病毒抗体谱的临床诊断意义

浆中。MAO参与胶原纤维的生成,因此在纤维化性疾病时活性增高。肝脏疾病中检测MAO主要用于诊断肝硬化。肝硬化时MAO活性明显增高,阳性率可达80%,且与纤维化的程度和范围呈正相关。急性肝炎肝细胞坏死时及明显肝炎活动期部分病人可出现MAO增高,提示纤维组织增生活跃。各种血清酶活性存在生理性波动,表现为:(1)性别:GGT在男性高于女性。(2)年龄:LDH在出生时最高,是成人的7倍;ALP在儿童为正常成人的2～4倍;GGT在哺乳期后随年龄而增加。(3)进食:ALP在餐后特别是脂肪餐后可升高;酒精及含酒精饮料可使GGT水平增高。(4)运动:短时间剧烈运动后可使血清ALT、AST及LDH等升高,尤以ALT明显,可达正常1倍以上。(5)妊娠:胎盘能分泌ALP,LDH及AST等,因此在妊娠时可增加,尤其在妊娠后期。(6)某些药物:如异烟肼,氯丙嗪,水杨酸制剂等可引起ALT升高;微粒体酶诱导剂如苯巴比妥,苯妥英钠等可使GGT升高。(7)溶血:红细胞中含ALT、AST及5’-NT等,因此,肝脏酶学检测应避免溶血。肝脏酶学检测能够在一定程度上反映肝脏细胞损害的程度,胆汁淤积的病变,但对肝脏功能的评价有其局限性,不能反映肝脏的合成及排泌等复杂的功能。因此,临床上应结合反映肝脏功能的指标如白蛋白、凝血酶原时间及胆红素定量等,综合评价肝脏的功能。此外,肝脏生化检测也不能反映肝脏的其它功能异常如门脉高压。因此,肝脏生化检查的评价必须结合详细的病史及体格检查而做出判断。需要指出,我们常用的“肝功检查”是一误用名词,因为转氨酶变化并不能反映肝脏功能,ALP及GGT也不是反映肝脏功能的指标,而真正反映肝脏合成、代谢及排泌功能的生化指标是白蛋白、凝血酶原时间及胆红素测定等。因此,

特定用于肝脏疾病筛查的试验应总称为“肝脏生化检查”为妥。

参考文献1　ScheigR.PrimaryCare;ClinicsinOffice.W.B.SaundersCompany,1996.5512　Ravel.ClinicalLaboratoryMedicine.6thed.Mosby-YearBookInc,1995.3093　GianniniE,BottaF,FasoliA,etal.Progressiveliverfunctionalim2pairmentisassociatedwithanincreaseinAST/ALTratio.DigDisSci,1999,44(6):12494　郑芝田主编.胃肠病学.第3版.北京:人民卫生出版社,2001.9295　CavallettoL,NoventaF.Predictorsofsustainedresponse,relapseandnoresponseinpatientswithchronichepatitisCtreatedwithinterferon-alpha.JViralHepat,1995,2:916　J.B.Whitfield.GammaGlutamylTransferase.CriticalReviewsinClinicalLaboratorySciences,2001,38(4):263,3557　FortunatoG,CastaldoG,OrianiG,etal:sixbiochemicalmarkersClinChem,2001,47(9):16968　HiroakiOkabe.Aspartateaminotransferase.JapenJClinMed,1995,53:(5),85(2001-10-20收稿)

文章编号:1005-2194(2002)01-0056-04

病毒抗体谱的临床诊断意义

张忠鲁

作者单位:大连市友谊医院(116001)中图分类号:R5 文献标识码:A

病毒感染实验室诊断有三个基本途径:从标本中直接检测到病毒、抗原、核酸序列;对标本中病毒的分离和鉴定;依据疾病过程中病毒抗体水平显著增高进行血清学诊断。病毒特异抗体检测是病毒感染血清学诊断的基础,其优势在于:①其它途径不能作为检测病毒的方法时,病毒抗体检测是主要手段;②对分离的病毒进行临床意义的评估;③诊断急性感染和评价机体对病毒的免疫状态。迄今,对肝炎系列病毒特异抗体检测已成为临床诊断肝炎病毒感染的金标准,近10年HIV病毒特异抗体检测在临床上倍受重视,巨噬细胞病毒(CMV)特异抗体检测已作为预防脏器移植后CMV肺炎的重要筛选指标,以CMV、风疹病毒(RV)、单纯疱疹病毒(HSV)等为核心的TORCH系列试剂盒已常规用于检测母婴血清病毒特异性抗体,明显提高了母婴病毒相关性疾病的临床诊疗水平。临床病毒学血清检测,特别是呼吸道病毒特异抗体,在儿科领域开展较早,目前国内市级儿童医院多数用于临床诊断,但在成人有关临床研究和应用较少,除肝炎病毒外,国内还没有医院根据血清病毒特异抗体检测结果进行临床常规诊断,更没有对一个社区或一个地区常见病毒进行血清学动态监测。导致该局面因素有:

①基础病毒学与临床病毒学脱节。长期以来血清病毒特异性抗体检测的标准抗原制备比较复杂,仅有为数不多的实验室才能利用,只有在近几年以酶联免疫吸附试验技术(ELISA)为主体的多种病毒特异性抗体检测试剂盒的商品

化使临床进行常规检测多种病毒特异抗体成为可能。②临床对非肝病性病毒感染的认知程度和临床研究不足。一方面临床医师对病毒感染的认识不够,没把病毒感染上升到与细菌感染同等的地位,另一方面缺乏动态、宽谱系的、多

・65・中国实用内科杂志2002年1月第22卷第1期中心的、多病种的临床流行病学纵向观察和截面临床对照研究。③病毒感染临床表现的非特征性,并常被细菌等感染所掩盖,因此临床对病毒感染血清学诊断的需求不明显。④血清病毒特异性抗体检测结果主要用于疾病的回顾性诊断,对疾病前瞻性的诊断和治疗方面意义甚小。本文以呼吸道病张忠鲁　教授毒为例对血清病毒特异性抗体临床意义加以概述。1　病毒抗体检测1.1　病毒特异性抗体概念、分类和动力学　病毒引起机体按照病毒的种类、血清型产生相对应的IgG、IgM、IgA和IgE等抗体,这些抗体具有病毒种(型)的特异性,称之为病毒特异抗体。临床上,如有病毒特异抗体的阳性,可作为相应病毒存在或感染的实验标志。免疫功能正常的人,在病毒感染后7～10d机体产生该种(型)病毒的特异IgM抗体,2个月达峰、3～6个月消失,因此临床上血清病毒特异IgM抗体阳性表明急性或近期感染。病毒感染后,5～9d后机体开始产生特异IgG抗体,持续数年,单次血清病毒特异IgG抗体阳性,表明既往病毒感染,如感染初始(急性期)和3周后(恢复期)双份血清中病毒特异IgG抗体≥1∶4倍升高,或恢复期和恢复后期(感染后6～8周)双份血清病毒特异IgG抗体≥1∶4倍下降,作为急性病毒感染的病原学标志,通常临床上属于回顾性诊断。病毒特异IgA抗体研究较少,先天性风疹病毒或CMV感染后血清中检测不到特异IgA抗体,对新生儿产后病毒感染血清病毒特异IgA抗体与IgM和IgG抗体同时出现,有研究表明流感病毒感染2周后血清和鼻黏膜分泌液达峰。有一些研究认为病毒特异IgA抗体可作为急性感染的标志,但近来一些敏感的检测发现感染后特异性IgA抗体存在时限相差殊远,几周到几年,因此作为急性病毒感染标志物的价值有待进一步评价。血清病毒特异性IgE抗体在感染后1～3d即可出现,14～28d达峰,体内半衰期最短,只是近些年有一些关于哮喘病人鼻病毒特异IgE抗体临床研究报告,没有直接用于临床诊断。1.2　检测方法和临床评价1.2.1　检测病毒抗体方法　包括单放射扩散法、凝胶溶血法、乳胶凝集试验和ELISA法等。ELISA为目前广泛使用,其敏感性高(灵敏度10-9～10-12),特异性强,操作简便,肉眼可观察。就病毒特异IgM抗体而言,过去病毒抗体检测方法的特异性和敏感性低,原因在于:①病毒特异IgG抗体和病毒特异IgM抗体互相竞争与病毒抗原结合;②血清中IgM类的类风湿因子,可以同与病毒抗原结合的特异IgG抗体相结合,然后与标记的抗IgM试剂反应,引起假阳性。捕捉法克服了上述一些问题,提高了敏感性和特异性。1.2.2　以病毒抗体为核心的传统检测方法　包括中和试验、红细胞凝集抑制试验(HI)、补体结合试验(CF)、间接免疫荧光染色、被动红细胞凝聚试验(PHA)。中和试验:依据血清中抗体对病毒的中和作用程度的实验,是以测定病毒感染力为基础,需要在动物、鸡胚等活体内进行。中和抗体滴度的判断是以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据,一般认为,中和抗体活性主要来源于IgG。HI试验:

许多病毒可促进红细胞凝集,

若病毒与特异抗体结合则可阻断这种反应,因此采用标准剂量病毒抗原,检测被检血清是否对红细胞的凝集有抑制作用,进而分析病毒抗体的存在,

敏感性和特异性与中和试验相近。CF试验:根据病毒抗原与特异性抗体形成复合物时能结合补体的原理,加入羊红细胞和溶血素,判断是否发生溶血,

进而判断病毒感染是否存在。主要活性也是来源于IgG抗体。目前文献和教科书上常提到中和抗体、CF抗体等,往往与IgG、IgM、IgA等化学结构明确的5种抗体并列起来,但在化学结构上,它们是不存在的,实际上是以IgG、IgM等抗体为核心的包括多种免疫因子的综合指标,在很大程度上是描述IgM、IgG等抗体的作用效应的方法,因此不要把中和抗体、CF抗体等与IgM、IgG、IgA并列起来,它们不能确切地反映各种免疫因子在病毒感染发病过程中的具体变化。观察表明虽然中和抗体和CF抗体都主要来源于IgG,但对同一病毒感染两种检测结果不尽一致,又有研究发现中和抗体的血清动力学变化水平与特异IgG抗体水平不平行。从临床诊断来看,这些检测方法获得的结果不及直接检测特性IgG、IgM和IgE等准确和简便。1.3　临床诊断意义1.3.1　病毒特异性IgM抗体检测意义　①确定急性或近期的病毒感染:特异IgM抗体往往在病毒感染后一个较短时期内出现,通过与该时期的临床疾病相联系,从而作出特异的病原学诊断。②早期诊断:特异IgM抗体多在病毒感染急性期出现,无需恢复期血清即可作出诊断,利于诊断、治疗和传染源的隔离。③反映病毒复制的持续性:有些病毒可在体内长时间地复制,其IgM抗体也较长期的存在,因此特异IgM抗体检测对分析感染类型及预后有一定意义,

如抗HBc-IgM抗体。④反映病毒感染的复发:疱疹属病毒,如CMV、HSV等感染后在体内潜伏,当免疫抑制等条件下,被激活而再次出现特异IgM抗体,即激活感染。⑤脑脊液中出现特异IgM抗体时,表明该病毒侵犯了中枢神经系统,如疱疹性脑炎、乙型脑炎、脊髓灰质炎等。⑥反映先天性宫内感染:一些病毒可在妊娠期通过胎盘传给胎儿,胎儿感染后产生自身的特异IgM抗体,在脐血或新生儿血中可查到,如先天风疹、先天CMV感染等。1.3.2　病毒特异性IgG抗体检测意义　①急性期和恢复期血清病毒特异IgG抗体≥1∶4倍升高作为急性病毒感染证据,由于恢复期血清需要病后3周时采取,此时临床上常常过了感染的急性期,即使可以证明是该病毒的急性感染,