2.1《微生物的实验室培养》课件(新人教版选修1)高二改

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动
作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯
化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。 整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致 烧杯破裂。
培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ， 培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ， 培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。
（2）获得纯净培养物的关键是什么？ （3）避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 （4）什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着 和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微 生物污染培养基。
3、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板？
三、实验操作

特点
不加凝固剂
用途
工业生产 观察微生物的运动、 分类鉴定 微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌 种 工业生产 科研 培养、分离出特 定微生物
化学成分
合成培养基
选择培养基 用途
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂 鉴别不同种类微 或化学药品, 生物
5. 配制原则
⑴目的明确： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源（CO2碳源） 异养型： 有机碳源
2.右表是某微生物培
编号
成分
含量
养基成分，请据此
回答： （1）右表培养基可
①
② ③
粉状硫 （NH4） 2SO4
K2HPO4
10g
0.4g 4.0g
培养的微生物代谢
类型是：
自养型微生物
④
⑤ ⑥
MgSO4
FeSO4 CaCl2
9.25g
0.5g 0.5g
⑦
H2 O
100ml
（2)若除去成分②， 加入（CH2O），该
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当
加入缓冲剂 ⑶适宜的pH值：
牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方
琼脂 蛋白胨 20.0g 5g 10g
牛肉膏
Nacl
H2 O
5g
定容至1000ml
请分析各成分的作用？
【典例解析】
例:关于微生物营养物质的叙述中， 正确的是( D ) A.是碳源的物质不可能同时是氮 源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机 盐 D.无机氮源也能提供能量
自养微生物
②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油 等

微生物需要的五大类营养要素物质： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 1.碳源
⑴概念 ：凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。
⑵来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等
⑶作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
2.氮源
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 back
——
伊 红 美 蓝 培 养 基
（四）无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防 止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌
⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。
培养基的种类
划分标准
培养基种类
液体培养基
半固体培养基
物理性质
固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
用途
工业生产 观察微生物的运 动、分类鉴定
微生物分离、 鉴定、活菌计 数、保藏菌种
化学成分 用途
天然培养基 合成培养基
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长, 促进所需要的微生物的生长
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或 化学药品,用以鉴别不同种类的
微生物
工业生产 分类、鉴定 培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种 类微生物
液体培养基：
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
半固体培养基：
无动力
固体培养基：菌落

(3) 为 避 免 周 围 环 境 中 _微__生__物___ 的 污 染 ， 实 验 操 作 应 在 ___酒__精__灯__火__焰__附__近___进行。
(4) 实 验 操 作 时 应 避 免 已 经 灭 菌 处 理 的 材 料 用 具 与栏目
周__围__的__物__品__相接触。
链 接
2．消毒和灭菌
包括某些大量元素
无机化合物
特别 提醒
①对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳 源又是氮源、能源。
②一些天然营养物质，如酵母膏、蛋白胨、动植物组织
提取液等可为微生物提供生长因子。
栏 目
链
接
③不同微生物对营养的需求不同，因此，首先根据不同
微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
④营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微 生物的生长有抑制作用。
花生饼、石油等
接
氮源
能为微生物的代谢提供 氮元素的物质
无机氮源：N2、NH3、 NO、NH有机氮源：蛋 白胨、尿素、蛋白质等
生长因子
生长必不可少的微量有 机物
维生素、氨基酸、碱基 等
在生物体内含量很高， 水 在低等生物体内含量更
高
外界摄入
栏
目
链
接
为微生物提供碳源、氮 无机盐 源以外的各种重要元素，
目
分利用营养物质；氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸 链
接
的原料；牛肉膏主要为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素。
答案：B
变式 训练
1．下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是 ()
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯