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《酸枣仁皂苷的提取转化及其抗氧化活性研究》篇一一、引言随着人们生活质量的提高，健康饮食与自然植物萃取的保健品受到广泛关注。
酸枣仁皂苷作为植物酸枣仁中具有生物活性的成分，具有独特的药理作用。
本篇论文主要研究酸枣仁皂苷的提取、转化工艺以及其抗氧化活性，旨在为相关产业提供理论基础与技术支持。
二、酸枣仁皂苷的提取酸枣仁皂苷的提取主要采用溶剂提取法。
首先，选取优质的酸枣仁作为原料，然后采用适当的溶剂（如乙醇、水）进行浸泡、搅拌和过滤。
在过滤后的滤液中，通过浓缩、干燥等步骤得到酸枣仁皂苷的粗品。
接着，通过柱层析、高效液相色谱等方法进一步纯化得到纯度较高的酸枣仁皂苷。
三、酸枣仁皂苷的转化酸枣仁皂苷的转化主要通过生物转化法实现。
采用适当的微生物（如酵母、霉菌）在适宜的条件下对酸枣仁皂苷进行发酵，通过微生物的代谢作用，将酸枣仁皂苷转化为其他具有生物活性的化合物。
此外，还可以通过化学方法对酸枣仁皂苷进行结构改造，得到具有更高生物活性的化合物。
四、抗氧化活性研究酸枣仁皂苷的抗氧化活性主要通过体外实验和体内实验进行研究。
在体外实验中，采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法等检测方法对酸枣仁皂苷的抗氧化能力进行测定。
实验结果表明，酸枣仁皂苷具有良好的抗氧化能力。
在体内实验中，通过对动物模型进行喂养，测定动物体内抗氧化酶活性、脂质过氧化程度等指标，进一步验证酸枣仁皂苷的抗氧化效果。
五、结论本篇论文通过研究酸枣仁皂苷的提取、转化工艺以及其抗氧化活性，得出以下结论：1. 酸枣仁皂苷的提取工艺简单可行，纯化后的酸枣仁皂苷纯度较高。
2. 酸枣仁皂苷经过生物转化或化学结构改造后，可以转化为具有更高生物活性的化合物。
3. 酸枣仁皂苷具有良好的抗氧化能力，可以通过体外和体内实验进行验证。
4. 酸枣仁皂苷的抗氧化活性为其在保健品、药品等领域的应用提供了理论依据。
六、展望未来研究可以进一步探讨酸枣仁皂苷的转化机制，优化提取和转化工艺，提高酸枣仁皂苷的纯度和生物活性。
２００９年１月第１１卷第１期中国现代中药ＭｏｄｅｍＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＪａｎ．２００９Ｖ０１．１１Ｎｏ．１综述苦瓜抗肿瘤研究进展张瑜１，崔炯谟１，赵余庆２‘（１．延边大学药学院，吉林延吉１３３０００；２．沈阳药科大学，辽宁沈阳１１００１６）［摘要］对苦瓜中含有多种天然的抗肿瘤活性成分研究进行综述，为其进一步研究利用提供依据。
【关键词］苦瓜；抗肿瘤；活性成分苦瓜ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ是葫芦科Ｃｕｒｃｕｂｉｔａ一倪钾苦瓜属Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ植物苦瓜的果实，别名凉瓜、锦荔枝、癞瓜，味苦性寒，归心、脾、胃三经。
原产于亚洲南部热带地区，南宋时传人我国。
《本草纲目》中记载：苦瓜“苦寒、无毒、除邪热、解劳乏、清心明目、益气壮阳。
”苦瓜的根、茎、叶、花、果实及种子皆可供药用，素有“药用蔬菜”之称，为药食同源品。
大量试验研究表明，苦瓜含有多种化学成分，具有降血糖和抗肿瘤等多种药理作用¨制。
苦瓜提取物的抗肿瘤作用，越来越受到人们的重视＂１。
近年来的药理研究表明，苦瓜中含有多种天然的抗肿瘤活性成分。
本文对此方面研究报道进行综述，为其进一步研究利用提供依据。
１苦瓜的抗肿瘤活性成分１．１蛋白质类目前，对于苦瓜的抗肿瘤活性报道最多的为苦瓜中的蛋白质类成分，据报道这类成分有很强的抗肿瘤活性。
１．１．１ａ一苦瓜素和ＪＢ．苦瓜素口・苦瓜素（ａ—Ｍｏｍｏｒｃｈａ—ｒｉｎ）和芦．苦瓜素（ＪＢ—Ｍｏｍｏｒｃｈａｒｉｎ）都是单链糖蛋白，相对分子质量分别为２９００和２８００，含糖量分别为１．６％和１．３％，齐文波等【７１在前人的基础上优化工艺，提高了得率和比活性，将苦瓜脱脂种仁粉经过一系列前处理，处理后的样品经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ和酸化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ柱层析除去苦瓜凝集素，洗脱液为ＰＢＳ（５ｍｍｏｌ・ＬｊｌｐＨ＝７．２），再将含有苦瓜素的洗脱液上ＣＭ－２３层析柱，以５ｍｍｏｌ・Ｌ～ｐＨ＝６．４的ＰＢＳ液洗除杂蛋白峰后，改用含０～０．３ｍｍｏｌ－Ｌ叫ＮａＣＩ的同种缓冲液梯度洗脱，分别收集图中的两峰，再将两部分收集液经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱（５ｍｍｏｌ・Ｌ～ｐＨ＝７．２ＰＢＳ液洗脱）层析２次，收集洗脱峰部分液体，透析、浓缩、冻干后得到ａ一苦瓜素和口・苦瓜素。
降血糖活性成分苦瓜皂苷的纯化工艺研究
张柏瑀n;关健;赵余庆
【期刊名称】《中国现代中药》
【年(卷),期】2008(010)005
【摘要】目的:研究苦瓜中降糖活性成分皂苷的纯化工艺.方法:以苦瓜苷计的总皂苷含量为指标,用正交试验和单因素试验等方法考查各工艺步骤的影响因素.结果:苦瓜的乙醇提取物经D-101大孔吸附树脂富集纯化后皂苷含量可达35%以上.结论:本纯化工艺可为苦瓜皂苷的工业化制备提供参考.
【总页数】3页(P18-20)
【作者】张柏瑀n;关健;赵余庆
【作者单位】辽宁中医药大学,辽宁,沈阳,110032;辽宁中医药大学,辽宁,沈
阳,110032;沈阳药科大学,辽宁,沈阳,110016
【正文语种】中文
【中图分类】TQ46
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5.苦瓜降血糖活性成分提取与评价方法研究进展 [J], 于斌;葛邦国;和法涛;吴茂玉;刘光鹏
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《苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮提取物降糖降脂功效及联合作用研究》一、引言近年来，随着人们生活方式的改变和人口老龄化的加剧，糖尿病等慢性疾病的发病率日益增加，而高血糖和高血脂是其重要的病因之一。
针对此情况，大量的天然植物提取物被研究并证实具有降糖降脂的功效。
本文将针对苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮这三种植物提取物进行深入的研究，并探讨其联合作用的效果。
二、苦瓜皂苷的降糖降脂功效苦瓜皂苷是从苦瓜中提取的一种天然活性成分，其降糖降脂的效果已经在许多研究中得到证实。
其降糖机制主要在于提高胰岛素的敏感性，促进胰岛素的分泌，从而降低血糖。
同时，苦瓜皂苷还可以通过调节脂质代谢，降低血清中的胆固醇和甘油三酯水平，达到降脂的效果。
三、南瓜多糖的降糖降脂作用南瓜多糖是从南瓜中提取的一种天然多糖，具有显著的降糖和降脂作用。
南瓜多糖可以显著降低血糖水平，其机制主要是通过促进胰岛素的分泌和改善胰岛素的敏感性来实现。
此外，南瓜多糖还可以通过调节肠道菌群，提高肠道对营养物质的吸收能力，从而降低血脂水平。
四、苦荞黄酮的降糖降脂效果苦荞黄酮是苦荞麦中的一种黄酮类化合物，具有显著的降糖和降脂作用。
苦荞黄酮可以显著降低血糖和血脂水平，其机制主要是通过增强胰岛素的敏感性，抑制糖异生，改善糖代谢和脂质代谢等途径来实现。
五、联合作用研究除了单独的降糖降脂效果外，我们还研究了苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮的联合作用。
实验结果显示，这三种植物提取物的联合使用可以显著提高降糖降脂的效果。
这可能是由于它们在作用机制上存在互补性，能够共同调节血糖和血脂水平，从而达到更好的治疗效果。
六、结论本文通过实验研究证实了苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单独及联合使用均具有显著的降糖降脂效果。
这三种植物提取物在作用机制上存在互补性，联合使用可以进一步提高治疗效果。
因此，我们可以将这三种植物提取物作为开发新型天然药物的重要候选成分，为治疗糖尿病等慢性疾病提供新的方法和途径。
一、实验目的1. 学习皂苷的提取方法。
2. 掌握皂苷的检测方法。
3. 了解皂苷在中药中的应用。
二、实验原理皂苷是一类具有表面活性作用的天然化合物，广泛存在于植物中，具有多种生物活性。
本实验采用溶剂提取法提取皂苷，利用皂苷的溶解性差异，通过溶剂萃取、酸碱沉淀等方法提取皂苷。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：干燥的植物药材（如甘草、人参等）。
2. 仪器：超声波清洗器、电热恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、电子天平、酸碱滴定仪等。
四、实验步骤1. 称取干燥的植物药材5g，加入50mL的70%乙醇溶液，超声提取30分钟。
2. 将提取液离心（3000r/min，10分钟），取上清液。
3. 将上清液用旋转蒸发仪浓缩至近干，加入5mL蒸馏水溶解。
4. 将溶液调至pH=7，加入等体积的氯仿，振荡提取，分层。
5. 将氯仿层转移至另一容器中，加入5mL的0.5mol/L的氢氧化钠溶液，振荡提取，分层。
6. 将氢氧化钠层转移至另一容器中，用酸碱滴定仪滴定至pH=7，加入等体积的氯仿，振荡提取，分层。
7. 将氯仿层转移至另一容器中，用旋转蒸发仪浓缩至干，得到皂苷粗品。
8. 将皂苷粗品用95%乙醇溶解，进行薄层色谱（TLC）检测，根据比移值（Rf值）判断皂苷的纯度。
五、实验结果与分析1. 皂苷提取率：通过计算实验所得皂苷粗品的质量与原药材质量的比值，得到皂苷提取率为10%。
2. 皂苷纯度：通过TLC检测，根据比移值（Rf值）判断皂苷的纯度，实验所得皂苷纯度为80%。
六、实验讨论1. 在提取过程中，采用70%乙醇溶液作为溶剂，有利于皂苷的提取。
2. 超声波提取法可以显著提高提取效率，缩短提取时间。
3. 通过酸碱沉淀法可以去除杂质，提高皂苷的纯度。
4. 实验结果表明，皂苷在植物药材中具有较好的提取率和纯度。
七、结论本实验通过溶剂提取法成功提取了植物药材中的皂苷，并对其纯度进行了检测。
实验结果表明，该方法操作简便、提取效率高，为皂苷的提取和应用提供了有益的参考。
新疆农业大学专业文献综述题目: 苦瓜中黄酮的研究进展姓名: 阿曼古丽.苏丽坦学院: 化学工程学院专业: 应用化学班级: 071班学号: 075131121成绩：指导教师: 阿不都拉职称: 副教授2011年12月20日新疆农业大学教务处制苦瓜中总黄酮的研究作者：阿曼古丽.苏力坦指导老师：阿不都拉摘要：苦瓜属葫芦科植物, 是人们生活中的一种常用蔬菜。
苦瓜生长在热带，苦瓜味苦性寒,没有毒性，具有清热解毒, 滋养强壮等功效。
苦瓜中活性成分很多，苦瓜活性成分主要有黄酮。
黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素、花色素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。
【2】黄酮可以改善血液循环，可以降低胆固醇，向天果中的黄酮还含有一种PAF抗凝因子，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，也可改善心脑血管疾病的症状。
总黄酮的提取方法与测定方法主要有高效液相色谱法，超声波提取法，超临界流体萃取法，分光光度法，毛细管电泳法等。
我主要用了超声波提取，紫外分光光度法测定总黄酮含量。
关键词：苦瓜，黄酮，紫外可见分光光度法，超声波提取。
前言：苦瓜属葫芦科植物, 是人们生活中的一种常用蔬菜。
苦瓜味苦性寒,无毒, 其根、茎、叶、花、果实和种子在世界各地均有药用记载。
像所有的天然产物一样苦瓜成分也很复杂,含有黄酮，三菇，生物碱、蛋白、有机酸及多糖类等多种化学成分，其中苦瓜中的活性成分种类繁多它所表现出的各种生理活性是多种活性物质共同作用的结果；黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定形粉末。
游离的各种苷元母核中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，其余则无光学活性。
黄酮在以前主要是指基本母核为2-苯基色原酮的化合物，现在则是泛指两个具有酚羟基中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。
黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。
苦瓜提取物安全性试验研究【摘要】目的进行苦瓜提取物安全性毒理学试验研究。
方法采用限量法的雌、雄性大鼠急性经口毒性试验，遗传毒性试验（细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞染色体畸变试验），90天经口毒性试验，致畸试验。
结果在本试验条件下，苦瓜提取物雌、雄性大鼠急性经口毒性试验的LD50大于20.0g/kg.bw，根据急性毒性剂量分级标准，该样品属实际无毒级；细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞染色体畸变试验结果均为阴性；苦瓜提取物以0.75g/kg.bw、1.50g/kg.bw、2.25g/kg.bw的剂量经口给予大鼠90天，受试动物一般情况良好，体重、食物利用率、脏器重量、脏器系数均无异常改变；眼部检查未发现异常变化；尿液指标、血液学指标及生化指标结果显示，各项指标均在正常范围内；各脏器病理组织学检查均未见与受试样品有关的病理改变。
苦瓜提取物对大鼠未见母体毒性、胚胎毒性和致畸性。
结论苦瓜提取物长期食用是安全的。
【关键词】苦瓜提取物；安全性苦瓜（学名：Momordica charantia），又名凉瓜、癞瓜、半生瓜，起源于东印度，是一种葫芦科植物，广泛栽培于热带、亚热带、温带等地区，品种繁多。
苦瓜的果肉、种子、茎叶等部位均被认为具有潜在的应用价值。
苦瓜传统的营养价值包括：清热解毒、降血糖、养颜嫩肤、养血滋肝等；药用价值包括清热解毒，明目等；食用价值包括作为蔬菜食用、苦瓜保健饮料、茶饮品等。
历年来，苦瓜被作为一种药食两用植物，富含多糖、多肽、多酚、皂苷及多种生物活性成分。
近几十年来，科学家们致力于研究苦瓜调脂降糖、抗氧化、抗炎、免疫调节、保护肝和神经组织等生理功能[1]。
1试验材料1.1试验药物苦瓜提取物，苦瓜经10倍量65%乙醇回流提取2次，每次2h，过滤、合并滤液、浓缩、喷雾干燥得苦瓜提取物，得率约8%，人体推荐剂量0.45g/人/d。
1.2实验动物SPF级昆明种小鼠，体重25～35g，SPF级健康离乳SD大鼠，体重180～220g，雌雄各半。
苦瓜多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性作者：马景蕃江烨等来源：《湖北农业科学》2012年第24期摘要：采用水提醇沉法提取苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）中的多糖，在单因素试验的基础上设计正交试验考察提取过程中提取温度、提取时间、料水质量比和Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇对多糖提取率的影响，并对所提取苦瓜多糖的抗氧化活性进行了检测。
结果表明，最佳提取工艺为提取温度９０℃、提取时间２ｈ、料水质量比１∶３５、Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇＝１∶４.0。
苦瓜多糖对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（ＤＰＰＨ·）和超氧阴离子自由基（Ｏ２－·）有较好的清除作用，在试验范围内清除率随苦瓜多糖用量的增加而升高。
关键词：苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）多糖；水提醇沉法；优化；抗氧化中图分类号：Ｓ６４２．５；Ｒ２８４．２；Ｏ６２９．１２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）24－5761-03苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）属葫芦科植物，是一种常用蔬菜。
对于苦瓜属植物的药用价值人们早有认识，在民间被广为应用［１］。
现代医学研究证实苦瓜具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血糖等作用。
多糖作为苦瓜的有效成分之一几乎无毒副作用，在治疗肿瘤、免疫力低下、高血糖、衰老、病毒性疾病等方面疗效独特［２］。
本试验采用水提醇沉法从苦瓜中提取粗多糖，考察乙醇添加量、提取温度、提取时间和料水质量比对其提取率的影响，优化提取工艺。
并对苦瓜多糖的抗氧化性能进行分析，为其开发利用提供参考依据。
１材料与方法１．１材料新鲜苦瓜购自当地市场，将鲜苦瓜洗净去内瓤，切成薄片。
置于电热恒温鼓风干燥箱中６０℃烘干至恒重，干燥的苦瓜经粉碎后过４０目筛，得到黄绿色苦瓜粉。
所用化学试剂均为分析纯。
ＦＺ１０２微型植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；ＤＨＧ－９４１５Ａ电热恒温鼓风干燥箱，上海一恒科技有限公司；ＨＨ－４数显恒温水浴锅，金坛市科析仪器有限公司；ＳＨＢ－３循环水多用真空泵，郑州杜甫仪器厂；ＲＥ－３０００旋转蒸发仪、ＴＤ５Ａ台式低速离心机、ＡＬ２０４电子天平，海南凯达科学仪器有限公司。
堡 忘 苦瓜皂苷的制备及体外抗氧化活性研究 王步江 ，王瑞 ，张平平 ，刘金福 （１．天津农学院食品科学系，天津３００３８４；２．天津农学院农业分析实验室，天津３００３８４） 摘 要：为优化苦瓜中皂苷的提取条件及其抗氧化活性，以皂苷得率为考察指标，研究了提取温度、时 间、乙醇浓度和料液比对苦瓜皂苷提取的影响，并采用正交试验确定最佳条件；以苦瓜皂苷对超氧自由基、 羟基自由基的清除率作为考查指标，研究苦瓜皂苷的体外抗氧化活性。确定了最佳提取工艺条件为：最佳提 取乙醇浓度为７０％，料液比为ｌ：１５，温度５５℃，提取时间２．５ｈ。０．４ｍｇ／ｍＬ苦瓜皂苷对超氧自由基的清除 率达到９２．５％，对羟基自由基（・ＯＨ）的清除率达到７８．９％ 关键词：苦瓜；皂苷；抗氧化；制备 中图分类号：Ｔｓ２０２．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—２５１３（２０１１）０３—０１５３一Ｏ５
Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒＯｍ ｂｉｔｔｅｒ ｍｅｌｏｎ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ＷＡＮＧ Ｂｕ－ｊｉａｎｇ ，ＷＡＮＧ Ｒｕｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｐｉｎｇ－ｐｉｎｇ ，ＬＩＵ Ｊｉｎ—ｆｕ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３８４； ２．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ａｎａｌｙｚｉｎｇ Ｌａｂ ｏｆ Ｔｉａｎｊｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３８４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ ｂｉｔｔｅｒ ｍｅｌｏｎ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｓａｐｏ— ｎｉｎｓ，ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ａｆｔ ｉｎｄｅｘ，ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｔｉｍｅ， ｍｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｂｉｔｔｅｒ ｍｅｌｏｎ ｐｏｗｄｅｒ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ，ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ０ ・ａｎｄ—ＯＨ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：ｍｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ７０％，ｌｉｑｕｉｄ—ｍａｔｅｒｉａｌ ｒａｔｉｏ １：１５，ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ５５℃，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ２ｈ．Ｔｈｅ ０．４ｍｇ／ｍＬ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ Ｏ ａｎｄ・ＯＨ，ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｔｅｓ ｗｅｒｅ ９２．５％ａｎｄ ７８．９％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｂｉｔｔｅｒ ｍｅｌｏｎ；ｓａｐｏｎｉｎｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ；ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ
近年来，活性氧和自由基研究成为现代生命 科学的热点，评价和筛选具有强抗氧化活性的天 然资源已成为食品科学、生物学和医学研究的新 趋势。苦瓜为葫芦科植物，是一种常见蔬菜，中 医认为它性味苦寒，具有清凉解热的作用。现代 医学研究发现，苦瓜中含有的苦瓜皂苷具有降血 糖、抗氧化、提高免疫能力、降低胆固醇等生理 功能…。除用作药物外，皂苷还可以食品添加 剂，如作为抗氧化剂、杀菌剂等在食品工业中具 有广泛的应用。从苦瓜粉中提取抗氧化物质属于 固液浸提单元操作，该过程受到温度、时间、溶 剂和料液比等多种因素的影响，优化最佳的因素
收稿日期：２０１１—０５—１５ 通讯作者 基金项目：天津市科技支撑计划重点项目（０８ＺＣＫＦＮＣ００４００）。 作者简介：王步江（１９７８一）男，讲师，硕士，研究方向为农产品深加．［及食品生物技术。 与水平是提高苦瓜皂苷提取率的基础 。因此， 开展对苦瓜皂苷提取工艺的研究具有十分重要的 现实意义。本文分别以乙醇为溶剂采用不同提取 方法对苦瓜皂苷进行提取，以皂苷含量为考察指 标，确定了苦瓜皂苷最佳提取工艺条件并通过树 脂吸附、解吸纯化，获得纯度较高的苦瓜皂苷， 并对苦瓜皂苷的体外抗氧化活性进行初步研究。
１材料与方法 １．１试验材料 人参皂苷Ｒｇｌ标准品上海卓康生物科技有限 公司；ＡＢ一８大孔树脂南开大学；香草醛；乙 醇、冰乙酸、高氯酸、甲醇、石油醚、香草醛等 均为分析纯 １．２仪器 ７２３型可见分光光度计，上海光谱仪器有限 公司生产；ＤＺＦ一６２１０型真空干燥箱，上海精宏 实验设备有限公司生产。 １．３试验方法 １．３．１苦瓜皂苷的提取工艺 鲜苦瓜一洗净一切片一干燥一粉碎一苦瓜干 粉一乙醇浸提一过滤一蒸馏去乙醇一浸膏溶于一 定去离子水中（石油醚脱脂）一上ＡＢ一８树脂吸 附一水洗除糖－－＊８０％乙醇洗脱一减压浓缩除去乙 醇一冷冻干燥一苦瓜总皂苷…。 １．３．２苦瓜皂苷提取条件的优化 在单因素试验结果的基础上，选择浸提温 度、时间、乙醇浓度、固液比四个因素，以苦瓜 干粉为原料，采用大孔树脂纯化和真空干燥的方 法制备苦瓜皂苷，三个水平进行Ｌ。（３） 正交实 验，以苦瓜皂苷得率为指标。正交实验设计方案 见表１。 表１实验因素水平 Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ Ｏｉｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓａｐｏｒｄｎｓ
１．３．３苦瓜皂苷的制备 在室温下，上样液ｐＨ为６～７，皂苷浓度在 １５ｍｇ／ｍＬ左右，过柱流速为２．５ｍｌＭｍｉｎ。在此条 件下吸附达到饱和时，用６倍柱床体积的８０％的 乙醇溶剂可将其基本完全洗脱下来，所得产品冷 冻干燥 。 １．３．４苦瓜皂苷含量的测定 采用香草醛一高氯酸法测定苦瓜总皂苷含 量。 苦瓜皂苷的测定以人参皂苷Ｒｇｌ为标准品， 加５％的香草醛一冰乙酸溶液０．２ｍＬ和０．８ｍＬ高 氯酸为显色反应，做标准曲线，在波长４６８ｎｍ下 测吸光度，绘制标准曲线，得曲线方程：Ｙ＝ ０．１６０７ｘ一０．００２６，Ｒ ＝０．９９８８，将苦瓜粗提液浓 缩除醇后，吸取一定量的浓缩液，同上述绘制标 准曲线的方法显色后，在波长４６８ｎｍ处测定吸光 值，根据标准曲线计算其总皂苷的量 Ｊ。 皂苷含量的计算： 总皂苷（ｍｇ／ｇ）：测得苦瓜皂苷含量／所用 脱脂苦瓜粉量 １．３．５抗氧化活性的测定 １）用邻苯三酚法测定对超氧自由基的清 除 ’ 称取苦瓜皂苷粉０．５０００ｇ用浓度为０．０５ｍｏｌ／ ｌ，ｐＨ为８．０的磷酸二氢钾一氢氧化钠缓冲溶液 配制成浓度为０．２ｍｇ／ｍＬ的溶液；取出５ｍＬ及 ５ｍＬ缓冲溶液加入５０ｍＬ容量瓶中，在４５℃恒温 水浴放置２０ｍｉｎ；加入１ｍＬ ２５￣Ｃ预热浓度为 ４５ｍｍｏｌ／Ｌ的邻苯三酚溶液迅速混匀；在４２０ｎｍ 处于５ｍｉｎ内每隔３０ｓ测溶液的吸光度。 其中：空白溶液为阴性对照实验，抗坏血酸 溶液为阳性对照实验。 抑制率计算公式： 其对超氧阴离子抑制率按以下公式计算： Ｒ＝［（Ｖ０一Ｖ１）／ｖ０］×１００％ 式中：Ｒ一对超氧阴离子的抑制率，％；Ｖ。一 邻苯三酚自氧化速率，１／ｍｉｎ；Ｖ 一样品中邻苯 三酚自氧化速率，１／ｍｉｎ。 ２）用Ｓｍｉｒｎｏｆｆ改进法测定对羟基自由基的清 除 一 ］ 在１０ｍＬ比色管中依次加入７．５ｍｍｏｌ／ｍＬ硫 酸亚铁铵ｌｍＬ，７．５ｍｍｏｌ／ｍＬ水杨酸１ｍＬ，０．１％ Ｈ ０ １ｍＬ，ｔｒｉｓ—ＨＣ１缓冲液２ｍＬ，最后分别加入 一定浓度的样品１ｍＬ，室温静置２ｈ，在５１０ｎｍ处 测其吸光值。 抑制率计算公式： 抑带０率＝（Ａ对照一Ａ样品）／Ａ对照×１００％ 式中：Ａ ——空白溶液反应后的吸光度； Ａ样品——被测液的反应后的吸光度。
２结果与分析 ２．１单因素试验 ２．１．１温度对苦瓜皂苷提取的影响 称量一定的苦瓜粉，按照相同的固液比，分 别在３０、３５、４０、４５、５Ｏ、５５、６ＯｑＣ下，提取 ４０ｍｉｎ，温度对苦瓜皂苷提取率的影响，结果见图 ３。
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温度（℃） 图１温度对苦瓜皂苷得率的影响 Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ
由图１可知，随着温度的升高皂苷含量增大， 达到５０℃如继续升高温度，含量呈下降趋势。原 因可能是温度升高增大了皂苷在乙醇中的溶解 度，溶液的粘度减少，物质扩散系数提高，促使 提取速率加快，从而提高了皂苷的含量；但温度 过高，活性成分易破坏，同时杂质量增加，给后 续纯化带来不便，成本费用增大。因此提取温度 以４５℃为宜。 ２．１．２时间对苦瓜皂苷提取的影响 称量一定的苦瓜粉，按照相同的固液比，在 温度为４５℃下超声提取，乙醇浓度为８０％下提取 皂苷，提取时间分别为３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ、 １２０ｍｉｎ、１５０ｍｉｎ、１８０ｍｉｎ，对提取率的影响结果 见图２。
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３０ ６Ｏ ９０ ｌ２Ｏ １５０ ｌ８Ｏ 提取时间（ｍｉｎ）
图２ 时间对苦瓜皂苷得率的影响 Ｆｉｇ．２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ
由图２可以看出时间在１２０ｍｉｎ内，皂苷的量 随时间的延长而增大，超过１２０ｍｉｎ后变化趋势不 明显。在１２０ｍｉｎ内，随超时间的延长，物质扩散 越来越完全，因而皂苷含量也随之增大；如继续 延长提取时间会导致细胞内大量不溶物等混入提 取液中，使溶液中杂质增多，影响后续的操作。 因此，提取时问１２０ｍｉｎ为提取效果最佳点。 ２．１．３ 乙醇浓度对苦瓜皂苷提取的影响 称量一定的苦瓜粉，按照相同的固液比，在 温度为５０℃下提取４０ｍｉｎ，并测定不同乙醇浓度 ６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％下虎刺中 皂苷的提取率，结果如图３所示。
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乙醇体积分数（％） 图３ 乙醇浓度比对苦瓜皂苷得率的影响 Ｆｉｇ．３ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ
以料液比１：２０（Ｗ：ｖ），６０￣Ｃ下，分别用不 同浓度乙醇溶液浸提２次，每次２ｈ，测提取液中 黄酮类化合物含量，结果见图３。当乙醇浓度为 ６０％时，提取率最高。根据相似相溶原理，此浓
