空顶气相色谱外标法测定全血中乙醇含量

血液酒精含量的检验方法1 范围本标准规定了血液酒精含量的顶空气相色谱检验方法。

本标准适用于道路交通执法活动中对人员血液中酒精的定性和定量分析。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法GB 19522 车辆驾驶人员血液、呼气酒精含量阈值与检验GA/T 122 毒物分析名词术语3 术语和定义GB 19522和GA/T 122界定的术语和定义适用于本文件。

4 原理本方法利用酒精(以下称乙醇)的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测；经与平行操作的乙醇标准品比较，以保留时间或相对保留时间定性，用内标法以乙醇对内标物的峰面积比进行定量分析。

5 试剂本标准所用试剂除另有说明外均为色谱纯，试验用水为二级水（见GB/T 6682-2008规定）：a）乙醇；b）叔丁醇；c）乙醇标准工作溶液：精密吸取或称取无水乙醇标准品适量，用水配成1000 mg/100 mL乙醇储备液，密封，冷藏保存，使用期6个月。

将乙醇储备液按倍数用水稀释制成试验中所用系列浓度的乙醇标准工作溶液，使用期3个月；d）叔丁醇内标工作溶液：精密吸取或称取叔丁醇标准品适量，用水配成4 mg/100 mL叔丁醇内标工作溶液，密封，冷藏保存，使用期3个月。

6 器材顶空气相色谱检验方法应具备以下器材：a) 气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）；b) 顶空自动进样器；c) 分析天平：感量0.1mg；d) 精密移液器；e) 样品瓶；f) 硅橡胶垫；g) 铝帽；h) 密封钳。

7 操作方法7.1 定性分析7.1.1 样品制备7.1.1.1 案件样品制备取0.10 mL待测全血及0.50 mL叔丁醇内标工作溶液加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，待测。

气相色谱法血液中酒精气相色谱仪检测分析气相色谱仪常见问题解决方法气相色谱法血液中酒精气相色谱仪检测分析：全自动血液中酒精含量检测专用气相色谱分析仪（GC—7980F型），该仪器接受全中文大屏幕液晶显示，操作直观，仪器具有自动诊断，自动断电保护，文件调用及存储，八阶程序升温等多项功能。

并具有单独竖直加热式毛细管进样系统，大限度地削减了汽化室对柱室的影响，提高了对各种不同注射器的适应性。

新型的FID氢火焰检测器具有较高的灵敏度，并可便利地进行喷嘴和离子收集极的装卸。

仪器还具有六路独立控温系统区域，各汽化室、检测器及放大器均接受模块设计，在安装、更换便利简捷。

超大容量色谱柱箱，可同时安装毛细管色谱柱及填充柱，具有独立的三个进样系统气相色谱法血液中酒精气相色谱仪检测分析ZM—8A型全自动顶空进样器，是我们公司新研制推出的具有一体化功能设计、易于操作的全自动顶空进样器。

该仪器全部微机掌控，中文，英文自由切换、触摸屏液晶显示，薄膜键盘，直观数字输入，触摸屏液晶可显示：全部参数方法设置、实时工作状态、运行时间、年月日时等实时显示。

ZM—8A型全自动顶空进样器有一个全面的通电自检程序，样品盘自动定位系统，还有完整的故障报警，故障提示功能。

便利分析中碰到的问题适时处理。

系统预存一套默认分析方法，并允许用户存储多套常用分析方法和混合运行分析方法。

使用ZM—8A的键盘可对其进行完全掌控，这一功能使它能够配套全部的气相色谱仪使用气相色谱法血液中酒精气相色谱仪检测分析备注：本公司仪器售后派专业技术人员免费对设备进行安装、启动和调试，负责对用户试验人员进行专业仪器技术培训，实行“交钥匙” 工程。

全套设备免费质保一年，终身维护1.氢火焰离子化检测器（FID）用于微量有机物分析；2.热导检测器（TCD）用于常量、半微量分析，有机、无机物均有响应；3.电子捕获检测器（ECD）用于有机氯农药残留分析；4.火焰光度检测器（FPD）用于有机磷、硫化物的微量分析；5.氮磷检测器（NPD）用于有机磷、含氮化合物的微量分析；6.催化燃烧检测器（CCD）用于对可燃性气体及化合物的微量分析；7.光离子化检测器（PID）用于对有毒有害物质的痕量分析色谱检测器分类；YL气相色谱仪1）按原理可分为光学检测器（如，紫外、荧光、示差折光、蒸发光散射）、热学检测器（如，吸附热）、电化学检测器（如，极谱、库仑、安培）、电学检测器（电导、介电常数、压电石英频率）、放射性检测器（闪亮计数、电子捕获、氦离子化）以及氢火焰离子化检测器。

如何用气相色谱仪检测血液中酒精含量酒后驾车现象的频繁出现和因酒后驾车造成交通事故地不断增加，因此需要快速、准确、稳定地分析出酒后驾车司机血液中的酒精含量，就成为各地交警司法部门的一项重要而艰巨任务。

北京华盛谱信仪器有限责任公司开发的该专用仪器配有真正的顶空进样器，省略了繁杂的前处理过程，分析效率高，检测方法先进，仪器配置合理，检测精准，操作方便简捷。

适合各级公安部门及医院、司法鉴定中心配备。

随着新《交通法》的实施，驾车者血醇含量的检测日趋普遍。

顶空气相色谱法定性、定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。

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﹡仪器分析范围血、尿中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇、正丁醇、异戊醇的定性分析及乙醇、甲醇、正丙醇的定量分析。

检测血液中酒精含量是按照中华人民共和国公共安全行业标准GA/T842-2009中规定分析要求、分析条件，能快速、准确的分析出人体血液中的酒精含量。

可满足全国各地交警司法部门的需求。

仪器配置：1.气相色谱仪2. FID+填充柱进样系统+毛细管进样系统3. 自动顶空进样器HS-12A，全自动顶空进样器HS-20A4. 专用色谱柱1只专用封口钳样品制备专用配件及消耗品100套顶空瓶、盖、垫5. 色谱工作站6. 高纯氮气、氢气、空气发生器7.内标物一支8、电脑打印机本公司售后派技术人员免费安装、启动和调试，负责对实验人员的专业培训，实行“交钥匙” 工程。

整机保一年，终身维护。

主要特点采用微机控制，全键盘操作，32位数码管显示。

具有自诊断功能，可连续监测仪器的自身状态，一旦检测到故障立即显示信息，并提示故障区域和排除方法。

可进行检测器量程和衰减时间编程。

具有阀的自动切换和两个检测信号自动切换功能，可实现自动分析。

多种保护功能：TCD断气保护、过温保护、FPD漏光保护等。

【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 ｅｔｈａｎｏｌ； ａｕｔｏ－ｈｅａｄｓｐａｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ； ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ； ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ
血液中乙醇含量的检测是法医鉴定和临床诊断的常规检 测项目。目前国内常 用 的 方 法 主 要 有 气 相 色 谱 法 、干 化 学 法、 速率法等，其 中 干 化 学 法、速 率 法 影 响 因 素 较 多，结 果 不 稳 定［１］。气相 色 谱 法 是 《中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 》 （ＧＡ／Ｔ １０５－１９９５）中 规 定 的 检 测 方 法 。 本 文 采 用 ＧＡ／Ｔ １０５－ １９９５中要求的气相色谱法，采用 样 品 直 接 顶 空 进 样，中 等 极 性 的毛细管气相色谱柱分离，叔丁醇作为内标物。顶空气相色 谱 （内 标 法 ）优 化 了 顶 空 进 样 器 和 气 相 色 谱 仪 的 各 项 工 作 参 数 ，以 期建立一种快速简便、高 效 准 确 的 分 析 方 法，适 用 于 批 量 样 品 的测定。 １ 材 料 与 方 法 １．１ 仪器与试剂 （１）仪器。７８９０Ｎ 型气 相 色 谱 仪（美 国 Ａｇ－ ｉｌｅｎｔ公 司 ）；氢 火 焰 离 子 化 检 测 器 （ＦＩＤ）；色 谱 柱 ：柱 长 ３０ ｍ，内 径０．５３ ｍｍ，液 膜 厚 １μｍ；具 有 中 文 软 件 操 作 的 化 学 工 作 站 ； ７６９４Ｅ 型顶空进样器（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公 司）；２０ ｍＬ 顶 空 瓶 及 配 套瓶盖。（２）试剂。标 准 物 质：乙 醇、正 丙 醇、叔 丁 醇 均 为 分 析 纯；其中叔丁醇用作为内标，使用前均配成１ｍｇ／ｍＬ 的工作液
计算式中 Ｗ１、Ｗ２ 为２份检材平行定量测 定 的 结 果 ，Ｗ 为 ２份检材平均值。 １．４．２ 将 检 测 的 蜂 面 积 代 入 公 式 计 算 ２ 结 果 ２．１ 乙 醇、正 丙 醇、叔 丁 醇 的 保 留 时 间 分 别 为 １．２７、１．６９、 ２．２３ ｍｉｎ。 ２．２ 取３种不同浓度的标准溶液（２０、８０、４００ｍｇ／ｍＬ）进 行 分 析，在０．０～４００．０ ｍｇ／１００ ｍＬ 乙 醇 浓 度 范 围 内 线 性 良 好 。 根 据３倍基线噪声所对应的标准物质的浓度，计算出该方法的 检 出 限 为 ０．１ ｍｇ／１００ ｍＬ。 ２．３ 取混 合 的 血 样 进 行 加 标 回 收 试 验 。 加 入 的 乙 醇 浓 度 为 ８０ｍｇ／ｍＬ。每份血样分装 成 ４ 份 平 行 样 品，其 中 １ 份 用 以 测 定样品 的 本 底 值，其 余 ３ 份 加 入 乙 醇 标 准 溶 液 后 进 行 测 定 ，计 算 其 加 标 回 收 率 为 ９８．５％ ，回 收 率 良 好 。 ［３－４］ ２．４ 取１ｍｇ／ｍＬ 的乙醇、叔丁醇混合标准溶液，加入１０ 个 检 测瓶，连续测定１０次，以 乙 醇、叔 丁 醇 的 峰 面 积 分 别 计 算 标 准 差和变异系数，乙醇、叔丁醇 的 变 异 系 数 分 别 ２．５６％、２．７４％。 在本精密度试验中得到的值 均 小 于 １０％，查 相 关 文 献 得 知，精 密 度 良 好［５］。 ３ 讨 论 ３．１ 柱温的选 择 柱 温 是 影 响 气 相 色 谱 分 离 的 重 要 因 素 之 一。本实验在４０～８０ ℃范 围 内 考 察 了 柱 温 对 分 离 的 影 响，并 在 不 同 柱 温 下 ，对 和 乙 醇 结 构 近 似 的 常 见 低 级 醇 类 ，如 甲 醇 、异 丙醇、正丙醇、叔丁醇配制了混合溶液进行了试验。结果表 明， 与 乙 醇 最 接 近 的 峰 为 甲 醇 和 异 丙 醇 ，因 此 以 它 们 的 分 离 情 况 作 为考察指标，温度越 高，乙 醇 与 甲 醇、异 丙 醇 保 留 时 间 越 接 近， 分离不好。进行多次 研 究 发 现，在 作 者 设 定 的 色 谱 条 件 下，４０ ℃时乙醇与甲醇和异 丙 醇 的 分 离 情 况 和 峰 形 最 好 ，其 余 物 质， 如正丙醇、叔丁醇亦不 会 产 生 干 扰，因 此 试 验 最 后 选 定 柱 温 为 ４０ ℃。甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、叔 丁 醇 的 保 留 时 间 分 别 为 １．００、１．２７、１．４９、１．６９、２．２３ ｍｉｎ［６－７］。 ３．２ 内标物质的选择 内标法可在一定程度上消除操作条 件