阴沟肠杆菌产AmpC β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶的检测和药敏分析
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三维试验检测阴沟肠杆菌产β作者:张益新单位:浙江省义乌市中心医院义乌【关键词】阴沟肠杆菌超广谱β AmpC酶三维试验本研究通过对阴沟肠杆菌产β(主要是ESBLs与AmpC酶)的监测,了解临床上耐三代头孢的阴沟肠杆菌耐药的主要原因及ESBLs与AmpC酶于此类耐药中出现频率(即其流行情况),并同时统计这些耐药菌对其它抗生素的耐药情况,现报道如下。
1 材料与方法1.1 材料①菌株:2006年1月~2007年2月本院收集的对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌33例。
大肠埃希菌标准菌株ATCC25922一株。
质控株为经VITEK确认产ESBLs的肺炎克雷伯菌一株。
②药敏纸片:头孢西丁(FOX)、头孢吡肟(FEP)。
③其它:生理盐水、克拉维酸粉剂、氯唑西林粉剂、血平板、MH平板等。
1.2 方法①粗提酶(冻融裂解法)[1]:新分离的纯菌种配成0.5McFarland密涂于1/4MH琼脂平板(φ=90mm)上,35℃培养24小时后用无菌棉签取下全部菌苔于1ml灭菌生理盐水中(用 1.5ml离心管),-80℃冻融数次,培养无菌生长后4℃10000r/min离心20min,取上清液头孢硝噻吩纸片确定β[1]后置-20℃保存待用。
②改良三维实验[1,2]:将大肠埃希菌标准株ATCC25922配成0.5McFarland密涂于两块MH琼脂(=90mm)10min后于平板中央分别贴30μg FOX纸片和30μg FEP纸片各1片,距纸片5mm处沿两边分别垂直打两个1mm×10mm的槽, FOX纸片平板的两槽内分别加酶粗提液+10μg/ml氯唑西林(9∶1)25~40μl和酶粗提液25~40μl。
而FEP纸片平板上的两槽内分别加酶粗提液25~40μl和酶粗提液+10μg/ml克拉维酸(9∶1)25~40μl。
肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析【摘要】为了解我院利用产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)检测菌株的流行情况、产ESBLS菌株的发生率和耐药性,采用纸片扩散法中的筛选实验和确认实验,结合常规方法对我院2003~2005年肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析。
结果,共检出肠杆菌科细菌398株,产ESBLS104株,总检出率26.1%,产ESBLS 3年检出菌株分别为22.8%、24.6%、30.3%。
产ESBLS菌株对头孢他啶、头孢噻肟、阿米卡星、氨曲南、复方新诺明、环丙沙星、氨苄西林具有多重耐药性,耐药率分别为44.2%、88.5%、70.2%、85.6%、57.7%、66.3%、100%。
认为利用ESBLS检测可准确了解ESBLS菌株流行趋势,以有效控制产ESBLS菌株的传播和流行。
【关键词】 ESBLS 肠杆菌科细菌抗生素耐药性随着抗生素在临床的广泛使用,原来敏感细菌变为耐药菌,特别是三代头孢菌素在临床的大量应用,细菌的耐药性已成为目前全球共同的难题,给临床抗感染治疗带来很大困难,导致病人病程延长和死亡率上升。
为了解临床细菌耐药性的发展趋势,药敏结果能正确地指导临床合理使用抗生素,制定各种抗感染的治疗方案。
本文利用肠杆菌科的细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)对我院主要肠杆菌科细菌菌株进行监测及耐药性分析。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 标本:来自我院2003年1月~2005年12月临床血、尿、便、痰、咽拭子、胸腹水、前列腺液及各种分泌物标本中分离培养的纯菌。
1.1.2 试剂:培养基选自杭州天和产品,鉴定卡和药敏卡选自湖南长沙天地人产品,药敏纸片选自北京天坛生物制品有限公司产品,用大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923和铜绿假单孢菌27853做质控均符合标准,ESBLS阴性质控菌为大肠埃希菌ATCC25922,阳性质控菌为肺炎克雷伯ATCC700603。
产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析王正兰;戎建荣;李连青;王淑峰;崔巧珍;梁红萍【期刊名称】《实用检验医师杂志》【年(卷),期】2011(003)004【摘要】目的分析产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β lactamases,ESBLs)及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6%以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8%.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株(93.9%);产ESBLs菌株29株(59.2%),PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株(73.5%),同时产两种酶的菌株为13株(26.5%).结论产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.【总页数】3页(P203-205)【作者】王正兰;戎建荣;李连青;王淑峰;崔巧珍;梁红萍【作者单位】030001 太原市,山西医科大学;030012 太原市,山西省临床检验中心;030012 太原市,山西省临床检验中心;030001 太原市,山西医科大学第一医院;030012 太原市,山西省人民医院;030012 太原市,山西省人民医院【正文语种】中文【相关文献】1.阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶基因检测及耐药性分析 [J], 周铁丽;郑佳音;李超;黄海霞2.产AmpC酶及或产超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌的检测及耐药性研究 [J], 刘建明;聂新民;孙圣华;刘备战3.ICU多药耐药阴沟肠杆菌产AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶的检测及同源性分析[J], 左克;周红翠;梁朋4.产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶阴沟肠杆菌的表型检测及耐药性分析 [J], 沈云峰;杨卫萍5.阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶的检测及耐药性分析 [J], 李岩;许淑珍;苏建荣;刘志远因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析杨洪芬;李美;刘宝;万珊;杨焕婕;费樱【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2016(037)024【摘要】目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药.方法非重复阴沟肠杆菌共1 74株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶.结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P<0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P<0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%.结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选.【总页数】4页(P3400-3402,3405)【作者】杨洪芬;李美;刘宝;万珊;杨焕婕;费樱【作者单位】贵州省贵阳市第二人民医院检验科 550081;贵州省贵阳市第二人民医院检验科 550081;贵州医科大学医学检验学院,贵阳550004;贵州医科大学附属医院微生物免疫科,贵阳550001;贵州医科大学附属医院微生物免疫科,贵阳550001;贵州医科大学附属医院微生物免疫科,贵阳550001;贵州医科大学附属医院微生物免疫科,贵阳550001;贵州医科大学医学检验学院,贵阳550004【正文语种】中文【相关文献】1.产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌的检测及耐药性分析 [J], 赵德军;胡昭宇;武静;刘彬;曹雁;田维涛2.产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析 [J], 唐振华;朱义朗3.产AmpC酶和ESBLs酶阴沟肠杆菌的耐药性分析 [J], 苏国娟;郭彦言4.产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究 [J], 唐萍;顾翠红5.产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究 [J], 唐萍;顾翠红因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。