芳酸及其酯类药物分析(精)

二、亚硝酸钠法
本品具有芳伯氨基，在盐酸存在条件下
与亚硝酸钠定量地发生重氮化反应。
中国药典采用亚硝酸钠滴定法测定含量。
三、双相滴定法测定苯甲酸钠的含量
1、采用双相滴定法原因： 滴定过程析出游离酸不溶于水，使滴定终点突跃 不明显，不利于终点的正确判断，同时吸附包埋 未反应完全的样品。
2、双相滴定法定义：在水和与水不相溶的 有机溶 剂两相中进行酸碱滴定的方法。
三、其他芳酸类
CH3 O C COOC2H5 CH3
Cl
氯贝丁酯
CH3 CH3 CH CH2
CH3 CH COOH
布洛芬
第二节、鉴别试验 （一）与铁盐 反应 1、水杨酸及其盐
COOH 6 OH + FeCl 3 COOO2 Fe Fe 3 + 12HCl
反应条件：弱酸性（pH4~6） 反应现象：紫堇色
V：剩余滴定时消耗硫酸体积(ml)
C H2SO4:硫酸滴定液的实际浓度（mol/l) m供试品片粉量（g) W平:平均片重（g)

例：取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重
为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法用两 步滴定法测定其含量，消耗硫酸滴定液 （0.05015mol/l）23.84ml，空白试验消耗该硫酸滴 定液39.88ml，求阿司匹林的含量为标示量的多少？
第三节、特殊杂质检查
（一） 阿司匹林（ASA）合成工艺：
COOH OH H2SO4 +(CH3CO)2O 70~75
COOH OCOCH3 +CH3COOH
（二）检查：
1、溶液的澄清度： （ 1 ）杂质来源：①原料②合成工艺中由副反应生成 的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯等。 （ 2 ）检查原理：利用药物与杂质在溶解行为上的差 异进行检查 （3）检查方法： 取供试品0.5g 溶液应澄清 用45℃的碳酸钠试液10ml
2、 游离水杨酸（SA）----特殊杂质 （1）来源：①生产过程乙酰化不完全（未反应 SA） ②贮存不当水解而产生的SA （2）检查原理：阿司匹林+硫酸铁铵 不反应 水杨酸+硫酸铁铵 紫堇色 与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，不 得更深。

对氨基水杨酸钠中特殊杂质-间氨基酚
离子对-HPLC法：分离有机离子
四、柱分配－紫外分光光度法 适用：片剂、胶囊、栓剂 特点：能分离杂质，同时测定ASA、SA （1）SA的限量测定 色谱柱用硅藻土填充。 固定相：三氯化铁－尿素 流动相：氯仿，乙醚 在λmax=306nm测定吸收度，A样（SA) ＜ A标（SA) （2）ASA的测定 固定相：碳酸氢钠 流动相：氯仿 λmax=280nm测定吸收度，A样（ASA+SA) -A样（SA)
3）注意事项：
A 采用中性乙醇做溶剂的目的： ①易于溶解样品 ②防止本品水解
B 滴定过程中不断振摇目的：防止局部碱度过大而促 使其水解。
C 采用酚酞作指示剂：本品是弱酸，用强碱滴定时， 化学计量点偏碱性，故选用在碱性区域变色的酚酞。 水杨酸检查合格用此法
2、水解后剩余滴定法
酯结构在碱性溶液中水解，加入定量过量的氢
2、阿司匹林需加热水解后与FeCl3反应
方法：取本品0.1g 加水10ml
COOH OCOCH3 + H2O
煮沸放冷 加FeCl3 1d
COOH
显紫堇色
OH
+CH3COOH
COOH OH +43; 12HCl
3、苯甲酸（钠）与三氯化铁生成褐色沉淀
苯甲酸（钠） FeCl3 碱性或中性 赭色

方法的定量下限(LOQ)为25 ng/mL, 灵敏度较高, 其人血浆
中阿司匹林和水杨酸在25～10 000ng/mL范围内, 其浓度与
响应值之间具有良好的相关性, 全部标准曲线的相关系数 ( r)均在0.990～1.000之间, 方法的日内和日间精密度、准确
度符合要求(RSD≤15% , RE≤15% ) 。
-COOH、-SO3H 基团，选用带正电荷的有机铵盐； -NH2、-NH等阳离子，选用带负电荷烷基磺酸盐 或烷基硫酸盐。缓冲盐调节溶液pH。

甲酚那酸中特殊杂质-铜，原子吸收分光光度法 氯贝丁酯中特殊杂质-对氯酚，气相色谱法
第四节、含量测定 1、酸碱滴定法 （1）直接滴定法： 1）：原理利用阿司匹林游离羧基的酸性，以 标准碱滴定液直接滴定。 2）方法： 滴定液：NaOH(0.1mol/L) 溶剂：中性乙醇 指示液：酚酞
4、丙磺舒与三氯化铁成米黄色沉淀
丙磺舒 钠盐 米黄色
5、布洛芬：与高氯酸羟胺及N，N-双环己基羧 二亚胺混合，再与高氯酸铁反应显紫色
FeCl3
NaOH
pH 5.0～6.0
6、氯贝丁酯的鉴别：异羟肟酸铁反应。氯贝丁酯分 子中具有酯结构，与盐酸羟胺及三氯化铁作用， 形成有色的异羟肟酸铁，显紫色。
第二步：水解 中和后供试品液 水浴加热 加定量过量NaOH(0.1mol/l) 第三步：测定 用H2SO4滴定液 (0.05mol/l)滴定剩余的碱。 滴定结果用空白试验校正 每1ml H2SO4滴定液 (0.05mol/l)滴定液相当于18.02mg 的C9H8O4
（3）含量计算：
标示量:表示制剂中各成分含量的理论值。
（二） 重氮化-偶合反应
对氨基水杨酸钠具芳伯氨基结构，在酸性溶液中，
与亚硝酸钠液进行重氮化反应，生成的重氮盐与
碱性β-萘酚偶合产生橙红色沉淀。 三、氧化反应 甲酚那酸遇硫酸显黄色
（四）水解反应：阿司匹林与碳酸钠试液反应
COOH OCOCH 3
+
COONa Na2co3 COOH OH
+
OH
+
CH 3COONa
OCOCH3 COO NHCOCH3
COONa OH
COOH OH
贝诺酯
水杨酸 （pKa2.98）
COOH
NH2 对氨基水杨酸钠?
OCOCH3
阿司匹林（pKa3.49）
结构性质：
1、具有芳环、羧基及其它取代基团。
2、具有游离羧基呈酸性，可成盐或酯。
3、pka=3～6，酸性比盐酸、硫酸弱，比碳酸、 苯酚强。 4、含共轭体系，在一定波长处有UV吸收。
3、原理：
COONa +HCl COOH + NaCl
水层 有机层 4、测定方法：在分液漏斗中进行 有机相：乙醚 反应产物苯甲酸溶于此相 滴定剂为盐酸（0.1mol/l) ，指示液：甲基橙
注意：边滴边振摇，使反应产物苯甲酸随时溶于乙醚层， 使反应进行到底。 终点判断：在水层第二次呈现持续的橙红色即为终点。
五、高效液相色谱法 阿司匹林栓剂的含量测定
丙磺舒原料的含量测定 第五节 体内药物分析 血清中阿司匹林和水杨酸的HPLC法测定 尿中丙磺舒的固相萃取-HPLC法测定 血浆中布洛芬的HPLC测定 血浆中二氟尼柳的固相萃取-反相HPLC测定

LC - MS/MS法定量测定人血浆中阿司匹林及其代 谢产物水杨酸
氧化钠滴定液，加热使药物水解，过量氢氧化
钠用硫酸滴定液回滴。
注意空白
3、两步滴定法
（1）适用范围：阿司匹林片剂 采用本法原因：①消除片剂中稳定剂干扰（枸橼酸或 酒石酸） ②消除水解产物干扰：阿司匹林片在贮存 过程水解产生水杨酸和醋酸 （2）测定：第一步：中和 精密称取片粉 酚酞指示剂 迅速滴至粉红色 加中性乙醇溶解 NaOH滴定液 酒石酸等稳定剂、 SA、ASA均成为相应钠盐
5、均有红外吸收
酸性：受苯环、羧基和取代基的影响

取代基为-X，-NO2，-OH时酸性比苯甲酸强 原因：吸电子效应，使羧基中-OH极性减弱，较易 离解出质子，故酸性增强。

取代基为-CH3，-NH2， 酸性比苯甲酸弱 原因：斥电子效应，增加苯环电子云密度，增加 OH极性，不易离解出质子，使酸性降低。
一般用标示量的百分值来控制制剂含量。
公式通则为：标示量％＝实际测得含量 ×100％
标示量
片剂标示量％＝
VTF×平均片重 ×100％
供试品重×标示量
阿司匹林含量由水解时消耗的碱量计算
标示量％＝（V0-V) C H2SO4×18.02/1000 ×W平× 100％
0.05 ×m ×标示量
上式中： V0：空白试验消耗硫酸体积（ml)
第六章 芳酸及其酯类药物分析
第一节、典型药物分类与理化性质 一、苯甲酸类
COOH
COONa
苯甲酸（pKa4.20）
苯甲酸钠
(CH3CH2CH2)2N SO2
丙磺舒（pKa3.4）
COOH
HO
羟苯乙酯
COOC2H5
(二) 主要理化性质
固体，一定的熔点，具苯环，有紫外吸收，只有 苯甲酸钠溶于水。
二、水杨酸类
+
CO2
COONa H 2SO4
OH
+
Na 2SO4
2
CH3COONa
+
H2SO4
2CH 3COOH
+
Na2SO4
反应现象：水杨酸白色沉淀析出，并产生醋酸的臭气
五、分解产物的反应
苯甲酸盐-升华 含硫药物-与氢氧化钠、硝酸反应产生硫 或加热产生二氧化硫。 六、紫外吸收光谱 七、红外吸收光谱法 八、薄层色谱法 九、高效液相色谱法 酸盐，