大鼠心肌梗死模型图解

大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良杨涛涛;肖颖;奚赛飞;马毅超;方明笋;寿旗扬;潘永明;陈民利【摘要】目的优化和改良大鼠心肌梗死模型的构建和评价方法,提高模型的可靠性和稳定性.方法取雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,在模型的构建过程中从麻醉、插气管、保温、手术操作、术后护理等环节进行优化和改进,并观察不同的麻醉方法和术后时间对心肌梗死程度的影响,用不同的染色方式进行心肌梗死模型的评价.结果对比大鼠心肌梗死模型构建过程中各组大鼠麻醉时间、术后恢复以及心肌梗死面积的结果,戊巴比妥钠是更合适的麻醉药;结扎手术后时间对模型心肌梗死范围无明显影响(P>0.05),但心肌缺血危险区面积随术后时间的延长明显减少(P<0.01);TTC与依文思蓝双重染色相对TTC染色能明显观察到心肌缺血危险区和梗死区范围.结论优化和改进后的大鼠心肌梗死模型,提高了动物福利,制备和评价方法更加客观准确.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2014(024)002【总页数】7页(P46-51,后插4)【关键词】大鼠;心肌梗死模型;方法;改良【作者】杨涛涛;肖颖;奚赛飞;马毅超;方明笋;寿旗扬;潘永明;陈民利【作者单位】浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053;浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州,310053【正文语种】中文【中图分类】R33心肌梗死是一种严重的心血管系统疾病，已成为中老年人群死亡的主要病因之一。

心肌梗死动物模型具体方法及步骤原型物种人来源结扎冠状动脉左前降支（LAD）导致心梗模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雌雄各半，体重为180g-200g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期72h建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，是一种急性及严重的心脏状态。

心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现，需要冠状动脉不断提供的血流供应，当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞，使得冠状动脉的血流急剧减少或中断，便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，心肌无法得到足够氧气，最终导致心肌不可逆的缺血性坏死，心脏的收缩和舒张功能降低，机体供血不足，严重者最终导致机体死亡。

1. 大鼠用3%戊巴比妥钠（30mg/kg），腹腔注射麻醉，用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇术区消毒。

2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。

打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸比2：1，潮气量6-8 mL，频率70 次/min），将气管插管沿声门插入气管，取下大鼠接上呼吸机，观察大鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。

3. 大鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。

4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线，于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD)，以完全阻断LAD血流。

5.关胸：结扎完成后，5-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。

6.术后管理：术后密切关注大鼠状态，有无呼吸异常等。

待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。

大鼠冠心病心肌梗死模型制备的新方法张世田;庞路路;冯悦;宁晚玲;黄岑汉;王露瑶;黄小珊;唐汉庆【摘要】目的通过结扎大鼠左心室回旋支末梢血管,探索一种制作大鼠心肌梗死模型的新方法.方法将90只SD大鼠随机分为对照组(10只)和模型组(80只),大鼠经腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,颈部行气管切开插管术,呼吸机维持呼吸.对照组只开胸不结扎;模型组开胸结扎左心室回旋支末梢血管,术后笼中饲养4周,观察大鼠形态、行为学、呼吸改变,心电图、梗死心肌表现,组织病理学HE切片,并对其成活率进行统计,描述模型制作成功的标准.结果经过上述方法造模后,模型组大鼠形态、行为学、呼吸改变符合冠心病心力衰竭特征,心电图表现符合冠心病心肌梗死的动态演变过程,梗死心肌表现符合心肌梗死室壁瘤特征,组织病理HE染色示心肌坏死符合冠心病心肌梗死特征.且术后成活率(即造模成功率)达到83.75%,各项指标符合临床冠心病心肌梗死标准.结论结扎大鼠左心室回旋支末梢制作大鼠心肌梗死模型,方法简单、稳定快速,造模成功率高、可控性好,与临床冠心病心肌梗死相似度高,是一种理想的造模新方法.【期刊名称】《右江民族医学院学报》【年(卷),期】2017(039)003【总页数】4页(P179-182)【关键词】大鼠;心肌梗死;模型,动物;左心室回旋支【作者】张世田;庞路路;冯悦;宁晚玲;黄岑汉;王露瑶;黄小珊;唐汉庆【作者单位】右江民族医学院,广西百色 533000;广西中医药大学,广西南宁530200;广西中医药大学,广西南宁 530200;广西中医药大学,广西南宁 530200;右江民族医学院,广西百色 533000;右江民族医学院,广西百色 533000;广西中医药大学,广西南宁 530200;右江民族医学院,广西百色 533000【正文语种】中文【中图分类】R542.2+2大鼠心肌梗死模型是研究冠心病心肌梗死发病机制及相关药物药理作用的常用动物疾病模型，结扎大鼠左冠状动脉前降支造模是许多文献记载比较多的一种手术方法[1]，但经解剖多只大鼠发现，左心室回旋支与前降支相比，其走行明显，左心末梢分支分布广泛，变异小，此处结扎便于操作、可控性好，我们在既往大鼠心肌梗死模型制作的基础上简化操作步骤，采用结扎大鼠左心室回旋支末梢血管来制作心肌梗死模型，通过分析观察相关指标，与临床冠心病心肌梗死相比较，判定该模型的制作效果，探索制作大鼠心肌梗死模型的新方法。

大鼠心肌梗死模型制作图解庄瑜制作南京市第一医院南京医科大学附属南京第一医院南京市心血管病医院心胸外科/制作前准备1．器械：动物呼吸机，开胸制作心梗模型，维持呼吸至关重要。

虽然据说某些牛人可以不用呼吸机，但是我想这是经验积累的结果，开始时必然要用；况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。

当然，如果你经费异常充足，不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。

显微器械，最主要的是针持，大鼠胸腔、心脏均很小，常规器械无法进入胸腔缝扎。

其他手术器械以眼科器械为主。

2．动物：应选择成年健康大鼠，耐受性较好。

最重要的是要充分利用每一只动物，包括死亡的大鼠。

许多人都知道制作大鼠模型需要多练习，但是练习不是买一大批大鼠，不停地缝扎，然后不停地扔掉死的大鼠；当然，制作心梗模型死亡一些大鼠是很正常的事情。

练习的前提是对大鼠解剖及操作过程的熟悉，如果可能的话，最好先找一份大鼠的解剖图谱，熟悉手术区域的解剖结构；同时研究实验流程，熟悉每一个实验步骤。

大鼠死亡后，不要急着扔掉，利用它练习每一个你不熟悉的操作步骤，直到熟练为止。

3．实验者：实验者必须具有一种平和的、耐得住寂寞的心态，制作模型需要时间，尤其是早期，需要耐心、仔细的摸索；必须对每一个步骤进行认真地研究。

最熟练的制作者做一只大鼠模型也需要30到40分钟的时间，加上准备及扫尾的时间，制作十只模型就需要一天的时间，如果你废寝忘食多用用功也可能做到15只左右，这样一天下来腰酸背痛是必然的，你能坚持多久？不熟练的话，一只就要两、三个小时；同时还要看着大鼠在你的手中死亡，这是很揪心的事情。

因此，实验者必须具备良好的心态，急于求成、难耐寂寞者不适合做此实验。

本人系气管切开插管，缝扎LAD制作模型。

亦有人经口插管，液氮冷冻制作模型；不在本人讨论范围之内，哪位有经验的话可以传上来，一起讨论。

最后祝各位早日成功！！导师简介陈 鑫 主任医师、教授，1963年2月出生于江苏靖江，1985年毕业于南京铁道医学院，同年进入南京市第一医院工作，1993年2月获南京医科大学硕士研究生学位，1993.3 - 1994.2至 Ocala Heart Institute, Ocala, FL, USA.学习，回国后从事心胸血管外科的临床、科研及教学工作，1999年成为南京医科大学硕士研究生导师，培养多名专业人才。

两种大鼠心肌梗死模型的比较研究童敏;贺亮;刘文亮;周胜华【摘要】目的通过对大鼠冠状动脉前降支结扎法和超声波凝固法制作心肌梗死模型进行对比研究,探讨两种心梗模型的优缺点.方法 45只SD大鼠,随机分成假手术组(n=15)、冠状动脉结扎组(n=15)、超声刀组(n=15).假手术组:冠脉左前降支只套线,不结扎；冠状动脉结扎组:用620缝合线结扎大鼠左冠状动脉前降支；超声刀组:用超声刀凝固冠状动脉左前降支.术后4周分别测定大鼠血清肌酸磷酸激酶(CK)及其同功酶(CK-MB),乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转换酶(AST)水平,并行心肌HE染色进行病理组织学分析,探讨两种模型的优劣.结果与冠脉结扎组比较,超声刀组血清CK、CK-MB、LDH、AST活性均无明显差异(P＞0.05);HE染色显示:两组心肌组织均出现凝固性梗死,炎细胞浸润,继而有肉芽组织长入,最后形成瘢痕.冠状动脉结扎组大鼠术后死亡率50％,超声刀组大鼠术后死亡率20％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论二者均可有效复制心肌梗死模型.超声刀凝固法操作简单,死亡率低,能建立稳定的大鼠心肌梗死模型,可用于心肌梗死的相关研究.%Objective To compare two rat models of myocardial infarction established by coronary artery ligation and harmonic scalpel method for their advantages, disadvantages and applications. Methods Sixty Sprague Dawley rats were randomly divided into sham-operated group, coronary artery ligation group and harmonic scalpel group. In the latter two groups, myocardial infarction was induced by ligation of the left anterior descending coronary artery and coagulation of the artery, respectively. Four weeks after the operations, the rats were sacrificed to measure the serum levels of CK, CK-MB, LDH and AST, and the hearts were collected for histopathologicalobservation with HE staining. Results The rats in the sham-operated group and coronary artery ligation group showed no significant differences in serum levels of CK , CK-MB , LDH or AST. Histologically, the myocardial tissues of the two models all showed coagulation necrosis and inflammatory cell infiltration, with granulation tissue ingrowth in the infracted tissues and scar formation. The mortality rate of the rats in coronary artery ligation group was 50% at 4 weeks, ' significantly higher than that of the harmonic scalpel group (20%, P<0.05). Conclusion Coronary artery ligation and harmonic scalpel method are both effective means to produce rat models of myocardial infarction. The latter method can establish a more stable model for studying the mechanism and treatment of myocardial infarction.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2011(031)011【总页数】3页(P1941-1943)【关键词】冠状动脉结扎法;超声刀;心肌梗死【作者】童敏;贺亮;刘文亮;周胜华【作者单位】中南大学湘雅二医院动物实验室,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院麻醉科,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院胸外科,湖南长沙410012;中南大学湘雅二医院心内科,湖南长沙410012【正文语种】中文【中图分类】R758.22在心肌梗死（myocardialinfarction，MI）［1-2］发病率和死亡率不断上升，严重威胁人类健康的今天，成功制备心肌梗死动物模型是我们进行相关研究的基础。

中国组织工程研究 第16卷 第7期 2012–02–12出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research February 12, 2012 Vol.16, No.7P .O. Box 1200, Shenyang 110004 1220Department of Cardiology, Renji Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200001, ChinaYu Li-wei,★Studying for master’s degree, Department of Cardiology, Renji Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200001, China yuliwei19@ Correspondence to: Jiang Meng, Doctor, Department of Cardiology, Renji Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200001, China jiangmeng0919@ Supported by: the National Natural Science Foundation of China, No. 30800453*; theRising Star Program of Science andTechnology for Youth in Shanghai, No. 10QA1404500*; the Pilot Project of Innovation forStudents of Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, No. IAP3117*; the Cross Project Biomedical Engineering ofShanghai Jiao Tong University, No. YG2010MS29*Received: 2011-10-08 Accepted: 2011-12-05实时PCR 法验证心肌梗死大鼠模型正常组织及心肌梗死组织与 血管新生途径相关差异基因的表达****★俞立玮，姜 萌，朱 丹，俞劼晶，马 骏Verification of differential expression of angiogenesis related genes in normal tissues and myocardial infarction tissues of rat models of myocardial infarction using real-time PCR methodYu Li-wei, Jiang Meng, Zhu Dan, Yu Jie-jing, Ma JunAbstractBACKGROUND: Researches have shown that the process of angiogenesis after acute myocardial infarction is mediated by a number of genes.OBJECTIVE: To investigate the differential expression of angiogenesis related genes after acute myocardial infarction.METHODS: Rat model of acute myocardial infarction was constructed; five specific differential expression genes in gene chip were selected based on the results of gene chips: secreted phosphoprotein 1, chemokine receptor 2, angiopoietin-like 4, CXCchemokine ligand 5 and interleukin-1β. Real-time PCR was conducted to detect the expression levels of these genes in normal and in infarction myocardial tissues of rat acute myocardial infarction model.RESULTS AND CONCLUSION: The gene expression of the secreted phosphoprotein 1, chemokine receptor 2 andangiopoietin-like 4 increased significantly in the early stage of acute myocardial infarction (P < 0.05); and it was time-dependent. While the expression levels of CXC chemokine ligand 5 and interleukin-1β showed low fluctuation without significant changes. Among them, the secreted phosphoprotein 1 and chemokine receptor 2 are related to the inflammation, cell adhesion, migration and chemotaxis after acute myocardial infarction; while the angiopoietin-like 4 is related to angiogenesis and cell differentiation.Yu LW, Jiang M, Zhu D, Yu JJ, Ma J. Verification of differential expression of angiogenesis related genes in normal tissues and myocardial infarction tissues of rat models of myocardial infarction using real-time PCR method. Z hongguo Z uzhi Gongcheng Yanjiu. 2012;16(7): 1220-1224. [ ]摘要背景：研究表明急性心肌梗死后血管新生过程受众多基因调控。

陈旧性心肌梗死大鼠的实验研究魏丽萍;赫小龙;祝光礼;陈铁龙【摘要】[目的]观察陈旧性心肌梗死大鼠的病理变化及细胞凋亡情况.[方法]40只SD雄性大鼠被随机分为模型组和对照组,每组20只,模型组结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,对照组开胸不结扎,术后3个月留取心脏标本,2,3,5-氧化三苯基四氮唑(tripheng ltetrazoliurn chloride,TTC)染色法检测心肌梗死面积,HE染色法观察病理改变,Westem blot法检测Caspase-3蛋白表达量.[结果]对照组梗死面积为0,Caspase-3蛋白表达量为(0.31±0.09),模型组的梗死面积为(30.60±5.20)％、Caspase-3蛋白表达量为(0.49±0.08),模型组显著高于对照组,P ＜0.01；HE染色发现模型组心肌细胞稀疏、萎缩,间质组织纤维化伴慢性炎症细胞浸润,心内膜软骨化,形态学特征符合透明软骨细胞.[结论]陈旧性心肌梗死大鼠梗死边缘区存在细胞凋亡.【期刊名称】《浙江中医药大学学报》【年(卷),期】2013(037)002【总页数】5页(P179-183)【关键词】陈旧性心肌梗死;细胞凋亡;心内膜软骨化;大鼠【作者】魏丽萍;赫小龙;祝光礼;陈铁龙【作者单位】浙江中医药大学附属广兴医院杭州 310007;浙江中医药大学附属广兴医院杭州 310007;浙江中医药大学附属广兴医院杭州 310007;浙江中医药大学附属广兴医院杭州 310007【正文语种】中文【中图分类】R221长期以来人们认为细胞坏死是心肌死亡的唯一方式，近年来，大量临床和实验研究证实细胞凋亡是心肌死亡的重要方式。

细胞凋亡不仅存在于急性心肌梗死中，陈旧性心肌梗死同样存在细胞凋亡，该点已在动物模型实验及人类尸检中得到证实[1-2]。

但是现在的心肌梗死的实验研究最多观察到心梗后8周的病理改变及细胞凋亡状况。

模型的背景，心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血两种，全心缺血主要靠注射药物（如异丙肾上腺素等），左心室缺血主要靠手术对动物的冠状动脉左降支进行紧扎实现。

由于左心室缺血对临床的意义更大，所以研究心肌缺血药物时这个模型是必须的。

（1）术前12小时给动物禁食（2）将动物注射10%水合氯醛（0.4mL/100g）麻醉后固定在手术台上（3）用笔型静脉置留针进行气管插管，插好后可用手术刀柄靠近气管，如果见气雾，就证明成功，连接动物呼吸机，参数为：呼吸频率85；呼吸比1：1；潮气量为18ml（4）胸部被毛、酒精棉消毒，在胸部左侧3~4肋间剪开皮肤，如图1（5）分离肌肉露出肋骨，切口位置有两块肌肉，胸浅肌和胸深肌，注意按照肌肉的纹路分离可以避免将肌肉扯烂，如图2（6）在第三根肋骨下用止血钳将肌肉分离开，然后左手用止血钳挑住肋骨，右手持剪刀剪开第三根肋骨，如图3（7）用止血钳将剪断的肋骨夹住掰开，放入开睑器，用止血钳剥离心包膜，如图4（8）用止血钳将胸腺（心脏上面白的像脂肪一样的东西）夹住拉出，如图5（9）在左心耳与肺动脉圆锥间穿6~0号线，拉紧丝线，形成心肌缺血，观察线扎紧的部位上下大约2mm范围的心肌是发白色的，如图6（10）闭合胸腔，注意将胸腔内的空气挤出（这点非常关键，这个模型最容易失败导致大鼠死亡的就是这个地方），对肌肉和皮进行缝合，挤空气的手法如图7（11）结扎术后6小时可进行TTC染色：将大鼠脱颈处死，打开胸腔，将心脏剪下，用生理盐水将心脏清洗干净并排出心脏内的淤血，沿冠状沟将心房切除留下心室，用刀片将心脏切成1mm厚的切片，放入0.1%的TTC磷酸盐缓冲液（pH 7.4）37℃水浴7~10分钟，取出切片用生理盐水冲洗数次，观察结果。

非梗死区因脱氢酶还原TTC而呈红色，梗死区因脱氢酶流失而呈白色，将梗死区和非梗死区分离并分别称重，梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。

下图是染色的结果，图8结扎位置，梗死的地方其实肉眼大致能看出，和其他地方相比发白，图9：下面再发正常大鼠和梗死大鼠的心电图区别，是用的PowerLab做的，正常的如下22小时后的心电。

急性心肌梗死模型大鼠探索行为及海马神经元中脑源性神经营养因子表达的变化张晓鑫;王艳;杨清成【摘要】目的探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠探索行为和海马神经元中脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化.方法将25只健康雄性Sprague Dawley大鼠依据分层抽样法分为对照组(n=5)和AMI组(n=20).AMI组大鼠采用心脏左冠状动脉前降支结扎术制作AMI模型,对照组大鼠不做任何处理.采用旷场实验观察各组大鼠AMI前及AMI后3、7、10、14 d探索行为的变化,苏木精-伊红(HE)染色检测2组大鼠心肌组织变化;免疫组织化学染色法和Western blot法检测2组大鼠海马神经元中BDNF蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应检测2组大鼠海马神经元中BDNF mRNA表达.结果旷场实验结果显示,AMI前2组大鼠潜伏期、水平运动次数、垂直运动次数比较差异无统计学意义(P＞0.05);AMI后3、7、10、14 d,AMI 组大鼠潜伏期长于对照组,水平运动次数、垂直运动次数少于对照组(P＜0.05).HE 染色结果显示,AMI组大鼠心肌组织梗死区及梗死边缘区的心肌细胞出现核固缩现象,且有炎细胞浸润;对照组大鼠心肌细胞呈粉红色.免疫组织化学染色和Western blot检测结果均显示,AMI后7、14 d,AMI组大鼠海马神经元中BDNF蛋白表达量低于对照组(P ＜0.05);AMI组大鼠AMI后14 d海马神经元中BDNF蛋白表达量低于AMI后7 d(P＜0.05).AMI后7、14 d,AMI组大鼠海马神经元中BDNF mRNA相对表达量低于对照组(P＜0.05);AMI后14 d,AMI组大鼠海马神经元中BDNF mRNA相对表达量低于AMI后7 d(P＜O.05).结论大鼠AMI后伴发抑郁样行为,其机制可能与海马神经元中BDNF表达显著降低有关.【期刊名称】《新乡医学院学报》【年(卷),期】2019(036)003【总页数】6页(P218-223)【关键词】急性心肌梗死;抑郁症;海马;神经元;脑源性神经营养因子;探索行为【作者】张晓鑫;王艳;杨清成【作者单位】新乡医学院第三附属医院神经内二科,河南新乡453003;新乡医学院第三附属医院神经内二科,河南新乡453003;安阳市人民医院神经内科,河南安阳455001【正文语种】中文【中图分类】R542.2+2急性心肌梗死(acute myocardial infracted，AMI)发病率较高，且治疗难度大，预后差，给患者家庭和社会带来很大压力[1]。

大鼠心肌梗死模型研究进展心肌梗死是现临床的多发病，是由于冠状动脉发生了闭塞，导致心肌缺血从而引起心肌细胞发生死亡，已经成为中老年人群死亡的主要病因之一。

心肌梗死动物模型是研究梗死性心脏病病理机制和相关治疗药物疗效评价的一个重要手段。

目前心肌梗死的临床治疗有很多种方法，譬如药物治疗、细胞技术等。

这些治疗方法在临床使用之前都要进行大量的动物实验，只有在动物实验出现了治疗的效果才能进而在临床应用。

其中大鼠心肌梗死模型是研究心肌梗死病理生理变化的重要模型，它能够客观的反应治疗效果以及在心肌梗死过程中心电活动、室壁运动的变化，对临床进一步揭示心肌梗死的发病机理及对心肌缺血损伤防治具有重要的理论意义和实用价值。

本文章就大鼠心肌梗死模型的建立进行一个简单的叙述。

1.结扎法1.1麻醉方法的选择大鼠的麻醉方法常见的有腹腔注射、静脉注射、吸入麻醉等方法，在实验中所用的麻醉药物常见的有水合氯醛、戊巴比妥钠、乙醚等。

其中戊巴比妥钠或水合氯醛通过腹腔注射给药可以达到理想的麻醉效果【1】，它的优点是给药途径便利、麻醉起效快、麻醉深度适中，但在麻醉时要对麻醉剂量的选择要非常谨慎，应当按公斤体重来计算，从低剂量开始给药，譬如10%的水合氯醛按照0.3ml/100g为起始量，5~10min起效。

麻醉太浅，大鼠容易清醒发生挣扎，不利于手术操作；麻醉太深，则术后大鼠不易清醒，呼吸道分泌物过多堵塞气道，会导致大鼠难以恢复正常的自主呼吸【2】，拔呼吸机插管较困难，容易导致实验大鼠的肺水肿、感染、呼吸肌麻痹等，会大大增加大鼠围手术期死亡率。

1.2建立气道的方法有研究表明，在建立AMI模型过程中可以不进行气管插管，但要在短时间内迅速开胸并进行结扎，手术难度较大。

这个方法在实际操作过程中有许多很难克服的技术弊端：操作难度大、围术期存活率低。

现如今AMI模型制作时多采用小动物呼吸机维持呼吸，比较常用的大鼠气管插管方法有经口气管插管和气管切开插管。

模型的背景，心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血两种，全心缺血主要靠注射药物（如异丙肾上腺素等），左心室缺血主要靠手术对动物的冠状动脉左降支进行紧扎实现。

由于左心室缺血对临床的意义更大，所以研究心肌缺血药物时这个模型是必须的。

（1）术前12小时给动物禁食（2）将动物注射10%水合氯醛（0.4mL/100g）麻醉后固定在手术台上（3）用笔型静脉置留针进行气管插管，插好后可用手术刀柄靠近气管，如果见气雾，就证明成功，连接动物呼吸机，参数为：呼吸频率85；呼吸比1：1；潮气量为18ml（4）胸部被毛、酒精棉消毒，在胸部左侧3~4肋间剪开皮肤，如图1（5）分离肌肉露出肋骨，切口位置有两块肌肉，胸浅肌和胸深肌，注意按照肌肉的纹路分离可以避免将肌肉扯烂，如图2（6）在第三根肋骨下用止血钳将肌肉分离开，然后左手用止血钳挑住肋骨，右手持剪刀剪开第三根肋骨，如图3（7）用止血钳将剪断的肋骨夹住掰开，放入开睑器，用止血钳剥离心包膜，如图4（8）用止血钳将胸腺（心脏上面白的像脂肪一样的东西）夹住拉出，如图5（9）在左心耳与肺动脉圆锥间穿6~0号线，拉紧丝线，形成心肌缺血，观察线扎紧的部位上下大约2mm范围的心肌是发白色的，如图6（10）闭合胸腔，注意将胸腔内的空气挤出（这点非常关键，这个模型最容易失败导致大鼠死亡的就是这个地方），对肌肉和皮进行缝合，挤空气的手法如图7（11）结扎术后6小时可进行TTC染色：将大鼠脱颈处死，打开胸腔，将心脏剪下，用生理盐水将心脏清洗干净并排出心脏内的淤血，沿冠状沟将心房切除留下心室，用刀片将心脏切成1mm厚的切片，放入0.1%的TTC磷酸盐缓冲液（pH 7.4）37℃水浴7~10分钟，取出切片用生理盐水冲洗数次，观察结果。

非梗死区因脱氢酶还原TTC而呈红色，梗死区因脱氢酶流失而呈白色，将梗死区和非梗死区分离并分别称重，梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。

下图是染色的结果，图8结扎位置，梗死的地方其实肉眼大致能看出，和其他地方相比发白，图9：下面再发正常大鼠和梗死大鼠的心电图区别，是用的PowerLab做的，正常的如下22小时后的心电。