生物化学实验--维生素C的定量测定

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸（硫酸或盐酸）作⽤下，脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物，后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意：因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下，酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛，后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢，只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原，同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊（颗粒⼤）或黄⾊（颗粒⼩）的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值（价）是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数，可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键，能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼，所含的不饱和脂肪酸越多，与其双键起加成作⽤的碘量就越多，碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+－CH=CH－－CHI－CHI－本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后，⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量，然后计算出待测脂肪吸收的碘量，求得脂肪的碘值。

加成作⽤：IBr+－CH=CH－－CHI－CHBr－剩余溴化碘中碘的释放：IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘：I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题：何谓空⽩溶液和空⽩实验？空⽩实验有何意义？在各种分析⽅法中，为消除⼲扰，⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。

1. 实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。

2. 严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。

非本实验组的同学不准进入实验室。

3. 进入实验室必须穿实验服。

各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。

绝对禁止用实验仪器或药物嬉耍。

4. 实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。

5. 实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。

否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。

6. 使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。

7. 做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。

8. 实验后，要及时完成实验报告。

实验记录和实验报告一、实验记录实验课前应认真预习，将实验名称、目的和要求、原理、实验内容、操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本上。

实验中观察到的现象、结果和数据，应该及时地直接记在记录本上，绝对不可以用单片纸做记录或草稿。

原始记录必须准确、简练、详尽、清楚。

从实验课开始就应养成这种良好的习惯。

记录时，应做到正确记录实验结果、切忌夹杂主观因素，这是十分重要的。

在实验条件下观察到的现象，应如实仔细地记录下来。

在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光电比色计或分光光度计的读数等，都应设计一定的表格准确记下正确的读数，并根据仪器的精确度准确记录有效数字。

例如，光密度值为0.050不应写成0.05。

每一个结果最少要重复观测两次以上，当符合实验要求并确知仪器工作正常后再写在记录本上。

实验记录上的每一个数字，都是反映每一次实验的测量结果，所以，重复观测时即使数据完全相同也应如实记录下来。

维生素c测定实验报告维生素C测定实验报告。

实验目的：本实验旨在通过分光光度法测定果汁中维生素C的含量，了解维生素C的性质和测定方法。

实验原理：维生素C是一种易氧化的物质，可以被2,6-二氨基苯酚（DPIP）还原成无色的化合物。

当果汁中含有维生素C时，它会与DPIP发生反应，使DPIP的颜色由蓝色逐渐变为无色。

通过测定果汁中DPIP的消耗量，可以计算出果汁中维生素C的含量。

实验步骤：1. 将一定量的果汁样品加入试管中；2. 加入适量的DPIP试剂，混合均匀；3. 用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度；4. 根据标准曲线计算出果汁中维生素C的含量。

实验结果：经过实验测定，我们得出果汁中维生素C的含量为XXmg/100ml。

实验分析：通过本次实验，我们了解到分光光度法是一种简便、快速、准确的测定方法，适用于测定果汁、蔬菜等食品中维生素C的含量。

同时，我们也发现果汁中维生素C的含量受到多种因素的影响，如果汁的种类、保存方式等。

实验总结：本次实验通过分光光度法成功测定了果汁中维生素C的含量，进一步加深了我们对维生素C的认识。

在今后的实验中，我们将继续学习和探索更多关于维生素C的知识，不断提高实验技能和分析能力。

实验注意事项：1. 实验过程中要注意操作规范，避免试剂的飞溅和溅洒；2. 实验结束后要及时清洗实验器材，保持实验台面的整洁；3. 实验中要注意安全，避免接触有毒有害物质。

维生素C在日常生活中扮演着重要的角色，它不仅是一种营养物质，还具有抗氧化、美白肌肤等功效。

通过本次实验，我们对维生素C有了更深入的了解，相信在今后的学习和生活中，我们会更加珍惜并正确利用维生素C的重要性。

紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量一、本文概述本文将详细阐述使用紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量的实验方法和过程。

紫外分光光度法是一种常用的化学分析方法，通过测量物质在特定波长下对紫外光的吸收程度，可以定量测定物质的含量。

该方法在化学、生物、医学等领域有着广泛的应用，尤其在药物分析领域中，对于确定药品中有效成分的含量具有重要的实用价值。

VC银翘片是一种常见的非处方药品，主要用于治疗感冒和其他上呼吸道感染。

其主要活性成分为维生素C，具有抗氧化、增强免疫力等多种药理作用。

因此，准确测定VC银翘片中维生素C的含量对于保证药品质量和疗效至关重要。

本文首先介绍了紫外分光光度法的基本原理和实验步骤，然后详细描述了实验过程，包括样品制备、波长选择、标准曲线绘制以及结果计算等。

通过实验结果的分析和讨论，验证了该方法的准确性和可靠性。

本文旨在为药品生产和质量控制提供一种有效的维生素C含量测定方法，同时也为相关领域的研究提供参考和借鉴。

二、紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性来测定物质含量的分析方法。

在紫外区，许多有机化合物和无机离子具有吸收紫外光的特性，其吸收程度与物质的浓度成正比。

因此，通过测量待测物质在特定波长下的吸光度，可以推算出该物质的浓度。

在测定VC银翘片中维生素C含量时，紫外分光光度法利用维生素C在紫外光区具有特定吸收波长的特性。

维生素C分子中的共轭双键结构使其对紫外光具有吸收能力，且吸收峰通常出现在约245nm处。

通过制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，并测量其在245nm波长下的吸光度，可以建立吸光度与维生素C浓度之间的标准曲线。

然后，对待测的VC银翘片提取液进行同样波长的吸光度测量，根据标准曲线即可计算出样品中维生素C的含量。

紫外分光光度法具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在药物分析、生物化学等领域得到广泛应用。

然而，该方法也受到一些限制，如对于颜色较深或浑浊的样品，可能需要进行前处理以消除干扰因素；对于某些在紫外区无吸收或吸收较弱的物质，该方法可能不适用。

维生素C的定量测定一、研究背景及目的：维生素作为生活中重要的营养物质，已经和受到越来越多的关注，学习定量测定维生素C的原理及方法也就显得尤为重要。

同时在测定过程中学习掌握微量滴定法的基本操作技术，对了解蔬菜水果中维生素C的含量有个初步的了解。

二、研究依据及原理：人们发现在日常饮食中缺乏维生素会引起营养失调，导致坏血病，因此，维生素C又被称抗坏血酸。

维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，为水溶性维生素。

维生素C分布很广，植物绿色部分及水果中含量尤其丰富。

维生素C具很强还原性，碱性溶液中加热且有氧化剂存在时，，抗坏血酸容易被氧化而遭到破坏。

中性或微酸性环境中，抗坏血酸能将燃亮2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型2,6-二氯酚靛酚。

同时抗坏血酸氧化成脱氢抗坏血酸。

氧化性2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈红色，中性碱性中呈蓝色。

滴定时，用2,6-二氯酚靛酚滴定含抗坏血酸的酸性溶液，在抗坏血酸未被全部氧化时，滴下染料立即被还原成无色。

一旦溶液中抗坏血酸被全部氧化时，滴下的染料立即使溶液呈现红色。

所以当溶液由无色变为微红色时，表示溶液中抗坏血酸刚好被全部氧化，即为滴定终点。

从滴定中消耗的染料标准溶液，即可计算出抗坏血酸的含量。

三、实验材料与方法：1、仪器：三角瓶（50ml）；研钵；移液器、移液管；容量瓶；微量滴定管；离心机；玻璃棒2、试剂：桔子；2%草酸溶液；标准抗坏血酸溶液（0.2mg/ml）；2.6-二氯酚靛酚纳溶液（0.001N）：称取干燥的二氯酚靛酚纳60mg，加蒸馏水100~150ml，滴加0.01N NaOH4~5滴，放在200ml容量瓶中，强烈摇动10min，冷却后加水至刻度，摇匀后用滤纸过滤于棕色瓶中，储于冰箱中备用，有效期一周。

3、实验方法：1）分别取桔皮2g，桔肉10g，在研钵中与少量2%草酸研成匀浆，之后用10ml左右的2%草酸将匀浆洗入离心管中，3500转/分，离心15min，将上清液转移至100ml容量瓶中，用2%草酸定容，为样品液。

实验三维生素C的定量测定一、研究背景维生素C的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。

另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。

富含维生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素C含量都不少。

美国专家认为，每人每天维生素C的最佳用量应为200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大约一百毫升）新鲜橙汁便可满足这个最低量。

而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。

维生素C 在维持身体健康方面很重要，因此有必要建立合理的定量测量维生素C的方法，本实验所采用的2,6-二氯酚靛酚钠滴定法就是其中一种。

二、实验原理维生素C具有很强的还原性，在中性和微酸性环境中能将染料2,6-二氯酚靛酚还原为无色的还原型2,6-二氯酚靛酚，同时自身氧化为脱氢抗坏血酸。

由于氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中显红色，在中性或碱性溶液中成蓝色，所以用2,6-二氯酚靛酚滴定维生素C的酸性溶液，滴下的2,6-二氯酚靛酚与维生素C迅速反应呈无色，当维生素C全部反应，滴下的染料使溶液呈现粉红色，此时即为滴定终点。

于是可以依据标准2,6-二氯酚靛酚的消耗量求出维生素C的含量。

三、仪器与试剂1、仪器（1）离心机：上海安亭科学仪器厂飞鸽牌系列，Anke 7DL-40B（2）架盘天平：北京天平物华医疗器械有限公司（3）平衡天平2、试剂（1）2%草酸溶液（2）0.2mg/ml的标准抗坏血酸溶液（3）2,6-二氯酚靛酚钠溶液3、实验材料2g桔皮和10g桔肉四、实验步骤1.样品的处理和提取2.空白测定取2%草酸10ml ，放入50ml 三角瓶中，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至三角瓶内溶液呈粉红色，15秒内不褪色为终点，记录所用滴定液体积，重复三次取平均值。

3.标定2,6-二氯酚靛酚钠溶液取2ml 标准抗坏血酸溶液加8ml2%草酸溶液，置于50ml 三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至终点，记录所消耗2,6-二氯酚靛酚钠溶液的量，重复三次取平均值。

水果及蔬菜中维生素C含量的定量测定范开祥金文党承兰徐娇（河西学院生命科学与工程系08级（2）班甘肃张掖734000）摘要本文以橙子，猕猴桃，青椒为材料，用实验室通用的2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C的含量。

还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。

因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。

如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。

关键词抗坏血酸2，6—二氯酚靛酚2%草酸引言橙子（学名：Citrus sinensis）是芸香科柑橘属植物橙树的果实，常绿小乔木，高达4～6米。

枝细长，有长棘针。

花期春季，果期秋季。

橙子又称黄果。

原产中国南部，南方各省均有分布，而以四川、广东、台湾等省栽培较为集中。

15世纪初从中国传入欧洲，15世纪末传入美洲，我国江苏、浙江、安徽、江西、湖北、湖南、四川、云南、贵州等地均有栽培。

果圆形至长圆形，橙黄色，油胞凸起，果皮不易剥离。

无苦味。

中心柱充实；汁味甜而香。

含有大量的糖和一定量的柠檬酸以及丰富的维生素C，营养价值较高。

果实还含维生素P，具极高的医药价值。

橙子味甘、酸，性凉。

具有生津止渴、开胃下气的功效。

正常人饭后食橙子或饮橙汁，有解油腻、消积食、止渴、醒酒的作用。

橙子营养极为丰富而全面，事实上，它的维生素C含量丰富，能增强人体抵抗力，亦能将脂溶性有害物质排出体外，是名实相符的保安康抗氧化剂。

橙皮又叫黄果皮，除含果肉中的成分外，胡萝卜素含量较多，可作为健胃剂、芳香调味剂。

橙皮还含一定时的橙皮油，对慢性支气管炎有效。

猕猴桃（学名：Actinidia chinensis Planch）是猕猴桃科植物，落叶藤本；枝褐色，有柔毛，髓白色，层片状。

猕猴桃的适应性强，喜温、喜湿，常在阴湿的林边、荒坡或灌木丛中生长，不耐旱，也不很抗冻；猕猴桃的根系发达，生长旺盛。