苯巴比妥的鉴别及异戊巴比妥的含量测定

药品生产质量管理规范GMP 药品经营质量管理规范GSP药物非临床研究质量管理规范GLP药物临床试验质量管理规范GCP分析质量管理AQC极微溶解系指溶质lg(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解。

不到1 极易溶解；1～不到10 易溶；10～不到30溶解；30～不到100略溶；100～不到1000微溶；1000～不到10000 极微溶解；>10000 不溶药典凡例规定原料药的含量（%），除另有注明者外，均按重量计；如未规定上限时，系指不超过101.0%。

标准品、对照品：百分比用“%（g/g）”表示溶液100g中含有溶质若干克%（g/ml）溶液100ml中含有溶质若干克中国药典(2005年版)规定，乙醇未指明浓度时，是指浓度为95％(mL／mL)取某药2.0g，称取质量应为1.95～2.05g；2.1g 1.96—2.14；0.1g 0.06—0.14；2g 1.5-2.5精密称定：千分之一；称定：百分之一；精密量取：移液管；“约”若干：+-10%试验用水，除另有规定，均系指纯化水。

酸碱度检查所用的水，均系指新沸并放冷至室温的水；指示剂如未指明时均系指石蕊试纸。

药品标准制定的原则为：科学性、先进性、规范性和权威性比旋度是指在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度原料药稳定性试验中的1.影响因素试验：高温试验、高湿度试验、强光照射试验和破坏试验2.加速试验；3.长期试验药典的内容一般分为凡例（解释和使用《中国药典》正确进行质量检定的基本原则）、正文（收载药品或制剂的质量标准）、附录（由制剂通则、通用检测方法和指导原则等组成）和索引（四为了方便、快速查阅药典而编写的内容）部分。

中国药典共9版:1953，1963，1977，1985，1990，1995，2000，2005，2010《中国药典》（2005年版）中，首次将《中国生物制品规程》并入药典收载。

第五章巴比妥类药物的分析第五章巴比妥类药物的分析收特征。

在酸性条件下不电离，无紫外吸收。

而含硫巴比妥在酸性、碱性条件下均有紫外吸收，据此可以区别。

内容第一节基本结构与特征代表性药物：1、苯巴比妥（Phenobarbital ）2、司可巴比妥钠（Secobarbital sodium）3、硫喷妥钠（Thiopental sodium）4、巴比妥、异戊巴比妥、戊巴比妥（barbital，Amobarbital，pento barbital）一、弱酸性--与强碱成盐二、水解反应---与碱液共沸→NH3↑三、与重金属离子反应与钴、铜→有色↓，与银、汞→白色↓四、紫外吸收光谱特征(一)、硫代巴比妥的紫外吸收(二)、5，5-取代巴比妥的紫外吸收特征五、显微结晶(一)、药物本身的晶形1、巴比妥——长方形结晶2、苯巴比妥——球形->->花瓣状结晶(二)、反应产物的晶形1、巴比妥与铜-吡啶形成十字形紫色结晶2、苯巴比妥形成浅紫色不规则或菱形结晶其他巴比妥类与铜-吡啶不形成结晶，可区别。

第二节鉴别试验一、丙二酰脲试验：(一)、巴比妥类 + Na2CO3·TS+ 过量AgNO3→白色↓(二)、巴比妥类 + 吡啶溶液 + Cu2+→紫色（↓）（含硫巴比妥类为绿色，可与之区别）二、钠盐的鉴别试验：（钠离子的焰色反应）(一)、在无色火焰中燃烧，呈现黄色火焰。

三、取代基试验(一)、苯环取代基反应：1、硝化反应2、亚硝酸钠-硫酸反应3、硫酸-甲醛反应苯巴比妥 + KNO3+H2SO4→黄色苯巴比妥 + NaNO2+H2SO4→橙黄色苯巴比妥 + 甲醛+ H2SO4→玫瑰红色4、硫元素反应：(1)、硫喷妥钠+NaOH+Pb2+ →白色↓(2)、加热→PbS↓（黑色）5、与香草醛反应：(二)、不饱和取代基（烯丙基）反应：1、司可巴比妥钠 + I2（ Br2）→碘（溴）褪色2、或在碱性溶液中与高锰酸钾反应，使后者褪色第三节特殊杂质检查一、苯巴比妥的特殊杂质(一)、酸度(二)、溶液的澄清度(三)、中性或碱性物质控制酸性杂质苯丙二酰脲，利用其酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙显红色，规定一定量供试品溶液加甲基橙后不得显红色。

1、用三点校正法测定维生素A的原理其原理主要基于以下两点：（1）杂质的无关吸收在310~340nm的波长范围内几乎呈一条直线，且随波长的增大吸收度下降。

（2）物质对光吸收呈加和性的原理。

即在某一样品的吸收曲线上，各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者吸收的叠加。

2、如何用化学方法鉴别苯巴比妥、司可巴比妥和异戊巴比妥。

3、简述铈量法测定苯骈噻嗪类药物的原理？本类药物具有较强的还原性，在酸性介质中，滴定开始时，吩噻嗪类药物先失去一个电子形成一种红色的自由基离子，达到化学计量点时，溶液中的吩噻嗪来药物均失去两个电子，而红色消退，借以指示终点。

4、简述提取酸碱滴定法的基本原理和方法？（1）基本原理：溶解性---本类药物的盐酸盐或硫酸盐可溶于水，而药物本身为游离碱不溶于水，可以溶于有机溶剂。

（2）方法：将供试品溶于水或矿酸溶液中，加入适量碱性试剂使药物游离后，用适当的有机溶剂提取。

提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定；或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定。

5、简述银量法用于巴比妥类药物含量测定的原理？原理：巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，生成盐而溶解，可与银离子定量成盐。

在硝酸银标准液滴定的过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测定的巴比妥类药物完全形成一银盐后，稍过量的银离子与药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变混浊，从而指示滴定终点。

6、维生素C结构中具有什么样的活性结构？因而使之具有哪些性质？具有烯二醇基内脂环 2个手性碳原子，使得其具有强还原性糖的性质旋光性7、维生素E中游离生育酚的检查原理？利用游离生育酚的还原性，可被硫酸铈定量氧化。

故在一定条件下以消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）的体积来控制游离生育酚的限量。

8、阿司匹林含量测定通常采用哪几种方法？各有何优缺点？（1）直接酸碱滴定法：优点是简便、快速；缺点是酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定），酸性杂质干扰（如水杨酸）。

第五章巴比妥类药物的分析五、含量测定题（根据下列药物结构，按规定方法测定其含量，并写出测定方法的原理、主要条件及药物名称）1．用银量法测定苯巴比妥钠的含量。

原理：分子结构中含有丙二酰脲基团，在碳酸钠介质中可与硝酸银定量反应。

根据消耗硝酸银的量可计算出苯巴比妥钠的含量。

主要条件：①甲醇作溶剂。

②加新配制的无水碳酸钠溶液后滴定。

③用电位法指示终点。

④滴定剂为0.1 mol/L硝酸银滴定液。

2．用紫外分光光度法测定硫喷妥钠的含量。

原理：硫喷妥钠在0.4%NaOH溶液中，于304 nm波长处有最大吸收，因此可采用紫外分光光度法中的对照品对照法测定其含量。

主要条件：①需要硫喷妥钠或硫喷妥对照品。

②在0.4%NaOH溶液中测定吸收度。

六、问答题1．丙二酰脲类药物鉴别试验包括哪些反应，主要用于哪一类药物的鉴别？丙二酰脲类鉴别试验包括银盐反应和铜盐反应，是巴比妥类药物环状丙二酰脲母核特殊的反应；是巴比妥类药物共有的鉴别试验。

因此主要用于巴比妥类药物的鉴别。

2．苯巴比妥及其钠盐的化学鉴别方法有哪几种？药品标准中常收载的苯巴比妥及其钠盐的鉴别方法有硝化反应，硫酸-亚硝酸钠反应和甲醛-硫酸反应。

3．简述硫喷妥钠硫元素鉴别试验的基本原理。

利用硫喷妥钠在氢氧化钠试液中与铅离子反应生成白色硫喷妥铅盐沉淀，加热后转变成黑色的硫化铅沉淀4．巴比妥类药物银量法药品标准中为什么要求采用电位法指示终点？利用巴比妥类药物与银离子生成二银盐白色沉淀指示终点时，由于终点的沉淀浑浊不易观察，而且沉淀的溶解度受温度的影响，使终点的观察产生误差较大。

为了减少目测误差和温度变化的影响，因此药品标准中要求采用电位法指示终点。

5．巴比妥类药物紫外吸收光谱在酸性和碱性介质中有何不同？为什么？巴比妥类药物为弱酸类药物，在酸性介质中不发生解离，其分子中没有共轭体系结构，因此无明显的紫外吸收峰。

在碱性或强碱性介质中，其发生一级电离或二级电离，分子中形成共轭体系结构，故于240 nm或255 nm波长处出现特征吸收峰。

基本结构与性质 ⼀、基本结构：巴⽐妥类： ⼆、特性： 1、弱酸性：⽔液显酸性，与强碱成盐，盐类⽔液显碱性，加酸后析出游离巴⽐妥类沉淀。

2、易⽔解：酰亚胺基团与碱液共沸放出氨⽓，使红⾊⽯蕊试纸变蓝。

3、易与重⾦属离⼦反应：产⽣有⾊沉淀。

⽤于鉴别和含量测定。

4、具紫外特征吸收：酸性不电离，⽆明显吸收，碱性电离，有吸收。

鉴别试验 ⼀、丙⼆酰脲类反应：药典下银盐与铜盐反应 1、与银盐反应：在碳酸钠溶液中加⼊硝酸银试液⽣成⽩⾊沉淀溶解。

2、与铜盐反应：在吡啶溶液中与铜吡啶试液作⽤ 3、⽣成配位化合物 4、显紫⾊。

硫喷妥显绿⾊。

⼆、熔点测定：异戊巴⽐妥钠和注射⽤硫喷妥钠的鉴别⽅法均采⽤熔点测定法。

3、钠盐的鉴别反应：附录中⼀般试验项下 1、焰⾊反应：显鲜绿⾊铂丝烧红， 2、浸⼊盐酸， 3、反复［医学教育搜集整理］ 4、与醋酸氧铀锌 5、反应：⽣成黄⾊沉淀 4、取代基或元素反应： 1、芳环取代基反应： （1）与亚硝酸钠-硫酸反应：橙黄⾊-橙红⾊有苯环取代基 （2）与甲醛-硫酸的反应：⽣成玫瑰红⾊环有苯环取代基 2、不 3、饱和烃取代基反应：司可巴⽐妥含丙烯基， 4、使碘试液棕黄消失 5、硫元素反应：naoh试液中与铅离⼦反应 6、⽣成⽩⾊沉淀——⿊⾊硫化铅。

检查 ⼀、苯巴⽐妥中特殊杂质检查： 1、酸度 2、⼄醇溶液的澄清度 3、中性或碱性物质 ⼆、溶出度：苯巴⽐妥和异戊巴⽐妥⽚检查溶出度 含量测定 ⼀、银量法：异戊巴⽐妥及其钠盐、苯巴⽐妥及其钠盐采⽤甲醇——3%⽆⽔碳酸钠溶剂系统，⽤甲醇溶解，新鲜配制⽆⽔碳酸钠，照电位滴定法，⽤硝酸银滴定。

银——玻璃电极临⽤硝酸浸洗1-2分。

⼆、溴量法：司可巴⽐妥含丙烯取代基与溴发⽣加成反应 三、紫外分光光度法：注射⽤硫喷妥钠含量测定采⽤对照品⽐较法。

鉴别题1.如何用化学方法鉴别巴比妥，苯巴比妥，司可巴比妥，异戊巴比妥和含硫巴比妥？①含硫巴比妥：与铜盐反应，巴比妥类药物在吡啶溶液中生成的烯醇式异构体与铜吡啶试液反应，形成了稳定的配位化合物，显绿色。

②司可巴比妥：司可巴比妥钠中的不饱和取代基（烯丙基）具有还原性，可在碱液中与高锰酸钾反应，将紫色的高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰。

③苯巴比妥：苯巴比妥与甲醛-硫酸试液反应，生成玫瑰红色的产物。

④巴比妥与异戊巴比妥：巴比妥分子结构因其含有酰亚胺结构，可以与碱共沸，释放氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。

结果：有氨臭的为巴比妥，没有氨臭的为异戊巴比妥。

2.用化学方法区别下列药物A.盐酸普鲁卡因B.盐酸丁卡因C.对乙酰氨基酚D.肾上腺素E.盐酸利多卡因F.盐酸普鲁卡因胺A.盐酸普鲁卡因：其分子结构中有芳伯胺基，在酸性条件下与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐，再与碱性β萘酚反应生成红色沉淀。

B.盐酸丁卡因：其分子结构中有芳伯仲胺，在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀。

C.对乙酰氨基酚：分子结构中有苯环羟基，可以与三氯化铁反应显蓝紫色。

D.肾上腺素：肾上腺素与甲醛-硫酸发那样，生成具有醌式结构的红色配位化合物。

E.盐酸利多卡因：在酸性条件下，与氯化钴试液反应生成草绿色细小钴盐沉淀。

F.盐酸普鲁卡因胺：分子结构中有芳酰胺结构，可被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁，溶液由紫红色随即变为暗棕色或者棕黑色。

4.鉴别下列药物A.氢化可的松B.黄体酮C.雌二醇D.炔雌醇A.氢化可的松：其结构中有C-17-α-醇酮基，具有还原性，蓝四氮唑具有氧化性。

使氢化可的松氧化为具有颜色的甲儹。

B.黄体酮：其结构中的甲酮基与亚硝基铁氰化钠反应生成蓝紫色的产物。

C.雌二醇：其结构中有苯环羟基，可以与重氮苯磺酸钠反应，产生红色的偶氮染料。

D.炔雌醇：炔雌醇中的炔基可以与硝酸银反应生成白色的炔银沉淀。