙醇法提取苦瓜皂苷工艺择优研究张宏梅;李晓光【摘要】目的：采用正交实验法优化苦瓜中皂苷的提取工艺。

方法以乙醇为提取溶剂，采用乙醇回流提取法，对苦瓜中的皂苷进行提取，通过正交实验，对提取温度、乙醇浓度、提取时间、料液比、提取次数5个因素进行了考察探索出提取苦瓜皂苷的最佳工艺条件。

结果苦瓜皂苷的最佳提取条件为：乙醇浓度75％，提取温度70℃，料液比1∶30，提取时间2．5 h，提取次数2次，皂苷平均得率为0．65％。

结论提取工艺稳定、可行、有较高的提取率，并为苦瓜皂苷的进一步的深入研究奠定了一定基础。

%Objective To optimize the extraction process of the saponin from balsam pear by orthogonal design . Methods In orthogonal experiment ,ethanol concentration ,extractiontemperature ,extraction time and solid-liquid ra-tio and extraction times five factors were investigated .Results The optimum extraction conditions of balsam pear saponin was:75%ethanol,temperature 70 ℃,material ratio 1∶30,times of extraction 2.5 h,times of extraction 2. Averag e content of saponin was 0.65%.Conclusion The method is simple,convenient,easily and suitable for the determination of the saponin from balsam pear .【期刊名称】《吉林医药学院学报》【年(卷),期】2016(037)006【总页数】3页(P433-435)【关键词】苦瓜;皂苷;回流提取【作者】张宏梅;李晓光【作者单位】吉林医药学院药学院，吉林吉林 132013;吉林医药学院药学院，吉林吉林 132013【正文语种】中文【中图分类】R286.0苦瓜又名凉瓜，最早记载始于明代《滇南本草》,为葫芦科苦瓜属一年生攀缘草本植物的果实，原产于热带、亚热带地区。

苦瓜皂苷（或总皂苷）测定方法节选一、试剂：人参皂苷Rgl对照品，购于黑龙江省药检所。

无水乙醇、石油醚、甲醇、正丁醇、香草醛、冰乙酸、高氯酸等均为分析纯试剂。

1．2．1 苦瓜总皂苷的提取方法将新鲜苦瓜干燥、粉碎、过筛后经石油醚脱脂，准确称取处理过的苦瓜2．5 g 于250 mL碘量瓶中，再加入一定量的乙醇溶液后，在一定温度、功率下提取一定时问，取出过滤，将滤渣二次浸提后过滤，滤液经减压浓缩后，用水饱和正丁醇溶液萃取过夜；分离出正丁醇相，经减压浓缩、真空干燥后得苦瓜总皂苷。

I．2．2 测定方法(1)苦瓜总皂苷含量的测定香草醛一高氯酸比色法(2)皂苷含量的计算总皂苷(％)=测得苦瓜皂苷含量／所用脱脂苦瓜粉量×100％二、本试验通过对高氯酸和硫酸体系进行比较，选择香草醛．冰醋酸．高氯酸体系作为测定苦瓜皂甙的合适显色条件，并对体系中各个因素逐一考察，确定比色法测定苦瓜皂甙的条件为：0．2 mL冰醋酸，0．8 mL高氯酸，5％香草醛．冰醋酸溶液，70℃条件下反应20 min。

试验以苦瓜皂甙建立了苦瓜皂甙测定回归曲线，线性和稳定性可靠，平均加标回收率100．78％，变异系数为1．910。

UV ofthe two systemVaniUin．H2S04systemThe standard solution(O．66 mg／mL)0．1 mL was added to 20 mL tubes，evaporated the solvent in the warming pan．then 0．2 mL 5％vanillin．acetate acid and 0．8 mL 80％ H2S04wel'~added respectively． etubes we1'~putinto the warming tank and mixtured．After reacting in 60 o C for 15 mins，the tubes were took out and cooled down by icy water for 10 mim ，5 mL acetic acid was added to delute the system。

苦瓜总皂苷提取条件优化及不同部位的含量分析边会喜;黄齐;蔡静;吴泽宇;刘健【摘要】Ethyl alcohol was used to extract total saponin from bitter melon .In this experiment ,four single factors including extractiontime ,liquid/solid ratio ,temperature and concentration of ethyl al-cohol were investigated ,and the yield of total saponin was considered as evaluation index .According to single factor experimental results ,three factors and three levels orthogonal experiment was used to determine the best extraction conditions .The optimum extraction conditions are obtained as follows :the concentration of ethyl alcohol is 60％ ,theliquid/solid ratio is 1 : 7 and the extraction time is 3 h . Under these conditions ,the maximal yield of total saponin is 2 .37％ .On this basis ,the content of to-tal saponin in sarcocarp and flesh of bitter melon was detected separately .The results reveal that the content of total saponin in different parts of bitter melon shows significant difference (P< 0 .05) .%文章采用乙醇提取苦瓜冻干粉中的总皂苷,选定乙醇质量分数、时间、料液比和温度作为单因素考察,将苦瓜总皂苷提取率作为考察指标.通过三因素三水平的正交实验,确定苦瓜总皂苷的最佳提取条件.实验结果表明,提取工艺条件为乙醇质量分数60％,料液比1:7,提取时间3 h,此时皂苷粗制品的得率为2.37％.在此基础上,对苦瓜果肉和苦瓜瓤分别进行分析,结果表明苦瓜果实的不同部分含有的总皂苷得率差异显著(P<0.05).【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(041)001【总页数】4页(P129-132)【关键词】苦瓜;总皂苷;分光光度法;正交试验设计;分离纯化【作者】边会喜;黄齐;蔡静;吴泽宇;刘健【作者单位】合肥工业大学食品科学与工程学院 ,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院 ,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院 ,安徽合肥 230009;合肥工业大学食品科学与工程学院 ,安徽合肥 230009;合肥工业大学生物与医学工程学院 ,安徽合肥 230009【正文语种】中文【中图分类】R284.2苦瓜(Momordica charantia L.)是一种常见的葫芦科植物,在中国、印度、日本和韩国等亚洲国家被广泛地作为一种可食用蔬菜。

苦瓜皂苷的提取和体外清除自由基活性的研究09级临床病理卢军（113200*********）郑明星（113200*********）张良（113200*********）赖兆泳（113200*********）摘要苦瓜皂苷是苦瓜的主要有效活性物质之一，本实验用有机溶剂萃取法提取苦瓜皂苷。

同时检索资料发现对苦瓜皂苷抗氧化能力的研究较少，本实验以Vc做阳性对照，通过检测苦瓜皂苷体外清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子的能力探讨其抗氧化的能力关键词：苦瓜皂苷清除自由基抗氧化1 前言苦瓜为葫芦科苦瓜属一年生蔓性草本植物, 又名凉瓜、癫瓜、癫葡萄、锦荔枝等, 药食兼用, 性味苦寒, 无毒, 除邪热, 解劳乏, 清心名目【1】。

苦瓜皂苷是苦瓜中有效成分之一，有抗氧化能力。

实验结果表明【2】，苦瓜皂苷可显著增强超氧化物歧化酶( SOD) , 谷胱甘肽过氧化物酶( GSH- Px) 活力，由此可看出苦瓜皂苷有很强的抗氧化活性。

自由基理论是公认的抗氧化的理论，本实验通过研究苦瓜皂苷抗DPPH自由基，羟基自由基和超氧阴离子三个方面与Vc进行对比，了解其抗氧化能力，为苦瓜皂苷作为抗氧化保健食品的开发提供理论依据。

2实验目的通过乙醚提取法提取苦瓜有效抗氧化化学成分，同时进行体外清除自由基能力测试。

以vc为阳性对比，用分光光度法，从清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧自由基三个方面对比，了解苦瓜皂苷清除自由基能力大小。

从而推测其抗氧化，抗衰老的能力，为苦瓜皂苷作为抗氧化保健食品的开发提供理论依据。

3实验原理3.1 苦瓜皂苷的提取苦瓜中除了含有碳水化合物、蛋白质、脂类、水、矿物质、维生素外，其中蛋白质和脂类含量较高。

还有特殊的化学成分，如苦瓜素、苦瓜抑制剂、苦瓜皂苷等。

用石油乙醚能有效地除去苦瓜中的蛋白质和脂类，剩下的基本是皂苷。

提取过程中，用70%乙醇提取时总皂苷的含量最高，乙醇浓度70%是提取效果最佳点。

浸提时，皂苷能最大限度地溶于70%乙醇。

苦瓜总黄酮的超声波提取工艺研究
庞红;文略;王小萍;李琳;黄锁义
【期刊名称】《微量元素与健康研究》
【年(卷),期】2007(24)6
【摘要】目的:为充分利用苦瓜植物资源,避免资源的浪费,探讨苦瓜总黄酮的提取及鉴别方法。

方法:采用超声波乙醇浸提法从苦瓜中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用紫外分光光度法测定含量。

结果:测得样品中总黄酮的含量C=6.72%,回收率为101.0%,其纯度和产率均较高。

结论:该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取苦瓜黄酮类物质的有效途径。

【总页数】2页(P49-50)
【关键词】超声波提取;苦瓜;总黄酮;鉴别
【作者】庞红;文略;王小萍;李琳;黄锁义
【作者单位】广西药科学校;右江民族医学院化学教研室;南华大学医学院
【正文语种】中文
【中图分类】O624.421;O6-33
【相关文献】
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3.微波提取苦瓜总黄酮的工艺研究 [J], 刘亚娟;范文昌
4.超声波提取苦瓜总黄酮及鉴别 [J], 黄锁义;文略;王小萍;李容
5.超声波辅助提取福建山苦瓜总黄酮工艺研究 [J], 谢勇武;谭属琼;郭建清
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苦瓜多糖超声波提取与抑菌活性的研究
张文波;韦文龙;李宏睿
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2011(22)7
【摘要】目的探讨苦瓜多糖的抑菌作用。

方法使用超声波法提取苦瓜多糖。

利用滤纸片扩散法测定不同质量分数、不同pH值的苦瓜多糖对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、米曲霉的抑菌圈直径。

结果苦瓜多糖的浓度与其抑菌效果呈正相关。

溶液pH值对于苦瓜多糖的抑菌活性影响显著。

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、米曲霉的MIC各不相同。

结论苦瓜多糖具有抑菌活性。

【总页数】2页(P1676-1677)
【关键词】苦瓜多糖;抑菌活性;滤纸片扩散法;最小抑菌浓度
【作者】张文波;韦文龙;李宏睿
【作者单位】江西农业大学动物科学技术学院;江西农业大学食品科学与工程学院【正文语种】中文
【中图分类】R284.2;R285.5
【相关文献】
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3.大叶千斤拔多糖的超声波提取工艺及其抗氧化抑菌活性研究 [J], 莫晓宁; 梁莹; 蔡锦源; 黄泽强; 李艾; 孙松; 熊建文; 韦坤华
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1. 原料处理，将苦瓜果实洗净、去籽切片。