大蒜中大蒜素的提取及含量测定
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HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量
8生物技术世界 BIOTECHWORLD大蒜素(三硫二丙烯,C6H10S3)为大蒜油中主要的有效成分,是大蒜类保健食品的主要功效成分,同时也是最重要的评价指标。
目前大蒜素的含量测定有重量法、滴定法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法等[1～7],高效液相色谱法以其分析准确性高、误差小、方便、普及率高。
本文建立了大蒜素有效成分含量HPLC测定方法,为大蒜油肠溶软胶囊制剂的研究奠定了基础。
1 仪器与试剂A g i l e n t 1100型高效液相色谱仪,紫外检测器,A g i l e n t chemstation色谱工作站;B3200S-T型超声仪(必能信超声上海仪器有限公司);AB204-N型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
甲醇(色谱纯 美国天地(TEDIA)试剂公司);甲醇、正己烷、乙腈(分析纯 国药集团化学试剂有限公司 批号:2007122、20090721、20090411);超纯水(江苏康缘药业股份有限公司研究院提供)大蒜素对照品(规格:每支0.5ml,含量为88.4%,中国药品生物制品检定所批号:100384-200501) 大蒜油(吉安市华新天然植物有限公司 批号090323)2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)流动相:(甲醇:水=85%:15%)柱 温:30℃流 速:1ml/min在此条件下,大蒜油样品的HPLC色谱图中大蒜素吸收峰可与其他成分的吸收峰达到基线分离,适于大蒜素的含量测定。
2.2 检测波长的选择精密称取大蒜素对照品适量,加甲醇制成30.2μg/ml的对照品溶液。
以甲醇作为空白对照,在200～300nm波长范围扫描,检测其吸收曲线及最大吸收波长(λmax),结果发现其光谱图中最大吸收波长为210nm左右,表明大蒜素在210nm有最大吸收,但是靠近末端吸收,参照文献254nm。
保健食品中大蒜素的测定方法
保健食品中大蒜素的测定方法1.范围本方法规定了保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，C6H10S3）的测定方法。
本方法适用于以大蒜（油）为主要原料，制成的酒、胶囊、片剂中大蒜素的含量测定。
本方法最低检出浓度为0.0430mg/ml；取100mg试样，提前定容5.0ml时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。
本方法最佳线性范围：0.320－3.00μg。
2.原理根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。
3.试剂3.1 无水乙醇分析纯。
3.2 正己烷分析纯。
3.3 大蒜素标准溶液准确称量大蒜素标准品0.1000g，加入正己烷并定容至10mL，该标准溶液浓度为10.0mg/mL。
此溶液可在冰箱中保存七天。
该标准溶液以正己烷－无水乙醇（1：1）稀释10倍后作为标准使用液，标准使用液浓度1.0mg/mL。
4.仪器设备4.1 气相色谱仪：附氢火焰检测器（FID）。
4.2 数据处理机，或积分仪。
4.3 分析天平：万分之一。
4.4 超声清洗机。
4.5 离心机。
5.分析方法5.1 样品处理5.1.1 固体样品：准确称取0.0100g样品，加入2.5mL无水乙醇，密塞，超声提取70min，取出后冷却，加入约10mL正己烷（调节大蒜素含量约为1.0mg/ml左右），振摇，静置分层后取上清液进样。
5.1.2 液体样品：精密吸取20.0mL样品，于分液漏斗中，加入5mL正己烷振摇提取1min，静置（或离心）分层后，取上清液进样。
5.2 气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：玻璃色谱柱长：2米，内装担体：硅藻土/（Chromosorb W.AW）,（60~80目）；固定相：0.5%已二酸乙二醇酯（EGA）。
5.2.2 柱箱温度：90℃。
5.2.3 进样口温度：150℃。
5.2.4 鉴定器温度：150℃。
5.2.5 气体流速：氮气55mL/min，氢气50mL/min，空气500mL/min。
高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量韩贵芝;王文军;王芳【摘要】[目的]通过有机萃取法中萃取剂的选择、用量和萃取时间等条件的优化处理,建立大蒜中大蒜素含量测定的分析方法.[方法]将新鲜大蒜捣碎、酶解后,分别用乙醇和乙酸乙酯作为萃取剂萃取得到大蒜素溶液.用高效液相色谱仪分析样品中大蒜素的含量,确定最佳萃取剂;通过对不同时间段提取物检测对比,确定最佳萃取时间.[结果]以乙醇作为萃取剂提取大蒜素,大蒜素的平均浓度可以达到28.85μg/mL,乙酸乙酯提取组中的大蒜素平均浓度为13.24 μg/mL;经对比分析,乙醇提取大蒜素的最佳萃取时间为3.0h.[结论]乙醇作为实验室常用的化学试剂具有低毒、无污染、高效的提取效果,可为医药、食品等实验室对大蒜素的提取开发和利用提供参考.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)007【总页数】3页(P57-58,72)【关键词】乙醇;乙酸乙酯;大蒜素;萃取时间优化【作者】韩贵芝;王文军;王芳【作者单位】济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013【正文语种】中文【中图分类】S41-33大蒜为百合科葱属植物，在我国有2 000多年的种植历史。
大蒜属药食同源植物，其鳞茎中富含钙、铁、锌、锗等元素以及多种必需氨基酸[1-5]，具有较高的食用和药用价值，能有效防治高血压等疾病。
在传统医学中，大蒜也是一味中草药，能够激发免疫功能，诱生出干扰素，抑制生成肿瘤坏死因子，降低致癌物的作用，具有提高人体免疫功能的重要作用[6]。
大蒜中的有机含硫化合物——大蒜素，其化学名称是二烯丙基三硫化物(DATS)。
新鲜完整的大蒜中并不含大蒜素，只含有其前体物质——蒜氨酸。
蒜氨酸存于大蒜的细胞质中，但当大蒜的细胞破碎后，液泡内的内源蒜酶被释放并与蒜氨酸接触，经酶解生成大蒜素。
现代医学研究得出，大蒜素的药理作用包含以下几种：抗微生物、抗肿瘤、抗寄生虫、抗溃疡、抗衰老、降血压、降血脂、提高机体免疫力等[7-8]。
大蒜素提取方案
大蒜和大蒜素：1.1大蒜：大蒜属百合科葱属植物，世界各地均有栽培，大蒜作为民间药物广泛应用于世界各地。
大蒜是百合科葱属的鳞茎，含有大量丰富的营养物质。
据检测每百克大蒜中含蛋白质4.4g、脂肪0.2g、碳水化合物23g、粗纤维0. 7g、硫胺素0.24mg、核黄素0.03mg、尼克酸0.9mg以及多种人体必须得微量元素，除此之外大蒜中还含有人体几乎所有必需氨基酸。
1.2大蒜素大蒜素分子式：C6H10OS2化学名：二烯丙基硫代磺酸脂分子量：162.27CAS号：539-86-6性质：淡黄色油状液体。
沸点80-85℃（0.2kPa），相对密度 1.112（20/4℃），折光率1.561。
溶于乙醇、氯仿或乙醚。
水中溶解度2.5%(质量)(10℃)，其水溶液pH值为6.5，静置时有油状物沉淀物形成。
与乙醇，乙醚及苯可互溶。
对热碱不稳定，对酸稳定。
1.3大蒜素的形成及降解：大蒜的完整组织并无辣味，而仅含有活性成分的前体物质（蒜氨酸，一种非蛋白质氨基酸），它由85%的S-烯丙基蒜氨酸，2%的丙基蒜氨酸和13%的甲基蒜氨酸组成，在组织受损时，它与位于其他部位或细胞的蒜酶受力接触，同时在磷酸吡哆醛辅酶的参与下，生成一种复合物，再分解成具强烈的辛辣味的挥发性物质大蒜素，而大蒜素遇光、热容易降解成各种含硫化合物。
大蒜素的乙醇提取方案1.实验原料：大蒜（产地四川，市售）2．实验试剂（主干试剂）：乙醇、硅胶、微量大蒜素标准品3.实验仪器（主要仪器）：组织捣碎机、旋转蒸发仪、离心机、冷冻干燥机4.实验方法：4.1工艺流程：大蒜→去皮→洗净→捣碎→酶解→95%乙醇萃取→离心分离→上层清液→蒸发浓缩→浓缩液→薄层色谱定性检验→柱色谱洗脱→大蒜素稀溶液→蒸发浓缩→冷冻干燥→大蒜素产品4.2酶解条件对大蒜素得率的影响：研究不同的酶解温度、PH和时间对大蒜产率的影响4.3乙醇浓度对大蒜素得率的影响研究不同浓度的乙醇对大蒜素产率的影响4.3萃取条件对大蒜素得率的影响：研究不同的萃取温度，萃取时间和料比对大蒜素得率的影响4.4浓缩条件对大蒜素得率的影响：4.5正交试验优化：在上述单因素结果的基础上，采用正交试验综合以上条件对大蒜素得率的影响4.6色谱吸附剂和展开剂的选择：1、吸附剂的选择：薄层吸附色谱用的吸附剂常用的是氧化铝、硅胶、聚酰胺，薄层分配色谱的支持剂为硅藻土和纤维素。
2005大蒜中大蒜素等含硫化合物的GC_MS法测定_李雪
大蒜中大蒜素等含硫化合物的GC/M S 法测定李 雪 李英峰 刘必前(中国科学院化学研究所 北京 100080)摘 要 对大蒜中的有效成分)))大蒜素进行提取,并利用气相色谱-质谱联用仪对大蒜中的大蒜素进行测定。
确定大蒜素的成分主要包含二烯丙基一硫醚,二烯丙基二硫醚,二烯丙基三硫醚等在内的多种含硫化合物。
关键词 大蒜素 气相色谱-质谱联用法 乙醇提取法引言大蒜(Alium sativum L)是百合科葱属的多年生草本植物1,以鳞茎、花茎、嫩叶为主要产品。
我国是大蒜的主要生产国,约占世界总产量的1/4,鲜蒜及其加工制品除供国内消费外,还大量出口日本、东南亚等国家2。
我国人民食用大蒜主要作为调味品,大蒜的医药保健功效远远没有得到有效的利用,造成大量的浪费。
大蒜作为一种高效中草药绿色添加剂可应用于饲料工业,在畜牧养殖业中有重要作用,可增加饲料的适口性,有效促进畜禽地生长3;可提高生产效益,降低成本;改善畜牧产品品质,保护环境。
大蒜在医药领域具有抗菌消炎作用,能够增强肝脏解毒功能4,具有防治心血管疾病5,防治糖尿病的功能,能够起到防癌抗癌作用,有抗衰老的作用6。
由于大蒜具有较高的营养保健功效,使得提取以及测定大蒜中有效成分的工作显得尤为重要。
自从1840年德国化学家Theodor Wertheim 开始大蒜成分的研究以来,全世界的化学及医药科技工作者已弄清大蒜中的许多化学成分及其降解产物。
大蒜的食疗价值,主要是大蒜中的有效成分)))大蒜素在起作用。
大蒜素并非单一组分组成,它是由20多种易挥发物组成,主要有大蒜新素(C 6H 10O 2S),大蒜辣素(C 6H 10OS 2)及多种烯丙基,丙基,甲基组成的硫醚化合物7。
据生物化学分析证明,新鲜大蒜中并不含有大蒜素,而含有它的前体)))蒜氨酸。
蒜氨酸以稳定无臭的形式与多糖类结合在一起存在于大蒜中,蒜氨酸和蒜氨酸酶分别存在于大蒜细胞组织的不同部位,蒜氨酸及亚砜类化合物存在于细胞溶胶中,而蒜氨酸酶存在于液泡中。
药用大蒜油中大蒜素的含量测定
环境保护监测
大蒜油中大蒜素的含量可以作为环境监测的一项指标，通过对其含量的测定，可以评估环境污染程度 和土壤质量状况。
06
结论
研究成果总结
成功建立了高效液相色谱法测定药用大 蒜油中大蒜素含量的方法，该方法具有 操作简便、准确度高、重现性好等优点。
通过对不同产地、不同品种的药用大蒜油进 行测定，发现大蒜素含量存在一定差异，其 中以某地产药用大蒜油的大蒜素含量最高。
药用大蒜油中大蒜素的含量 测定
目录
• 引言 • 大蒜油中大蒜素的提取方法 • 大蒜油中大蒜素的含量测定方法 • 大蒜油中大蒜素含量的影响因素
目录
• 大蒜油中大蒜素含量测定的实际 应用
• 结论
01
引言
目的和背景
目的
准确测定药用大蒜油中大蒜素的含量，为药品质量控制和临床应用提供依据。
背景
大蒜素是大蒜中的主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。药 用大蒜油是大蒜素的重要来源之一，其含量直接影响药品质量和治疗效果。因此 ，对药用大蒜油中大蒜素的含量进行准确测定具有重要意义。
相关工作
已有研究
已有研究表明，不同产地、品种、加工方法等对药用大蒜油中大蒜素的含量有一定影响。 因此，需要建立一种准确、可靠的测定方法，以实现对药用大蒜油中大蒜素含量的有效
控制。
研究现状
目前，关于药用大蒜油中大蒜素含量测定的研究主要集中在提取方法、纯化技术、检测 手段等方面。其中，高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）是 最常用的检测方法。然而，这些方法在操作过程、仪器设备等方面存在一定的局限性，
提取时间也是影响大蒜素提取效率的重要因素。较短的提取时间可能导致提取不完全，而长时间的提取则可能导致大 蒜素的结构发生变化。因此，需要根据实际情况选择合适的提取时间。
大蒜油中大蒜素的含量可以作为环境监测的一项指标，通过对其含量的测定，可以评估环境污染程度 和土壤质量状况。
06
结论
研究成果总结
成功建立了高效液相色谱法测定药用大 蒜油中大蒜素含量的方法，该方法具有 操作简便、准确度高、重现性好等优点。
通过对不同产地、不同品种的药用大蒜油进 行测定，发现大蒜素含量存在一定差异，其 中以某地产药用大蒜油的大蒜素含量最高。
药用大蒜油中大蒜素的含量 测定
目录
• 引言 • 大蒜油中大蒜素的提取方法 • 大蒜油中大蒜素的含量测定方法 • 大蒜油中大蒜素含量的影响因素
目录
• 大蒜油中大蒜素含量测定的实际 应用
• 结论
01
引言
目的和背景
目的
准确测定药用大蒜油中大蒜素的含量，为药品质量控制和临床应用提供依据。
背景
大蒜素是大蒜中的主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。药 用大蒜油是大蒜素的重要来源之一，其含量直接影响药品质量和治疗效果。因此 ，对药用大蒜油中大蒜素的含量进行准确测定具有重要意义。
相关工作
已有研究
已有研究表明，不同产地、品种、加工方法等对药用大蒜油中大蒜素的含量有一定影响。 因此，需要建立一种准确、可靠的测定方法，以实现对药用大蒜油中大蒜素含量的有效
控制。
研究现状
目前，关于药用大蒜油中大蒜素含量测定的研究主要集中在提取方法、纯化技术、检测 手段等方面。其中，高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）是 最常用的检测方法。然而，这些方法在操作过程、仪器设备等方面存在一定的局限性，
提取时间也是影响大蒜素提取效率的重要因素。较短的提取时间可能导致提取不完全，而长时间的提取则可能导致大 蒜素的结构发生变化。因此，需要根据实际情况选择合适的提取时间。
保健食品中大蒜素含量的测定方法
保健食品中大蒜素含量的测定方法1. 试剂1.1 无水乙醇分析纯。
1.2 正己烷分析纯。
1.3 大蒜素标准溶液准确称量大蒜素标准品0.1000g，加入正己烷并定容至10mL，该标准溶液浓度为10.0mg/mL。
该标准溶液以正己烷－无水乙醇（1：1）稀释10倍后作为标准使用液，标准使用液浓度1.0mg/mL。
2. 仪器设备2.1 气相色谱仪：附氢火焰检测器（FID）。
2.2 超声波清洗器。
2.3 离心机。
3. 分析步骤3.1 样品处理3.1.1 固体样品：准确称取一定量样品，加入2.5mL无水乙醇后超声提取70min，取出后冷却，加入约10mL正己烷后振摇，静置分层后取上清液进样。
3.1.2 液体样品：精密吸取一定量样品于分液漏斗中，加入5mL正己烷振摇提取1min，静置（或离心）分层后，取上清液进样。
3.2 气相色谱参考条件3.2.1 色谱柱 0.5%EGA/Chromosorb W.AW（60~80目）2m。
3.2.2 柱温：90℃。
3.2.3 进样口温度：150℃。
3.2.4 气体流速：氮气55mL/min，氢气50mL/min，空气500mL/min。
3.2.5 进样量：1μL。
3.2.6 色谱分析：量取1μL标准溶液及样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。
4. 结果4.1 计算X = C×h1/h2×V/m式中：X－样品中大蒜素的含量，mg/100g；h1－样品峰高或峰面积；C－标准溶液浓度，mg/mL；V－样品定容体积，mL；h2－标准溶液峰高或峰面积；m－试样量，g。
4.2 精密度和准确度对本方法进行精密度和准确度试验，方法的回收率在95.8%~113.7%之间，相对标准偏差2.1%。
最低检出浓度0.043mg/mL。
大蒜素制取
大蒜素制取
大蒜素是一种天然有机硫化物，可在大蒜中找到。
它具有多种
药理活性，包括抗菌、抗炎、抗氧化和抗肿瘤等作用，因此在医药
和保健领域被广泛应用。
制取大蒜素的方法有多种，下面是其中一种常见的制备过程：
1. 采集大蒜：选择新鲜、完整的大蒜作为原料。
大蒜的品种和
产地也会影响大蒜素的含量和质量。
2. 剥皮和洗净：将大蒜去掉外皮，然后用清水彻底洗净，以去
除表面的杂质。
3. 粉碎和浸泡：将洗净的大蒜切碎或磨成泥状，然后将其放入
适量的有机溶剂（如乙醇或乙酸乙酯）中浸泡，使大蒜素溶解于溶
剂中。
4. 过滤和浓缩：将浸泡的大蒜溶液过滤，去除固体残渣。
然后
使用旋转蒸发器或真空浓缩器将溶液中的有机溶剂去除，得到浓缩
的大蒜素提取物。
5. 结晶和干燥：将浓缩的大蒜素提取物置于冷藏条件下，使其
结晶。
然后将结晶的大蒜素用真空干燥器或其他干燥方法进行干燥，以去除余留的溶剂和水分，得到纯净的大蒜素。
6. 检测和质量控制：对制备的大蒜素进行质量检测，包括检测
其化学成分和纯度，以确保其符合相关标准和规定。
需要注意的是，制备大蒜素的方法可以根据具体的应用需求和
工艺要求进行调整和改进。
此外，大蒜素的制备过程需要在严格的卫生条件下进行，以确保提取物的纯度和质量。
大蒜中大蒜素提取工艺研究
正 交设 计 Ｌ。３） 】 ’ 结果 表 明 ， （ 大蒜 素 最 佳 提取
条件为 ： １２ １３ ２１ １ 即酶 解时 间 ３ ｍｎ 酶 Ａ Ｂ Ｃ ＤＥ ＦＧ ， ０ ｉ、 解温度 ４ ℃、 ５ 酶解 ｐ ６ 料液 比 ｌ： ｍ 、 Ｈ、 ｇ ４ ｌ萃取时间 ６ ｍ ｎ 萃取温度 ３ ℃ ， ０ ｉ、 Ｏ 乙醇浓度 ９ ％。由极差分 ５ 析结果表 明， 各因素对实验结果影响程度依次为 ： Ａ＞Ｄ＞Ｆ＞Ｅ＞Ｂ＞Ｇ＞Ｃ。对 正 交 试 验 进 行 方差 分析（ ２ 可知 ， 个 因素 中， 酶解时 间） Ｆ 表 ） 七 Ａ（ 、
Ｄ＞ Ｅ＞ Ｇ＞ ， Ｆ＞ Ｂ＞ Ｃ 即酶解时间 ＞ 料液比 ＞ 萃取 温度 ＞萃 取 时 间 ＞酶 解 温 度 ＞乙 醇 浓 度 ＞酶 解 ｐ ６其 中 ， 时间 、 Ｈ ， 酶解 萃取温度 、 液 比对 大蒜素 提 料 取率影响最显著。优化所得 的大蒜素提取最佳工 艺为 ： 解时 间 ３ ｒ ｎ 酶解温度 ４ ℃ 、 酶 ０ ｉ、 ａ ５ 酶解 ｐ ６０ Ｈ ．、 料液比 ｌ：ｍ 、 ｇ４ ｌ 萃取时间 ６ｍｎ萃取温度 ３℃ ， ０ ｉ、 ０ 乙 醇浓度 ９％ 。为 了验证此优选 方案的可行性 ， 重 ５ 又 复３ ， 次 结果稳定 ， 大蒜素平均提取率达到 ２９％ 。 ．１ ｏ 证 明优化 的提 取 工艺 可 以更 有效 的提取 大蒜 中 的 大蒜素 ， 且此工艺操作简单， 合理可行 ， 为进一步规 模化生产 提供依据 。
求高。由此 ， 文采用提取率高、 本 设备简单 为 提 取剂 ， 以 采用 正交 设计 法优 化大 蒜 素 提 取 工 艺 ， 以期 提 高 大蒜 中大
・ 基金项 目： 成宁学院校级课 题（ Ｙｌ０ ６ Ｚ ｌ ６ Ｋ １ ７ 、Ｘｌ０ ）
大蒜SOD的提取与分离
大蒜SOD的提取与分离一、实验目的：1、熟悉大蒜SOD的提取与分离方法2、掌握SOD活力测定—NBT光化还原法的原理3 熟悉G-250法对蛋白浓度的测定以及PAGE电泳的操作方法二、实验的原理1、通过研磨和高速离心的方法粗提大蒜SOD,再经过丙酮沉淀得到SOD酶液2、由于SOD是含金属辅基的酶，通过氮蓝四（NBT）光还原法测定酶的活性。
NBT在蛋氨酸和核黄素存在的条件下，照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙，在560nm处有最大光吸收。
SOD能抑制NBT的光化还原，其抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。
3考马斯亮蓝G250与蛋白质通过疏水结合作用后，变为蓝色，在波长为595nm处测得吸光度，用EXCEL软件得出标准曲线，从而得到待测的蛋白浓度。
三、实验的材料和试剂（1）新鲜蒜瓣；（2）磷酸buffer（0.05mol/L，pH7.8）；（3）氯仿：无水乙醇（3:5，V/V）；（4）丙酮，冷却至4~10℃四、实验步骤1、SOD的提取，15min）3五、结果分析1、SOD活力测定—NBT光化还原法试剂：（1）0.026mol/L蛋氨酸（Met）溶液；（2）75×10-5mol/L氯化硝基四氮唑蓝（NBT）溶液；（3）1.0μmol/LEDTA及2×10-5mol/L核黄素溶液。
表1 反应各系统中试剂用量（ml）的2盏20W日光灯下照光15分钟，然后立即遮光停止反应，于560nm以第一号杯调零，测定光密度。
以2、3号杯液光密度的平均值作为还原率100%，分别计算不同酶液量的各反应系统中抑制NBT光还原的相对百分率，作出二者相关曲线（以酶液用量为横坐标，以抑制NBT光还原相对百分率为纵坐标），找出50%抑制的酶液量（μl）作为一个酶活单位。
结果计算：SOD活力按下式计算：V×1000×60A= ————————B×W×T式中A：酶活力（酶活力单位·g –1FW·h–1）；V：酶提取液体积（ml）；B：一个酶活单位的酶液量（μl）；W：样品鲜重（g）；T：反应时间（min）。
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大蒜中大蒜素的提取及含量测定摘要：大蒜素是大蒜中的主要活性成分，是大蒜破碎后，蒜氨酸在蒜酶催化作用下产生的一种具有生物活性的有机硫化物，具有抗菌消炎、降血压、降血脂、防癌等作用，可用于多种疾病的防治，在临床上的应用也越来越广泛，作为药物或保健品开发具有广阔前景[1]。
大蒜素的提取方法可以分为三类：水蒸气蒸馏法、溶剂萃取及超临界流体萃取[2-3]，但是采用水蒸气蒸馏得到的提取物中大蒜素含量很低，导致提取物的活性很低。
超临界萃取法提取率高、品质好，但生产成本高、设备复杂、操作技术难度大[4]。
综合考虑在有机溶剂萃取法的基础上，以乙醇为提取剂萃取大蒜素，研究确定了其最佳工艺参数。
用硫酸钡沉淀法测定大蒜素的含量。
关键词：大蒜素、提取、含量测定Extraction and Determination of allicin in garlic(Yunnan Agricultural University College of Basic Science andInformation Engineer,Kunming 650201)ABSTRACT：Allicin is the main active ingredient in garlic,crushed garlic alliin in the garlic enzyme catalysis of a biologically active organic sulfides,With antibacterial anti-inflammatory role in lowering blood pressure, lowering blood pressure, anti-cancer,Can be used for the prevention and treatment of many diseases,Clinical application is more and more widely, and has broad prospects for development as drugs or health products .Allicin extraction methods can be divided into three categories:Steam distillation, solvent extraction and supercritical fluid extraction method,However, the extract obtained by steam distillation and the allicin content is low, resulting in low activity of the extracts.Supercritical extraction extraction rate, the quality is good, but the high cost of production, complex equipment operation prehensive consideration on the basis of the organic solvent extraction, ethanol extraction solvent extraction of allicin, research to determine the optimum parameters. Determination of allicin content of barium sulfate precipitation method.Key words: Allicin;Extract ;Content ;determination大蒜中大蒜素的提取含量及测定1 引言研究意义：通过以大蒜为原料来提取大蒜素，大蒜素的提取方法可以分为三类：水蒸气蒸馏法、溶剂萃取及超临界流体萃取[2-3]，但是采用水蒸气蒸馏得到的提取物中大蒜素含量很低，导致提取物的活性很低。
超临界萃取法提取率高、品质好，但生产成本高、设备复杂、操作技术难度大[4]。
综合考虑在有机溶剂萃取法的基础上，以乙醇为提取剂萃取大蒜素，研究确定了其最佳工艺参数。
用定硫法测定大蒜素的含量。
大蒜为单叶子植物百合科葱属植物蒜的鳞茎，含有丰富的营养物质，对冠心病、高血压、动脉粥样硬化症等有防止作用[5]。
大蒜素[6](Allimin)又称大蒜油,化学名称为2-丙稀基硫代亚磺酸稀丙脂。
结构式CH2=CH-CH2-S-S-S-CH2-CH=CH2，分子量为178。
是从大蒜球茎中分离出的一种化合物,具有强烈的辛辣刺激味。
大蒜素不稳定，特别是在热和碱性环境下易分解。
大蒜素微溶于水，易容于醇、醚等有机溶剂。
目前大蒜素具有广泛的应用，有医疗保健作用，大蒜素具有广谱抗菌作用[7]，大蒜素在食品保鲜中的应用,大蒜素对多种细菌、真菌、病毒均具有杀灭和抑制作用,被称为“天然广谱植物杀菌素”。
大蒜素在饲料添加剂中的应用，近年来,在畜牧及水产养殖业中大蒜素被开发利用的进展较快,估计90%以上的加工产品用作兽用药物或直接作为饲料添加剂[8]。
前人研究进展：水蒸气蒸馏法：其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥发性的有机物质中(大蒜油具有一定挥发性),使该有机物在低于100℃的温度下随水蒸气一起蒸馏出来,再经进一步分离获得较纯物质。
本法的一般工艺流程为:大蒜去皮→洗净→加水捣碎→酶解→水蒸气蒸馏→油水分离→大蒜油[9]。
孙淑爱[10]等探讨了蒸馏法提取大蒜油的适宜条件。
按照大蒜油的生产步骤和影响因素,选择大蒜的破碎粒径、蒜酶激活剂—亚铁离子的浓度、发酵温度和蒸馏提取时间这4个因素,在三水平下对大蒜油的产率进行比较。
结果表明,大蒜的破碎粒径为0.2 mm、亚铁离子的浓度为10 mmol/L、发酵温度在33℃、蒸馏提取时间为120 min时,大蒜油的产率最高为0.49%。
水蒸气蒸馏法具有设备简单、成本低、稳定性好等特点,是最常用的方法之一。
但是因发酵和蒸馏温度相对较高,蒜氨酸酶的活性下降,大蒜素有损失,使出油率较低,而且所得的大蒜油有一股熟味,不够清新。
溶剂萃取法:大蒜油微溶于水,易溶于乙醇、苯、乙醚等有机溶剂,利用这一性质可以用有机溶剂将大蒜油浸提出来。
该法得到的大蒜油与水蒸气蒸馏获得的大蒜油没有明显的区别。
有机溶剂的选择是关键,要求该溶剂对大蒜油的溶解性好,浸提结束后易于分离,沸点差异显著,不含其它不良气味和溶剂残留。
溶剂法的一般流程为:大蒜去皮→洗净→捣碎→酶解→溶剂萃取→蒸馏分离→回收溶剂→大蒜油。
李瑜[11]等以乙醇为溶剂,研究了溶剂法提取大蒜油的工艺,确定的醇提最佳工艺条件为: 30℃酶解11 min,乙醇浸提时间1.0 h,浸提温度24℃,V(乙醇):m(大蒜)=4 mL: 1 g,大蒜油提取率可达75.03%。
超临界CO2萃取法：超临界流体萃取技术,是一种新型的萃取分离技术。
该技术是利用流体在临界点处温度和压力的微小变化会引起流体的溶解能力有很大变化的基础上,利用流体在高压低温对大部分物质具有较大的溶解能力的性质,提取原料中的有效成分,然后在较低的压力下进行分离,从而实现混合物的分离或提纯。
该技术因具有高效节能、工艺简单、安全可靠等优点而应用于化工、食品和医药等部门,而食品、医药工艺中常以无毒、价格便宜的CO2作为萃取剂。
超临界CO2萃取大蒜油一般流程为:大蒜去皮→洗净→捣碎→装填萃取柱→密封→超临界萃取→降压→大蒜油。
王霞[12]等研究了超临界CO2萃取大蒜油的工艺。
在对萃取压力、温度、时间、流量单因素分析的基础上,对温度、压力、流量、时间四因素进行了正交试验,确定了超临界萃取的最佳工艺参数为:萃取温度35℃,萃取压力15 Mpa,流量30 kg/h,萃取时间2.5 h。
2 材料与方法2.4实验过程：将大蒜瓣捣碎匀浆，调节PH值，加热，抽滤去杂，再次调节PH值，离心分离，取其上清液，加入体积分数95%乙醇萃取，用旋转蒸发仪减压蒸馏，得到浓缩大蒜素溶液。
2.5产品分析：采用定硫法测定大蒜素含量。
3 大蒜素的研究进展目前,人们已用多种方法提取大蒜素,但如何提高得率并在提取过程中尽量保留有效成分,如何提高大蒜素的稳定性,有待于进一步研究。
大蒜素具有多方面的药理作用和生物活性,但它的作用机制和是否有新的活性,仍是我们在相当长的一段时间里需要研究和阐明的问题。
目前,人们已经开发出许多关于大蒜素应用的方法和产品,但是存在品种过于单一、方法过于简单、模糊开发、有效成分不够明确等问题,因而对大蒜素的应用科技含量提升空间大,需要结合多学科不断深入的理论研究成果及现代制药工艺和技术,开发出一系列科技含量高、经济和社会效益显著的新产品,造福人类。
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