固定化酶提取大蒜多糖的研究
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大蒜多糖的提取分离与分析黄雪松(暨南大学理学院食品科学与工程系,广东 广州 510632)摘 要:目的:提取、分离、纯化大蒜多糖,并对其进行分析。
方法:依次用水提取、过滤、去蛋白、DEAE纤维素层析、冷冻干燥获得大蒜多糖;用薄板层析和气相色谱法测定单糖的组成和比例,高效液相色谱法测定分子量;结合IR和13CNMR确定单糖组成、连接方式和端基碳构型。
结果:从大蒜中得到了纯多糖,其含有85%果糖、14%葡萄糖、1%半乳糖,分子量7100道尔顿,糖苷键为β-2,1-糖苷键。
结论:大蒜多糖是主要含有果糖,葡萄糖和少量半乳糖的大蒜中的β-杂聚糖。
关键词:大蒜;多糖;分离Isolation and Identification of Garlic PolysaccharideHUANG Xue-song(Department of Food Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, China)Abstract :Aim: To isolate and identify the garlic (Allium sativum L.) polysaccharide. Methods: The polysaccharide was gotby the extraction, DEAE chromatography etc. The pure polysaccharide was detected by the HPLC,GC and IR,UV, 13CNMRspectrum were obtained and analysed. Results: The polysaccharide is consisted of 85% fructose, 14% glucose and 1% galactose.Its molecular is 7.1kDa. The saccharides were connected on the β-2,1-glycosides. Conclusion: Polysaccharide is a kind ofheteropolysaccharide which contains fructose, glucose galactose and is connected by β-2,1-glycosides.Key words:garlic(Allium sativum L.);polysaccharide;isolat中图分类号:TS201.23 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2005)09-0048-04收稿日期:2005-06-11基金项目:国家高技术研究发展计划委员会专项(2001AA248021)作者简介:黄雪松(1957-)男,教授,博士,主要从事食品化学与食品加工工艺方面的研究。
大蒜多糖的提取纯化及生物功能活性研究的开题报告一、研究背景及意义大蒜作为一种常用的食品、保健品和药物,已经在人类的日常生活中得到广泛应用。
其中,大蒜多糖作为大蒜的重要活性成分之一,具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖等多种生物功能活性。
因此,大蒜多糖的提取纯化及其生物活性研究,具有重要的意义和应用价值。
二、研究目的和内容本研究的目的为:1.利用适当的提取方法,提取大蒜多糖,并进行纯化处理;2.对提取的多糖进行理化性质和结构分析;3.评价大蒜多糖的生物功能活性,包括其对大鼠血糖的作用、对人体细胞的保护作用等;4.探究大蒜多糖的作用机制。
为实现以上目的,本研究的具体内容为:1.选择适宜的提取方法,比较不同方法提取多糖的效果,并进行纯化处理。
2.利用FT-IR、NMR等技术手段,对大蒜多糖进行理化性质和结构分析。
3.通过大鼠实验和细胞实验,评价大蒜多糖的生物功能活性及其作用机制。
三、研究方法和技术路线1.大蒜多糖的提取和纯化a.水提法:将大蒜粉末和适量的水进行混合,再进行加热提取,通过分离和纯化处理得到多糖。
b.酸解提法:将大蒜粉末浸泡在有机溶剂中,作用一定时间后,用酸解提取,经过纯化处理获得多糖。
c.超声波提法:将大蒜粉末和适量的水进行混合,通过超声波处理,再进行离心、过滤等步骤得到多糖。
d.纯化处理:采用Gel chromatography、超滤等技术进行提纯处理。
2.大蒜多糖的理化性质和结构分析a. FT-IRb. NMR3.大蒜多糖的生物功能活性评价a.高糖饮食大鼠的血糖水平b.人体细胞抗氧化能力4.大蒜多糖的作用机制通过实验结果的分析,综合考虑生物学、生物化学等多种因素,对其作用机制进行探究。
四、预期成果1.获得一定量的高纯度大蒜多糖,对其进行理化性质和结构分析;2.评价大蒜多糖的生物学活性,包括其对大鼠血糖的作用、对人体细胞的保护作用等;3.探究大蒜多糖的作用机制,为其后续临床应用提供理论依据。
代爽,李琳琳,尹卫,等. 大蒜多糖提取、结构测定、化学修饰及生物活性研究进展[J]. 食品工业科技,2024,45(1):9−17. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023060161DAI Shuang, LI Linlin, YIN Wei, et al. Research Progress on Extraction, Structure Determination, Chemical Modification and Biological Activity of Garlic Polysaccharides[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(1): 9−17. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023060161· 特邀主编专栏—食品中天然产物提取分离、结构表征和生物活性(客座主编:杨栩、彭鑫) ·大蒜多糖提取、结构测定、化学修饰及生物活性研究进展代 爽1,2,李琳琳1,2,尹 卫1,王 乐1,王煜伟1, *,梁 健1,*(1.青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,青海西宁 810016;2.青海大学农牧学院,青海西宁 810016)摘 要:作为大蒜的主要活性成分之一,大蒜多糖具有增强免疫力、抗菌、抗病毒、抗氧化、保肝、降血脂、降血糖等多种生物活性,应用前景广阔。
大蒜多糖的提取方法以热水法、酶法和超声辅助法最为常见,大蒜多糖是由果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、半乳糖醛酸等组成的杂多糖,乙酰化、硒化和磷酸化等化学修饰可以增加大蒜多糖抗氧化等生物活性。
本文从大蒜多糖的提取、结构测定、化学修饰及生物活性的角度出发,系统总结了大蒜多糖的研究现状,未来应关注多糖结构与生物活性的构效关系,深入探讨大蒜多糖的功效机理,以期为大蒜多糖作为功能性产品的开发利用提供理论参考。
实训一大蒜多糖的提取与含量测定12学时一、实训目的1.掌握利用大蒜制备大蒜多糖的工艺流程。
2.掌握多糖制备的操作要点。
3.掌握大蒜多糖含量测定的方法。
二、实训原理大蒜多糖具有抗氧化、清除氧自由基、保护心肌的作用;易溶于热水,微溶于乙醇,不溶于丙酮、正丁醇。
利用热水浸提大蒜破碎组织液,得到大蒜粗多糖,使用乙醇沉淀大蒜多糖,经干燥后粉碎,用紫外-可见光分光光度法测定样品中大蒜多糖的含量。
三、仪器设备低速大容量离心机*1,鼓风干燥机*1,紫外可见分光光度计*1热水回流设备*1::铁架台,万能夹*2,弹簧夹*2,电热套*1/水浴锅(优选)*1/2,22#三角瓶/22#圆底烧瓶,22#球形冷凝管,乳胶管*2m(两段)浓缩设备:电热套,22#三角瓶/22#圆底烧瓶*1,蒸馏弯管*1,直形冷凝管*1,真空尾接管*1,三角瓶150mL*1案板*1,菜刀*1,电子天平*1,精密电子天平*1其它:烧杯100mL*1,玻璃棒*1,研钵*1,容量瓶100mL*1四、材料与试剂大蒜*50g4℃无水乙醇500mL:冰箱冷藏葡萄糖标准品0.01g:105 ℃干燥至恒重苯酚AR5g,硫酸AR50mL95%乙醇AR300mL蒸馏水*500mL凡士林少许(密封磨口)五、工艺流程大蒜瓣→破碎→热水回流浸提→离心→上清液→浓缩→乙醇沉淀→大蒜多糖→干燥→大蒜多糖成品六、操作步骤1.破碎:大蒜去皮,准确称取30g的蒜瓣,剁碎,用研钵将其研磨成蒜泥。
注意:研磨,不是捣碎,提高效率、降低噪音。
2.浸提:称取研磨液5g,按料液比为1:10的比例加入蒸馏水(即50mL),将加热回流装置安装好,置于电热套中80℃进行热水回流浸提2h。
注意:装置搭装顺序为自下而上、从左到右;冷凝水下进上出;打开冷凝水时必须要缓慢,关闭时切勿拧错水阀方向。
3.分离:浸提结束后,转移至离心瓶(两组合并或者分两批),平衡重量,在4000r/min,离心20min,得到上层清夜。
大蒜多糖提取工艺的研究进展及应用作者:李国强来源:《现代交际》2013年第10期[摘要]本文探讨了大蒜多糖提取方法,热水浸提萃取法、超声波辅助酶解提取、超临界萃取法的研究进展,进一步探究了大蒜多糖在医疗行业、食品加工、饲料喂养、种植业中的应用。
[关键词]大蒜多糖提取工艺应用[中图分类号]TQ461 [文献标识码]A [文章编号]1009-5349(2013)10-0096-01大蒜中含有丰富的营养成分,具有医疗、营养、食品等功效,但大蒜多糖是其中最主要的活性功能因子。
研究表明,大蒜多糖具有肝损伤的抗氧化,抗病毒,调解血脂,降低血糖,增强人体免疫力,病毒性心肌炎,改善CLL的结果,目前国内和国际对大蒜多糖的研究十分活跃。
大蒜多糖的研究具有积极和深远的影响和意义。
大蒜多糖是从大蒜中提取的有效活性成分,属于菊花果聚糖碳水化合物。
大蒜多糖可控制血脂,选择性增殖肠道双歧杆菌;能增强T,B淋巴细胞和巨噬细胞活性,抗氧化和抗病毒的作用护肝,增强在保健食品和医药中具有良好的发展前景。
本文主要介绍了一些研究大蒜多糖提取技术及其应用的最新进展。
一、大蒜多糖的提取工艺大蒜多糖功能活性因子提取工艺有很多种,目前主要使用的有:热水浸提萃取法、超声波浸提萃取法、超临界二氧化碳萃取法等。
(一)热水浸提萃取法大蒜多糖溶于水,微溶于乙醇,不溶于丙酮,丁醇。
压碎大蒜的组织液,通过热水,得到大蒜粗多糖,通过乙醇沉淀得到大蒜多糖,干燥,粉碎得纯物质。
大蒜瓣→破碎→热水回流浸提→离心→上清液→浓缩→乙醇沉淀→大蒜多糖→干燥→大蒜多糖成品破碎:大蒜经过去皮,使用研钵将其捣碎成泥。
浸提:按料液比为1:10的比例加入蒸馏水,将加热回流装置安装好,打开冷凝水时必须要缓慢。
分离:浸提结束后,转移至离心瓶,在4000r/min,离心20min,得到上层清夜。
浓缩:采用普通浓缩装置,用电热套进行热浓缩时可保持在微沸,电压约为100V。
醇析:向浓缩液中加入4℃无水乙醇,边加入边搅拌,至终点是乙醇浓度为70%,低温醇析6h。
专利名称:从黑大蒜提取物废液中提取大蒜多糖技术专利类型:发明专利
发明人:秦大伟,薛乃峰,赵保翠,于功明,刘先华
申请号:CN201210452030.7
申请日:20121113
公开号:CN103059153A
公开日:
20130424
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明为从黑大提取物废液中提取大蒜多糖技术,涉及食品、医药领域,是一种从黑大蒜中提取蒜氨酸后的废液中利用固定化酶技术提取大蒜多糖技术,本技术是通过在蒜氨酸废液中添加特定的用大孔树脂固定化的蛋白酶,脱除蛋白。
经过过滤得到大蒜多糖的溶液。
在本技术中,将酶用大孔树脂固定化,加大了酶与蛋白的接触面积,增加了酶解效率。
此外,酶固定化以后,在分离大蒜多糖的时候,就无需再进行灭酶工艺,而且固定化的酶还可以重复利用,降低了生产成本。
申请人:山东省巨野晨农天然产物有限公司,山东轻工业学院
地址:274900 山东省菏泽市巨野县人民路东段路北(济宁工业园区内)
国籍:CN
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专利名称:一种大蒜多糖的提取纯化工艺专利类型:发明专利
发明人:孟涛,宫恩超,宋鹤鹤,俞贵茂
申请号:CN201810362987.X
申请日:20180421
公开号:CN108676101A
公开日:
20181019
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种大蒜多糖的提取纯化工艺,包括以下步骤:(1)原料预处理;(2)打浆;(3)脱脂;(4)超声处理;(5)酶处理;(6)蒸馏;(7)大蒜多糖粗提液的获得;(8)离心处理;(9)离交;(10)一次浓缩;(11)二次浓缩;(12)干燥。
本发明采用特定的复合酶,并辅以超声波辅助酶解的方法,相比普通热提取法提取率显著提高,同时本发明将大蒜多糖提取液进行逐级的离子交换,可以有效提高了大蒜多糖的纯度,从而保证本发明在具有较高提取率同时,又能具有较高的提取纯度。
申请人:孟涛
地址:277000 山东省枣庄市薛城区泰山路福苑社区
国籍:CN
代理机构:青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:李浩成
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专利名称:一种壳聚糖固定化蒜氨酸酶及制备大蒜素方法专利类型:发明专利
发明人:王静,王成涛,曹雁平,孙宝国
申请号:CN200910236538.1
申请日:20091030
公开号:CN101696407A
公开日:
20100421
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种壳聚糖固定化蒜氨酸酶及制备大蒜素方法。
大蒜具有消炎、杀菌、抗病毒、降血压,抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、调节机体免疫力等多种功效,具有显著的保健作用和药用价值。
大蒜具有的这些功效和大蒜中的大蒜素有关。
大蒜素是大蒜中的蒜氨酸酶催化蒜氨酸水解得到的含硫有机化合物,其化学名称为二烯丙基硫代亚磺酸酯。
大蒜素具有接近生蒜的香气和辛辣味,纯天然,安全,健康,广泛应用于食品咸味添加剂、保健食品、食用调和油等。
本发明采用壳聚糖对蒜氨酸酶进行固定化,利用固定化蒜氨酸酶转化蒜氨酸生成大蒜素,提高蒜氨酸酶的稳定性和酶促反应速度,提高大蒜素得率。
申请人:北京工商大学
地址:100048 北京市海淀区阜成路33号
国籍:CN
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固定化蔗糖酶降解大蒜渣多糖的工艺研究作者:王慧慧任茂生李维静来源:《现代农业科技》2019年第01期摘要; ; 优化固定化蔗糖酶降解大蒜渣多糖的工艺条件,研究了pH值、温度和流速对酶活性的影响,并进行了正交试验。
然后研究不同使用次数后固定化蔗糖酶的活性,测定了酶解前后多糖的相对分子质量。
结果表明,固定化提高了蔗糖酶的稳定性和利用率,反应的最适pH 值、温度和流速分别为5.0、50 ℃和0.5 mL/min。
正交试验结果表明,在pH值5.0、温度60 ℃和流速0.5 mL/min的条件下,固定化酶的催化活力最大,降解后的低聚果糖相对分子质量约为5 000 Da。
关键词; ; 固定化;大蒜渣;蔗糖酶;降解中图分类号; ; TS219; ; ; ; 文献标识码; ; A; ; ; ; 文章编号; ;1007-5739(2019)01-0219-03Abstract; ; To optimize the technological conditions of the garlic dreg polysaccharide degradation by immobilized sucrase.The effects of pH value,temperature and flow rate on the activities of immobilized sucrase were studied,and the orthogonal experiment was executed.The activities of the immobilized sucrases with the different usage number were compared,and the relative molecular weights of the garlic dreg polysaccharides were measured before and after degradation.The immobilization increased the stability and efficiency of sucrose,and the optimal reaction pH value,temperature and flow rate were 5.0,50 ℃ and 0.5 mL/min,respectively.The orthogonal experiment showed that the activity of immobilized sucrose was the highest at pH 5.0,60 ℃ and 0.5 mL/min.The relative molecular weight of the degraded fructo-oligosaccharide was about 5 000 Da.Key words; ; immobilization;garlic dreg;sucrase;degradation大蒜渣是大蒜精油加工過程中形成的主要废弃物,由于其含有较多的硫化物,具有较浓烈的刺激性臭味,若不及时处理将会造成严重的环境污染[1]。
大蒜多糖的提取分离及含量测定分析索朗桑姆(西藏农牧学院林学系)摘 要 多糖是由单糖组成的天然高分子化合物。
到目前为止,已从自然界提出好几百种多糖。
经过近十多年的大量研究证明,多糖有许多生物活性,尤其有增强人体免疫能力和抗肿瘤的功能。
大蒜多糖是大蒜中的重要活性成分,本文主要进行了大蒜多糖提取及分离纯化,并对得到的多糖作了初步的结构与性质分析。
关键词 大蒜多糖 提取 分离纯化 大蒜(AlliumSativum L1)又名胡蒜、葫、独蒜、独头蒜,为百合科葱属植物。
由于它富含生物活性成分和营养成分(见表1),五千多年前,人们就利用大蒜防病。
《旧约全书—古埃及记》提到,古埃及人为了让奴隶身体强壮,就让他们多吃大蒜。
我国使用大蒜防病、治病也有悠久的历史,《别录》、《古今注》、《普济方》、《本草纲目》等均有记载,指出大蒜具有“通五脏、达诸窍、去寒湿、避邪恶、消臃肿、化积食”等功能。
现代医学研究表明,大蒜还具有很多全新的用途。
在当今返本求真、回归自然的国际食品潮流中,掀起了一股“大蒜热”。
1989年2月在西德召开了“大蒜的化学、药理和应用专题讨论会”;1990年8月在美国召开了“大蒜的保健意义及其成分”国际会议;1991年7月在美国又举行了一次“大蒜功能研讨会”,更加推动了这股世界热潮。
大蒜是我国民间常用的食物,实验已经证明它具有抗菌消炎、抗血凝、降血脂、预防动脉粥样硬化、保护肝功能和抑制肿瘤生长等多方面的药理作用。
1990年8月在美国召开的关于大蒜保健意义及其成分的首届会议证实了大蒜能在不同程度上防治结肠癌、膀胱癌、皮肤癌和肝癌。
大蒜多糖是蒜中有效成分,它集蒜的多种功能于一身。
在药理作用方面,临床显示大蒜多糖具有抗菌消炎、抗血凝、降血脂和预防动脉粥样硬化的功效。
有资料报道大蒜多糖还具有抗糖尿、保护肝功能、抗肿瘤和预防衰老等作用。
表1 新鲜磷茎每100g含有成分T ablel主成分Major(g)水分water蛋白protein脂肪Lipid碳水化合物Carbohydrate粗纤维Cellulose挥发油Volstileoil 7041401223017012微量成分Minor(mg)钙Ca磷P铁Fe硒(μg)Se锗G eS OD 5440144475141716核黄酸尼克酸抗坏血酸硫氨素010*********221 材料试剂及仪器111 材料及试剂大蒜(西藏)、015%草酸铵、乙醚、石油醚、冰醋酸,丙酮、氨水、95%乙醇、无水乙醇、浓硫酸、均为国产分析纯试剂,80%苯酚溶液、6%苯酚溶液(临用前以80%苯酚溶液配制)DE AE纤维素、NaC1,葡萄糖、木糖、半乳糖、树胶醛糖112 主要仪器日本岛津FIIR—8001红外光谱议、J E NW AY6305UV/VIS紫外分光光度计、调温电热套、8302型恒温水浴锅、分析电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)、DHG—9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海益恒实验仪器有限公司)、PHS—2C型酸度计、S JD28—5多功能电磨机、RE—52C 型旋转蒸发器(巩义市英峪予华仪器厂)。
大蒜多糖的酶法提取及其抗氧化性研究李朝阳;刘魁;韩忠宵;王未肖;李珊;郭利果【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)001【摘要】本实验研究了大蒜多糖的提取方法,结果表明,采用纤维素酶解可显著提高多糖提取率,在加酶量5%,pH值5.0,酶解温度50℃时,提取1.5h,提取率达20.54%.本实验进一步对大蒜多糖的抗氧化性进行了测定,并与大蒜素进行了对比.结果显示,大蒜多糖具有清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力,且在较高浓度下强于大蒜素,而大蒜素的还原能力则强于大蒜多糖.【总页数】4页(P117-120)【作者】李朝阳;刘魁;韩忠宵;王未肖;李珊;郭利果【作者单位】河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018;河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018;河北工业职业技术学院,河北,石家庄,050091;河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018;河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018;河北科技大学理学院化学系,河北,石家庄,050018【正文语种】中文【中图分类】TS201.23【相关文献】1.大蒜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究 [J], 李朝阳;李珊;刘魁;李景印;王未肖2.双酶法提取大蒜多糖工艺优化及其体外抗氧化活性研究 [J], 董玉玮;苗敬芝;李勇3.双酶法提取赤霞珠酿酒葡萄皮渣白藜芦醇工艺优化及抗氧化性研究 [J], 王彦平;娄芳慧;孙瑞琳;钱志伟;汤高奇4.海西黑枸杞多糖酶法提取工艺研究及其体外抗氧化性分析 [J], 梅丽;舒远;傅小红;李佳根;王洁雪;冉琪;刘雪琴;胡霞;徐坤5.超声波辅助酶法提取紫薯花青素及抗氧化性研究 [J], 张莹丽;邓瑞瑞;李伟民因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。