卵黄卵磷脂提取与应用的研究进展
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卵磷脂提取与纯化技术研究进展刘文倩;廖泉;赵玲艳;邓放明【摘要】文章简述卵磷脂的生理生化及保健特性,综述近年来国内外卵磷脂的分离提取及精制方法的研究进展,并展望卵磷脂的生产制备研究与应用前景.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2014(030)001【总页数】5页(P267-271)【关键词】卵磷脂;磷脂酰胆碱;提取;精制【作者】刘文倩;廖泉;赵玲艳;邓放明【作者单位】湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;食品科学与生物技术湖南省重点实验室,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;食品科学与生物技术湖南省重点实验室,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;食品科学与生物技术湖南省重点实验室,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;食品科学与生物技术湖南省重点实验室,湖南长沙410128【正文语种】中文卵磷脂广义上指一类不溶于丙酮的磷脂混合物,包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、肌醇磷脂、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、及少量甘油三酯和糖脂等;狭义的卵磷脂即指磷脂酰胆碱。
卵磷脂根据来源分为植物性卵磷脂和动物性卵磷脂。
植物性卵磷脂主要来源于植物油脱胶时产生的副产品,其中以大豆最高,约含2%~3%,其中磷脂酰胆碱约30%。
动物性卵磷脂中以蛋黄含量最多,约10%,磷脂酰胆碱含量约70%[1]。
卵磷脂根据制得途径和磷脂酰胆碱含量又可以分为浓缩卵磷脂、去油卵磷脂、高纯度精制卵磷脂和改性卵磷脂。
由于卵磷脂结构中同时存在亲水的磷酸脂基团和疏水的脂肪酸基团,使其具有很好的表面活性,因此在食品、化妆品和医药业中有广泛的应用,可作为乳化剂、黏度调节剂和稳定剂添加到焙烤食品、巧克力、奶粉、人造黄油、蛋黄酱等食品中[2-4]。
自20世纪70年代以来,卵磷脂的保健作用及理化功能就得到了反复的试验与验证,尤其是蛋黄卵磷脂和大豆卵磷脂,研究[5]发现蛋黄卵磷脂相比于大豆卵磷脂饱和脂肪酸比例大,氧化性好且更容易被人体吸收。
FOOD INGREDIENTS添加剂·配料蛋黄来源卵磷脂的应用及进展近年来,母乳中越来越多的功能性成分被大家发现并应用于婴幼儿配方食品中。
卵磷脂即为其中之一,蛋黄卵磷脂已成为国际上新进针对婴幼儿配方食品开发出来的高安全系数食品配料。
蛋黄卵磷脂的概念磷脂(Phospholipid)是指含磷的脂类,广泛存在于动物的大脑、心、肝等器官及神经系统中,也存在于母乳里。
卵磷脂(Lecithin)是1812年和1844年分别从脑和蛋黄中发现的含磷脂类物质。
广义的卵磷脂是各种磷脂的总称,包括磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine,PC)、磷脂酰乙醇胺(Phosphatidythanolamine,P E)、神经鞘磷脂(S p h i n g o m y e l i n,S M)、肌醇磷脂(Phosphatidylinositol,P I)、溶血磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine,L P C))磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyserine,PS)等,狭义的卵磷脂是指磷脂酰胆碱(PC)。
蛋黄卵磷脂(E g g y o l kp h o s p h o li p i d s)的成分复杂,且随着禽蛋种类不同,磷脂组分会有差异。
鸡蛋蛋黄卵磷脂主要含有磷脂酰胆碱(70%~75%),磷脂酰乙醇胺(15%~20%),神经鞘磷脂(2%~3%),其中最主要的成分是磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺。
磷脂酰胆碱的结构式如下:从应用上来看,我国目前生产的蛋黄卵磷脂产品有两大类,一类是粗蛋黄卵磷脂(磷脂含量30%左右),另一类是精制蛋黄卵磷脂(磷脂含量90%)。
值得注意的是,功能性的蛋黄卵磷脂随着研究的深入而推向市场。
如富含DHA、ARA的蛋黄卵磷脂,DHA、ARA含量可达4%。
因此,在欧洲新一代蛋黄卵磷脂作为必需脂肪酸补充途径之一,已经广泛添加到各类食品中。
蛋黄卵磷脂的理化性质纯净的卵磷脂为白色蜡状固体,液态为淡黄色,低温下可结晶,同时有清淡柔和的香味。
比较了水提方法与醇提法,醇提法效果较好。
为全面考查醇提法影响因素,设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的3因素3水平正交试验,结果见表4。
试验结果及方差分析表明:乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件A2B3C2即用25倍量80%乙醇回流2h,影响因素的大小依次为:乙醇浓度、提取时间、溶媒量;此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为12.59%。
3结 论对多穗柯中黄酮类物质的提取,水提法以80℃的恒温水浴,pH值为10的氢氧化钠液提取效果最好。
醇提法的正交试验的结果表明:多穗柯中黄酮类物质的最佳提取条件是A2B3C2,即用25倍量80%乙醇回流2h,醇提法提取总黄酮类物质的含量是12.59%。
而碱提法色素成分浸出太多。
所以,多穗柯中黄酮类物质的最佳提取方法是醇提法。
此法的提取工艺简单,条件容易控制,提取率高,提取剂乙醇易除净,所以可将此工艺应用于工业化生产,所生产的提取液可浓缩成膏状物,也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中,作为保健食品、营养食品和功能食品的原料,应用前景良好。
参考文献:[1]中科院植物研究所.中国高等植物图鉴(第一册)[M].科学出版社,1972.[2]廖代富,等.多穗柯叶的综合利用[J].中国野生植物,1992(3):10.[3]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科技出版社,1997.2433.[4]郭建平,等.葛根药理作用研究进展[J].中草药,1995,(3):163.[5]马慧萍,贾正平,谢景文,等.淫羊藿总黄酮的提取分离工艺研究[J].华西药学杂志,2002,17(1):1.[6]覃洁萍,许学键,董明姣,等.广西藤茶中黄酮类成分的提取工艺研究[J].中国现代应用药学杂志,2000,17(3):196,[7]丁利君,吴振辉,蔡创海,等.金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究[J].食品科学,2002,23(2):62.蛋黄卵磷脂的制备研究吴晓英,林 影,叶倩君,李晶晶(华南理工大学生物工程系,广东 广州 510640)摘 要:研究了鸡蛋卵黄卵磷脂的制备工艺和产品质量分析。
摘 要:该文介绍了卵磷脂的理化性质、生理功能,综述了国内外对蛋黄卵磷脂的分离提取和精制方法及其在食品中的应用等方面的研究进展,展示了其在食品、药品等研究开发方面的广阔前景。
关键词:蛋黄;卵磷脂;分离;纯化0 引言卵磷脂(Lecithin)是一种含磷酸的类脂类生理活性物质,同时又是一种天然表面活性剂[1],其化学名称是磷酰二甘油脂肪酸酯。
卵磷脂有广义和狭义之分,狭义的卵磷脂指的是蛋黄磷脂和大豆磷脂中主要成分磷脂酰胆碱(PC);广义上的卵磷脂是指包括卵磷脂(磷脂酰胆碱,PC)、脑磷脂(磷脂酰乙醇胺,PE)、肌醇磷脂(磷脂酰肌醇,PI)、丝氨酸磷脂(磷脂酰丝氨酸,PS)、溶血磷脂(溶血磷脂酰胆碱,LPC)等在内的各种磷脂质集合体[2]。
卵磷脂是由极性脂(磷脂、糖脂)、非极性脂(甘油三酸酯、固醇、游离脂肪酸)以及少量的其他物质如糖类和杂质所组成的复杂混合物。
每个磷脂分子都具有1个亲脂部分——包括2个依附于甘油主架结构上的脂肪酸链,以及1个由胆碱磷酸酯、胆碱或肌醇等组成的亲水部分。
就是这种分子结构,使卵磷脂具有乳化性、分散性,是一种纯天然的表面活性剂,在食品、化工、医药等行业均有着广泛的用途。
磷脂来源不同,其组成也不尽相同,下表列出了大豆磷脂与蛋黄磷脂主要成分。
由表可看出,蛋黄磷脂与大豆磷脂相比,其最明显的特点是PC含量高,前者的含量为后者的3倍多。
1 卵磷脂的性状和理化性质卵磷脂在禽卵卵黄中的含量最为丰富,尤其在鸡、鸭卵黄中的含量最高,可占蛋黄总重量的4%左右,达干物质总量的8% ̄10%。
卵磷脂为白色至枯黄色粉末或团状,在低温下可结晶,有轻微的异气味,味淡。
等电点是6.7,可溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中,也能溶于水成为胶体状态,但不溶于丙酮、乙酸乙酯。
不同的卵磷脂在有机溶剂中溶解度不同,故可用有机溶剂来提取分离卵磷脂。
卵磷脂具有较强的吸水性,由于分子中有大量不饱和脂肪酸,在储存过程中易受到光照、氧气和温度的影响而变质,产生能溶血的有毒物质[3]。
实验申请实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料:鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂: 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇,均为分析纯试剂.实验仪器: 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材:毛细管(两支)、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒(2个)、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的:1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理:卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中含量较高,约10%。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上,样品中的两成分是两种结构近似的染料,在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸,再吸附,再解吸,由于极性不同从而分离,展开结束以后,会在薄层板上形成斑点,混合物中的成分得以分离。
参考文献: 刘宝全,所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋,分别将其刨壳,把四个鸡蛋的总的蛋壳,蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中,用筷子捣碎,取100ml丙酮倒入其中,搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤,收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯,取100ml丙酮倒入杯中,重复上步操作,收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇,放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中,搅拌30min后用布氏漏斗抽滤,收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中,再取100ml混合液浸泡搅拌30min,然后抽滤,将所有滤液收集,倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发,旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
122 食品安全导刊 2021年12月工艺技术鸡蛋中卵磷脂提取工艺研究关爱国(江西科技职业学院,江西南昌 330000)摘 要:卵磷脂(Lecithin)是一种含磷酸的类脂化合物,是构成细胞生物膜的基本组成成分,具有较高的营养价值和生理调节机能,并且作为一种天然的表面乳化剂,具有乳化、分散、润湿、速溶、脱膜和分离等作用,主要存在于大豆、菜籽、花生、蛋黄中。
本研究以鸡蛋蛋黄为原料,通过有机溶剂萃取法提取卵磷脂,探索卵磷脂粗提物的最佳提取工艺。
有机溶剂采用乙醚溶液,并通过单因素及正交实验对回流提取过程进行了优化。
通过实验数据分析,得出影响卵磷脂提取率的因素依次为乙醚浓度>提取温度>提取时间;回流提取最佳工艺条件为:乙醚浓度为90%,温度为30 ℃,提取时间为1 h。
为卵磷脂生产工艺的市场化提供参考依据。
关键词:鸡蛋;卵磷脂;粗提物Study on the Extraction Technology of Lecithin from EggsGUAN Aiguo(Jiangxi University of Science and Technology, Nanchang 330000, China)Abstract: Lecithin is a lipid compound containing phosphoric acid. It is the basic component of cell biomembrane. It has high nutritional value and physiological regulation function. As a natural surface emulsifier, It has the functions of emulsification, dispersion, wetting, instant dissolution, de-filming and separation. It mainly exists in soybeans, rapeseeds, peanuts, and egg yolks. In this study, egg yolk was used as raw material, and lecithin was extracted by organic solvent extraction method to explore the best extraction process for crude lecithin. The organic solvent adopts ether solution, and the reflux extraction process is optimized through single factor and orthogonal experiment. Through the analysis of experimental data, it is concluded that the factors affecting the extraction rate of lecithin are ether concentration > extraction temperature > extraction time; the optimal process conditions for reflux extraction are: ether concentration of 90%, temperature of 30 ℃, and extraction time of 1 h. Provide reference basis for the marketization of lecithin production process.Keywords: egg; lecithin; crude extract1 材料与方法1.1 材料与试剂原料:市售新鲜鸡蛋。
实验申请实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料:鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂: 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇,均为分析纯试剂.实验仪器: 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材:毛细管(两支)、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒(2个)、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的:1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理:卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中含量较高,约10%。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上,样品中的两成分是两种结构近似的染料,在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸,再吸附,再解吸,由于极性不同从而分离,展开结束以后,会在薄层板上形成斑点,混合物中的成分得以分离。
参考文献: 刘宝全,所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋,分别将其刨壳,把四个鸡蛋的总的蛋壳,蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中,用筷子捣碎,取100ml丙酮倒入其中,搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤,收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯,取100ml丙酮倒入杯中,重复上步操作,收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇,放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中,搅拌30min后用布氏漏斗抽滤,收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中,再取100ml混合液浸泡搅拌30min,然后抽滤,将所有滤液收集,倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发,旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
蛋黄卵磷脂提取工艺的研究作者:李欣刘欣来源:《现代食品·下》2017年第06期摘要:本实验以新鲜鸡蛋为原料,通过单因素和L9(34)正交实验,研究不同提取温度、提取时间、乙醇浓度和料液比对蛋黄卵磷脂提取量的影响,探讨丙酮(脱脂)—乙醇(萃取)联合提取法提取蛋黄卵磷脂的最佳工艺。
结果表明:提取温度20 ℃、提取时间60 min、乙醇浓度为92%、料液比为1∶12时,卵磷脂提取量为101.9 mg/g。
关键词:蛋黄卵磷脂;提取工艺;乙醇Abstract:In this study, the effects of different extraction temperature, extraction time,ethanol concentration and ratio of material to liquid lecithin on the extraction of egg yolk lecithin were studied by single factor and L9 (34) orthogonal experiment. The effects of acetone (degreasing)- ethanol (Extraction) combined extraction method to extract egg yolk lecithin. The results showed that the extraction time was 60℃, the extraction time was 60 min, the ethanol concentration was 92% and the ratio of material to liquid was 1∶12. The lecithin extraction rate was 101.9 mg / g.Key words:Egg yolk lecithin; Extraction process; Ethanol中图分类号:TQ645.96鸡蛋黄中含有33%左右的脂类物质,包括占蛋黄总重10%以上的磷脂质,目前国内保健品市场大豆磷脂也占有重要地位,蛋黄中卵磷脂含量高,对人体有益的磷脂酞胆碱含量远远高于大豆磷脂[1-3]。
卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的卵磷脂的提取与鉴定一实验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法。
二实验原理卵磷脂在脑神经细胞中含量很高,蛋黄中含有特别高。
根据卵磷脂溶于乙醇、乙醚等有机溶剂进行提取。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物,与空气接触后被氧化为黄褐色。
利用卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺(特殊的鱼腥臭味)进行鉴别。
三实验器材与试剂鸡蛋黄、乙醇(95,)、10,NaOH、烧杯、量筒等。
四实验步骤1 提取卵磷脂取2g蛋黄于15mL(95,)乙醇,过滤、蒸气浴蒸干,残留物为卵磷脂。
2 鉴别取少量的卵磷脂于试管中,加10,NaOH溶液2mL,水浴加热是否产生鱼腥臭味。
五注意事项滤液要清。
六作业完成实验报告,写出实验小结。
1粗脂肪的提取和定量测定——索氏提取法一实验目的1 学习和掌握用索氏提取器提取脂肪的原理和方法2 学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。
二实验原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性,在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的的脂类物质进行提取。
因提取的物质是脂类物质的混合物,故称其为粗脂肪。
三实验器材1索氏提取器 2 分析天平 3 烧杯 4 恒温水浴锅 5 脱脂棉和脱脂滤纸 6 镊子7 干燥器四实验试剂与材料1 样品2 石油醚五实验步骤1称量索氏提取瓶将索氏提取瓶洗净烘干至恒重,记录重量。
2提取样品粗脂肪将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积1/2—2/3。
将样品包放入提取管内。
连接索氏提取器各个部分。
用70度,80度恒温水浴加热提取瓶,抽提进行2―3小时,直至提取管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止,表示提取完全。
3 计算样品中粗脂肪的含量提取完毕,取出滤纸包,再回馏一次,倒出石油醚。
取下提取瓶,洗净瓶的外壁,烘干至恒重。
记录重量。
2按照下式计算样品中粗脂肪的百分含量。
粗脂肪(,),(提取后提取瓶的重量,提取前提取瓶的重量)/样品重量*100% 六作业计算样品中粗脂肪的含量,完成实验报告。
大豆卵磷脂的提取工艺及发展研究大豆卵磷脂的提取称取约10g蛋黄于小烧杯中,加入温热的95%乙醇30mL,边加边搅拌均匀,冷却后过滤。
如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。
大豆卵磷脂的鉴定新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
1、三甲胺的检验:取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验。
2、不饱和性检验:取干净试管一支,加入10滴上述滤液,再加入1~2滴3% 溴的四氯化碳溶液,振摇试管,观察有何现象产生。
3、磷酸的检验:取干净试管一支,加入10滴上述滤液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管放入热水浴中加热5~10min,观察有何变化。
4、甘油的检验:取干净试管一支,加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾,用试管夹夹住并先在小火上略微加热,使卵磷脂和硫酸氢钾混熔,然后再集中加热,待有水蒸气放出时,嗅有何气味产生。
大豆卵磷脂的开发应用1 在食品中的应用卵磷脂被用于糖果、巧克力中以降低粘度,用于人造黄油的乳化。
其次,它还用于制作许多粉末状食品以使产品迅速溶解和润湿。
含有卵磷脂的速溶蛋白粉能与肉类迅速彻底地混合。
某些分解胶体也能较容易地被迅连掺入食品中。
卵磷脂还具有抗氧化、催长及包埋等作用。
因此,其技术价值愈来愈被人们重视,2 在饲料工业中的应用卵磷脂是动物脑神经组织、骨髓、心、肝和脾不可缺少的组成部分,是生物膜的重要组分,对幼龄动物的生长发育非常重要,添加卵磷脂能促进鱼类和肉猪的脑、神经组织、内脏、骨髓的发育健全。
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法;2. 学习卵磷脂的提纯技术;3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。
其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。
卵磷脂具有多种生物活性,如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。
本实验采用乙醇提取卵磷脂,利用乙醚进行提纯。
实验过程中,通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤,使卵磷脂与其他杂质分离,提高卵磷脂的纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。
2. 实验仪器:离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。
四、实验步骤1. 提取卵磷脂(1)取一定量的蛋黄,加入适量的95%乙醇,充分搅拌,使蛋黄溶解;(2)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的氯化钠,充分搅拌,使蛋白质沉淀;(3)将溶液静置一段时间,待蛋白质沉淀后,取上层清液;(4)将上层清液转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(5)将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(6)将溶液过滤,收集滤液。
2. 卵磷脂的提纯(1)将收集到的滤液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(2)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(3)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的石油醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(4)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(5)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(6)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(7)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(8)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(9)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(10)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(11)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(12)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(13)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(14)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(15)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(16)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(17)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(18)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(19)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(20)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(21)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(22)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(23)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(24)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(25)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(26)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(27)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(28)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(29)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(30)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(31)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(32)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(33)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(34)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(35)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(36)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(37)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(38)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(39)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(40)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(41)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(42)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(43)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(44)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(45)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(46)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(47)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(48)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(49)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(50)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(51)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(52)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(53)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(54)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(55)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(56)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(57)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(58)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(59)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(60)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(61)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(62)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(63)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(64)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(65)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(66)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(67)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(68)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(69)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(70)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(71)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(72)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(73)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(74)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(75)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(76)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(77)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(78)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(79)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(80)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(81)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(82)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(83)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(84)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(85)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(86)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(87)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(88)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(89)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(90)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(91)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(92)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(93)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(94)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(95)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(96)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(97)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(98)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(99)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(100)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(101)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(102)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(103)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(104)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(105)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(106)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(107)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(108)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(109)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(110)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(111)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(112)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(113)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(114)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(115)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(116)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(117)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(118)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(119)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(120)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(121)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(122)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(123)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(124)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(125)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(126)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(127)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(128)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(129)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(130)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(131)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(132)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(133)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(134)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(135)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(136)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(137)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(138)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(139)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(140)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(141)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(142)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(143)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(144)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(145)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(146)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(147)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(148)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(149)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(150)。