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乙醇法提取苦瓜皂苷工艺择优研究张宏梅;李晓光【摘要】目的：采用正交实验法优化苦瓜中皂苷的提取工艺。
方法以乙醇为提取溶剂，采用乙醇回流提取法，对苦瓜中的皂苷进行提取，通过正交实验，对提取温度、乙醇浓度、提取时间、料液比、提取次数5个因素进行了考察探索出提取苦瓜皂苷的最佳工艺条件。
结果苦瓜皂苷的最佳提取条件为：乙醇浓度75％，提取温度70℃，料液比1∶30，提取时间2．5 h，提取次数2次，皂苷平均得率为0．65％。
结论提取工艺稳定、可行、有较高的提取率，并为苦瓜皂苷的进一步的深入研究奠定了一定基础。
%Objective To optimize the extraction process of the saponin from balsam pear by orthogonal design . Methods In orthogonal experiment ,ethanol concentration ,extractiontemperature ,extraction time and solid-liquid ra-tio and extraction times five factors were investigated .Results The optimum extraction conditions of balsam pear saponin was:75%ethanol,temperature 70 ℃,material ratio 1∶30,times of extraction 2.5 h,times of extraction 2. Averag e content of saponin was 0.65%.Conclusion The method is simple,convenient,easily and suitable for the determination of the saponin from balsam pear .【期刊名称】《吉林医药学院学报》【年(卷),期】2016(037)006【总页数】3页(P433-435)【关键词】苦瓜;皂苷;回流提取【作者】张宏梅;李晓光【作者单位】吉林医药学院药学院，吉林吉林 132013;吉林医药学院药学院，吉林吉林 132013【正文语种】中文【中图分类】R286.0苦瓜又名凉瓜，最早记载始于明代《滇南本草》,为葫芦科苦瓜属一年生攀缘草本植物的果实，原产于热带、亚热带地区。
《苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮提取物降糖降脂功效及联合作用研究》一、引言近年来，随着人们生活方式的改变和人口老龄化的加剧，糖尿病等慢性疾病的发病率日益增加，而高血糖和高血脂是其重要的病因之一。
针对此情况，大量的天然植物提取物被研究并证实具有降糖降脂的功效。
本文将针对苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮这三种植物提取物进行深入的研究，并探讨其联合作用的效果。
二、苦瓜皂苷的降糖降脂功效苦瓜皂苷是从苦瓜中提取的一种天然活性成分，其降糖降脂的效果已经在许多研究中得到证实。
其降糖机制主要在于提高胰岛素的敏感性，促进胰岛素的分泌，从而降低血糖。
同时，苦瓜皂苷还可以通过调节脂质代谢，降低血清中的胆固醇和甘油三酯水平，达到降脂的效果。
三、南瓜多糖的降糖降脂作用南瓜多糖是从南瓜中提取的一种天然多糖，具有显著的降糖和降脂作用。
南瓜多糖可以显著降低血糖水平，其机制主要是通过促进胰岛素的分泌和改善胰岛素的敏感性来实现。
此外，南瓜多糖还可以通过调节肠道菌群，提高肠道对营养物质的吸收能力，从而降低血脂水平。
四、苦荞黄酮的降糖降脂效果苦荞黄酮是苦荞麦中的一种黄酮类化合物，具有显著的降糖和降脂作用。
苦荞黄酮可以显著降低血糖和血脂水平，其机制主要是通过增强胰岛素的敏感性，抑制糖异生，改善糖代谢和脂质代谢等途径来实现。
五、联合作用研究除了单独的降糖降脂效果外，我们还研究了苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮的联合作用。
实验结果显示，这三种植物提取物的联合使用可以显著提高降糖降脂的效果。
这可能是由于它们在作用机制上存在互补性，能够共同调节血糖和血脂水平，从而达到更好的治疗效果。
六、结论本文通过实验研究证实了苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单独及联合使用均具有显著的降糖降脂效果。
这三种植物提取物在作用机制上存在互补性，联合使用可以进一步提高治疗效果。
因此，我们可以将这三种植物提取物作为开发新型天然药物的重要候选成分，为治疗糖尿病等慢性疾病提供新的方法和途径。
苦瓜皂苷的提取和体外清除自由基活性的研究09级临床病理卢军（113200*********）郑明星（113200*********）张良（113200*********）赖兆泳（113200*********）摘要苦瓜皂苷是苦瓜的主要有效活性物质之一，本实验用有机溶剂萃取法提取苦瓜皂苷。
同时检索资料发现对苦瓜皂苷抗氧化能力的研究较少，本实验以Vc做阳性对照，通过检测苦瓜皂苷体外清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子的能力探讨其抗氧化的能力关键词：苦瓜皂苷清除自由基抗氧化1 前言苦瓜为葫芦科苦瓜属一年生蔓性草本植物, 又名凉瓜、癫瓜、癫葡萄、锦荔枝等, 药食兼用, 性味苦寒, 无毒, 除邪热, 解劳乏, 清心名目【1】。
苦瓜皂苷是苦瓜中有效成分之一，有抗氧化能力。
实验结果表明【2】，苦瓜皂苷可显著增强超氧化物歧化酶( SOD) , 谷胱甘肽过氧化物酶( GSH- Px) 活力，由此可看出苦瓜皂苷有很强的抗氧化活性。
自由基理论是公认的抗氧化的理论，本实验通过研究苦瓜皂苷抗DPPH自由基，羟基自由基和超氧阴离子三个方面与Vc进行对比，了解其抗氧化能力，为苦瓜皂苷作为抗氧化保健食品的开发提供理论依据。
2实验目的通过乙醚提取法提取苦瓜有效抗氧化化学成分，同时进行体外清除自由基能力测试。
以vc为阳性对比，用分光光度法，从清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧自由基三个方面对比，了解苦瓜皂苷清除自由基能力大小。
从而推测其抗氧化，抗衰老的能力，为苦瓜皂苷作为抗氧化保健食品的开发提供理论依据。
3实验原理3.1 苦瓜皂苷的提取苦瓜中除了含有碳水化合物、蛋白质、脂类、水、矿物质、维生素外，其中蛋白质和脂类含量较高。
还有特殊的化学成分，如苦瓜素、苦瓜抑制剂、苦瓜皂苷等。
用石油乙醚能有效地除去苦瓜中的蛋白质和脂类，剩下的基本是皂苷。
提取过程中，用70%乙醇提取时总皂苷的含量最高，乙醇浓度70%是提取效果最佳点。
浸提时，皂苷能最大限度地溶于70%乙醇。
《苦瓜皂苷与南瓜多糖或苦荞黄酮提取物联合改善Ⅱ型糖尿病代谢紊乱的研究》一、引言糖尿病，作为一种常见的慢性代谢性疾病，已逐渐成为全球性健康问题。
在糖尿病类型中，II型糖尿病占据了主要地位。
随着生活方式的改变和饮食结构的调整，寻找有效的天然药物或食物成分以改善II型糖尿病的代谢紊乱显得尤为重要。
近年来，苦瓜皂苷、南瓜多糖以及苦荞黄酮等天然产物的提取物备受关注。
本文旨在探讨苦瓜皂苷与南瓜多糖或苦荞黄酮提取物联合使用对II型糖尿病代谢紊乱的改善作用。
二、材料与方法1. 材料（1）苦瓜皂苷：从苦瓜中提取的活性成分。
（2）南瓜多糖：从南瓜中提取的多糖类物质。
（3）苦荞黄酮：从苦荞中提取的黄酮类化合物。
（4）实验动物：选用II型糖尿病模型动物。
2. 方法（1）建立II型糖尿病动物模型。
（2）将实验动物随机分为对照组、苦瓜皂苷组、南瓜多糖组、苦荞黄酮组以及联合使用组。
（3）对各组动物进行不同时间点的血糖、血脂等指标的检测。
（4）分析各组间的数据差异，探讨联合使用的效果。
三、结果与分析1. 结果（1）单独使用苦瓜皂苷、南瓜多糖或苦荞黄酮，均能在一定程度上降低血糖和血脂水平，改善II型糖尿病的代谢紊乱。
（2）联合使用苦瓜皂苷与南瓜多糖或苦荞黄酮，效果更为显著，能够更有效地降低血糖和血脂水平。
（3）联合使用组在改善胰岛素抵抗、提高胰岛素敏感性方面也表现出较好的效果。
2. 分析（1）苦瓜皂苷具有降低血糖、调节血脂的作用，其机制可能与促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗有关。
（2）南瓜多糖具有增强免疫力、降低血糖的作用，其机制可能与促进胰岛素受体敏感性、减缓胃肠排空等有关。
（3）苦荞黄酮具有抗氧化、抗炎、降血糖等多种生物活性，能够改善胰岛功能，促进胰岛素分泌。
（4）联合使用苦瓜皂苷与南瓜多糖或苦荞黄酮，可以发挥各成分的协同作用，增强降血糖、降血脂的效果，改善II型糖尿病的代谢紊乱。
四、结论本研究表明，苦瓜皂苷与南瓜多糖或苦荞黄酮提取物联合使用，能够更有效地改善II型糖尿病的代谢紊乱，降低血糖和血脂水平，提高胰岛素敏感性。
西安双德生物技术有限公司Xi’an shuangde Biological Technology CO., LTD.主要成分：苦瓜甙，苦瓜素，苦瓜苷提取来源：为葫芦科植物苦瓜Momordica charantia L的果实。
外观：棕黄色精细粉末检测方法：uv 含量：苦瓜甙≥10% 10：1（%）应用剂型：胶囊片剂等临床应用：清热祛暑，明目解毒，利尿凉血，主治热病烦渴，中暑丹毒，目赤痈肿，痢疾，少尿等病症。
【中文名称】苦瓜甙，苦瓜提取物【英文名称】Charantin，Bitter Melon P.E【提取来源】为葫芦科植物苦瓜Momordica charantia L的果实。
【化学成分】苦瓜甙【规格含量】苦瓜甙≥10%（HPLC）10：1【产品性状】棕黄色精细粉末。
气微，味淡。
【物理性质】溶解度：溶于热水,乙醇和乙酸乙酯,稍溶于乙醚,难溶于苯和石油醚。
溶点：174℃【功能主治】清热祛暑，明目解毒，利尿凉血，主治热病烦渴，中暑丹毒，目赤痈肿，痢疾，少尿等病症。
【应用领域】食品添加剂，保健品，化妆品。
【包装说明】双层塑料袋外加纸板桶（25公斤/桶）【中文名称】苦瓜素，苦瓜提取物【英文名称】Charantin，Bitter Melon P.E【提取来源】为葫芦科植物苦瓜Momordica charantia L的果实。
【化学成分】苦瓜素【规格含量】苦瓜素≥10%（HPLC）【产品性状】白色晶体粉末。
气微，味淡。
【物理性质】溶解度：溶于热水,乙醇和乙酸乙酯,稍溶于乙醚,难溶于苯和石油醚。
溶点：174℃【功能主治】清热祛暑，明目解毒，利尿凉血，主治热病烦渴，中暑丹毒，目赤痈肿，痢疾，少尿等病症。
【应用领域】食品添加剂，保健品，化妆品。
【包装说明】双层塑料袋外加纸板桶（25公斤/桶）。
㊀基金项目:广西一流学科建设项目重点课题(Ｎｏ.２０１８ＸＫ０３０)ꎻ广西中医药大学青年创新研究团队项目(Ｎｏ.２２０１５ＱＴ００２)ꎻ广西中医药大学大学生创新创业训练计划项目(Ｎｏ.２２０１９１０６００１７３)㊀作者简介:王亚军ꎬ女ꎬ研究方向:药理学ꎬＥ－ｍａｉｌ:１０１７６９２１９０＠ｑｑ.ｃｏｍ㊀通信作者:李宇清ꎬ女ꎬ研究方向:药事管理研究ꎬＴｅｌ:１５９７７４７６６０９ꎬＥ－ｍａｉｌ:４５７６００＠ｑｑ.ｃｏｍ苦瓜皂苷的急性毒性及解热抗炎作用研究王亚军１ꎬ张文煊２ꎬ李宇清２(１.南阳市第一人民医院ꎬ河南南阳４７３００１ꎻ２.广西中医药大学ꎬ广西南宁５３０００１)摘要:目的㊀考察苦瓜皂苷的急性毒性及解热抗炎作用ꎮ方法㊀采用改良寇氏法测定苦瓜皂苷的半数致死量(ＬＤ５０)ꎮ利用皮下注射酵母悬液诱发大鼠的发热反应ꎬ考察一次性灌胃苦瓜皂苷对大鼠的退热作用ꎮ另采用二甲苯致耳肿胀实验及冰醋酸致腹腔毛细血管通透性亢进实验ꎬ综合考察苦瓜皂苷减轻急性炎症的作用ꎮ结果㊀苦瓜皂苷对小鼠的半数致死量为(２５.０２ʃ１.４１)ｇ ｋｇ－１ꎮ苦瓜皂苷０.１４４ｇ ｋｇ－１对酵母诱发的大鼠发热有较弱的退热作用ꎮ苦瓜皂苷０.０２８ｇ ｋｇ－１㊁０.０１４ｇ ｋｇ－１能显著抑制冰醋酸刺激引起的腹腔依文思兰渗出(Ｐ<０.０５)ꎬ降低腹腔毛细血管通透性ꎬ并且对二甲苯引起耳肿胀有缓解趋势ꎮ结论㊀苦瓜皂苷为实际无毒级ꎬ在规定剂量下服用是安全的ꎬ且在发热动物模型中表现出一定的退热效果ꎬ并能减轻动物的急性炎症反应ꎮ关键词:苦瓜皂苷ꎻ急性毒性ꎻ解热ꎻ耳肿胀ꎻ腹腔通透性中图分类号:Ｒ２８５.５㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２０)０３－０１３０－００４ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２０.０３.００２Ｓｔｕｄｙｏｎａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃａｎｄａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＷＡＮＧＹａｊｕｎ１ꎬＺＨＡＮＧＷｅｎｘｕａｎ２ꎬＬＩＹｕｑｉｎｇ２(１.ＴｈｅＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅᶄｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎｙａｎｇꎬＮａｎｙａｎｇ４７３００１ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＮａｎｎｉｎｇ５３０００１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃａｎｄａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｅｄｉａｎｌｅｔｈａｌｄｏｓｅ(ＬＤ５０)ｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａ￣ｒａｎｔｉａｂｙｍｏｄｉｆｉｅｄＫｏｃｈｍｅｔｈｏｄ.Ｈｙｐｏｄｅｒｍｉｃｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆｙｅａｓｔｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｎｄｕｃｅｔｈｅｆｅｂｒｉｌｅｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｒａｔｓꎬｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆｏｎｅ－ｔｉｍｅｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａｏｎｒａｔｓ.Ａｎｏｔｈｅｒｍｏｕｓｅｗａｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈｘｙｌｅｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｅａｒｓｗｅｌｌｉｎｇａｎｄｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｃａｐｉｌｌａｒｙｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙꎬｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａｏｎｒｅｄｕｃｉｎｇａｃｕｔｅｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀ＴｈｅＬＤ５０ｏｆｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａｔｏｍｉｃｅｗａｓ(２５.０２ʃ１.４１)ｇ ｋｇ－１.ＴｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａ０.１４４ｇ ｋｇ－１ｈａｓｗｅａｋａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎｙｅａｓｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｆｅｖｅｒｉｎｒａｔｓ.ＴｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａ０.０２８ｇ ｋｇ－１ａｎｄ０.０１４ｇ ｋｇ－１ｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｅｘｕｄａｔｉｏｎｏｆＥｖａｎｓｂｌｕｅｉｎｔｈｅａｂｄｏｍｉｎａｌｃａｖｉｔｙｃａｕｓｅｄｂｙｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ(Ｐ<０.０５)ꎬａｎｄｒｅｄｕｃｅｔｈｅｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｃａｐｉｌｌａｒｙꎬａｎｄｃａｕｓｅａｔｅｎｄｅｎｃｙｔｏｒｅｌｉｅｖｅｅａｒｓｗｅｌｌｉｎｇｂｙｘｙｌｅｎｅ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａｉｓａｃｔｕａｌｌｙｎｏｎ－ｔｏｘｉｃꎬｉｔｉｓｓａｆｅｔｏｔａｋｅａｔｔｈｅｐｒｅｓｃｒｉｂｅｄｄｏｓｅꎬａｎｄｔｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｅｘｈｉｂｉｔａｃｅｒｔａｉｎａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃｅｆｆｅｃｔｉｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｏｆｆｅｖｅｒａｎｄｃａｎａｌｌｅｖｉａｔｅａｃｕｔｅｉｎ￣ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅａｃｔｉｏｎｓｉｎａｎｉｍａｌｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＴｈｅｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａꎻＡｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎꎻＡｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃꎻＥａｒｓｗｅｌｌｉｎｇꎻＡｂｄｏｍｉｎａｌｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ㊀㊀苦瓜(ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ.)又名凉瓜ꎬ是我国传统的药食两用植物ꎬ具有清热祛暑㊁明目解毒㊁利尿凉血㊁解劳清心㊁益气壮阳的功效[１]ꎬ可用于治疗热病烦渴㊁中暑发热㊁痢疾等症ꎮ现代研究表明苦瓜具有改善胰岛素抵抗㊁调节糖脂代谢[２－３]㊁抗菌[４]㊁抗癌[５]等功效ꎮ苦瓜富含多种生物活性物质如糖苷㊁皂苷㊁黄酮类㊁生物碱类㊁三萜类㊁蛋白及类固醇等[６]ꎮ苦瓜苷包括总皂苷㊁黄酮苷等ꎬ苦瓜总皂苷即为苦瓜皂苷ꎮ苦瓜皂苷是苦瓜的药理活性成分之一[７]ꎬ本课题组前期研究了苦瓜总皂苷的利尿及其对肾脏的保护作用[８]ꎬ现探求苦瓜皂苷的急性毒性及解热抗炎作用ꎬ以发掘苦瓜新的药用功效ꎮ１㊀实验材料１.１㊀药物及试剂㊀苦瓜皂苷(批号:２０１８１２１２ꎬ桂林实力科技有限公司ꎬ总皂苷含量ȡ５０％)ꎻ干酵母(批号:２０１８１００２ꎬ安琪酵母股份有限公司)ꎻ阿司匹林肠溶片(批号:１８０７１１ꎬ江苏平光制药有限公司)ꎻ地塞米松(批号:１８０５１０ꎬ浙江仙锯制药股份有限公司)ꎻ依文思兰(批号:２０１８０３０５ꎬ上海慧济生物有限公司)ꎻ二甲苯(批号:Ｔ２０１８０８２５ꎬ国药集团上海化学试剂有限公司)ꎻ冰醋酸(批号:Ｔ２０１８０９１３ꎬ国药集团上海化学试剂有限公司)ꎮ１.２㊀动物㊀ＳＰＦ级昆明小鼠ꎬ１８~２２ｇꎬＳＰＦ级ＳＤ大鼠ꎬ体重１８０~２２０ｇꎬ均购自广西医科大学实验动物中心ꎬ许可证号:ＳＣＸＫ２００９－０００２ꎬ合格证号:０００６４８８㊁０００６００９ꎮ１.３㊀仪器㊀ＤＴ－１００型电子天平(美国双杰兄弟有限公司)ꎻＭｉｃｒｏｌｉｆｅＭＴ－１６７１电子体温计(华略电子有限公司)ꎻＥＬ－２０４型电子天平(梅特勒－托利多仪器上海有限公司)ꎻＵＶ－１８００型紫外分光光度计(日本岛津公司)ꎮ２㊀实验方法２.１㊀苦瓜皂苷对小鼠的急性毒性实验[９]㊀采用改良寇氏法考察苦瓜皂苷对小鼠的半数致死量(ＬＤ５０)ꎮ先用一定数量动物进行预试验ꎬ确定动物０％与１００％死亡率的用药范围ꎮ取昆明小鼠５０只ꎬ雌雄各半ꎬ随机分成５组ꎬ１０只/组ꎬ根据预试验结果ꎬ分别在２０.４~２９.６ｇ ｋｇ－１范围内按照１ʒ０.９１的比例设置给药剂量ꎬ动物禁食１２ｈ后称重ꎬ分别灌胃给予苦瓜皂苷ꎬ灌胃容量为４０ｍＬ ｋｇ－１ꎬ灌胃后连续观察动物行为状态的改变ꎬ记录各组动物的中毒和死亡情况ꎬ计算ＬＤ５０ꎮ２.２㊀苦瓜皂苷对发热大鼠体温的影响[１０]㊀取雄性ＳＤ大鼠６０只ꎬ随机分为模型对照组(蒸馏水)ꎬ阳性对照组(阿司匹林１０ｍｇ ｋｇ－１)ꎬ苦瓜苷高(０.５７６ｇ ｋｇ－１)㊁中(０.２８８ｇ ｋｇ－１)㊁低(０.１４４ｇ ｋｇ－１)３个剂量组ꎮ各组动物于实验第１天起每天禁食不禁水１８ｈ后测定肛温１次ꎬ连续４ｄꎬ作为大鼠体温基础值ꎮ第４天测定肛温后ꎬ立即于背部皮下注射２０％酵母混悬液(１０ｍＬ ｋｇ－１)ꎬ３０ｍｉｎ后按照分组灌胃给药１次ꎬ于注射酵母后６ｈ测定大鼠肛温ꎮ２.３㊀苦瓜皂苷对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[１０]㊀取１８~２２ｇ雄性小鼠５０只ꎬ随机分为模型对照组(蒸馏水)㊁阳性对照组(地塞米松５ｍｇ ｋｇ－１)㊁苦瓜皂苷高㊁中㊁低３个剂量组ꎬ分别给药０.２８８㊁０.１４４㊁０.０７２ｇ ｋｇ－１ꎮ所有动物均灌胃给药ꎬ每天１次ꎬ连续７ｄꎮ末次药后６０ｍｉｎ后ꎬ于右耳滴０.０２ｍＬ二甲苯致炎ꎬ左耳不涂作为空白对照ꎮ１５ｍｉｎ后脱颈椎处死ꎬ剪下左右耳ꎬ并于双耳相同位置对称打下相同大小的耳片ꎬ电子天平称重ꎮ计算肿胀度(肿胀度＝右耳片重–左耳片重)ꎬ并计算抑制率ꎮ抑制率(％)＝(模型对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/模型对照组平均肿胀度ˑ１００％２.４㊀苦瓜皂苷对小鼠腹腔通透性的影响[１１]㊀小鼠分组及给药方法同 ２.３ 项下ꎬ末次给药６０ｍｉｎ后ꎬ尾静脉注射０.２５％依文思兰ꎬ同时腹腔注射冰醋酸ꎬ１５ｍｉｎ后ꎬ脱颈椎处死ꎬ注入６ｍＬ生理盐水冲洗腹腔ꎬ将腹腔洗出液于２０００ｒｐｍ离心１０ｍｉｎꎬ取上清液于５９０ｎｍ处测定吸光值ꎮ２.５㊀统计方法㊀实验采用ＳＰＳＳ１７.０软件进行分析ꎬ实验数据以平均值ʃ标准差(ｘʃｓ)表示ꎬ组间比较应用方差分析ꎬＰ<０.０５即认为统计具有显著性差异ꎮ３㊀实验结果３.１㊀苦瓜皂苷对小鼠的急性毒性实验㊀各组小鼠灌胃后自发活动㊁梳理毛发活动明显减少ꎬ动物多呈俯卧状态ꎬ且多数动物有腹泻现象ꎮ服用苦瓜皂苷剂量为２０.４ｇ ｋｇ－１组的全部动物约在用药５ｈ后活动能力逐渐恢复ꎬ动物服用剂量越大ꎬ活动能力恢复所需时间越长ꎮ部分动物服用苦瓜皂苷后死亡ꎬ解剖发现胃肠充盈ꎬ且死亡率随服用剂量增加而升高ꎮ服用剂量为２９.６ｇ ｋｇ－１的苦瓜皂苷动物死亡率为１００％ꎬ服用最低剂量２０.４ｇ ｋｇ－１苦瓜皂苷的动物死亡率为１０％ꎬ根据改良寇氏法计算所得半数致死量(ＬＤ５０)为(２５.０２ʃ１.４１)ｇ ｋｇ－１ꎮ３.２㊀苦瓜皂苷对发热大鼠体温的影响㊀实验结果见表１ꎮ各组动物注射干酵母后６ｈ体温均显著高于基础值(Ｐ<０.００１)ꎮ阿司匹林组动物体温升高程度显著低于模型对照组ꎬ高㊁中剂量的苦瓜皂苷均不能降低发热动物的体温ꎬ仅低剂量苦瓜皂苷(０.１４４ｇ ｋｇ－１)有降低大鼠发热体温的趋势ꎮ表１㊀苦瓜皂苷对发热大鼠的体温影响(ｘʃｓꎬｎ＝１２)组别剂量/ｍｇ ｋｇ－１体温/ħ基础体温发热后体温体温增加模型对照－３６.０９ʃ０.４４３８.１４ʃ０.６２∗２.０５ʃ０.７１阳性对照１０３６.４１ʃ０.２８３７.７９ʃ０.６６∗１.３７ʃ０.４３＃苦瓜皂苷高剂量５７６３６.２５ʃ０.３０３８.２６ʃ０.７７∗２.０１ʃ０.６２苦瓜皂苷中剂量２８８３６.１８ʃ０.２８３８.０２ʃ０.８７∗１.８３ʃ０.５１苦瓜皂苷低剂量１４４３６.２８ʃ０.２０３７.７１ʃ０.８１∗１.４３ʃ０.３３＃㊀注:与同组基础体温比较ꎬ∗Ｐ<０.００１ꎻ与模型对照组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５３.３㊀苦瓜皂苷对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响㊀实验结果见表２ꎮ连续口服苦瓜皂苷７ｄꎬ３个苦瓜皂苷组动物受二甲苯刺激引发的耳肿胀均有不同程度的减轻ꎬ尤其是高剂量(０.２８８ｇ ｋｇ－１)对耳肿胀的抑制率达到５７.５１％ꎬ且与模型对照组相比有显著性差异(Ｐ<０.００１)ꎮ表２㊀苦瓜皂苷对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(ｘʃｓꎬｎ＝１０)组别剂量/ｍｇ ｋｇ－１肿胀度/ｍｇ肿胀抑制率(％)模型对照－２.５４ʃ２.３８－地塞米松５０.９２ʃ０.２５∗６５.０３苦瓜皂苷高剂量２８８１.０６ʃ０.４２∗５７.５１苦瓜皂苷中剂量１４４１.８２ʃ０.８３２８.３９苦瓜皂苷低剂量７２１.８４ʃ０.７７２６.５６㊀注:与模型对照组比较ꎬ∗Ｐ<０.００１３.４㊀苦瓜皂苷对小鼠腹腔通透性的影响㊀实验结果见表３ꎮ连续口服苦瓜皂苷７ｄ后ꎬ苦瓜皂苷高(０.２８８ｇ ｋｇ－１)㊁中剂量(０.１４４ｇ ｋｇ－１)均能显著抑制冰醋酸刺激引起的腹腔通透性增加ꎬ减少腹腔依文思兰渗出(Ｐ<０.０５)ꎬ低剂量(０.０７２ｇ ｋｇ－１)能轻度抑制腹腔依文思兰渗出ꎬ但其作用未达显著性差异ꎮ表３㊀苦瓜皂苷对小鼠腹腔通透性的影响(ｘʃｓꎬｎ＝１０)组别剂量/ｍｇ ｋｇ－１ＯＤ５９０模型对照－１.６８ʃ０.２２地塞米松５１.２７ʃ０.２５∗苦瓜皂苷高剂量２８８１.４９ʃ０.２３＃苦瓜皂苷中剂量１４４１.３４ʃ０.４６＃苦瓜皂苷低剂量７２１.５４ʃ０.３３㊀注:与模型对照组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５ꎬ∗Ｐ<０.００１４ 讨论苦瓜皂苷的半数致死量(ＬＤ５０)为(２５.０２ʃ１.４１)ｇ ｋｇ－１ꎬ人日用量为０.３６ｇ/６０ｋｇꎮ按照相对体表面积换算ꎬ半数致死量的人等效剂量为２.０８５ｇ ｋｇ－１ꎬ相当于苦瓜皂苷推荐人日用量的３４７.５倍ꎮ根据ＧＢ１５１９３－２００３急性毒性剂量分级表ꎬ苦瓜皂苷的毒性水平为实际无毒级[１２]ꎬ在一定剂量内使用是安全的ꎮ单次口服苦瓜皂苷对干酵母引起的大鼠体温升高有较弱的退热效果ꎬ且连续７ｄ口服苦瓜皂苷可显著抑制冰醋酸诱导的腹腔通透性亢进ꎬ并对二甲苯引起的小鼠耳肿胀有一定的抑制作用ꎬ说明苦瓜皂苷能对小鼠的急性炎症反应产生抗炎效果ꎬ与肖莹等[１３]研究的苦瓜对炎症因子的调节作用相吻合ꎮ苦瓜是我国传统的药用植物ꎬ因其毒副作用较小ꎬ它的降糖降脂功效一直被广泛地应用[１４]ꎮ苦瓜皂苷是苦瓜中的有效成分之一ꎬ主要以葫芦烷型四环三萜类化合物的形式存在ꎬ具有抗肿瘤㊁降血糖㊁降血脂㊁抗氧化等多种生物活性[１５]ꎮ有研究表明ꎬ苦瓜皂苷粗制品的得率为２.３７％ꎬ且苦瓜果实的不同部分(苦瓜瓤ｖｓ苦瓜果肉)含有的总皂苷得率差异显著[１６]ꎮ本次探讨了苦瓜皂苷的解热抗炎作用ꎬ还没有对苦瓜皂苷生物利用度的系统研究ꎬ但是已经有研究提示ꎬ苦瓜可以改善糖耐量ꎬ缓慢降低血糖而不会诱发低血糖[１７]ꎬ并且能减少糖尿病的并发症[１８]ꎮ另有苦瓜皂苷的药物代谢动力学实验[１９]ꎬ通过口服苦瓜皂苷绘制的血药浓度曲线表明ꎬ苦瓜皂苷能够通过肠道吸收后进入血液循环ꎬ从而发挥其药理活性ꎮ以上研究均从侧面表明ꎬ口服苦瓜皂苷具有能够支撑其发挥药理活性的生物利用度ꎬ则下一步需继续研究苦瓜皂苷的生物利用度ꎬ以期实现较高的药用价值ꎮ总之ꎬ由于苦瓜的有效成分比较多ꎬ作用靶点多样ꎬ所以苦瓜的药理作用广泛ꎬ本研究也为以后苦瓜更多药用价值的发掘提供参考ꎮ参考文献:[１]㊀黄文蔚ꎬ洪李锋ꎬ桂天然ꎬ等.苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心肌凋亡的影响[Ｊ].中西医结合心脑血管病杂志ꎬ２０１９ꎬ１７(２):１８６－１９１.[２]祝莹ꎬ董英ꎬ钱希文ꎬ等.苦瓜冻干超微粉调节肥胖大鼠胰岛素抵抗及其作用机制研究[Ｊ].中国食品学报ꎬ２０１４ꎬ１４(７):５－１３.[３]ＢＡＩＪꎬＺＨＵＹꎬＤＯＮＧＹ.Ｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｇｕｔｍｉｃｒｏｂｉｏｔａａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｓｔａｔｕｓｔｏｂｉｔｔｅｒｍｅｌｏｎ(ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ.)ｉｎｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｉｎｄｕｃｅｄｏｂｅｓｅｒａｔｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａ￣ｃｏｌꎬ２０１６(１９４):７１７－７２６.[４]张文波ꎬ韦文龙ꎬ李宏睿.苦瓜多糖超声波提取与抑菌活性的研究[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１１ꎬ２２(７):１６７６－１６７７.[５]张逸ꎬ王旺ꎬ蔡寅ꎬ等.苦瓜多糖的纯化㊁结构解析及其免疫调节和抗肿瘤活性研究[Ｊ].南京中医药大学学报ꎬ２０１７ꎬ３３(１):３３－３９.(下转第１３７页)ｐｈｅｎｏｌｉｃｏｌｉｇｏｍｅｒｓｄｕｒｉｎｇｆａｓｔｐｙｒｏｌｙｓｉｓｏｆｌｉｇｎｉｎ[Ｊ].Ｆｕｅｌꎬ２０１４(１２８):１７０－１７９.[８]ＷＩＥＲＣＫＸＮꎬＫＯＯＰＭＡＮＦꎬＲＵＩＪＳＳＥＮＡＡＲＳＨＪꎬｅｔａｌ.Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｆｕｒａｎｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓ:ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬｇｅｎｅｔｉｃｓꎬａｎｄｉｍｐａｃｔ[Ｊ].ＡｐｐｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌꎬ２０１１ꎬ９２(６):１０９５－１１０５.[９]ＴＥＲＥＳＡＬＤＳꎬＳＡＮＴＯＲꎬＲＥＩＳＡꎬｅｔａｌ.ＥｆｆｅｃｔｏｆＦｕｒｆｕｒａｌｏｎＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓＧｒｏｗｔｈꎬＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＥｔｈａｎｏｌＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｐｐｌＢｉｏｃｈｅｍａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌꎬ２０１７ꎬ１８２(２):７０８－７２０.[１０]ＫＩＭＹＧꎬＬＥＥＪＨꎬＧＷＯＮＧꎬｅｔａｌ.ＥｓｓｅｎｔｉａｌＯｉｌｓａｎｄＥｕｇｅｎｏｌｓＩｎｈｉｂｉｔＢｉｏｆｉｌｍＦｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅＶｉｒｕｌｅｎｃｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７:Ｈ７[Ｊ].ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｐｏｒｔｓꎬ２０１６(６):３６３７７.[１１]ＹＡＮＧＪＦꎬＹＡＮＧＣＨꎬＬＩＡＮＧＭＴꎬｅｔａｌ.ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍ￣ｐｏｓｉｔｉｏｎꎬＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔꎬａｎｄＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＷｏｏｄＶｉｎｅｇａｒｆｒｏｍＬｉｔｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０１６ꎬ２１(９):１１５０.[１２]ＮＵＮＥＳＣꎬＡＬＭＥＩＤＡＬꎬＪＯＡＯＬ.３ꎬ４－Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌａ￣ｃｅｔｉｃａｃｉｄ(ＤＯＰＡＣ)ｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｉｎＰＣ－１２ｃｅｌｌｓｖｉａｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｇ[Ｊ].Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙꎬ２００８ꎬ２９(６):９９８－１００７.[１３]ＫＡＵＲＧꎬＳＵＬＴＡＮＡＳ.Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉａｒｔｈｒｉｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｉｓｏｅｕｇｅｎｏｌｉｎａｄｊｕｖａｎｔｉｎｄｕｃｅｄａｒｔｈｒｉｔｉｓｉｎｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍＴｏｘｉｃｏｌꎬ２０１２ꎬ５０(８):２６８９－２６９５. 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HPLC-ELSD测定苦瓜皂甙的含量
石雪萍;姚惠源
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】2006(18)3
【摘要】本文用HPLC-ELSD法测定苦瓜中皂甙B的含量.色谱条件:色谱柱Zorbax SB C18,4.6×150mm;检测器ELSD(Evaporative Light Scattering Detector);柱温30℃;流动相:甲醇-水(70:30);流速1.0 mL/min,N2压
力:2.0×105Pa.皂甙B的保留时间在为7.295 min,在浓度为0.1058～5.290μg/μL 之间有很好的线性关系(R2=0.9918).平均加标回收率为
100.27%(n=3),RSD=2.83%.实验结果表明此方法可以作为苦瓜皂甙的定量测定方法.
【总页数】3页(P471-473)
【作者】石雪萍;姚惠源
【作者单位】江南大学食品学院,无锡,214036;江南大学食品学院,无锡,214036【正文语种】中文
【中图分类】TS201.2
【相关文献】
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苦瓜皂苷（或总皂苷）测定方法节选
一、
试剂：
人参皂苷Rgl对照品，购于黑龙江省药检所。
无水乙醇、石油醚、甲醇、正丁醇、香草醛、冰乙酸、高氯酸等均为分析纯试剂。
1．2．1 苦瓜总皂苷的提取方法
将新鲜苦瓜干燥、粉碎、过筛后经石油醚脱脂，准确称取处理过的苦瓜2．5 g 于250 mL碘量瓶中，再加入一定量的乙醇溶液后，在一定温度、功率下提取一定时问，取出过滤，将滤渣二次浸提后过滤，滤液经减压浓缩后，用水饱和正丁醇溶液萃取过夜；分离出正丁醇相，经减压浓缩、真空干燥后得苦瓜总皂苷。
I．2．2 测定方法
(1)苦瓜总皂苷含量的测定
香草醛一高氯酸比色法
(2)皂苷含量的计算
总皂苷(％)=测得苦瓜皂苷含量／所用脱脂苦
瓜粉量×100％
二、
本试验通过对高氯酸和硫酸体系进行比较，选择香草醛．冰醋酸．高氯酸体系作为测定苦瓜皂甙的合适显色条件，并对体系中各个因素逐一考察，确定比色法测定苦瓜皂甙的条件为：0．2 mL冰醋酸，0．8 mL高氯酸，5％香草醛．冰醋酸溶液，70℃条件下反应20 min。
试验以苦瓜皂甙建立了苦瓜皂甙测定回归曲线，线性和稳定性可靠，平均加标回收率100．78％，变异系数为1．910。
UV ofthe two system
VaniUin．H
2S0
4
system
The standard solution(O．66 mg／mL)0．1 mL was added to 20 mL tubes，evaporated the solvent in the warming pan．then 0．2 mL 5％
vanillin．acetate acid and 0．8 mL 80％ H
2S0
4
wel'~added respectively． e
tubes we1'~put
into the warming tank and mixtured．After reacting in 60 o C for 15 mins，the tubes were took out and cooled down by icy water for 10 mim ，5 mL acetic acid was added to delute the system。
put in the loom temperature f0r l5 mim ，the blank tube added no solution was also treated as the steps upwards．Then the two systems were scanned by UV．VaniUin-HClOd system All steps were as above except adding the 0．8 mL HC10
4
(not 0．8 mL H2$04)in thesystem．
Interfere test
duc0se solution(0．1 g／mL)10，20，30，40，50 ；bovine serunl
albumin(BsA)solution(10 ng／mL)10，20，30，4o，5O and the mtin solution(2 ng／mL)20，4o，60，80，100 t,-L were put in two groups of tubes respectively，
one group were added 5％ vanillin-acetic acid 0．2 mL and 0．8 mL H2S04，and the other were added 5％ vanillin．acetic acid 0．2 mL and 0．8 mL Ha04．the next steps were referred to 2．4．1．then the absorbencies were detected．
researdl of the vanillin-acetic add-HCIO
system
4
In the vanillin．acetic acid-HCl04 system．there were five
factors which afected the abso~ cies．In this test，we
change one factor and immobilize other factors．Every step
was one as above 2．4．2．Then the absorbencies were de．
tected ．We could choose the optimum condition according
to the curves
三、
1．1 一般资料：苦瓜(购自哈尔滨第一百货商场)，人参皂甙Rgl标准品(中国药品生物制品检定所)。
1．2 方法：采用单因素和正交试验法优选提取苦瓜皂甙的最佳工艺。
仪器为721分光光度计(上海第三分析仪器厂)，XT系列原装天平(瑞士PRECISA公司)。
1．3 统计方法：通过正交实验表做方差分析得到结论。
2 结果
2．1 标准曲线的制备：精密称取人参皂甙Rgl的标准品2mg，加无水乙醇溶解定容至4ml，摇匀，作为对照品溶液。
精密吸取上述对照品溶液0．05、0.10、0．15、0．20、0．25、0．30m1分别置于具塞试管中，水浴挥去溶剂，加入新配制的5％香草醛一冰乙酸溶液0、2ml，高氯酸0、8ml。
在60℃水浴中加热15分钟，流水冷却，加冰乙酸5ml，摇匀，在15min内于波长548nm处分别测吸光度，结果见表1。
另取无水乙醇随行空白对照(取0．35ml于具塞试管中，水浴挥去溶剂)。
以吸光度(A)为纵坐标，人参皂甙Rgl浓度(C)为横坐标绘制标准曲线。
经统计处理，得线形回归方程为：Y=0．0022x+0．0135，r=0．9974。
表1 人参皂甙Rg1标准品浓度与吸光度
2．2 苦瓜皂甙的测定：将苦瓜洗净、去籽、切片、烘干、粉碎、脱脂、烘干，用乙醇回流提取。
将提取液抽滤、过滤，在60℃水浴中浓缩，然后用无水乙醇定容至lOml，过滤，取lml滤液于具塞试管中，用无水乙醇再定容至lOml，取0．2ml 于具塞试管中，在60℃水浴中挥去溶剂，加入新配制的5％香草醛一冰乙酸溶
液0．2ml，高氯酸0．8ml。
在60℃水浴中加热15分钟，流水冷却，加冰乙酸5ml，摇匀，在15分钟内于波长548nm处测吸光度A(取无水乙醇0．35ml作空白对照)。
