光滑念珠菌耐药性分析

念珠菌感染特性与耐药性分析目的探讨本院念珠菌的感染特性及耐药性特点。

方法随机抽取2000个标本，分离出615株念珠菌，采用科码嘉显色培养基培养，用念珠菌药敏测定试剂盒进行药敏试验。

结果615株念珠菌里面，白色念珠菌含量最高，痰液检出率最高，呼吸科分布最多；65岁以下患者念珠菌的分离率明显低于65岁以上的患者。

药敏实验中，5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素、酮康唑对常见念珠菌的敏感率均大于95%；益康唑对常见念珠菌敏感率大于80%；伊曲康唑、氟康唑、咪康唑对常见念珠菌的敏感率均小于50%。

结论要重视菌株特性与耐药性，合理使用抗菌药物。

标签：念珠菌；感染；耐药；抗菌药近年来真菌耐药现象呈现上升趋势[1]，念珠菌是临床常见致病菌。

念珠菌中的耐药菌群给临床治疗带来很大麻烦，为了更好地指导临床使用抗真菌药物。

对本院2011年6月～2013年7月临床分离的615株念珠菌感染特性与耐药性的情况进行分析。

1 材料与方法1.1 材料收集本院2011年6月～2013年7月临床科室送检的痰液、生殖系统分泌物、尿液、粪便、脑脊液、引流液、血液等各类标本。

1.2 试剂革兰染液购自四川省迈克科技有限公司，念珠菌显色培养基chrom GA显色培养基（法国科马嘉公司提供），VITEK -32的YB，C卡是法国Bio-Merieux公司配套的产品，酵母样真菌快速显色药敏板购于温州市康泰生物科技有限公司，8种抗菌药物：5-氟胞嘧啶、酮康唑、两性霉素B、制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、益康唑。

1.3 仪器沙保罗培养平板为郑州安图公司产品，VITEK-AMS 32全自动微生物分析仪（法国Bio-Merieux公司制造）。

1.4 质控菌株白色念珠菌ATCC 90029，购于卫生部临检中心。

1.5 方法1.5.1 念珠菌分离鉴定根据《全国临床检验操作规程》[2]进行培养分离鉴定，分离出的念珠菌用念珠菌显色培养基chrom GA显色培养基进行鉴定，不能够用显色培养基鉴定的菌株用VITEK-32的YBC卡在全自动微生物分析仪上鉴定。

“走进非白念”之“近平滑和光滑念珠菌”徐英春北京协和医院检验科徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略近平滑念珠菌的耐药情况及指南推荐近平滑念珠菌的独特之处4132近平滑念珠菌徐英春近平滑念珠菌最新分型狭义的近平滑念珠菌仅指第一种，广义指的是三种亚型的通称由于后两种的发生率低，且基本不发生耐药情况，出于检测上的便捷，不分开描述刘维达.《中华皮肤科杂志》2011;44(8):537-539.2005年以前，近平滑念珠菌被认为是由3种不同基因型(I，Ⅱ和Ⅲ) 组成的一种复合体国外学者根据多位点序列分型研究(MLST)的结果将该复合体明确区分为3个种徐英春近平滑念珠菌位居全球侵袭性念珠菌感染第2位Pfaller MA et al. J Clin Microbiol.2008Jan;46(1):150-6.前瞻性调查分析：2001-2006年全球5346株侵袭性念珠菌感染菌株分布情况菌株分布(%)2001-2006徐英春近平滑念珠菌位于全球最大规模流调的念珠菌血流感染第2位•念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY(2008–2009)•研究纳入2008-2009年的79个医学中心的1239名念珠菌血流感染患者菌株分布(%)P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.徐英春Forrest GN et al. Journal of Infection 2008; 56:126-129.每1000例患者日念珠菌血症发生率2002-2006徐英春近平滑念珠菌位于亚太区念珠菌感染第2位前瞻性调查分析：2001-2006年亚太区958株念珠菌菌株分布情况近平滑念珠菌已成为非白念感染的最常见病原菌占全部念珠菌感染的15.97%M. A. Pfaller,et al., J Clin Microbiol. 2008 Jan; 46(1):150-6.徐英春近平滑念珠菌位于中国念珠菌感染检出率第2位Data on file.研究结果：念珠菌菌株分布情况N=741徐英春近平滑念珠菌在血液及导管/引流液中分离率高居首位研究中期结果：导管/引流液分离的菌株分布Data on file.研究结果：血液中分离的菌株分布(N=347)徐英春近平滑念珠菌最常检出部位为血流及黏膜表面葡萄牙一家医院(Hospital S. Joao)对4年间检出的160例近平滑念珠菌进行分析，其最常见的检出部位为血流及黏膜表面S ilva AP et al. J C lin Mic robiol.2009 Aug ;47(8):2392‐7.徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略近平滑念珠菌的耐药情况及指南推荐432近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点1徐英春全胃肠外营养徐英春近平滑念珠菌更易导致导管相关性B S I可能因为Dunc an M, et al., E merg ing Infec tious Dis eas es. 2004;10(6):1074‐81.近平滑念珠菌比其它念珠菌更容易在导管和其它植入装置的表面和腔内形成生物膜生物膜形成的菌种对抗真菌药物具有较强的耐药性近平滑念珠菌生物膜的形成在院内感染暴发的菌落中比散发的明显增多(P <0.0005)所以临床上对于中心静脉置管等留置导管患者的真菌感染，需要特别注意更可能由近平滑念珠菌引起的导管相关性感染徐英春徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略43近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点12徐英春卡泊芬净的应用与近平滑念珠菌血症发生呈正相关F orrestG N et al. J ournal of Infection 2008; 56:126‐129.回顾性调查分析：2002‐2006年美国一家大型医疗中心念珠菌血症与抗真菌药物使用情况分析徐英春大扶康®对近平滑念珠菌始终保持低耐药率2001‐2009年AR T E MIS 中国5家医院氟康唑对近平滑念珠菌的耐药率徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略43近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点12徐英春导管相关性全胃肠外营养手传播病情危重的低体重婴儿减少留置导管的几率、时间，加强置管期间的护理注重恢复患者胃肠道正常功能，严格营养液的配制，现配现用手卫生，严格遵循无菌操作规程抢先治疗基本防控措施徐英春光滑念珠菌录徐英春2004年-2007年美国41所医疗中心无菌部位分离得到的5900株念珠菌分布白念: 非白念=43% : 57%2004-2007美国无菌部位：非白念比例超白念Lyon GM et al. J Clin Microbiol.2010Apr;48(4):1270-5.仅收集血液、无菌体液等与感染相关的菌株徐英春Horn DL et al.C lin Infec t Dis.2009J un 15;48(12):1695‐703.2004-2008年美国23个医学中心，2019例确诊念珠菌血症的病原体分布白念：非白念=45.6% ：54.4%2004-2008美国PATH ：非白念比例超白念注：PATH= P rospective A ntifungal Th erapy Alliance database26%徐英春2005‐2006法国IC U ：非白念比例与白念相当前瞻性、观察性、多中心研究纳入2005年10月到2006年10月法国300名已经确诊为侵袭性念珠菌感染的患者白念：非白念=57% ：43%•所有纳入的患者中，39.5%为单纯的念珠菌血症，•32.1%为单纯的侵袭性念珠菌感染，28.4%两者都有Leroy O et al. Crit Care Med.2009 May;37(5):1612-8.17%徐英春徐英春徐英春hoff H et al.C linInfec t Dis.2004 Aug 1;39(3):309‐17.对1890例念珠菌血流感染的回顾性研究白念珠菌光滑念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌热带念珠菌念珠菌属粗计死亡率(%)徐英春光滑念珠菌目录徐英春美国2001‐2007光滑念珠菌耐药情况2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌为642名P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.徐英春光滑占念珠菌属百分比(%)<11-910-1920-2930-3940-4950-5960-6970-79>80N=642Pfaller MA et al. J Clin Microbiol.2009 Oct;47(10):3185-90.•2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌阳性为642名•随着患者年龄的增加，光滑念珠菌血流定植发生率增加•>80岁年龄人群光滑念珠菌血症发生率最高，达到32%徐英春老年患者光滑念珠菌对大扶康®耐药率减<11-910-1920-2930-3940-4950-5960-6970-79>80耐药性比例(%)MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.•2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌阳性为642名•随着年龄的增加，光滑念珠菌对氟康唑的耐药性显著下降•>80岁人群对氟康唑的耐药性最低，只有5%，即敏感性达95%患者数14625328014614112879徐英春SENTRY2008-2009•全球最大规模的念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY(2008–2009)•研究纳入2008-2009年的79个医学中心的1239名念珠菌血流感染患者P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010Nov;68(3):278‐83.徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐中青年患者P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.20-39年龄段患者n=1840-59年龄段患者n=71如果分年龄段来看光滑念珠菌对各类抗真菌药物的耐药性数据那么，20-39和40-59这两个年龄段的患者的耐药性比例最高对棘白菌素类、三唑类都存在一定比例的耐药情况耐药率(%)徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐老年患者及总体情况P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.60-79年龄段患者n=91总体情况n=215光滑念珠菌对不同的抗真菌药物均存在不同程度的耐药情况整体来看，光滑念珠菌对药物的耐药性与年龄呈负性相关关系耐药率(%)徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐IC U 与非IC U全球最大规模的念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY 研究(2008-2009)结果光滑念珠菌对抗真菌药物产生了广泛的耐药研究纳入2008-2009年全球79个医学中心的2085名念珠菌血流感染患者P faller MA et al. Int J Antimic rob Ag ents.2011 J ul;38(1):65‐9.N=136N=176耐药率(%)徐英春最新SENTRY2006-2010P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2012 J an 25.徐英春光滑念珠菌对棘白菌素类耐药性值得关注调查总共纳入了1669名由光滑念珠菌引起血流感染的患者检测了菌株对氟康唑、伏立康唑、阿尼芬净、卡泊芬净以及米卡芬净的体外敏感性氟康唑*阿尼芬净卡泊芬净米卡芬净光滑念珠菌对三唑类药物和棘白菌素类药物均产生了耐药性，且比例相当耐药率(%)*对氟康唑耐药的162株光滑念珠菌之中•有18株(11.1%)同时对一种或几种棘白菌素类药物产生了耐药•这18株光滑念珠菌均发生了fks 1和fks 2基因位点的获得性变异•对比2001-2004的结果：110株耐氟康唑的光滑念珠菌全部对棘白菌素类药物敏感P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2012 J an 25.徐英春2010中国光滑念珠菌敏感性分析总数药物S%S-DD%R%92氟康唑59.826.114.1伏立康唑79.47.613.0on file.徐英春小结一系列研究得出关于光滑念珠菌的重要结论有：•光滑念珠菌对不同的抗真菌药物均存在不同程度的耐药情况•对氟康唑耐药的菌株也有可能对棘白菌素类耐药，对棘白菌素类耐药的菌株也不一定对氟康唑不敏感•随着患者年龄的增加，光滑念珠菌的检出率显著地升高•与检出率不同的是，随着患者年龄的增加，光滑念珠菌对抗真菌药物的耐药性减弱徐英春光滑念珠菌目录徐英春突变体CDR 1可能与CDR 2呼吸缺陷型光滑念珠菌耐药耐药型线粒体敏感型线粒体中国感染与化疗杂志2010;10(1):59-62.Brun S et al. Antimicrob Agents Chemother.2004;48(5):1788—1796.Kaur R et al. Antimicrob Agents Chemother.2004;48(5):1600—1613.徐英春光滑念珠菌耐药性与患者年龄负性相关的原因分析这种光滑念珠菌随着患者年龄的增加而出现的耐药性减弱的原因还不明确，分析认为•与中青年患者相比，尽管老年患者就医比例更高，但是他们接受干细胞移植、器官移植或预防性氟康唑治疗的比例更低•另外，光滑念珠菌的定植在老年患者更为常见："这种定植反映出了与暴露于药物相比较，念珠菌菌种分布的改变与年龄的关系更加密切"这种定植菌株通常为对氟康唑天然耐药菌株而非获得性耐药菌株P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.徐英春光滑念珠菌目录徐英春•对于尚未确定菌种或由于条件有限无法鉴定菌种的患者，早期治疗是抗真菌治疗的难点和重点•尽早明确病原学诊断以及规范化应用抗真菌药物尤为重要需要抗真菌早期治疗但尚未明确菌种选用氟康唑选用其他药物有效有效但不理想无效足量足疗程增加药物剂量鉴定结果菌株对氟康唑敏感可降阶梯换用氟康唑足量足疗程换药徐英春“特殊使用”抗菌药物须由具有高级专业技术职务任职资格的医师开具处方后方可使用则2011年最新版抗菌药物分级管理目录/抗菌药物临床应用管理办法氟康唑伊曲康唑(口服剂型)酮康唑米卡芬净，卡泊芬净伏立康唑，两性霉素B ，伊曲康唑(静脉剂型)泊沙康唑，阿尼芬净徐英春徐英春。

念珠菌感染菌种的分布及耐药性分析目的了解本地区2007～2008年念珠菌感染的菌种分布和耐药性情况,为临床抗真菌治疗提供依据。

方法收集本地区两家医疗机构两年间临床分离的念珠菌1462株,采用生物梅里埃ATB ID32C试条进行念珠菌菌种的分离鉴定,药敏试验采用生物梅里埃ATB-FUNGU30试条对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶和两性霉素B等5种抗真菌药物进行测定。

结果1462株念珠菌中以白色念珠菌为主,检出682株(59.6%),其他依次为热带念珠菌278株(21.3%),光滑念珠菌135株(9.2%),近平滑念珠菌70株(4.8%),克柔念珠菌27株(1.8%),其他念珠菌46株(3.1%)。

念珠菌对伊曲康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、两性霉素B和伏立康唑的耐药率分别为28.9%、10.6%、3.1%、1.5%和0。

结论本地区念珠菌感染以白念珠菌为主,对伊曲康唑和氟康唑耐药性较高,对5-氟胞嘧啶、两性霉素B和伏立康唑敏感性较高。

本地区应建立真菌常规菌种鉴定及药敏试验,指导临床合理用药。

[Abstract] ObjectiveTo investigate the candida species distribution and susceptibility of Candida species to antifungal agents in Foshan city during 2007 to 2008,and provide evidence for diagnosis and treatment of fungi infection. MethodsIn a 2-year surveillance programme,1462 Candida stains were collected from two local medical institutions,Candida strains were identified by bioMérieux ATB ID32C test paper. Antifungal susceptibility of fluconazol,itraconazole,voriconazole,5-flurocytosine and amphotericin B was assessed by bioMérieux ATB-FUNGU30 test paper method. Results Among 1462 strains examined,Candida albicans accounted mainly for 59.6%(682 strains),and the other species accounted for 31.3% including,tropicalis 21.3%(278 strains),Candida glabrata 9.2%(135 strains),Candida parapsilosi 4.8%(70 strains),Candida krusei and 1.8%(27 strains)and the other Candida 3.1%(46 strains). The resistant rates to itraconazole,fluconazol,5-flurocytosine,amphotericin B and voriconazole were 28.9%,10.6%,3.1%,1.5% and 0,respectively. ConclusionThe pathogens causing fungus infection are mainly C. albicans in Foshan city,and it shows more sensitive to 5-flurocytosine,amphotericin B and voriconazole compared with itraconazole and fluconazol. The Fungi and Fungal pathogens routine strain identification and susceptibility test in this region should be established,guiding clinical rational drug use.[Key words]Candida; Resistance; Antifungal agents近年来,大量广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的应用及各种介入性治疗技术的开展,尤其是随经济社会发展,越来越多医院投入使用密闭式中央空调,使真菌成为院内感染的一大病原菌,种类不多的抗真菌药反复使用后诱发越来越严重的耐药现象。

念珠菌引起泌尿系统感染的耐药状况分析【摘要】目的了解念珠菌引起泌尿系感染的地位及其耐药性。

方法采用VITEK32的UID3卡和YBC卡进行细菌的计数及鉴定；用纸片扩散法进行念珠菌的药物敏感性实验。

结果在念珠菌引起泌尿系感染中，白念珠菌所占比例最高，其次为光滑念珠菌。

白念珠菌和热带念珠菌对氟康唑的敏感性为100%，光滑念珠菌对氟康唑为浓度依赖性敏感，克柔念珠菌对氟康唑天然耐药。

结论各种念珠菌的耐药谱不同，临床一定要鉴定到种。

【关键词】念珠菌；泌尿系感染近年来随着广谱抗菌药物及免疫抑制剂在临床的广泛应用及介入治疗的不断增加，使患者罹患真菌感染的比例增加，特别是在中老年患者及应用免疫抑制剂的患者，在念珠菌引起的泌尿系统感染在泌尿系统感染的致病菌中已由2001年的的第十位上升到2010年的第五位。

我院自2001年1月至2010年12月期间从门诊和住院患者急、慢性尿路感染患者中分离到的301株念珠菌，年龄从48岁到92岁，其中女265例(占88%)，男36例(占12%)，用科玛嘉显色培养基和法国梅里埃公司的VITEK32自动微生物鉴定仪鉴定到种，并用ROSCO纸片法对常用抗真菌药物进行了药敏试验，了解我院念珠菌的耐药情况，为临床提供参考1 材料和方法11 材料111 菌株来源实验用菌株来自2001年1月至2010年12月期间吉林省人民医院泌尿系感染的患者共检出301株念珠菌，其中白念珠菌210 株(占698 %)，光滑念珠菌55 株(占182%)，热带念珠菌30株(占10%)，克柔念珠菌3株(占1%)，其他念珠菌3株(占1%)。

尿液为晨尿(留取方法为：清洗外阴后，留取中段尿，2 h内送检)［2］。

用法国生物梅里埃公司的VITEK32尿卡(UID3)进行培养及计数，用科玛嘉显色培养基鉴定到种,显示翠绿色为白念珠菌,篮色为热带念珠菌,藕合色为光滑念珠菌，粉色为克柔念珠菌，其他颜色用法国梅里埃公司的VITEK32的念珠菌鉴定卡(YBC)细菌鉴定到种。

念珠菌医院感染特性及耐药性分析念珠菌是深部真菌感染中最常见的菌属。

是一群呈酵母样菌落的单细胞芽生真菌，广泛存在于自然界。

随着医疗诊断方法技术的不断更新，真菌感染的患病率呈上升趋势，分析显示，念珠菌感染已成为重要的医院感染病源菌。

由于患者往往有严重的基础疾病，并长期使用抗生素，条件致病性念珠菌感染病例不断增多，因而真菌治疗后的耐药问题日渐突出。

我们对我院2年间住院病人、门诊病人标本分离的212株念珠菌菌种及药敏结果进行回顾分析，现报道如下：1材料1.1 标本来源212株念珠菌来自2010年1月至2011年12月我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。

1.2仪器鑫科细菌鉴定/药敏全自动微生物分折仪，山东鑫科生物科技股份有限公司制造。

1.3试剂山东鑫科生物科技有限公司配套产品，念珠菌显色培养基（郑州安图生物公司提供），8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬（山东鑫科生物股份有限公司）。

1.4质控菌株白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。

氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28～39 mm。

2方法2.1细菌分离鉴定按《全国临床检验操作规程》进行培养分离，分离所得念珠菌采用念珠菌显色培养基或用山东鑫科真菌鉴定生化仪鉴定到种的水平。

2.2细菌药敏试验采用2003年美国国家临床试验标准化委员会（NCCLS）认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。

Mueller-Hinton（MH）琼脂中补充2%葡萄糖和0.5mg/L美蓝。

酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为1×106～5×106/ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35℃孵箱，24小时判断结果。

质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合CLSI质控要求3结果3.1念珠菌分布的科室构成212株念珠菌分布在10多个科室，以内科系统为主，共分离出149株（占70.47%）;外科系统分离出30株（占14.16%）。