集中空调系统水中嗜肺军团菌脉冲场凝胶电泳指纹图谱分析

深圳市酒店集中空调通风系统微生物污染基线调查林爱红,梁焯南,叶宝英,曾惠芳,张　然 摘要:　目的　了解深圳市公共场所集中空调通风系统微生物污染状况。

　方法　按卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范》,随机抽取深圳市32家宾馆运行2年以上的集中空调通风系统42套,检测通风系统的风管积尘量及积尘中细菌总数、真菌总数、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及冷却塔水、冷凝水中的军团菌。

　结果　集中空调风管积尘中真菌总数污染严重;管道积尘量中等污染;积尘中细菌总数严重污染率为81.9%。

32家宾馆的集中空调冷却水、冷凝水中检出3株军团菌。

　结论　本次调查的公共场所集中空调通风系统微生物污染严重,应加强卫生管理。

关键词:　空气污染,公共场所;集中空调通风系统;微生物污染中图分类号:R126.4 文献标识码:B 随着我国经济的发展和人民生活水平的提高,集中空调越来越广泛地应用于宾馆、商场和办公写字楼等公共场所[1],公共场所集中空调通风系统(以下简称空调系统)若受微生物污染,微生物会在温、湿度适宜的部件中大量生长繁殖,随空调送风进入空调环境可能造成传染病的流行(如嗜肺军团菌等)[2]。

美国环保局、丹麦技术大学等在美国和欧洲的调查结果表明,室内污染中来自于空调通风系统的占42%～53%[3]。

为掌握基线资料,预防传染性疾病通过空调系统在公共场所的传播,为卫生管理提供技术依据,遂对深圳市3星级以上宾馆或酒店中空调系统微生物污染状况进行了专项调查。

1　材料与方法1.1　采样仪器　M AS-100型撞击式大气采样器,采样空气流量为100L min,RRK-SR-Ⅰ型定量采样机器(北京人人康空气净化技术有限公司)。

1.2　采样点　随机抽取深圳市22家3星级以上宾馆或酒店运行2年以上的空调系统,每家各抽取1～2套共42套,每套空调系统各随机抽取4～5个送风口,共采集223份;采集送风管内表面212份、冷却水75份、冷凝水84份等样品,进行微生物污染指标的检测调查。

福建省嗜肺军团菌血清1型及血清6型菌株PFGE分型研究原灵;陈爱平;杨劲松;林震宇【摘要】The aim was to investigate the genotyping characteristics of Legionella pneumophila serotype I (LP1) and VI (LP6) strains isolated from cooling tower water and condensed water in air conditioners of public places of Fujian Province from 2008 to 2010. The pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was applied to test 57 strains of LP1 and 15 strains of LP6 respectively, the results of which were underwent cluster analysis by BioNumerics. The 57 strains of LP1 could be divided into 40 PFGE types, and the similarity coefficients were between 24. 107% and 100. 000%. There were significant differences of PFGE types among most LP1 strains without dominant types. The PFGE types of LP1 strains isolated from different areas showed distinct, identical or similar bands. There were difference in similarity coefficients in the same district without dominant types. The 15 strains of LP1 could be divided into 12 PFGE types, and the similarity coefficients were between 27. 870% and 100. 000%. Results indicate that LP1 and LP6 strains isolated from cooling tower water and condensed water from air-conditioners of public places in Fujian Province from 2008 to 2010 display great diversity in gene.%目的研究福建省2008年至2010年公共场所空调冷却塔水及冷凝水中分离的嗜肺军团菌血清Ⅰ型(LP1)及血清Ⅵ型(LP6)的基因特征.方法应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对57株LP1型军团菌及15株LP6军团菌进行电泳,并用BioNumerics(version 6.0,Applied Maths,Inc)软件包对其进行聚类分析.结果 57株LP1军团菌可分为40种PFGE型,菌株间相似性系数在24.107%~100.000%之间不等,大部分菌株的PFGE型别差异明显,无优势型别.不同地区分离的LP1军团菌既有差异较大的带型,也存在相同和相似的带型;相同地区,菌株间相似性系数存在差异,无优势菌株.15株LP6军团菌可分为12个不同的PFGE型别,菌株间相似性系数在27.87%~100.00%之间.结论 2008-2010年福建省公共场所空调冷却塔水及冷凝水中分离的LP1及LP6军团菌呈现基因多样性.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2012(028)005【总页数】3页(P461-463)【关键词】嗜肺军团菌1型;嗜肺军团菌6型;脉冲场凝胶电泳;指纹图谱;PFGE型【作者】原灵;陈爱平;杨劲松;林震宇【作者单位】福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001;福建省疾病预防控制中心,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R378军团病是近20年以来新发现传染病之一，并且该病已成为世界各国及我国普遍关注的公共卫生问题。

空调冷却水嗜肺军团菌的分离及鉴定报告
罗隆泽;谢仁栋;兰纪康;吕强;孙莉;祝小平;任红宇;邱琼;卢锡华;万超群
【期刊名称】《预防医学情报杂志》
【年(卷),期】1999(15)2
【摘要】四川省在外环境中分离到嗜肺军团菌，尚未见于以往文献。

１９９７年１１月自空调冷却水中分离到两株细菌（编号为９７００４、９７００８），其菌体形态、培养特性、生化反应及ＰＣＲ分析均符合嗜肺军团菌鉴定要求，经试管凝集、间接免疫荧光鉴定证实为嗜肺军团菌血清１型。

【总页数】2页(P67-68)
【关键词】嗜肺军团菌;分离;鉴定;空调冷却水
【作者】罗隆泽;谢仁栋;兰纪康;吕强;孙莉;祝小平;任红宇;邱琼;卢锡华;万超群【作者单位】四川省卫生防疫站;中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所【正文语种】中文
【中图分类】R378.99
【相关文献】
1.广东省惠州市集中空调系统冷却水及冷凝水中嗜肺军团菌脉冲场凝胶电泳分型分析 [J], 刘思超;罗泽燕;徐励琴;杨剑英;冯伟明;邬军军
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3.广州市环境及空调冷却水中釜山军团菌的分离与鉴定 [J], 范晓姗;胡朝晖;顾全;赵利伟;严慧;朱庆义
4.集中空调冷却水中分离出多种血清型嗜肺军团菌 [J], 刘继倩;宋驰萍;骆玲飞;王小光;汪萍;王海青;张颖华;欧阳霖
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高级卫生专业资格（正高副高）临床医学检验临床微生物专业资格(正高副高)模拟题2021年(70)(总分97.XX99,考试时间120分钟)多项选择题1. 属于非发酵菌的是A. 艾肯菌属B. 金氏菌属C. 无色杆菌属D. 肠杆菌属E. 黄杆菌属2. 非发酵菌是一群不利用或仅以氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性菌，主要有（）A. 产碱杆菌属B. 假单胞菌属C. 无色杆菌属D. 不动杆菌属E. 莫拉菌属3. 铜绿假单胞菌的生物学特性是A. 革兰阴性杆菌B. 1～3根鞭毛，运动活泼C. 4℃可生长D. 在培养基上形成有特殊气味的绿色菌落E. 在SS琼脂培养基上不生长4. 嗜麦芽窄食单胞菌的生化反应特征是A. 氧化酶试验阳性B. 氧化葡萄糖C. 水解七叶苷D. DNA酶阳性E. 液化明胶5. 对非发酵菌生长条件，叙述正确的是A. 培养温度以30℃为宜B. 大部分为专性需氧菌C. 大部分为微需氧菌D. 大部分为兼性需氧菌E. 体外培养时，不易生长6. 产碱杆菌属的生物学特征是A. 革兰阴性球菌B. 无芽胞C. 有周鞭毛D. 多数无荚膜E. O／F培养基呈碱性反应7. 氧化酶阴性的非发酵菌有（）A. 铜绿假单胞菌B. 荧光假单胞菌C. 粪产碱杆菌D. 溶血不动杆菌E. 嗜麦芽窄食单胞菌8. 非发酵菌的总体特征是A. 非发酵菌有13个属B. 革兰阴性C. 无芽胞D. 球杆状细菌E. 发酵但不氧化分解糖类A1/A2题型1. 铜绿假单胞菌引起的局部感染最常见于A. 失血性休克B. 烧伤或创伤后C. 尿路感染D. 肠道感染E. 介入性治疗后2. 铜绿假单胞菌培养特性为A. 专性需氧B. 专性厌氧C. 兼性厌氧D. 微需氧E. 以上都是3. 铜绿假单胞菌可引起的疾病为A. 任何组织化脓感染B. 菌血症C. 角膜穿孔而致失明D. 败血症E. 以上皆是4. 分离卡他莫拉菌的最佳培养基是A. 卵黄琼脂B. 巧克力兔血琼脂C. 血液琼脂D. 卵黄双抗琼脂E. 活性炭-酵母浸液琼脂培养基(BCYE)5. 肺鼻疽病是以下哪种细菌引起A. 马勒伯克霍尔德菌B. 非液化莫拉菌C. 铜绿假单胞菌D. 脑膜炎败血性黄杆菌E. 嗜肺军团菌(LP)，LP1、LP6血清型6. 不符合莫拉菌属特点的是A. 氧化酶试验阳性B. 不分解糖类C. 不产生吲哚D. 在6.5％NaCl肉汤中不生长E. 氧化酶试验阴性7. 铜绿假单胞菌可产生的致病物质是A. 内毒素，外毒素，菌毛B. 内毒素，外毒素，芽胞C. 内毒素，菌毛，芽胞D. 外毒素，菌毛，芽胞E. 外毒素，菌毛，黏附素8. 下列细菌培养所选培养基正确的是A. 钩端螺旋体接种于沙保弱培养基B. 艰难梭菌接种于厌氧血琼脂C. 氧化-发酵试验接种于含糖蛋白胨水D. 军团菌接种于BCYE琼脂E. 流感嗜血杆菌接种于营养琼脂9. 与黄杆菌有关的描述是A. 绝大多数菌株产生不溶性黄色素B. 革兰阴性杆菌C. 无鞭毛、无动力、无荚膜、无芽胞D. 可分解碳水化合物产酸不产气E. 以上均是10. 嗜麦芽窄食单胞菌的生化反应是A. 氧化酶试验阳性，缓慢氧化葡萄糖，DNA酶阳性B. 氧化酶试验阳性，水解七叶苷，液化明胶C. 氧化酶试验阴性，缓慢氧化葡萄糖，DNA酶阳性D. 氧化酶试验阴性，缓慢氧化葡萄糖，产生吲哚E. 氧化酶试验阴性，产生吲哚，DNA酶阳性11. 在含有蛋白胨的肉汤培养基中产氨，使pH上升至8.6的细菌是A. 假单胞菌属B. 不动杆菌属C. 产碱杆菌属D. 黄杆菌属E. 莫拉菌属12. 马勒伯克霍尔德菌培养特性中哪一项是错误的A. 需氧菌，42℃生长B. 营养要求较高，在普通培养基上生长缓慢，发育不良C. 在血琼脂生长良好D. 能在麦康凯上生长E. 不产生绿脓素和荧光素13. 莫拉菌分离培养时不可以在何种培养基上生长A. 血琼脂平板培养基B. 麦康凯培养基C. 心肌浸液琼脂培养基D. 5%兔血琼脂平板培养基E. SS培养基14. 男，65岁，淋巴细胞性白血病，1周前出现呼吸道感染症状，经实验室检查，鉴定为产碱杆菌感染产碱杆菌属于A. 革兰阳性非发酵菌B. 革兰阴性非发酵菌C. 革兰阳性发酵菌D. 革兰阴性发酵菌E. 革兰阳性芽胞菌15. 铜绿假单胞菌的鞭毛数量是A. 0～2根B. 1～3根C. 10～20根D. 20～30根E. 30～50根16. 进行院内感染的流行病学调查，对铜绿假单胞菌的分型方法不正确的是A. 血清学分型B. 噬菌体分型C. 质粒指纹图谱分析D. 脉冲场凝胶电泳分析E. 生化反应的区别17. 对洋葱伯克霍尔德菌的描述错误的是A. 是医院感染的常见病原菌之一B. 革兰阴性杆菌C. 需氧菌，最适生长温度35℃D. 在麦康凯琼脂上生长较快E. 在含铁培养基上（如TSI斜面），许多菌株可产生亮黄色色素18. 引起肺炎型（重症）的嗜肺军团菌(LP)，以何种血清型多见A. LP1B. LP2C. LP3D. LP5E. LP719. 男，65岁，淋巴细胞性白血病，1周前出现呼吸道感染症状，经实验室检查，鉴定为产碱杆菌感染产碱杆菌的培养特性是A. 在含有蛋白胨的肉汤中产氨，培养基pH值升高B. 在含有蛋白胨的肉汤中产氨，培养基pH值降低C. 在含有蛋白胨的肉汤中产氨，但培养基pH值无变化D. 在含有蛋白胨的肉汤中产氢，培养基pH值降低E. 在含有蛋白胨的肉汤中产氢，培养基pH值升高20. 不动杆菌中分离率最高的是A. 醋酸钙不动杆菌B. 洛菲不动杆菌C. 溶血不动杆菌D. 鲍曼不动杆菌E. 琼氏不动杆菌21. 下列关于铜绿假单胞菌毒力因子的叙述中，不正确的是（）A. 能产生外毒素B. 能产生内毒素C. 能产生溶血素D. 具有荚膜结构E. 能产生胞外酶22. 与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是（）A. 产生外毒素B. 具有内毒素C. 产生溶血素D. 产生绿脓素E. 具有菌毛23. 对鲍曼不动杆菌的描述错误的是A. 氧化酶阴性B. 动力阳性C. 硝酸盐试验阴性D. 革兰阴性球杆菌常成双排列E. 不发酵糖类24. 军团病的传播途径是A. 空气B. 食物C. 血液D. 皮肤E. 人畜25. 男，65岁，淋巴细胞性白血病，1周前出现呼吸道感染症状，经实验室检查，鉴定为产碱杆菌感染产碱杆菌的临床意义是A. 人体是其惟一寄生场所B. 一般情况下，产碱杆菌不属于人体正常菌群的一部分C. 产碱杆菌是条件致病菌D. 不易引起医院感染E. 组织缺氧时，产碱杆菌生长较快26. 铜绿假单胞菌的典型生化反应是A. 不分解葡萄糖B. 产生吲哚C. 产生H2SD. 氧化酶试验阳性E. 不分解尿素27. 非发酵菌包括A. 假单胞菌属，不动杆菌属，产碱杆菌属B. 假单胞菌属，埃希菌属，产碱杆菌属C. 莫拉菌属，黄杆菌属，肠杆菌属D. 假单胞菌属，黄杆菌属，变形杆菌属E. 假单胞菌属，气单胞菌属，黄杆菌屑28. 女，22岁，住院1周后出现呼吸道感染症状。

公共场所水环境中活嗜肺军团菌的快速检测方法郭沛;赵龙;胡翮【摘要】旨在建立一种基于16S rRNA前体的分子学检测方法用于快速检测活嗜肺军团菌,应用该方法与ISO标准法调查公共场所水环境中嗜肺军团菌的水平及污染现状.此研究方法的理论基础在于营养刺激后可诱导嗜肺军团菌16S rRNA前体的合成,后者可作为检测细胞活性的指标.分别应用预刺激RT-qPCR法和ISO法对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌以及非军团菌进行检测,并验证两种方法的特异性、灵敏度.应用预刺激RT-qPCR法和ISO法检测公共场所水环境中的嗜肺军团菌,比较两者结果的一致性.结果显示,预刺激时间大于3h时,嗜肺军团菌16S rRNA前体的增长缓慢,最佳预刺激时间设置为3h.预刺激RT-qPCR法与ISO法均能较好地检出嗜肺军团菌,特异性均为100％,预刺激法的最低检测浓度(Limit of detection,LOD)为102Cell/L,ISO标准法的LOD为104 Cell/L.预刺激法及ISO法的总阳性率分别为43.5％(30/69)和40.6％(28/69),两种方法的检出率差异无明显统计学意义(C2=0.119,P=0.730).预刺激RT-qPCR法是一种快速有效的检测活嗜肺军团菌的方法,诊断灵敏度及特异性高,是ISO标准法潜在的替代方案.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2019(035)003【总页数】7页(P203-209)【关键词】嗜肺军团菌;PCR;水环境;公共场所;16S rRNA;快速检测方法【作者】郭沛;赵龙;胡翮【作者单位】湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100;湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100;湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100【正文语种】中文军团菌病是一种细菌性疾病，主要表现为自限性非肺炎性庞蒂亚克热（Pontiac fever）和军团菌病症状，其特征是严重的呼吸道症状，包括具有高度致命性的肺炎。

上海市质量技术监督局关于2013年公共场所集中空调系统中嗜肺军团菌检测能力验证情况的通报文章属性•【制定机关】上海市质量技术监督局•【公布日期】2014.01.26•【字号】•【施行日期】2014.01.26•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】质量监督检验检疫综合规定正文上海市质量技术监督局关于2013年公共场所集中空调系统中嗜肺军团菌检测能力验证情况的通报各有关检测机构：为加强对资质认定获证检测机构的监督，考核检测机构检测数据的准确性和一致性，促进检测机构持续加强能力水平建设，市质量技监局组织开展了“公共场所集中空调系统中嗜肺军团菌检测能力验证”活动，现将有关情况通报如下：一、参加单位本次能力验证活动共有46家检测机构参加，参加单位均已获得所参加检测项目的计量认证资质，覆盖了本市所有具备该项目检测能力的获证单位。

二、比对过程本次能力验证样品分为A、B两个水平测试样品和阴性样品，A水平样品为嗜肺军团菌1型，B水平样品为其他嗜肺军团菌血清型，两水平样品之间嗜肺军团菌的血清型不同；阴性样品则不含嗜肺军团菌。

每个检测机构检测A、B两个水平和阴性共三份样品，检测目标值略有差别。

本次能力验证经过盲样制作、样品分发、样品检测、数据分析等几个过程。

其中盲样制作又分为盲样设计、均匀性检验和稳定性检验等步骤。

上海市疾病预防控制中心（能力验证提供者）及时对检测机构上报的初测数据进行了统计分析，并向市质量技监局报送了中期报告。

市质量技监局对初测结果不满意单位发出《关于2013年公共场所集中空调系统中嗜肺军团菌检测能力验证中期结果的通知》，要求结果不满意单位暂停向社会出具该项目（参数）的证明数据和结果，待补测合格后方可恢复。

本次能力验证初测结果情况见下表。

因能力验证结果不满意而参加本次能力验证补测的共有22家检测机构，另有2家检测机构（上海疾控生物工程检测评价中心有限公司、上海轻工业研究所有限公司）因故未参加本次能力验证初测，市质量技监局要求其须参加能力验证补测。

嗜肺军团菌血清1型基因检测及分子分型研究杨梦;程慧键;熊长辉;徐晓倩;陈福辉;刘晓青;周海建;袁辉【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2010(026)012【摘要】目的了解南昌市宾馆业中央空调冷却塔水中分离的嗜肺军团菌菌株的基因特征.方法 6株分离嗜肺军团菌菌株分别经血清学凝集试验、胶乳凝集试验确定为Lp1型嗜肺军团菌后,利用PCR技术对军团菌属5SrRNA基因和嗜肺军团菌mip毒力基因的特异序列进行扩增, 应用多位点测序(SBT)分析, 获得相应的SBT型别.使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术,对菌株进行全染色体DNA酶切电泳分型,并用BioNumerics数据库软件进行分型分析.结果所有的菌株均带有属特异性5S rRNA基因及mip毒力基因, SBT分型6株菌均为ST1型,PFGE聚类分析结果显示菌株带型之间有差异,6株菌可分为4种带型.结论南昌市公共场所冷却塔水中分离的Lp1型嗜肺军团菌菌株基因呈多样性.【总页数】4页(P1151-1153,1156)【作者】杨梦;程慧键;熊长辉;徐晓倩;陈福辉;刘晓青;周海建;袁辉【作者单位】江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,北京,102206;江西省疾病预防控制中心,南昌,330029【正文语种】中文【中图分类】R126.4【相关文献】1.四川省嗜肺军团菌血清Ⅰ型(LP1)基因分型研究 [J], 曾林子;廖虹瑜;祁腾;刘谊;刘莉莉;罗隆泽2.温泉水中嗜肺军团菌污染调查及分子分型研究 [J], 章乐怡;李毅;上官智慧;吴跃进;谢爱蓉;王良怀;陈文斌3.福建省嗜肺军团菌血清1型及血清6型菌株PFGE分型研究 [J], 原灵;陈爱平;杨劲松;林震宇4.嗜肺军团菌毒力岛分子分型及其致病性研究进展 [J], 朱庆义;胡朝晖5.嗜肺军团菌基因检测及分子特征研究 [J], 张政;朱水荣;徐宝祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。