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人参皂苷的提取与分离学生姓名专业班级学院摘要首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。
Abstract.The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process ofextraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;目录摘要 (1)Abstract ................................................................................................ 错误！未定义书签。
1绪论 (3)1.1人参概述 .............................................................................. 错误！未定义书签。
人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。
提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。
常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。
溶剂提取法：这是最常见且相对简单的方法，主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。
常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。
通过浸泡、回流或渗漉等方式，使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中，再通过蒸发溶剂得到粗提物。
微波辅助提取法：微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用，提高提取效率和速度。
微波产生的热能可以使细胞壁破裂，加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解，从而缩短提取时间。
超声波辅助提取法：超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用，增加溶剂对原材料的穿透力，提高人参皂苷的提取率。
同时，超声波还可以破坏细胞结构，使皂苷更容易释放到溶剂中。
超临界流体提取法：超临界流体提取是利用超临界状态下的流体（如二氧化碳）作为溶剂，通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力，从而实现对人参皂苷的高效提取。
这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。
在实际应用中，可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素，选择最合适的提取方法。
为了提高提取效果，还可以结合使用多种提取方法，如先用溶剂提取法得到粗提物，再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。
三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤，其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。
这通常涉及到一系列的色谱技术，包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱（HPLC）等。
液-液分配色谱，也称为液-液萃取，是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。
这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。
固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。
苦杏仁苷提取
苦杏仁苷的提取主要采用溶剂提取法。
具体来说，有以下几种提取方式：
1. 有机溶剂提取法：根据苦杏仁苷在不同溶剂中溶解度的差异，选择适当的有机溶剂进行提取。
常用的有机溶剂有乙醇、甲醇、丙酮等，其中乙醇是最常用的溶剂，因为苦杏仁苷在乙醇中的溶解度较大。
将苦杏仁或苦杏仁粉加入乙醇中，搅拌均匀后过滤，得到提取液，进一步处理后得到苦杏仁苷。
2. 超声波辅助提取法：超声波具有空化、振动和热效应等作用，可以加速目标成分的溶解和扩散，提高提取效率。
将苦杏仁或苦杏仁粉加入溶剂中，利用超声波辅助提取，可缩短提取时间并提高提取率。
3. 微波辅助提取法：微波具有穿透性和加热作用，能够使目标成分迅速加热并渗透到组织内部，从而提高提取效率。
将苦杏仁或苦杏仁粉加入溶剂中，利用微波辅助提取，可显著缩短提取时间并提高提取率。
4. 超临界流体萃取法：超临界流体萃取是一种新型的分离技术，利用超临界流体的特殊性质进行提取和分离。
常用的超临界流体为二氧化碳，操作条件温和，不产生有害物质。
将苦杏仁或苦杏仁粉装入萃取釜中，以二氧化碳为萃取剂进行高压萃取，得到高浓度的苦杏仁苷提取液。
在完成提取后，可以通过结晶、沉淀等方法将苦杏仁苷与其他成分分离出来。
结晶法是最常用的分离方法之一，通过控制结晶条件（如温度、浓度、pH值等），使苦杏仁苷在溶剂中结晶析出，从而实现分离。
此外，还可以采用沉淀法、吸附法等方法进行分离纯化。
以上方法仅供参考，如需获取更具体的信息，建议咨询专业人士。
湖南农业大学课程论文学院:班级:姓名:学号:课程论文题目:人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展课程名称:评阅成绩:成绩评定教师签名:日期:年月日人参皂苷提取和分离纯化方法的研究进展学生:(湖南农业大学园艺园林学院,长沙)摘要:人参皂苷是人参的主要活性成分之一,具有提高免疫力,抗氧化,抗疲劳,抗肿瘤等多种药理活性作用,如何提高效率得到高质量的人参皂苷现已成为研究热点。
因此,本文综述了人参皂苷提取、分离纯化方法,旨在为人参皂苷开发和利用提供一定的科学依据。
关键词:人参皂苷提取工艺分离纯化1前言人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥根,主产于我国吉林长白山脉、辽宁、黑龙江、河北、山西等地,是我国传统名贵的中药材。
现代研究表明,人参中已经分离鉴定40余种人参皂苷单体,其次还含有人参多糖、氨基酸、蛋白质、人参二醇、人参三醇等有效成分,其中人参皂苷为人参中的主要活性成分之一,具有保护心功能,降血糖,抗氧化,抗疲劳,抗肿瘤等药理活性作用[1-2],选用合理的提取分离方法得到高质量的人参皂苷已成为研究热点。
据文献报道[3-4],传统提取分离方法,如煎煮法、渗漉法、索氏提取法、柱层析法等均在中药制药业发展过程中发挥了重大作用。
但是,这些方法均不同程度的存在提取周期长,有效成分流失多,提取效率低等问题。
随着现代科学技术的不断发展,出现了许多新型的提取分离技术,如超临界二氧化碳萃取技术等,运用这些技术不仅降低了生产成本,又能提高其得率,对人参产业化、确化、自动化提供了技术指导。
2提取工艺研究2.1微波提取法微波提取具有设备简单,节省时间,萃取率高,投资少,节省溶剂,污染小等优点。
刘永练[5]等采用微波提取法对西洋参干燥根中的人参皂苷进行提取,结果发现人参皂苷得率高达5.53%,比乙醇回流提取率提高29%,提取时间是乙醇回流的2%。
另有实验证实了微波提取人参皂苷的提取率为8%,是常规回流法的2.67倍。
概括描述人参皂苷的提取和分离过程
人参皂苷是一种天然的活性成分，具有多种保健作用。
其提取和分离过程通常包括以下几个步骤：
1. 原料处理：选择新鲜的人参，去除杂质和不必要的部分，以便获得高品质的人参皂苷。
2. 粉碎：将处理好的人参进行粉碎，增加表面积，便于后续的提取。
3. 提取：采用水提、乙醇提、超临界CO2提等不同的提取方法，将人参中的皂苷提取出来。
4. 分离：通过溶剂萃取、色谱分离、膜分离等技术，分离出人参皂苷的主要成分，如人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1等。
5. 纯化：通过再结晶、过滤、离子交换等方法，进一步提高人参皂苷的纯度。
6. 检测：使用UV、HPLC、GC-MS等分析方法对提取分离后的人参皂苷进行检测，确保其质量和活性。
人参皂苷的提取和分离过程需要严格的操作和控制，以确保其商品化和应用价值。
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如何从佛手瓜中提取有效成分佛手瓜（Citrullus colocynthis），也被称为苦瓜或尿瓜，是一种草本植物，属于葫芦科。
它广泛分布于亚洲、非洲和地中海沿岸地区。
佛手瓜的果实可食用，而且在传统草药中有许多用途。
其中，提取佛手瓜中的有效成分是一项重要的研究领域。
本文将介绍有效提取佛手瓜成分的方法和其潜在的健康益处。
1. 概述佛手瓜中的有效成分主要集中在其果实和种子中。
这些成分包括多种化合物，如皂苷、多糖、多酚、苦味成分和其他活性物质。
提取佛手瓜的有效成分可以用于制作传统草药、药物和保健产品。
2. 提取方法（a）溶剂提取法：将佛手瓜果实或种子粉末与适量的溶剂（如乙醇、水、甲醇）混合，经过搅拌、沉淀和过滤等步骤，得到溶液。
然后，用浓缩和蒸发等技术去除溶剂，最终得到目标成分的浓缩物。
（b）超声波提取法：通过将佛手瓜样品浸泡在溶剂中，并利用超声波的机械振荡作用，加速溶剂对目标成分的萃取。
超声波提取方法具有快速、高效、环保等优点，因此被广泛应用于佛手瓜成分的提取研究中。
（c）微波辅助提取法：类似于超声波提取方法，微波辅助提取法利用微波辐射的热效应和非热效应来增加溶剂和目标成分之间的反应速率。
微波辅助提取方法对于佛手瓜成分的提取也具有较好的效果。
（d）超临界流体萃取法：超临界流体指的是超过其临界点（温度和压力临界点）的气体或液体，其物理性质介于气体和液体之间。
超临界流体的特点是密度较大、粘度较小、毒性低，并且易于回收。
超临界流体萃取方法具有高效、无毒、无残留物和可控性等优势，因此在佛手瓜成分提取方面有着广阔应用前景。
3. 健康益处（a）抗氧化作用：佛手瓜中的多酚化合物和其他活性成分具有一定的抗氧化作用，可以帮助消除自由基，减少细胞受损和老化。
（b）抗炎作用：佛手瓜中的某些成分具有抗炎作用，可以减轻炎症反应，缓解相关疾病的症状。
（c）抗菌作用：佛手瓜中的某些成分具有抗菌活性，可以抑制细菌、真菌和病毒的生长，对某些感染性疾病的治疗具有潜在作用。
皂苷类成分一、皂苷类成分的分类皂苷类成分是一类具有糖苷结构的化合物，通常由糖部分与脂肪酸部分组成。
根据糖部分的结构，皂苷可分为葡萄糖苷、阿拉伯糖苷、半乳糖苷等多种类型。
根据脂肪酸部分的饱和度，可以分为饱和脂肪酸皂苷和不饱和脂肪酸皂苷。
皂苷类成分具有多种生物活性，常被应用于医药、化妆品和农业等领域。
以下是几种常见的生物活性：1. 抗氧化活性：许多皂苷类成分具有显著的抗氧化活性，可以中和自由基，减缓细胞氧化损伤，具有抗衰老和抗疾病的作用。
2. 抗炎作用：某些皂苷类成分具有明显的抗炎作用，可以抑制炎症反应和炎症介质的释放，对炎症性疾病具有一定的治疗作用。
3. 抗肿瘤活性：研究发现，一些皂苷类成分具有抗肿瘤活性，可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，对某些肿瘤具有一定的治疗潜力。
4. 免疫调节作用：部分皂苷类成分可以调节免疫系统的功能，增强机体的免疫力，对于预防和治疗免疫相关性疾病具有一定的作用。
三、皂苷类成分的应用领域由于皂苷类成分具有多种生物活性，因此在医药、化妆品和农业等领域有广泛的应用。
1. 医药领域：许多皂苷类成分被应用于药物研发和临床治疗，如葛根素、人参皂苷等。
它们可以用于预防和治疗心血管疾病、肿瘤、糖尿病等多种疾病。
2. 化妆品领域：皂苷类成分具有清洁、抗氧化和抗炎等功效，因此被广泛应用于化妆品中。
例如，山慈菇皂苷可以用于面部清洁和护肤产品中，具有清洁毛孔、改善肤色等效果。
3. 农业领域：一些皂苷类成分具有杀虫和抗菌作用，可以用于农业生产中的害虫防治和病害控制。
例如，苦瓜皂苷可以用于防治蔬菜害虫，有效减少化学农药的使用。
四、皂苷类成分的开发与利用随着科学技术的进步，越来越多的皂苷类成分被发现和开发。
传统的提取方法主要采用溶剂提取和分离纯化的方法，但存在操作复杂、成本高等问题。
近年来，随着分离纯化技术和生物工程技术的发展，越来越多的皂苷类成分通过生物转化和基因工程等方法得到大规模生产。
总结起来，皂苷类成分是一类具有丰富药理活性的天然产物。
基础研究 食品研究与开发 ２０１０年４月 第３１卷第４期 ５３ 苦瓜茎、叶中皂苷类物质的提取及分离纯化 张玉婵 －－。刘金福 ・，张平平 ，江英 ，庞红勋 ， （１．石河子大学食品学院，新疆石河子８３２０００；２．天津农学院食品科学系，天津３００３８４）
摘要：苦瓜茎、叶中舍有丰富的皂苷类物质。在浸提温度为７０ ｑＣ，浸提时间３ ｈ，浸提溶剂为６Ｏ％乙醇溶液，料液比 ｌ：１５，对６０目的原料浸提两次，测得苦瓜茎、叶总皂苷的含量分别为２．９２％和６．９０％，提取率分别为５．９％和１３．６％， 粗提物中总皂苷的含量分别为４９．５％和５０．１％。粗提物经两次ＡＢ一８大孔吸附树脂分离纯化后，苦瓜茎、叶提取物中 皂苷纯度分剐达到８３．４％和８６％，经ＨＰＬＣ分析，主要有２种皂苷成分。 关键词：苦瓜茎叶；皂苷；提取；纯化
Ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｓｔｅｍ ａｎｄ Ｌｅａｆ ｏｆ Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ Ｃｈａｒａｎｔｉａ Ｌ． ＺＨＡＮＧ Ｙｕ—ｃｈａｎ 一，ＬＩＵ Ｊｉｎ—ｆｕ ，ＺＨＡＮＧ Ｐｉｎｇ－ｐｉｎｇ ，ＪＩＡＮＧ Ｙｉｎｇ ，ＰＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｘｕｎ ＇ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２０００，Ｘｉｎｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３８４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｐｌｅｎｔｙ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ ｏｆ ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ．Ｓｅｖｅｒａｌ ｉｎｆｌｕｅｎｔｉａｌ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎ ｆｒｏｍ ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ Ｌ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ，ｔｉｍｅ，ｍａｓｓ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆａｌｃｏｈｏ１．Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｔｈｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ｗｉｔｈ ６０％ｅｔｈａｎｏｌ ａｔ ７０℃ｉｎ ３ ｈ ｗｉｔｈ ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ １：１５． Ａｆｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ６０ ｍｅｓｈ ｍａｔｅｒｉａｌ ｆｏｒ ｔｗｉｃｅ ｔｉｍｅｓ．ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎ ｇｏｔ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ａｎｄ １ｅａｆ ｏｆ ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ ｗａｓ ２．９２％ａｎｄ ６．９％，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｗａｓ ５．９％ａｎｄ １３．６％，ａｎｄ ｔｈｅ ｓａｐｏｎｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｒｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ４９．５％ａｎｄ ５０．１％．Ａｆｔｅｒ ｐｕｒｉｆｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐａｒｔ ｔｗｉｃｅ ｔｉｍｅｓ ｗｉｔｈ ＡＢ一８ Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｒｅｓｉｎ．ｔｈｅ ｐｕｒｉｔｙ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｒａｉｓｅｄ ｔｏ ８３．４％ａｎｄ ８６％．Ｂｙ ＨＰＬＣ．ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｔｗｏ ｔｙｐｅｓ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｉｎ ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｔｈｅ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ ｏｆ ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ；ｓａｐｏｎｉｎｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
苦瓜（Ｍｏｍｏｒｄｉｃａｃ ｈａｒａｎｔｉａ Ｌ．）别名锦荔枝、凉瓜、 癫蛤蟆、红羊、癫葡萄，是葫芦科苦瓜属蔓性草本植 物，苦瓜性味苦寒，具有清热解毒、滋养强壮、抗肿瘤［１ 以及提高人体免疫力 等功效。近十年来对苦瓜皂苷 的研究比较多，研究表明，苦瓜的醇提物，水提物均含 有皂苷类物质，具有降血糖等功效 。但是大部分的 研究都是以苦瓜的果实，果肉或种籽为原料，对苦瓜 茎叶中皂苷类物质的提取及功效的研究鲜见报道。植 物茎叶中往往含有丰富的次生代谢产物，并具有明显 的生物活性，如沙棘黄酮 、苦荞黄酮［１０－１１】、银杏茎叶 黄酮＿ｌ２ 等等。本研究对苦瓜茎叶中的皂苷类物质进 行提取、纯化，并测定其含量，为对其生物活性进行研 作者简介：张玉婵（１９８３－－），女（汉），在读硕士，研究方向：天然产物的 提物与分离 通讯作者 究，对废弃的茎叶进行深度的开发利用提供参考。 １材料和仪器 １．１材料 苦瓜茎叶：产于天津西青区大寺设施农业大棚， 秋季拉秧后采收，阴干、粉碎过６Ｏ目筛，装袋后常温贮 存；人参皂苷Ｒｇｌ标准品：上海同田生物技术有限公 司；大孑Ｌ吸附树脂（型号为ＡＢ一８）：河北沧州远威化工 有限公司；乙醇、冰乙酸、高氯酸、氯仿、甲醇、等均为国 产分析纯：天津市北方天医化学试剂厂；甲醇（色谱 纯）、乙腈（色谱纯）：天津市永大化学试剂开发中心。 １．２仪器 Ａｇｉｌｅｎｔ高效液相色谱仪：安捷伦科技有限公司； ＦＤ一１Ｃ冷冻干燥机：北京博医康实验仪器有限公司； ＤＬ一１８０Ａ超声波清洗器：上海之信仪器有限公司； ５４ ４ 食品研究与开发 第３１卷第期 氐口曩Ｗｌ ．Ｊ丌 基础研究 ＳＨＢ一１１１循环水式真空泵：郑州长城科工贸有限公 司；旋转蒸发器ＲＥ一５０：上海申生科技有限公司；ＤＢＳ一 １００自动部分收集器：上海沪西仪器厂；紫外可见分光 光度计：上海光谱仪器有限公司；恒温摇床：上海智城 分析制造有限公司；ＦＡ２００４电子天平：上海精科仪器； 恒温水浴锅：天津市中环实验电炉有限公司；ＤＨＧ一 ９２４０Ａ型电热恒温鼓风干燥箱：上海精密实验设备有 限公司；１０ Ｌ￣１００ ，２０ Ｌ￣２００ ｔｘＬ，１００Ｉ，ｚＬ～１ ０００ ＩｘＬ Ｆｉｎｎｐｉｐｅｔｔｅ移液枪各１支。 ２方法 ２．１苦瓜茎、叶中皂苷类物质的测定 ２．１．１标准曲线的制作 准确称取香革醛２．５ ｇ于小烧杯中，用冰乙酸多 次溶解，定容到５０ ｍＬ容量瓶中。即为５％的香草醛一 冰乙酸溶液。 精密称取干燥至恒重的人参皂苷Ｒｇｌ对照品５ ｔｎｇ， 加甲醇溶液定容到５ ｍＬ，摇匀，作为对照品溶液，即 １ ｍｇ／ｍＬ的人参皂苷标准溶液。准确称取标准皂苷溶 液０．００、０．０２、０．０４、０．０６、０．０８、０．１０、０．１２、０．１４、０．１６、０．１８、 ０．２０ ｍＬ于药剂瓶水浴挥干溶剂，加５％的香草醛一冰 乙酸溶液０．２ ｍＬ和０．８ ｍＬ高氯酸，摇匀，６０℃水浴加 热１５ ｍｉｎ。取出后立即流水冷却１０ ｒａｉｎ，加入５ ｍＬ冰 乙酸稀释，静置２０ ｒａｉｎ后，在波长４６８ ｎｍ处测吸光 度，甲醇溶液随行空白对照，以吸光度Ａ为纵坐标，人 参皂苷取样量（ ｇ）为横坐标，绘制标准曲线（如图１）， 得曲线方程：ｙ＝０．００１ ７ｘ一０．００２ ６ Ｏ．３５ ０．３ Ｏ．２５ 越０．２ ０．１５ ０．１ Ｏ．Ｏ５ ０ ２．１．２苦瓜皂苷含量的测定 将苦瓜粗提液浓缩除醇后，吸取一定量的浓缩 液，同图１绘制标准曲线的方法显色后，在波长４６８ ｎｍ 处测定吸光值，根据标准曲线计算其总皂苷的量。 ２．１．３皂苷的ＨＰＬＣ分析 将上述苦瓜皂苷溶于色谱甲醇，配成５ ｍｇ／ｍＬ的 甲醇溶液，以ＨＰＬＣ分析，在２０３ １ｑｍ检测，色谱条件： 色谱柱：Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ—Ｃｌ８柱（１５０ ｍｍｘ４．６ ｍｍ，５ Ｉ．Ｌｍ）；流 动相：乙腈：水＝３０：７０，等度洗脱；流速：１ ｍＬ／ｍｉｎ；柱 温：３０℃。 ２．２皂苷的提取与纯化 ２．２．１ －Ｅ艺过程 苦瓜茎、叶自然干燥一粉碎一乙醇浸提一过滤一 浓缩一调整ｐＨ一大孑Ｌ树脂吸附一洗脱一浓缩一真空 干燥 ２．２．２具体操作 ２－２．２．１苦瓜茎中皂苷的提取 称取苦瓜茎１．１ ｋｇ，加１５Ｌ６０％乙醇于７０℃下浸 提３ ｈ，过滤，再加ｌ０ Ｌ ６０％乙醇与７０℃下浸提３ ｈ，过 滤，合并两次滤液得到浸出液１３ Ｌ，真空浓缩，得到苦 瓜茎皂苷粗提液２．６ Ｌ。吸取８０ ，按上述绘制标准曲 线的方法显色后，在波长４６８ ｎｍ处测定吸光值，３次 取平均值，按公式计算总皂苷含量，粗提液干燥后计算 提取率。 ２．２．２．２苦瓜叶中皂苷的提取 称取苦瓜叶（干叶）１．２ ｋｇ，加ｌ５Ｌ６０％乙醇与７０℃ 下浸提３ｈ，过滤，再加１２Ｌ６０％乙醇与７０℃下浸提３ｈ， 过滤，合并两次滤液得到浸出液１９．５ Ｌ，真空浓缩，得到 苦瓜叶皂苷粗提液４ Ｌ。吸取５Ｏ Ｌ，按上述绘制标准 曲线的方法显色后，在波长４６８ ｎｍ处测定吸光值，３ 次取平均值，按公式计算总皂苷含量，粗提液干燥后计 算提取率。 ２．２．２－３ 皂苷的柱层析纯化 本试验采用直径为１００ ｍｍ，高２ ｍ的吸附柱进行 纯化，大孑Ｌ吸附树脂为ＡＢ一８型，柱装填体积为８ Ｌ。 上样量：苦瓜茎提取物上样量为５．３ Ｌ；苦瓜叶提 取物上样量为５Ｌ。 上样液ｐＨ值：苦瓜茎提取物上样ｐＨ６．２；苦瓜叶 提取物上样ｐＨ７．０。 上样液浓度：根据预试验的结果，苦瓜茎提取物 上样浓度为ｌ４．２ ｍｇ／ｍＬ；苦瓜叶提取物上样浓度为 １６ ｍｇ／ｍＬ。 上样液速度：苦瓜茎、叶提取物均为２Ｏ ｍＷｍｉｎ。 洗脱剂及其浓度：本试验选择水和乙醇作为苦瓜 皂苷的洗脱剂，据预试验结果，选择８０％的乙醇溶液 作为苦瓜皂苷的洗脱剂。 洗脱剂量：将上述饱和的树脂柱进行水洗除杂至 Ｍｏｌｉｓｈ反应为阴性，收集除杂液，再用８０％的乙醇以 ２０ ｍｌｄｍｉｎ的速度洗脱，用２倍柱床体积的８０％的乙 醇溶液洗脱皂苷时几乎全部被吸附皂苷都可以洗脱下 来。因而确定洗脱剂用量为２倍柱床体积的８０％的乙
