23例直接抗人球蛋白试验阳性患者输血结果分析及血液成分选择_徐静

86例直接抗人球蛋白试验阳性病例分析张静;刘婷婷;李平【摘要】目的调查分析直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性患者的病种分布特征及不同病种的抗体和补体类型,并探讨DAT阳性的影响因素及临床意义.方法采用经典试管法对608例患者标本进行DAT初步筛查,DAT阳性标本做进一步抗体和补体分型,分析患者临床资料.结果 608例患者标本主要来自风湿免疫科、血液内科、产科及其他内科.其中检出DAT阳性86例,阳性率为14.14％.86例DAT阳性患者的疾病类型主要为系统性红斑狼疮(SLE)占26.74％,自身免疫性溶血性贫血(AIHA)占18.60％,其他血液病占15.11％,干燥综合征占13.95％,新生儿溶血病占5.81％.DAT阳性患者标本分型结果显示,IgG+C3d类型阳性率最高,占61.73％,其次为单独IgG型和单独C3d型,阳性率分别为19.75％和18.52％.结论对DAT阳性结果应结合临床背景进行分析,并进行抗体类型的检定,以辅助临床诊断和治疗.【期刊名称】《当代医学》【年(卷),期】2019(025)007【总页数】4页(P66-69)【关键词】直接抗人球蛋白试验;不完全抗体;自身免疫【作者】张静;刘婷婷;李平【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院输血科,江苏南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院输血科,江苏南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院输血科,江苏南京 210008【正文语种】中文直接抗人球蛋白试验（Dir ect Ant igl obul in Test，DAT）是检测红细胞膜表面是否被不完全抗体或补体结合的经典实验，反映红细胞在体内的致敏性。

抗人球蛋白与致敏红细胞表面不完全抗体或补体结合，可使红细胞出现肉眼可见的凝集，即为DAT阳性。

DAT主要应用于临床上自身免疫性溶血性贫血（AIHA）的诊断、药物诱发型溶血病的诊断、母婴血型不合新生儿溶血病的诊断、以及实验室中免疫溶血性输血反应的调查和交叉配血不合分析等[1]。

23例输血反应分析1.2、输血试验：所有受血者输血前常规采用西班亚戴安娜微柱凝胶技术进行ABO血型正反定型、Rh（D）血型鉴定，不规则抗体筛选及交叉配血试验，均为同型输注。

表1 各种血液成分输血不良反应1.3、方法：受血者发生输血反应时，经临床紧急处理结束后，由经治医师逐项认真填写输血不良反应回报单，由护士送到输血科。

表2 不同血液成分发生输血反应分布2、结果2.1、输注各种血液成分的不良反应率从表1可以看出，2013年至2014年度全院受血者共计为16239例，发生输血反应23例，发生率为0.14%。

所发生的输血反应中以红细胞和血浆为主，血小板和冷沉淀凝血因子较少，全血和洗涤红细胞暂未发现有输血反应发生。

2.2、各种血液成分发生不良反应几率从表2可以看出，输血不良反应主要表现为发热和过敏反应。

通过各种血液成分引起的不良反应例数可以看出，发热反应17例，主要以输注红细胞引起，占所有发热反应的58.8%；过敏反应6例，主要以输注血浆引起，占所有过敏反应的66.7%。

无溶血性输血反应和其它输血反应发生[1]。

3、讨论输血不良反应是指受血者输入血液制品过程中或输入后，受血者发生了用原来疾病不能解释的新的症状和体症。

当前输血已经成为临床抢救危重病人的一种不可缺少的治疗手段，由于血液自身特殊的不可替代性，输血带来的不良反应也一直困扰着临床工作者.常见的输血反应有发热反应、过敏反应、溶血反应、细菌污染反应及输血相关的急性肺损伤等。

在23例发生输血不良反应的患者中全部是非溶血性输血反应。

其中发热反应17例，占74%，发生率0.10%。

造成该不良反应的原因有：（1）血液制品中有致热源。

（2）受血者多次输入人类白细胞抗原不相合的白细胞和血小板后，诱导机体发生抗人类白细胞抗体，此抗体与供血者白细胞发生作用，产生凝集反应，凝集的白细胞在单核细胞和巨噬细胞系统内破坏后，释放出内源性致热源，作用于体温调节中枢导致发热。

（3）由于血液保存时间的延长，使白细胞分解产生的细胞因子，也可引起发热。

交叉配血不相合的原因分析及处理对策栾自槐输血是临床抢救、治疗危重患者的一种不可替代的重要治疗手段。

为了保证输血安全，输血前还必须进行交叉配血试验。

但在交叉配血试验中偶尔会出现的交叉配血不相合的情况发生，使临床输血的安全性问题面临困难和挑战，为了不断提高这方面的处理能力，本研究就2012年1月至2015年12月遇到的交叉配血不相合的病例进行分析研究，找出原因，并提出处理对策，对减少或预防患者输血反应的发生，保证临床输血的安全性具有重要的意义。

1资料与方法1.1调查对象：2012年1月至2015年12月在我院住院需要进行输血治疗的患者共3128例次，其中交叉配血不相合25例，其中男性11例，女性14例，年龄5d至83岁，平均年龄为58岁。

所有供血者血液均来自文山州中心血站，患者血样标本均未抗凝。

1.2试剂：ABO血型试剂（抗-A/抗-B标准血清）、谱细胞、抗人球蛋白试剂（广谱）、单克隆抗IgG、单抗C3、筛选细胞及人ABO血型反定型用红细胞（（Ac、Bc和Oc）均来自上海血液生物医药有限责任公司。

Rh（D）血型试剂、凝聚胺盒试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。

0.9%氯化钠注射液和IgG致敏细胞为本实验室自制。

所有试剂均在有效期内使用。

1.3方法：交叉配血试验方法参考全国临床检验操作规程[1]和试剂说明书进行操作，对供血者血样采用试管法ABO血型正反定型复查；对患者血样用试管法做ABO血型正反定型、RhD血型鉴定和不规则抗体筛选。

采用盐水法+凝聚胺法进行交叉配血，配血相合，严格遵照《临床输血技术规范》[2]进行输血。

配血不相合，则进行复查，如仍然配血不相合，复核患者ABO血型正反定型、RhD血型和不规则抗体筛选试验，加强与临床沟通，进一步查找原因。

2结果3128例患者中采用盐水法交叉配血不相合18例，凝聚胺法不相合25例。

其中冷凝集素所致非特异性凝集15例，缗钱状假凝集3例，红细胞被致敏（直接抗人球蛋白试验阳性）引起的凝集4例，不规则抗体引起的凝集3例。

经验交流108直接抗人球蛋白实验阳性患者的交叉配血 方法临床研究尹雄，全健，柴方秀 （中国贵航集团三O二医院，贵州安顺 561000）摘要：目的 研究直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性患者的交叉配血方法。

方法 选择我院确诊的自身免疫性溶血性贫血、直接抗人球蛋白试验阳性患者（48例）进行分析，所有参加者接受直接抗人球蛋白试验、血型鉴定、交叉配血检测，DAT阳性、血型鉴定、交叉配血检测，分析交叉配血不合格处理结果。

结果 直接抗人球蛋白实验阳性患者中W+-2凝集97.92%。

ABO阳性和阴性血型不一致占79.17%；红细胞自身血清总含量占60.42%；通过冷抗体吸收试验、乙醚放散试验，确定血型为A型、B型、O型、AB型的Rh阳性依次为12:11:8:8例。

所有参照者配血不合格38例，其中主、次侧均为阳性反应19例，主侧阳性和次侧阴性反应12例，主侧阴性和次侧阳性反应7例。

配血不合格原因为冷凝集有15例，冷凝集素效价1:256以上7例，冷凝集素效价1:128有17例。

接受冷抗体吸收试验、乙醚放散试验、自身抗体吸收试验后，交叉配血相合31例，交叉配血不合7例。

结论 冷抗体吸收试验、乙醚放散试验或自身抗体吸收试验均可作为血型鉴定和交叉配血的鉴定方法，为直接抗蛋白试验阳性患者的血型鉴定奠定了有利条件，有效提高临床交叉配血相合率，确保患者输血安全。

关键词：直接抗人球蛋白实验；阳性；交叉配血；血型鉴定输血在临床急救工作中占有重要地位，是治疗失血过多、危重患者的重要手段。

输血前，临床要对每个患者的抗筛、血型进行检测，并根据结果完成配型血选择，确保患者输血的安全性。

但在临床配血中，直接抗蛋白质实验阳性的患者由于存在自身抗体，一般会出现与所供血液样本凝集的现象，进而导致配血困难，同种抗体鉴定难度较大，容易造成安全隐患[1]。

为了进一步提高患者的配血成功率，直接进行抗球蛋白实验检测及血清学特性检测的研究非常必要[2~3]。

红细胞不规则抗体对输血安全的影响目的：探讨红细胞不规则抗体分布特点及对输血安全的影响。

方法：选取笔者所在医院临床收治的3 272例申请输血的患者作为研究对象，均行红细胞不规则抗体筛查。

对比红细胞不规则抗体阳性者与阴性者的输血反应情况。

结果：33例患者红细胞不规则抗体检测结果为阳性。

阳性检出率为1.01%，其中男10例，阳性检出率为0.55%（10/1 811），女23例，阳性检出率为1.57%（23/1 461），女性红细胞不规则抗体阳性检出率显著高于男性，差异有统计学意义（P＜0.05）。

不规则抗体阳性患者抗-e、抗-Lea、抗-Fya、抗-Jka检出率最低，均为0.03%；抗-Ce检出率也较低，为0.06%；抗-M检出率最高，为0.21%；抗-E检出率次之，为0.18%；再次为抗-Ec，为0.15%；抗-D、自身抗体及非特异性抗体检出率均为0.09%。

不规则抗体的Ig类型：IgG共22例（66.67%），IgM+IgG共5例（15.15%），IgM共6例（18.18%）。

47例输血后发生不良反应，以荨麻疹、瘙痒等过敏反应占大部分比例，其中发热/心率异常7例，溶血/血常规异常14例。

血制品类别分布：悬浮红细胞7例，血浆21例，血小板17例，冷沉淀2例。

7例有妊娠史，12例有输血史，14例有输血合并妊娠史。

356例输红细胞制剂患者为无效输血，其中不规则抗体阳性15例，占无效输血人数的4.21%。

结论：红细胞不规则抗体阳性会影响输血安全，输血前进行抗体筛选、鉴定有助于减少输血不良反应和输血无效的发生，保障输血安全。

标签：输血；红细胞；不规则抗体；不良反应血型为人类的遗传性状之一，不同人种、不同个体的血型抗原分布差异较大，异体输血可产生不规则抗体，从而造成交叉配血困难，增加输血不良反应发生风险[1]。

红细胞不规则抗体，指的是红细胞抗体以外的抗体，有输血史或妊娠史的群体更易产生红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体可引起血型鉴定困难、新生儿溶血病、输血不良反应等，所以输血前进行红细胞不规则抗体筛查、鉴定，对于保证输血的有效性及输血安全具有重要作用[2]。

输血前不规则抗体筛查与直接抗人球蛋白试验的意义目的探讨对输血患者在输血前实施直接抗人球蛋白试验以及不规则抗体筛选的检查结果，并总结检查临床意义。

方法输血前患者2000例，实施不规则抗体筛选以及直接抗人球蛋白试验（DAT）两种辅助检查，分析结果以及研究性别、既往妊娠史和输血史对结果的影响。

结果不规则抗体筛查检查阳性率为0.20%，直接抗人球蛋白试验结果阳性率为1.05%；既往输血史或者妊娠史是影响不规则抗体筛查以及直接抗人球蛋白试验结果的相关因素。

结论不规则抗体筛查以及直接抗人球蛋白试验可以针对检查结果实施输血，避免溶血反应，临床上对患者安全以及治疗有很大帮助。

标签：输血；直接抗人球蛋白试验；不规则抗体筛查；微柱凝胶法现阶段的文献资料显示引起溶血反应的最主要原因是红细胞不规则抗体（irregular antibodies）[1，2]，而不规则抗体产生原因不一，可能是妊娠免疫产生，也可能是多次以及大量的输血产生[3]，红细胞不规则抗体因缩短了红细胞存活时间，严重的导致威胁生命的免疫溶血性输血反应，因此目前对输血患者要事先进行不规则抗体的检查以及筛选，以此保证患者临床输血安全性[4]。

实施直接抗人球蛋白试验（DAT）的目的是验证不完全抗体是否导致了红细胞过敏[5]，而DAT的工作原理是体内由于不完全抗体（或补体）引起红细胞致敏因此发生凝集。

检查结果阳性的患者的配血将会难度增加，国外的实施方法微柱凝胶技术已经广泛使用[6]。

本研究选择2010年12月～2012年12月间浙江省嵊州市人民医院住院部输血前患者共2000例，检查方法具体为微柱凝胶法，具体实施不规则抗体筛选以及DAT两种辅助检查，检查结束后对结果显示阳性的标本进一步实施抗体特异性鉴定检查。

1 资料与方法1.1 一般资料选择2010年12月～2012年12月间浙江省嵊州市人民医院住院部輸血前患者共2000例，其中男1102例，女898例，年龄1～87岁，中位年龄（56.45±6.29）岁；包括643例孕产妇、手术需血712例、住院部治疗645例。

抗人球蛋白试验（直接法）简介抗人球蛋白试验（直接法）是一种常见的免疫学实验方法，用于检测机体内特定抗体（抗人球蛋白抗体）的水平和活性。

通过这一试验可以评估机体对人球蛋白的免疫反应情况，是许多研究和临床诊断工作中重要的实验手段之一。

实验原理抗人球蛋白试验（直接法）基于抗原-抗体相互作用的原理。

人球蛋白是一种外源蛋白，当人体受到人球蛋白的免疫刺激后，机体会产生抗人球蛋白抗体。

通过将待测血清与标准人球蛋白溶液混合反应，通过测定溶液中抗体与抗原结合的程度，进而评价该血清中抗人球蛋白抗体的水平。

实验步骤1.准备试剂：标准人球蛋白溶液、待测血清、辅助试剂等。

2.取等量的标准人球蛋白溶液和待测血清，混合均匀。

3.将混合溶液孵育一段时间，促使抗体与抗原结合。

4.添加特定试剂，使未结合的物质沉淀或产生其他特定反应。

5.通过光密度仪或其他检测仪器测定光密度值，计算出抗体水平。

实验结果分析实验结果以光密度值或其他测量指标呈现，一般抗体水平较高的样本对应较高的光密度值。

通过比较待测样本的结果与标准曲线或对照组的结果，可以判断该样本中抗人球蛋白抗体的水平及活性。

应用领域抗人球蛋白试验（直接法）在免疫学研究、临床诊断以及药物疗效评价等领域有着广泛的应用。

例如，在自身免疫性疾病的诊断中，该试验可帮助医生评估患者的免疫系统功能状态；在药物疗效评价方面，可用于监测药物对患者免疫功能的影响。

结论抗人球蛋白试验（直接法）是一种重要的实验技术，可以用于评估机体对人球蛋白的免疫反应水平。

通过本实验，我们可以深入了解机体免疫系统的功能状态，为研究和临床诊断提供有力的支持。