小鼠心肌微血管内皮细胞使用说明

小鼠主动脉内皮细胞小鼠主动脉内皮细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠主动脉内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的小鼠主动脉内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。

培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。

4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

小鼠主动脉内皮细胞产品简介：1、产品名称：C57小鼠主动脉内皮细胞（Mouse Aortic Endothelial Cells）2、组织来源：C57小鼠心肌主动脉3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠主动脉内皮细胞简介：心肌主动脉是供给心脏血液的动脉。

主动脉内皮细胞分离自正常C57小鼠心肌主动脉，呈单层扁平分布。

内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。

它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。

内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最少的微血管。

本公司生产的C57小鼠主动脉内皮细胞采用混合酶消化而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，CK-18免疫荧光鉴定细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

大鼠肺微血管内皮细胞编号名称规格北京派瑞金GK1001大鼠肺微血管内皮细胞5×105cells/瓶为能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的大鼠肺微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

大鼠肺微血管内皮细胞简介：1、名称：大鼠肺微血管内皮细胞2、组织来源：大鼠肺血管组织3、规格：5×105cells/25cm2培养瓶4、细胞简介：大鼠肺微血管内皮细胞分离自正常大鼠肺血管组织，血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。

细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列。

肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障，该屏障对于肺气体交换，调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。

本公司生产的大鼠肺微血管内皮细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度75%~85%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5、培养基信息：1）培养基类型：1640培养基(GIBCO，添加NaHCO31.5g/L，Sodium Pyruvate0.11g/L) 2）添加因子：优质胎牛血清10%，细胞生长因子等大鼠肺微血管内皮细胞使用方法：收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1.取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

成年大鼠心肌微血管内皮细胞的分离与培养陈小燕;樊梦雅;李慧;蒋易楠;靖静;张海龙【摘要】目的本文建立一种简便、高效的成年大鼠心肌微血管内皮细胞分离及培养的方法.方法选取7~8周龄Wistar大鼠,麻醉后开胸取出心脏,采用离体心脏灌流和酶消化法进行心肌微血管内皮细胞的分离;取第3代细胞观察其增殖特征并绘制增殖曲线;用免疫细胞化学和免疫荧光对细胞的第Ⅷ因子相关抗原和CD31进行鉴定,利用基质胶检验其血管形成能力.结果体外培养心肌微血管内皮细胞呈多边形或梭形,具有典型的铺路石样生长特点;同时,第Ⅷ因子相关抗原和CD31呈阳性;具备血管形成能力.结论本方法培养的成年大鼠心肌微血管内皮细胞具有较高的纯度,方法简便易行,可用于心血管疾病基础及临床研究.%Objective To establish a simple and efficient method for isolation and culture of adult rat cardiac micro-vascular endothelial cells. Methods Wistar rats were anesthetized and thoracotomy was performed. Cardiac micro-vascular endothelial cells were isolated by heart perfusion and enzyme digestion. The morphology and growth curve of the third generation cells were examined by inverted microsc opy. Its molecular markers factor Ⅷ-related antigen and CD31 were detected by immunocytochemistry and immunofluoresence. The angiogenic ability was examined by matrigel. Results The primary cultured cardiac microvascular endothelial cells in vitro were polygonal or fusiform with typical paving stone-like growth characteristics. At the same time,the cells were positive stained by factorⅧ-related antigen and CD31 and showed angiogenic ability. Conclusions Cardiac microvascular endothelial cells cul-tured by this method possess high purity. The method is easy tooperate and can be used for laboratory and clinical research of cardiovascular diseases.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2018(038)004【总页数】5页(P530-534)【关键词】细胞培养;内皮细胞;成年大鼠;心肌微血管【作者】陈小燕;樊梦雅;李慧;蒋易楠;靖静;张海龙【作者单位】河南大学医学院抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室细胞与分子免疫重点实验室,河南开封475004;河南大学医学院抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室细胞与分子免疫重点实验室,河南开封475004;河南大学医学院抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室细胞与分子免疫重点实验室,河南开封475004;郑州大学基础医学院,河南郑州450001;河南大学医学院抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室细胞与分子免疫重点实验室,河南开封475004;河南大学医学院抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南省抗体药物国际联合实验室细胞与分子免疫重点实验室,河南开封475004【正文语种】中文【中图分类】R331心肌微血管是深入心脏内的终末细小分支，在心脏内分布广泛，结构上与其他血管不同，由单层内皮细胞和细胞外基质组成；微血管内皮细胞在表型与功能上均表现出不同于大血管内皮细胞的异质性，且其性质与功能在不同组织器官之间也具有显著差异[1]。

成年小鼠心肌成纤维细胞的分离和原代培养物品准备：6-8周成年小鼠、眼科剪、眼科镊、75%酒精、PBS缓冲液、细胞培养皿、细胞培养瓶、15ml细胞离心管、恒温水平摇床、低速水平离心机、倒置显微镜、DMEM/F12细胞培养基、胎牛血清、胶原酶II、胰蛋白酶等。

操作步骤：（1）取出2只成年小鼠心脏，并将它们置于含有冰冷的PBS的培养皿中。

（2）将心脏置于无菌细胞培养皿中，并在无菌条件下进行操作。

使用剪刀将心脏切成10块，使用解剖刀将它们缩小至1mm的尺寸。

（3）将组织小块移到盛有PBS的无菌细胞培养皿中，清洗后弃去PBS。

（4）加入2ml消化缓冲液并在37℃恒速水平摇床下消化组织5分钟。

注意：摇床速度应调整至80r，以使所有组织片流动并且不会坐在底部，但不应太强以至不能破坏细胞。

消化酶（胶原酶II: 1mg/ml，胰酶: 0.75mg/ml）（5）将混合物放置1分钟，使组织沉淀并丢弃含有碎片和血细胞的上清液。

（6）加入2ml消化缓冲液并在37℃恒速水平摇床下消化组织30分钟。

（7）将混合物放置１分钟使组织沉淀到底部，并用移液管收集上清液。

不要收集倾向于漂浮的组织碎片。

（8）将上清放入含有2ml成纤维细胞培养基的15ml细胞离心管中。

（9）800r，离心5min。

（10）将细胞重悬于3-4ml培养基中。

（11）重复步骤6-10，直到所有组织溶解（通常7-10次）。

（12）将细胞悬液平铺到细胞培养皿瓶中，并在37℃下在具有5%二氧化碳的细胞培养箱中培养２小时。

（13）２ｈ后显微镜下观察细胞汇合。

此时成纤维细胞类似于小圆点。

（14）收集并丢弃上清液。

用2.5ml温热的PBS洗涤３次，并用10ml 新鲜的成纤维细胞培养基补充。

在37℃和5%二氧化碳的细胞培养箱中培养。

小鼠肺微血管内皮细胞小鼠肺微血管内皮细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠肺微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

小鼠肺微血管内皮细胞注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。

4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

小鼠肺微血管内皮细胞其他相关小鼠原代细胞：小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞小鼠肺大动脉内皮细胞小鼠前脂肪细胞小鼠肺动脉成纤维细胞小鼠成骨细胞小鼠肺大静脉内皮细胞小鼠关节软骨细胞小鼠气管和支气管上皮细胞小鼠胎儿表皮角质形成层细胞小鼠胰岛细胞小鼠成年表皮角质形成层细胞小鼠胰腺星状细胞小鼠皮下脂肪细胞小鼠胰腺导管上皮细胞小鼠内脏脂肪细胞小鼠颌下腺上皮细胞小鼠脑动脉血管内皮细胞小鼠腮腺细胞小鼠脑动脉血管平滑肌细胞小鼠乳腺上皮细胞小鼠脑静脉血管内皮细胞小鼠胰腺上皮细胞小鼠脑静脉血管平滑肌细胞小鼠甲状腺上皮细胞小鼠脑膜细胞小鼠淋巴管内皮细胞小鼠神经胶质细胞小鼠淋巴成纤维细胞小鼠海马神经元细胞小鼠外周血白细胞小鼠脑微血管内皮细胞小鼠骨髓基质细胞小鼠脑成纤维细胞小鼠食管上皮细胞小鼠神经小胶质细胞小鼠食管平滑肌细胞小鼠雪旺氏细胞小鼠肠动脉内皮细胞小鼠小脑颗粒细胞小鼠肠静脉内皮细胞小鼠嗅鞘细胞小鼠肝实质细胞小鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠肝动脉内皮细胞小鼠小梁网细胞小鼠肝动脉平滑肌细胞小鼠视网膜色素上皮细胞小鼠小肠血管内皮细胞小鼠视网膜muller细胞小鼠小肠隐窝上皮细胞小鼠虹膜色素上皮细胞小鼠肝内胆管上皮细胞小鼠晶状体上皮细胞小鼠胃粘膜上皮细胞小鼠角膜上皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠视网膜神经节细胞小鼠肝星形细胞小鼠角膜成纤维细胞小鼠直肠平滑肌细胞小鼠脉络膜血管细胞小鼠小肠平滑肌细胞小鼠牙乳头细胞小鼠结肠平滑肌细胞小鼠肝外胆管上皮细胞小鼠肠上皮细胞小鼠肝Kupffer细胞小鼠肠微血管细胞小鼠骨髓间充质干细胞小鼠肠巨噬细胞小鼠下丘脑神经元细胞小鼠子宫内膜上皮细胞小鼠睾丸支持细胞小鼠卵巢颗粒细胞小鼠心肌微血管内皮细胞小鼠子宫颈上皮细胞小鼠真皮微血管上皮细胞小鼠子宫平滑肌细胞小鼠胚胎成纤维细胞小鼠卵巢上皮细胞小鼠心脏干细胞小鼠子宫成纤维细胞小鼠神经干细胞小鼠卵巢成纤维细胞小鼠骨髓来源内皮祖细胞小鼠肾实质细胞小鼠椎间盘髓核细胞小鼠肾系膜细胞小鼠肾足突细胞小鼠膀胱上皮细胞小鼠肾小管平滑肌细胞小鼠膀胱平滑肌细胞小鼠肾成纤维细胞小鼠肾动脉内皮细胞小鼠尿道上皮细胞小鼠肾动脉平滑肌细胞小鼠输尿管上皮细胞小鼠肾小管上皮细胞小鼠肾管状上皮细胞小鼠肾小球内皮细胞小鼠心肌细胞小鼠前列腺上皮细胞小鼠心肌成纤维细胞小鼠肾上皮细胞小鼠主动脉内皮细胞小鼠膀胱成纤维细胞小鼠主动脉平滑肌细胞小鼠血管外膜成纤维细胞。

成年心肌梗死小鼠心肌细胞去分化现象观察沈文艳;陈瑶;李军【摘要】目的观察成年心肌梗死小鼠心肌细胞是否存在去分化现象.方法 20只成年小鼠随机分为观察组和对照组各10只,观察组制备心肌梗死模型,对照组仅行假手术处理.采用RT-PCR法检测两组心肌组织α-横纹肌肌动蛋白(α-SA)、横纹肌蛋白(α-actinin)、转录因子nkx2.5、肌细胞增强因子2(mef2)、细胞增殖核抗原(Ki67)、于细胞标记物血管内皮生长因子受体(flk-1) mRNA,采用免疫荧光染色法检测两组心肌组织磷酸化组蛋白(PH3)、连接蛋白43(cx43).结果观察组心肌组织α-SA、α-actinin、nkx2.5、mef2 mRNA表达量均低于对照组,Ki67、flk-1、mRNA表达量及PH3、cx43均高于对照组,P均＜0.05,结论成年心肌梗死小鼠心肌细胞存在去分化现象.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)018【总页数】3页(P34-36)【关键词】心肌梗死;心肌细胞;细胞去分化;α-横纹肌肌动蛋白;横纹肌蛋白;转录因子;细胞增殖核抗原;磷酸化组蛋白【作者】沈文艳;陈瑶;李军【作者单位】上海交通大学医学院附属仁济医院,上海200217;上海交通大学Med-X临床干细胞研究中心;上海交通大学Med-X临床干细胞研究中心;上海交通大学Med-X临床干细胞研究中心【正文语种】中文【中图分类】R544.22急性心肌梗死(AMI)是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死，是引起充血性心力衰竭的重要原因[1]。

心肌梗死发生后，梗死区域的心肌细胞因为缺血损伤而失去了功能，心脏的泵血功能严重受损[2, 3]。

目前常用治疗心肌梗死的方法一般是药物和介入治疗，这些治疗方法对已梗死的心肌无法修复。

传统上认为，哺乳动物的心脏是一个终末分化器官[4]，而心肌细胞是一种终末分化的细胞，心肌梗死后心肌细胞没有再生能力而导致心力衰竭的发生[5]。

小鼠主动脉内皮细胞提取方法
提取小鼠主动脉内皮细胞的方法通常包括以下步骤：
1. 将小鼠安乐死，并取出主动脉。

2. 将主动脉放入含有冷平衡盐溶液的容器中，并迅速清除外部组织和血块。

3. 转移到含有PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）的容器中，用PBS 清洗主动脉表面。

4. 将主动脉切成小段，然后将其转移到含有PBS和胰蛋白酶的容器中，在37°C下消化30-45分钟。

5. 转移到含有PBS的容器中，用PBS洗涤主动脉段。

6. 使用镊子将主动脉段从内外膜分离，并转移到含有PBS和0.05% EDTA的容器中，在37°C下轻轻反复摇动5-10分钟以去除内外膜。

7. 使用显微镊子取出内皮细胞，可进行后续实验。

需要注意的是，在整个过程中要保持组织的冷却和湿润，以确保细胞的活力。

此外，实验过程中要注意无菌技术的使用，以避免细菌或其他污染物的干扰。

不同实验目的可能需要对提取方法进行适当的修改。

内皮细胞成管实验步骤内皮细胞是一种具有重要生物学功能的细胞类型，其在血管形成和维持血管功能方面起着关键作用。

内皮细胞成管实验是一种常用的实验方法，用于研究内皮细胞的管腔形成能力和血管生成的机制。

下面将介绍内皮细胞成管实验的详细步骤。

步骤一：细胞培养和准备1.1 培养内皮细胞：从小鼠或人的血管组织中分离内皮细胞，并将其培养在含有内皮细胞培养基的培养皿中，细胞密度一般为1×10^4 - 1×10^5个细胞/ml。

1.2 细胞的准备：用内皮细胞培养基洗涤细胞，将细胞悬浮于含有血清的培养基中。

步骤二：细胞的涂层和培养2.1 准备基质涂层：在培养皿中加入适量的基质涂层溶液（如胶原、玻璃纤维基质等），在室温下静置1小时或在4°C下静置过夜。

2.2 细胞的涂层：将细胞悬液加入基质涂层的培养皿中，使细胞均匀分布在涂层表面。

2.3 培养细胞：将培养皿放入细胞培养箱中，以37°C、5% CO2的条件下培养。

步骤三：细胞的处理和观察3.1 添加适当的刺激物：在培养基中加入适当的刺激物（如VEGF、FGF等），以促进内皮细胞的管腔形成。

3.2 处理时间的控制：根据实验的需要，控制细胞处理的时间，通常为24-72小时。

3.3 细胞的观察：使用光学显微镜观察培养皿中的细胞形态变化，特别注意细胞的管腔形成情况。

步骤四：结果分析和图像获取4.1 细胞成管评价：根据观察到的管腔形成情况，使用成管指数等评价指标对细胞成管能力进行定量分析。

4.2 图像获取：使用显微镜和成像设备获取细胞成管的图像，用于结果展示和进一步分析。

步骤五：数据分析和结果呈现5.1 数据的统计分析：使用合适的统计学方法对实验结果进行分析，比较不同处理组之间的差异。

5.2 结果的呈现：将实验结果以表格、图表或图片的形式进行呈现，准确描述实验结果和得出的结论。

内皮细胞成管实验是研究内皮细胞生物学功能的重要方法之一。

通过对内皮细胞的培养、处理和观察，可以深入了解内皮细胞的管腔形成过程和相关的信号通路。

常见大、小鼠实验性心血管病模型专家共识中国心血管病患病率处于持续上升阶段，2020年《中国心血管健康与疾病报告》推算心血管病现患病人数3.3亿[1]，其中脑卒中、冠状动脉性心脏病（冠心病）、心力衰竭的患病人数众多，而高血压、心房颤动、动脉粥样硬化、心肌病不仅是心血管病，也是缺血性和出血性脑卒中、冠心病和各种心力衰竭等心血管并发症的主要危险因素。

由于绝大多数心血管病的确切原因还不明确，动物模型为解开心血管病的发病机制和测试新型治疗策略提供了有效的解决方法。

为了提高动物模型的可靠性，2005年美国心脏协会（American Heart Association，AH A）制定了实验动物血压测量建议的科学声明[2]，强调了准确而有意义的血压测量对于解释血管生物学、动脉粥样硬化和其他形式的心血管病研究的重要性。

2012年AHA发表了心力衰竭动物模型科学声明[3]，建议建立动物模型的目的在于确定心力衰竭的原因或测试可能预防或治疗心力衰竭的措施。

2017年AHA在动物动脉粥样硬化研究设计、实施报告中指出[4]：为了避免不同研究组的结果矛盾，建议动物模型的选择应对人体疾病模拟的可靠性进行评述，并应关注实验设计及其资料解释，提高动脉粥样硬化病变测量和表型准确性的标准方法。

2019年AHA在高血压动物模型的科学声明中指出[5]：为了提高高血压及其合并症发病机制、预防和治疗的水平，动物模型的实用性取决于模型代表人类高血压类型的有效程度，包括对治疗的反应，模型的可重复性和实验设计等研究的质量问题。

由此可见，国际上越来越关注动物模型质量问题。

实验性大、小鼠动物能有效地模拟人类心血管病，由于繁殖能力强，易于检测等优点，目前是我国心血管病研究的主要动物模型之一。

为了提高实验性大、小鼠动物模型在我国心血管病转化医学研究中的临床参考价值。

中国心胸血管麻醉学会精准医疗分会组织标准委员会相关专家通过文献复习和论坛讨论，对高血压、动脉粥样硬化、心房颤动、心肌病和心力衰竭实验性大、小鼠心血管病模型的研究现状、存在问题和应用前景等进行概述，并撰写成共识，目的旨在为研究者规范实验性大、小鼠心血管病模型研究提供参考。

小鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠视网膜微血管内皮细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠视网膜微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的小鼠视网膜微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。

培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。

4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

小鼠视网膜微血管内皮细胞产品简介：1、产品名称：小鼠视网膜微血管内皮细胞（Mouse Retinal Microvascular EndothelialCells）2、组织来源：小鼠视网膜组织3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠视网膜微血管内皮细胞简介：小鼠视网膜微血管内皮细胞（Rat Retinal Microvascular Endothelial Cells）来源于成年小鼠视网膜组织，其是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力，调节血压，抗血栓形成等有重要作用，在视网膜血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。

血管内皮细胞培养方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：血管内皮细胞是一种位于血管内壁的重要细胞，它们在维持血管结构稳定、调控血管张力和血液循环等方面发挥着重要作用。

对血管内皮细胞进行培养研究具有重要的生物学意义和临床应用前景。

下文将介绍一种常见的血管内皮细胞培养方法，希望能为相关研究工作提供一些帮助。

一、血管内皮细胞的来源：血管内皮细胞主要来源于人体的血管组织，通过合适的方法可以从血管中分离和提取。

通常来说，可以选择人体动脉、静脉等血管组织作为细胞来源，从中分离得到血管内皮细胞进行培养。

在实验动物中，也可以选择小鼠、大鼠等动物的血管组织来获取血管内皮细胞。

1. 血管组织的分离和处理：需要将血管组织从人体或动物中取出，并去除周围的结缔组织和肌肉组织。

然后，将血管组织切成小段，并用适当的消化酶进行消化处理，使内皮细胞从血管组织中释放出来。

2. 血管内皮细胞的分离和纯化：经过消化处理后，将获得的细胞悬液进行离心分层，采集含有内皮细胞的上清液。

然后，可以通过负性筛选或CD31抗体磁珠等方法将内皮细胞进行进一步的分离和纯化。

3. 血管内皮细胞的培养和传代：将得到的血管内皮细胞接种到预先涂有明胶或基底膜的培养皿中，加入适当的培养基和生长因子，将细胞放入细胞培养箱中进行培养。

随着细胞的增殖和扩张，可以进行细胞的传代，维持内皮细胞培养的稳定性。

4. 血管内皮细胞的鉴定与应用：在进行内皮细胞培养的过程中，需要对细胞进行鉴定，确认其具有内皮细胞的特征和功能。

通过免疫组化染色、PCR检测等方法，可以检测内皮细胞表面标记物和相关基因的表达情况。

血管内皮细胞在动脉粥样硬化、血管疾病等方面的研究应用也具有广泛的前景。

1. 培养环境的控制：血管内皮细胞对培养环境的要求比较严格，需要在无菌条件下进行培养，并保持适当的温度、湿度和CO2浓度等参数。

2. 培养基的选择：选择适合血管内皮细胞生长和扩张的培养基是培养过程中的关键。

关于小鼠动脉血管内皮细胞的原代培养和鉴定【摘要】目的探讨小鼠动脉血管内皮细胞分离、培养的方法，为进一步实验研究提供相应的技术手段。

方法手术显微镜辅助下取小鼠主动脉，去除外膜及脂肪组织，将血管剪成1 mm×1 mm大小的组织块，用植块法在含20% 胎牛血清的DMEM培养液中培养。

倒置相差显微镜观察细胞形态和生长特征，免疫细胞化学方法进行血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原（von Willebrand factor，vWF）鉴定。

结果60 h后，相差显微镜下可观察到内皮细胞从组织块边缘游出，12天左右细胞开始融合成片，免疫染色相关抗原检测呈阳性。

结论用组织块培养方法可以获取较为满意的小鼠血管内皮细胞。

【关键词】小鼠血管内皮细胞原代培养Abstract： Objective To develope an efficient protocol for the isolation and culture of vascular endothelial cells from mouse aorta. Methods The aorta was removed from mice under an operation microscope，with the periadventitial fat and connective tissue cleared of carefully. The vessel was opened longitudinally and cut into small 1 mm×1 mm cubes. The cubes were placed on six-well plates with the intima side down and covered with a little DMEM containing 20% fetal bovine serum. The cell growth was evidenced by revealing the morphological characteristics and immunological marker VIII factor (or von Willebrand factor， vWF). Results Endothelial cells were found migrate out of the aortic cubeafter 60 h， forming confluent monolayer of a cobblestone pattern when observed under inverted phase-difference microscope about 12 days later. Immunohistochemical labeling showed the characteristic positive reaction to vWF in the cytoplasm of the new cells. Conclusion A reliable methodis described to isolate and propagate vascular endothelial cells from mouse aorta by cultivating small tissue cubes.Key words: mice；vascular endothelial cells； culture在异种器官移植中，移植物血管内皮细胞是受体血流首先接触的组织，也是受体抗体攻击的主要靶细胞［1］。

有氧运动通过心肌细胞吞运内皮细胞来源外泌体抑制细胞凋亡吴方南1，2，李卓1，田振军1*（1.陕西师范大学体育学院暨运动生物学研究所，陕西西安710119；2.西安交通大学生命科学与技术学院，陕西西安710049）摘要：目的：探讨运动干预对H9C2细胞内吞外泌体及抑制细胞凋亡的影响。

方法：C57/BL6小鼠随机分为假手术组（S组）、心梗组（MI组）、心梗有氧运动组（ME组），每组8只，采用左冠状动脉前降支结扎术（left anterior de‐scending of the coronary artery,LAD）制备MI模型，ME组手术结束1周后进行持续6周的有氧运动。

训练结束后超声检测心脏LVIDs、LVIDd、FS和EF，Masson染色检测心肌纤维化；使用无外泌体培养基培养HUVEC细胞，并提取外泌体孵育H9C2细胞。

使用AMPK激动剂（AICAR，2mmol/L，24h）、脂多糖（LPS，10μg/mL，4h）干预H9C2细胞。

NTA和Western Blotting鉴定、检测提取的外泌体；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡水平；Western Blotting 检测小鼠心肌及H9C2细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-Caspase3。

结果：与MI组比较，ME组心功能指标EF和FS显著增加（P＜0.05），细胞凋亡蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）；NTA粒径及Western Blotting鉴定外泌体为阳性结果；正常组细胞无外泌体内吞现象；与单纯LPS诱导的H9C2凋亡组比较，AICAR干预后可显著促进H9C2对外泌体的吞运作用；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡阳性数目显著减少（P＜0.05），且凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）。

小鼠心肌细胞小鼠心肌细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的小鼠心肌细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的小鼠心肌细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。

培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。

4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。

5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

小鼠心肌细胞产品简介：1、产品名称：小鼠心肌细胞（Mouse myocardial cells）2、组织来源：小鼠胚胎心室肌组织3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠心肌细胞简介：小鼠心肌细胞分离自小鼠胚胎心脏组织，细胞呈多边形等不规则形状，2天以后大部分伸出伪足呈巴掌状部分心肌细胞会出现搏动，成熟的心肌细胞增殖缓慢或不增殖。

体外培养的小鼠心肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

本公司生产的小鼠心肌细胞采用混合酶解法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

心脏微血管内皮细胞中vecadherin的表达概述说明1. 引言1.1 概述心血管疾病是当前全球范围内导致死亡和残疾的主要原因之一。

心脏微血管是心脏供血的重要组成部分，而在心脏微血管内皮细胞中的vecadherin表达对于维持其结构和功能的稳定至关重要。

vecadherin作为紧密连接蛋白，在细胞间起到粘附和信号传递等多种功能，在保持正常的心脏微血管内皮屏障功能以及调节心血管系统平衡中发挥着重要作用。

1.2 文章结构本文将通过以下几个方面来深入探讨心脏微血管内皮细胞中vecadherin的表达与相关性：第2部分将介绍微血管内皮细胞与心脏健康之间的关系，包括微血管内皮细胞的定义、功能和其与心脏健康之间的联系，还将回顾前人在该领域所取得的研究成果。

第3部分将着重分析vecadherin这一重要结构蛋白的基本特性，包括其结构和作用机制，以及在心脏微血管内皮细胞中的表达调节机制和与其他相关蛋白质的相互作用研究进展。

第4部分将重点探讨vecadherin在心脏微血管内皮细胞中的表达异常与心血管疾病之间的关联性分析，包括表达异常对心脏微血管内皮细胞功能的影响、vecadherin表达异常与心血管疾病发生发展的相关性，并介绍临床研究中vecadherin表达异常的检测与诊断方法。

最后，在第5部分中总结本文的主要研究结果，提出可能的未来研究方向，并对心脏微血管内皮细胞中vecadherin的表达所具有的意义和应用前景进行讨论。

1.3 目的本文旨在系统概述并深入解析心脏微血管内皮细胞中vecadherin的表达及其与心脏健康之间存在的关系。

通过对该领域前人研究成果和现有知识进行回顾和整理，探索vecadherin在心脏微血管内皮细胞中的表达异常与心血管疾病之间的关联性，并为进一步的相关临床研究提供参考和启示。

同时，本文也旨在为未来研究工作提出可能的方向，并讨论心脏微血管内皮细胞中vecadherin 表达的意义和应用前景。

一种小鼠主动脉内皮细胞的分离及培养方法说实话小鼠主动脉内皮细胞的分离及培养方法这事，我一开始也是瞎摸索。

我试过好几种方法，有一回，我按照一个看起来很靠谱的文献里说的做。

首先就是处死小鼠这一步，听起来简单，其实要很小心。

就好比你要拆除一个特别精密的小零件一样，手要稳准狠。

我刚开始的时候手有点抖，导致取主动脉的时候就不是很顺利。

这中间有个小窍门就是一定要让小鼠处于合适的麻醉或者处死状态，要是它突然动一下，那就全乱套了。

取主动脉的时候呢，因为主动脉很细小，就像在一堆细细的面条里面找到一根特定的面条那样难。

我曾经就因为镊子用得不顺手，把主动脉弄破了，这一破，基本上前面的工作就白费了。

所以，工欲善其事必先利其器，镊子剪刀这些小工具，一定要选那种尖细又合手的。

取出来主动脉之后，就要开始处理细胞分离了。

我试过用酶来消化，但是这个酶的浓度啊，我当时就把握不好。

浓度太高吧，会把细胞都给毒死了似的，浓度低呢，又分不出来多少细胞。

就像你做饭放盐，多了就咸得没法吃，少了又没味道。

在无数次尝试之后，我感觉大概这个酶的浓度到多少多少是比较合适的，当然这个数值可能不是完全精准，但是能做出效果。

再就是培养了，培养的时候那个细胞生长的环境很重要。

比如说培养皿就像房子，得先把房子打扫干净，也就是把培养皿进行非常严格的消毒处理。

那培养基就像是食物，得选对适合主动脉内皮细胞生长的培养基。

我在这方面也走了不少弯路，刚开始随便选了一种培养基，结果细胞根本就不怎么长，就像把树栽在沙漠里肯定不行啊。

后来换了适合的培养基，还有就是温度、湿度这些环境一定要控制好，就好比人类不能在高温火山或者冰冷极地好好生活一样，细胞也需要合适的温湿度。

还有就是观察细胞的时候，千万不能偷懒。

我有时候忘记及时观察细胞状态，结果细胞就被污染了，那些污染就像侵略者一样，一进来就把细胞都破坏掉了。

所以要时不时地看看细胞有没有变化。

虽然这个过程很折腾，但只要耐心地不断尝试，总能找到适合自己的方法的。