维生素C含量测定的检验方法

实验一维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法一、测定原理2,6-二氯酚靛酚滴定法用于测定还原型抗坏血酸。

抗坏血酸分子中存在烯醇式结构（HO—C═C—OH），因而具有很强的还原性，还原型抗坏血酸能还原2,6-二氯酚靛酚染料。

2,6—二氯酚靛酚染料在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。

因此，当用2,6—二氯酚靛酚染料滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，被还原后红色消失成为无色的衍生物，可作为维生素C含量测定的滴定剂和指示剂。

还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化为脱氢抗坏血酸。

当抗坏血酸全部被氧化时，滴下的2,6—二氯酚靛酚溶液则呈红色。

在测定过程中当溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。

根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量、与样品中所含抗坏血酸的量成正比。

反应式如下：二、实验仪器与试剂1.仪器组织捣碎机；水果刀；托盘天平；精密天平；称量纸；卷纸；台式离心机；电炉；吸耳球；玻璃棒；蒸馏水，蒸馏水洗瓶；记号笔、标签纸、定性滤纸；20cm镊子；5ml、10ml移液管、(微量)酸式滴定管、漏斗；漏斗架；50ml、250ml、 500ml 、1000ml烧杯；10ml 、500 ml、1000 ml量筒；100ml具塞量筒(或普通量筒)；100mL、250mL棕色容量瓶；50ml或100ml三角烧瓶。

及试剂本实验材料是，用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯度。

(1)2%草酸溶液：草酸20g溶于700ml蒸馏水中，稀释至1000ml。

(2)1%草酸溶液：取上述2%草酸溶液450ml，稀释至900ml。

(3)抗坏血酸标准溶液：称取抗坏血酸20mg，用适量1%草酸溶液溶解后，移入100mL棕色容量瓶中，并以1%草酸溶液定容，振摇混匀，备用。

(4)0.02% 2,6-二氯酚靛酚溶液：称取碳酸氢钠52.2mg，溶解在200mL沸水中。

滴定法测定维生素C含量一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体健康具有多种益处，包括增强免疫力、促进铁质吸收、参与胶原蛋白的合成等。

由于其生理功能和广泛的应用，维生素C的含量测定在食品、药品、化妆品等领域具有重要意义。

滴定法作为一种经典的化学分析方法，因其准确度高、操作简便等优点，被广泛应用于维生素C含量的测定。

本文将详细介绍滴定法测定维生素C含量的原理、实验步骤、注意事项以及结果分析。

通过本文的阅读，读者可以了解滴定法的基本原理和实验操作，掌握维生素C含量测定的基本方法，为实际工作和研究提供有益的参考。

二、滴定法基本原理滴定法是一种常用的化学分析方法，通过测量一种已知浓度的试剂（称为滴定剂）与被测物质发生化学反应所需的量，从而确定被测物质的含量。

在维生素C含量的测定中，滴定法被广泛应用。

滴定法的基本原理是基于化学反应的定量关系。

在滴定过程中，滴定剂与被测物质按照一定的化学计量比进行反应，直到反应完全。

通过测量滴定剂的使用量，可以推算出被测物质的含量。

对于维生素C的滴定测定，通常使用碘作为滴定剂。

维生素C（抗坏血酸）具有还原性，可以与碘发生氧化还原反应。

在滴定过程中，碘逐渐与维生素C反应，直到维生素C完全消耗。

此时，通过测量剩余的碘的量，可以推算出样品中维生素C的含量。

滴定法的优点在于操作简便、准确度高、适用范围广。

然而，滴定法也需要注意一些影响准确度的因素，如滴定剂的纯度、操作误差等。

因此，在进行滴定法测定时，需要严格控制实验条件，确保测量结果的准确性。

通过滴定法，我们可以有效地测定样品中维生素C的含量，为食品、药品等产品的质量控制提供重要依据。

滴定法也为研究维生素C 的生理功能和代谢途径提供了重要的实验手段。

三、实验材料与方法试剂：维生素C标准品，碘酸钾（KIO₃），硫代硫酸钠（Na₂S₂O₃），淀粉指示剂，盐酸（HCl），氢氧化钠（NaOH）等。

标准溶液的制备：精确称取一定量的维生素C标准品，用适量水溶解后，转移到容量瓶中定容，得到标准溶液。

实验3 食品中维生素C含量的测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验原理维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

2，6-二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无色，因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。

当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一点染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。

如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。

二、试剂和器材偏磷酸醋酸溶液：取15g（用时研细）溶于40mL醋酸及20mL水的混合液中，然后用水稀释至500mL，过滤后储入试剂瓶中。

标准2，6-二氯酚靛酚溶液：取0.25g2，6-二氯酚靛酚溶于700mL蒸馏水中（用力搅动），加入300mL磷酸缓冲液（预先配制9.078g/L KH2PO4-11.867g/LNa2HPO4·2H2O水溶液，用时以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4：6的比率将其混合，pH值为6.9-7.0），翌日过滤，滤液储于棕色瓶中，临用时，以抗坏血酸溶液标定。

标准维生素C溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解0.1g维生素C于100mL容量瓶中，再以该液稀释至刻度。

2，6-二氯酚靛酚液的标定：在3个100mL锥形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再各加2mL标准维生素C溶液，摇匀。

用上面所制的标准2，6-二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰红色保持30s不褪色为止。

记下所用2，6-二氯酚靛酚溶液体积平均值，再以同样方法做一空白实验，取7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相当于以上所用的2，6-二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。

将第一次滴定的量减去空白实验的量，即为标准维生素的反应量，求出1mL 2，6-二氯酚靛酚对应于维生素C的质量（mg）。

研钵、容量瓶、剪刀、锥形瓶、微量滴定管三、实验步骤1、用自来水冲洗果蔬样品，再以蒸馏水清洗，用纱布或吸水纸吸干表面水分，然后称取25g，剪碎，在研钵中研呈浆状。

维生素c的含量测定方法
维生素 C 的含量测定方法
一、实验原理
维生素 C（水溶性维生素）是一种生物体必需的营养素，它的含量反映和保护人体健康的重要指标之一。

本实验采用酸度法测定维生素 C 含量。

根据双缩酸酐苷酸（DPPH）对维生素 C 的抗氧化作用，即抗氧化剂的抗氧化能力随着抗氧化剂浓度的减少而减弱的原理，采用UV-vis 波长540nm处的吸光度（A）改变率（ΔA）来测定维生素
C 的含量。

二、实验原料
1.0 mol/L 磷酸钠溶液；0.1 mol/L 双缩酸酐苷酸（DPPH）母液；50%乙醇；测定样品；标准维生素 C 的标准溶液。

三、实验步骤
1. 勺取0.2ml的维生素 C 样品，加入9.8ml的磷酸钠溶液，振荡混匀。

（做到样品浓度相等，以便获得精确的测定结果）
2. 将2ml的双缩酸酐苷酸（DPPH）母液加入1.0ml的样品液，振荡混匀，在室温下静置 10min 。

3. 测定 UV-vis 波长540nm处吸光度（A），用此值作为空白试验值，记为 A1。

4. 将1.0ml的样品液加入2.0ml的50%乙醇，振荡混匀，在室温下静置 10min，测定 UV-vis 波长540nm处吸光度（A），记为 A2。

5. 计算λ=540nm处的吸光度初变化值ΔA=A2-A1，根据ΔA与
维生素 C 标准溶液浓度的变化关系，求维生素 C 样品的含量。

《中国药典》维生素c的含量测定维生素C是一种重要的水溶性维生素，也是人体所必需的营养物质之一。

在《中国药典》中，对维生素C的含量测定方法进行了详细的规定，以确保维生素C产品质量的可靠性和一致性。

《中国药典》中关于维生素C含量测定主要参考内容如下：1. 原理：维生素C的测定主要采用氧化还原反应原理，以氧化剂作为指示剂，测定待测样品中维生素C的氧化还原能力。

2. 试剂：(1) 0.1mol/L碘液：通过溶解碘粉和氢碘酸制备。

(2) 10%硫酸：将浓硫酸与等体积的蒸馏水混合而成。

(3) 混合指示剂：将0.1mol/L的淀粉溶液与蒸馏水按1:100混合。

(4) 维生素C对照溶液：浓度为1.00mg/mL的维生素C溶液。

3. 仪器设备：(1) 滴定管：用于滴定过程中调节试液加入速度。

(2) 滴定管架：用于固定滴定管。

(3) 温度恒定水浴：用于控制滴定温度。

4. 操作步骤：(1) 取适量待测样品，加入10%硫酸溶液挤压提取维生素C。

(2) 将提取液过滤，并将滤液冷却至室温。

(3) 取适量的滤液和维生素C对照溶液，用0.1mol/L碘液逐滴滴定到产生淡蓝色终点。

(4) 加入混合指示剂，继续滴定到溶液变为无色。

(5) 计算样品中维生素C含量。

5. 计算公式：维生素C（mg/g）=（V-V0）×C×V1/m其中，V为滴定终点消耗的0.1mol/L碘液体积（mL），V0为滴定过程中滴定管中的0.1mol/L碘液消耗体积（mL），C为0.1mol/L碘液浓度（mol/L），V1为滴定取样体积（mL），m 为样品质量（g）。

以上是《中国药典》中关于维生素C含量测定的相关参考内容。

通过实验操作，并结合计算公式，可以准确测定维生素C 的含量。

这些规定的制定和执行可以保障维生素C产品的质量及安全，帮助人们获得足够的维生素C供给，维持身体健康。

维生素c含量测定公式计算步骤
维生素C片中维生素C含量的测定方法有：碘量法、紫外分光光度法、比色法、薄层扫描法、差示旋光法和HPLC法。

一简单方法：间接碘量法测定维生素C的含量：
（1）测定原理：在弱酸性条件下，维生素C与碘发生氧化还原反应，过量的碘用硫代硫酸钠标准液滴定。

有关反应方程式：（2）仪器和试剂：
电子天平：感量0.0001g、0.04mol·L-1（16K2Cr2O7）标准溶液、0.04mol·L-1（12I2）标准溶液；0.04mol·
L-1Na2S2O3标准溶液。

准确称取0.2g左右样品于碘量瓶中，加新煮沸并冷却的蒸馏水50mL、冰醋酸5mL溶解。

准确移取50.00mL碘标准液于碘量瓶中，充分摇匀。

然后用Na2S2O3标准液滴定剩余的碘，滴定至溶液呈浅黄色后，加入2mL0.5%淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好消失。

记录滴定消耗的体积为根据滴定所消耗体积按以下公式计算：用间接碘量法测定维生素C药片的含量，不需对样品进行前处理，具有操作简便、精密度好、准确度高等优点。

维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较目前研究维生素C测定方法的有很多，如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果。

目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流，但近年来色谱法，特别是HPLC 法上升趋势尤为明显。

一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。

本方法的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC，GB／T6195—1986）1、原理：还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、优点简便、快速、比较准确等，适用于许多不同类型样品的分析。

3、缺点2，6一二氯靛酚法虽然简便，但是药品价格昂贵。

而且不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。

如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。

三、分光光度法1、原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。

脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎，脎在500nm波长有最大吸收。

维生素c测定含量测定方法
维生素C含量的测定可以采用以下方法：
1.碘姜法：将待测物与加入了淀粉溶液的碘液加入姜汁中，根据被测物的浓度，溶液在一定时间内呈现不同颜色。

根据颜色的深浅即可推断维生素C的含量。

2.操作步骤：
（1）取0.1g测试物粉末，加入60ml蒸馏水，把瓶口用纸片盖好，放到90水浴中煮沸5min，连同剩余液体倒入定容瓶中，揉匀，装压滤器上，用蒸馏水再冲洗若干次，至50ml定容，得到的溶液为1%的Vc溶液。

（2）取Vc溶液4.0ml，加入1mol/L的FeSO4溶液10ml中，用10mol/L的H2SO4滴定至黄色漆黑色转化为粉红色后，即记录所滴入的体积。

（3）同时，取另一烧杯加入20ml的去离子水作空白，加入相同的含量的FeSO4和H2SO4，然后进行滴定，此滴定所需的体积就是空白滴定。

（4）根据维生素C的化学反应式和滴定结果计算出维生素C的含量。

3.较为简便的方法：同样使用该测试方法，单可用水激发器代替FeSO4溶液，从而避免了FeSO4溶液的制备。