微柱凝胶技术在直接抗球蛋白试验中的应用

  • 格式:pdf
  • 大小:163.31 KB
  • 文档页数:2

8 现代检验医学杂志第26卷第4期2011年7月JModLabMed,Vo1.26,No.4,July.2011 hamsters:apoptotic cell death as a possible mecha- nism of hepatic remodeling by congestionD].Pathol Res Pract,2002,198(4):291—298. [22]Harriman JF,Liu XL,Aleo MD,et a1.Endoplasmic reticulum Ca。 signaling and ealpains mediate renal cell death口].Cell Death Differ,2002,9(7):734— 741. [23]Hein S,Arnon E,Kostin S,et a1.Progression from compensated hypertrophy to failure in the pressure- overloaded human heart:structural deterioration and compensatory mechanisms[J].Circulation, 2003,107(7):984—991. [24]Fischer S,Maclean AA,Liu M,et a1.Dynamic cha— nges in apoptotic and necrotic cell death correlate with severity of ischemia-reperfusion injury in lung transplantati0n[J].Am J Respir Crit Care Med, 2000,162(5):1932—1939. [253原春辉,刘永锋,李桂臣,等.外源性腺苷三磷酸对移 植胰腺再灌注损伤保护作用的实验研究[J].消化 外科杂志,2004,3(4):274—277. Yuan CH,Liu YF,Li GC,et a1.Protective effects of exogenous adenosine triphosphate against the reper— fusion injury after pancreaticoduodenal transplanta— tion in rats[J].J Diges Sur,2004,3(4):274-277. [26]王安喜,冯善章,章冠东,等.精索静脉曲张患者的精 子运动速度和ATP含量的比较研究[J].临床泌尿 外科杂志,1998,13(7):292—294. Wang AX,Feng SZ,Zhang GD,et a1.Journal of Cli— nical Urology,1998,13(7):292-294. [27] 曹兴午.牙周病与男性不育症[J].中国性科学, 2003,12(增刊):76—78. Cao XW.Chinese Journal of Human Sexuality,2O 03,12(supp1):76-78. [283 Chautan M,Chazal G,Cecconi F,et a1.Interdigital cell death can occur through a necrotic and caspase— independent pathway[J].Curr Biol,1999,9(17): 967—970. [29]Sapunar D,Vilovic K,England M,et a1.Morpholog- ical diversity of dying ceils during regression of the human tail口].Ann Anat,2001,183(3):217-222. [3o3 Herceg Z。Wang ZQ.Functions of poly(ADP2 ri— bose)polymerase(PARP)in DNA repair,genomic integrity and cell death[J].Mutat Res。2001,477 (122):97-110. [31]Ryoke T.Gu Y,Ikeda Y,et a1.Apoptosis and OD ̄P.O- sis in the early progression of left ventricular dys— function in the cardiomyopathic hamster口].Basic Res Cardiol,2002,97(1):65—75. [32]Takeda M,Shirato l,Kobayashi M,et a1.Hydrogen peroxide induces necrosis,apoptosis,oneosis and apoptotic oneosis of mouse terminal proximal straight tubule cellsD].Nephron,1999,81(2);234— 238. [33]Xu Y,Huang S,Liu ZG,et a1.Poly(ADP—ribose) polymerase-1 signaling to mitochondria in necrotic cell death requires RIP1/TRAF2一mediated JNK1 activation[J].J Biol Chem,2006,281(13):8788— 8795. [343 Liu x。Schnellmann RG.Calpain mediates progres— sive plasma membrane permeability and proteolysis 0f cyt0skelet0n—ass0ciated paxillin,talin,and vin— culin during renal cell death[J].J Pharmacol Exp Ther,2003,304(1):63—7O. f 35]Liu X,Van Vleet T,Sehnellmann R・G.The role of calpain in oncotic cell death[J].Annu Rev Pharma— col Toxicol,2004(44):349—370. [36]Cummings BS,McHowat J,Schnellmann RG.Phos— pholipase A2s in cell injury and death[J].J Pharma— col Exp Ther,2000,294(3):793-799. [37]Mills EM,Xu D,Fergusson MM,et a1.Regulation of cellular oneosis by uncoupling protein 2D].J Biol Chem,2002,277(3O):27385-27392. [38]Levin S.Apoptosis,necrosis,or oncosis.. ̄vhat is yo- ur diagnosis?A report from the Cell Death Nomen— clature Committee of the Society of Toxicologic Pathologists[J].Toxicol Sci,1998,41(2):155-156. [39]曹兴午.睾丸生精障碍的靶区、靶细胞和靶点[J].中 国男科学杂志,2008,22(7):58—60. Cao XW.Chines Journal of Andrology,2008,22(7): 56—6O. [4O]曹兴午,曹育爱.微生物感染与生精细胞凋亡和胀亡 [J].中国男科学杂志,2009,23(5);69—72. Cao XW。Cao YA.Chinese Journal of Andrology, 2009,23(5):69—72. 收稿E1期{2011-06—26 修回13期l2010—01—28 

微柱凝胶技术在直接抗球蛋白试验中的应用 钟月华 (广西壮族自治区民族医院,南宁530001) 摘要:目的通过微柱特异性凝肢和传统试管法在直接抗球蛋白试验中的比较,探讨确认微柱凝胶技术直接抗人球蛋白 试验的可靠准确性。方法 采用试管法和微柱特异性胶试剂对56例血液标本进行直接抗球蛋白试验,微柱法阳性32例, 试管法阳性3O例。结果微柱法直接抗球蛋白试验阳性:抗一IgG13例;抗一IgG。抗一IgA同时存在1例{抗-IgG,抗一IgA,抗一 IgM同时存在2例;抗一IgG,C3d同时存在1O例;C3d 6例;C3c 0例。试管法直接抗球蛋白试验阳性:抗-IgG 14例,抗-IgG, C3d 同时存在10例;C3d 6例。结论 微枉法操作简便结果可靠,值得在临床推广应用。 关键词:抗一IgG;抗一IgA;抗一IgM;补体C3c;补体C3d , 

作者简介:钟月华,女,副主任技师,输血科主任,研究方向 各种疾病与输血相关性。 现代检验医学杂志第26卷第4期2011年7月 J Mod Lab Med・Vo1.26・No.4,July.2011 9 中图分类号:Q503文献标志码:A文章编号:1671—7414(2011)04—008—02 doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2011.04.002 近年来,微柱凝胶技术已广泛应用于红细胞血型血清 学临床常规检验中,并正逐渐替代应用多年的血凝试 验口.2]。微柱凝胶免疫检测试剂分中性胶试剂、特异性胶试 剂和抗球蛋白胶试剂。抗球蛋白试验是免疫血液学经典、准 确的检测不完全抗体的方法[a]。直接抗球蛋白试验是检测 红细胞上有无不完全抗体。本文应用微柱法特异性胶试剂 和传统试管法对本院56例住院患者进行直接抗球蛋白试 验,现报道如下: 1材料和方法 1.1 患者资料本院2010年1~6月住院患者56例,女 性25例,男性31例,年龄23 ̄78岁,其中自身免疫性溶血 27例,骨髓瘤4例,肾病12例,肿瘤13例。 1.2仪器和试剂DiaMed—ID保温反应机,微柱凝胶技术 专用离心机,DiaMed—ID直接抗球蛋白筛查卡(批号 50830.52.03)来自达亚美公司;试管法抗球蛋白试剂(批号 20090828)来自上海生物医药有限公司。 1.3方法微柱法直接抗球蛋白试验操作:①患者EDTA 抗凝血。②撕开铝箔加5O l 0.8 ml/dl患者红细胞悬液到 每个微孔中,离心10 rain,判读抗-IgG,抗一IgA,抗一IgM,补 体C3c和C3d结果。③结果判断:凝聚细胞在表面或凝胶 中为阳性,在底部为阴性。试管法直接抗球蛋白试验的操作 详见《输血技术学》[|]。 1.4 统计学分析微柱法和试管法符合率的比较采用 检验,以P<O.05为差异具有统计学显著性意义。 2结果 2.1 32例阳性标本中,自身免疫性溶血2O例,肾病6例, 骨髓瘤1例,肿瘤5例。 2.2将32例阳性标本进行二法比较,见表1。 表1 32例阳性标本微柱法、试管法 直接抗球蛋白试验结果比较 ( )] 3讨论直接抗球蛋白试验阳性常见的原因是自身免疫 溶血性贫血,温抗体型自身免疫性贫血通常由IgG抗体引 起,而冷抗体型自身免疫性贫血通常由IgM抗体引起,补 体因IgM抗体的影响而结合到红细胞膜上 ]。冷抗体疾病 通常是互补抗体,IgM和/或IgA同时存在,IgG抗体也可 以检测出,目前直接抗球蛋白试验试管法常规只做抗一IgG, 抗一C3d,忽视了抗一IgA,抗一IgM,C3c的检测。异体抗体和自 身抗体很少单独以IgA出现,一般IgA和IgG的自身抗体 一起出现[6]。本文微柱法中抗一IgA伴抗一IgG同时出现为 3.1 ,抗一IgA,抗一IgM伴抗一IgG同时出现为6.3 。试管 法30例阳性中有2例在单特异性抗球蛋自试剂呈阴性反 应,在多特异性抗球蛋白试剂呈阳性反应,可能是多特异性 抗球蛋白试剂较单特异性抗球蛋白试剂含有更为广谱的抗 血清成分。32例微柱法阳性标本中,试管法检出率为 93.7 ,两法相比差异无统计学意义。C3c和C3d各自或共 同沉积对肾脏都有损害作用,共同沉积的损害高于各自单 纯沉积损害[7]。本文未检测出1例C3c阳性,可能与检测的 例数、病种,特别是肾脏疾病方面的病例少有关。 特异性胶试剂在抗球蛋白试验中能同时检测抗一IgG, 抗一IgA,抗一IgM,C3c和C3d,弥补了日常试管法仅检测抗一 IgG,C3d的不足。微柱凝胶免疫反应与试管法凝集试验一 样简便却较试管法敏感性高,且标准化,结果直观易判断, 无需镜检,实验结果可以长期保存。微柱凝集实验作为一种 免疫学检验新技术,其所需标本量少、操作规范、简单快捷、 省去洗涤步骤减少试验时间、能避免人为误差。微柱特异性 胶试剂成本较高,目前在临床试验中做常规检测推广特别 是基层医院可能有些困难,但在一些特殊病例中应用,对疾 病的诊断治疗具有重要意义. 参考文献: [1] Bromilow IM.The use of the monodonal antibodies for blood typing and antibody screening by the gel teat[J].Vax Sang,1996,(7O);49. [2]De Castilho,Pellegrino J,Bechelli AP,et a1.Evalua— tion of recent techniques for detection of blood cell antibodies in sera of reference samples,patients, pregnant woman,and blood clonors[J].Clin Lab Anal,l996,10(5):250—256. [33李 勇,马学严.实用血液免疫学血型理论和实验技 术[M].北京:科学出版社,2006:565—568. Li Y・Ma XY.Practical blood type theory of blood immunology and experimental techniques[M].Bei— jing:Science Press,2006:565-568. [4]王培华.输血技术学[M].2版.北京:人民卫生出版 社,2003:226—227. Wang PH.Blood transfusion study[M].2nd.Edition. Beijing:People’S Medical Publishing House,2003: 226—227. [5]魏 晴,涂同涛,周金安,等.直接抗球蛋白试验在临 床中的应用D].中国输血杂志,2007,21(7):537. Wei Q,Tu TT,Zhou JA,et a1.Direct antiglobulin test in the clinical application[J].Chinese Journal of Blood Transfusion,2007,21(7):537. [6]林玛利.输血医学[M].2版.台北:健康文化事业股 份有限公司,1999. Li ML.Transfusion medicine[M].2nd Edition。Tai bei:Health Culture Enterprise Co.LTD,1999. [7]王自良,张爱平,刘鹏.补体C3,C3c和C3d在IgA 肾病肾组织中的表达[J].中华肾脏病杂志,2007,23 (1O):634. Wang ZL,Zhang AP,Liu P.Complement C3 and C3e and C3d in IgA nephropathy kidney tissue[J].Chi— nese Journal of Nephrology,2007,23(10):634. 收稿日期:201卜1I-22 修回日期:201i-03—29