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一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。
（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。
（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。
（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。
（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于动植物细胞膜中，对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂，了解其提取方法和鉴定技术，为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先，我们需要准备卵黄，将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂，使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后，通过离心将上清液和沉淀分离，将上清液转移到锥形瓶中，加入等体积的0.9%氯化钠溶液，摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后，将沉淀离心，得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构，我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先，将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中，然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品，放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射，我们可以观察到卵磷脂的斑点，并计算Rf值来确定其纯度。
另外，质谱技术也是一种常用的鉴定方法，通过质谱仪的分析，我们可以得到卵磷脂分子的质谱图，进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定，我们成功得到了卵磷脂，并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射，我们观察到了卵磷脂的斑点，并计算出了其Rf值，证明了其纯度。
同时，质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰，进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中，我们也发现了一些问题，比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰，导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此，在今后的实验中，我们需要进一步优化提取方法，提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验，我们成功提取和鉴定了卵磷脂，了解了其提取方法和鉴定技术。
同时，我们也发现了一些问题，为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力，能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。
2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。
3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜中。
它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。
本实验采用乙醇作为溶剂，通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂，并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器：离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 取鸡蛋，去壳取蛋黄，用玻璃棒搅拌成糊状。
2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇，搅拌均匀。
3. 将混合液倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌，使卵磷脂充分溶解。
4. 将烧杯置于冰箱中，低温处理2小时，使卵磷脂沉淀。
5. 取出烧杯，用漏斗和滤纸过滤沉淀物，得到卵磷脂粗提液。
6. 将粗提液倒入离心管中，离心分离，取下层卵磷脂沉淀。
7. 将沉淀物用乙醚洗涤，去除杂质，得到纯净的卵磷脂。
8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中，晾干至恒重。
五、实验结果与分析1. 提取结果：通过实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 鉴定结果：a. 硫酸铜试验：取少量卵磷脂，加入硫酸铜溶液，振荡，若出现蓝色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有磷酸基团。
b. 氯化钠试验：取少量卵磷脂，加入氯化钠溶液，振荡，若出现白色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有胆碱。
六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂，能够有效提取蛋黄中的卵磷脂，提取率较高。
2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀，提高提取纯度。
3. 通过硫酸铜和氯化钠试验，对提取的卵磷脂进行了鉴定，验证了其纯度。
七、实验结论通过本实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，并对其进行了鉴定。
实验结果表明，本实验方法可行，提取的卵磷脂纯度较高，为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。
八、实验注意事项1. 实验过程中，注意操作规范，避免交叉污染。
卵磷脂的提取卵磷脂的提取一、实验原理卵磷脂为两性分子，既具有脂溶性，又具有亲水性，其等电点为6.7。
纯净的卵磷脂为淡黄色，液态，有清淡柔和的风味和香味。
卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中，也能溶于水中成为胶体状态，但不溶于丙酮，且不同的磷脂在有机溶剂中的溶解度不同，故可用这些有机溶剂来提取分离卵磷脂。
卵磷脂的提取方法有有机溶剂法;无机盐复合沉淀法；乙酸乙酯纯化法；超临界Co2萃取法；色谱法和酶法等。
有机溶剂法：根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的，该方法提取卵磷脂具有分离效率高，生产周期短，易实现自动化等优点，但所得卵磷脂纯度不高。
本实验采取有机溶剂法对卵磷脂进行粗提取，再进一步纯化。
二、试验材料的依据三、操作步骤1、原蛋液处理原料蛋去壳，蛋内容物搅拌、过滤，取培养皿称量原蛋液2g于50~55℃的真空干燥器中烘干，磨成粉末。
2、原料粉浸泡用乙醇和甲醇1：1的混合液浸泡，混合液的用量为原料粉的2倍，浸泡时醇液以高出粉面30~35cm为原则：先将混合醇液倒入烧杯中，然后边搅拌边加入原料粉，持续搅拌到醇浸液为金黄色，用倾泻法（即将沉淀上澄清液沿玻棒小心倾入漏斗,尽可能使沉淀留在杯中。
少量是为防止洗涤后溶液太多,多次是为是清洗的更干净）吸取金黄色醇浸液，沉淀物倒入细纱布中，压出余下的浸泡液，移至前浸液中。
3、蒸馏浓缩甲醇的沸点为66.78℃，乙醇的沸点为78.4℃，故将醇浸液加热至78~80℃时醇变成气体，由分馏柱进入冷凝管;再变成液体而积存于接受瓶中。
当蒸馏出2/3的醇液时，便可升高蒸馏温度达80~85℃，继续蒸馏至烧瓶中残液已呈浊厚油状物，而冷凝管中已不再滴下回收醇液时，即可停止蒸馏，准备进行沉淀净化。
沉淀净化是用丙酮进行。
方法是将平底（或圆底）大烧杯中残余的油状物倒出，加入油状物2倍量的丙酮，以便净化沉淀。
加丙酮时应用玻璃棒搅拌，静置，待其沉淀分层。
将上层浑浊的丙酮洗液倾出，加入同量的丙酮搅拌洗净，放入已干燥、称重且标记了的离心管中，4000r/min离心10min，这样重复两三次。
卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言：卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物，存在于生物体细胞膜中，具有重要的生理功能。
本实验旨在通过提取卵磷脂，了解其提取方法和应用。
实验材料与方法：材料：鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器：搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤：1. 取适量鸡蛋，将蛋黄与蛋清分离。
2. 将蛋黄放入搅拌器中，加入适量乙醇，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心，离心后分为两层，上层为乙醇层，下层为沉淀层。
4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
5. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
6. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
8. 加入适量水，摇匀后放置静置。
9. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
11. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
12. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
14. 加入适量水，摇匀后放置静置。
15. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
结果与讨论：经过多次提取，我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。
实验过程中，通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用，能够有效地分离出卵磷脂。
乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂，而氯化钠则用于调节溶液的渗透压，帮助分离。
氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂，能够与卵磷脂形成复合物，从而实现分离。
卵磷脂作为一种重要的生物大分子，具有多种生理功能。
首先，卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一，能够维持细胞膜的完整性和稳定性。
其次，卵磷脂还参与细胞信号传导，调节细胞功能。
此外，卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能，常被用作食品添加剂和药物载体。
在实际应用中，卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。
例如，可以根据不同来源的卵磷脂进行提取，以获得特定的卵磷脂种类。
生命科学与技术系
生化技术综合实验报告
设计（论文）题目鸡蛋中卵磷脂的提取与鉴定
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摘要
卵磷脂是甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷脂类物质，
它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的本成份、研究发现卵磷脂具延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力，促进脂肪代谢、防止出现脂肪肝、降低血清胆固醇等方面的作用。
被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。
在西方国家卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
卵磷脂在动植物体内分布广泛．其中以蛋黄中含量最为丰富。
卵磷脂按照其纯度的高低，一般分为PC50、PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形式。
最高可以提纯到98%，因为其纯度越高，氧化性能越强，故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化处理。
然后保存。
未经过氢化处理的卵磷脂，一般要求在充氮的密封容器中。
纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
利用95％乙醇在蛋黄溶液里进行浸提取，再加入乙醚过滤，加入一定量的丙酮在旋转干燥仪器中把乙醇蒸发出来，取溶胶性的物质，加入丙酮冲洗除杂，冲洗多次取得粗品，让后再加入无水乙醇溶解，加入金属沉淀剂进行精提取，取出少量精品，在碱性条件下溶解，分别用钼酸铵，斐林试剂，滤纸，氢氧化钠，对卵磷脂进行定性检测
关键词：蛋黄卵磷脂；提取；纯化；鉴定。
卵磷脂的提取与鉴定
卵磷脂(lecithin) 是一种含磷的类脂类生理活性物质, 同时又是一种天然表面活性剂 [1～2], 化学名称为磷脂酰胆碱，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份，空间结构的卵磷脂分子是由一个极性的“头部”(甘油和胆碱磷酸脂部分) 和两条非极性的“尾巴”(两个依附于甘油主框架上的脂肪酸) 组成, 它是典型的两性电解质 [3]主要集中在大脑、神经系统、免疫系统及心、肝、肾、生殖腺等重要器官内) ,是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源 [4] 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
目前, 我国已经有10余家企业生产大豆卵磷脂, 而且均是小规模的生
产装置, 还未形成工业化生产规模, 技术水平也落后于世界先进水平[5], 生产蛋黄卵磷脂的厂家则更少。
国内的卵磷脂产量远远不能满足市场需要, 因此大部分卵磷脂特别是高纯度卵磷脂仍然依靠进口。
动物性原料中蛋黄
含卵磷脂最多, 达干物质总重的8%～10%。
一．实验目的意义：
1.1掌握卵磷脂的提取方法及其鉴定方法，对卵磷脂进行定性
检测，了解卵磷脂的性质，
1.2掌握离心干燥技术，熟练应用提纯技术
1.3 掌握抽滤等的基本操作
二．实验原理
1.1卵磷脂在脑、神经组织、肝、肾上腺和红细胞中含量较多。
卵磷脂易溶于乙醇、乙醚等脂溶剂，可利用此溶剂提取。
由于卵磷脂不溶于丙酮，可以用丙酮多次冲洗除去一部分杂质，金属离子复合沉淀法进行精提纯，新提取的卵磷脂为白色蜡状物，新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三．实验材料和方法
1试验材料与试剂
新鲜鸡蛋、无水乙醇、95％乙醇、乙醚、丙酮、甲醇.会属沉淀剂(ZnCI2)、丙酮、蒸馏水、溴的四氯化碳、氢氧化钠、红色石蕊试纸、钼酸铵、硫酸氢钾
2试验仪器
三角瓶、烧杯、试管、真空冷冻干燥箱、磁力搅拌器、玻璃棒、
电子天平、冷冻干燥器、冰箱、离心机、水浴锅试管夹、量筒、滤布、漏斗。
3试验方法
（1）蛋黄卯磷脂的粗提、
首先将鸡蛋打破，称量鸡蛋300克除去蛋白，，将蛋黄放人洁净的带塞的三角瓶中．在称量蛋黄
加入95％乙醇(用量12m]，g)浸取，于磁力搅拌器搅拌60min后，静置15min．然后加
人乙醚(用量为乙醇用量的1／3)，搅拌15min后静置15min，过滤三次，将
滤液收集放旋转蒸发器中低温、减压浓缩
．
加入一定量的丙酮除杂．卵磷脂即沉淀出来．过滤，用丙酮冲洗几次，至冲洗液无色．即得蛋黄卯磷脂粗晶存放于冰箱里保存。
[6]
图一，过滤除杂
图二，卵磷脂的粗提取
(2) 蛋黄卵磷脂的纯化
金属离子复合沉淀法
把卵磷脂粗品溶于无水乙醇中．加入金属沉淀剂40％的zncl2水
溶液．待生成沉淀后，分离出沉淀物．而后加入丙酮洗涤，然后放于真空中冷冻干燥仪中干燥．最终得到精制的卵磷脂．[7]
更改试剂，由于实验室里没有zncl2，所以用znso4代替，由于丙酮不能除去znso4，所以在过滤后采用氯仿把卵磷脂溶解沉淀的方法，离心除去znso4，然后在真空冷冻干燥仪中干燥得到纯品。
图三，离心提纯分离
（3）、卵磷脂的鉴定
（3.1）三甲胺的检验：
取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 10% 氢氧化钠溶液，放沸水浴试管中加热10min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
（3.2）、脂肪酸的检测：
取棉花上固体少许，滴加20%NaOH一滴，另加5mL蒸馏水，观察结果。
（3.3）、磷酸的检验：
取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。
（3.4）、甘油的检验：
取干净试管一支，取1％CuSO4,两滴20％NaOH,无沉淀，即加1mL水解液，振摇。
四．实验结果（现象）
1.4.1卵磷脂粗提结果：
500mL烧杯重166.96g,三百克鸡蛋去壳后于烧杯中重244.12g，鸡蛋黄重量77.16g。
实验结束后以小烧杯盛装，小烧杯重23.94g，加粗品卵磷脂后重29.11g，得粗品卵磷脂共5.17g。
占总中量的6.7％。
1.4.2 卵磷脂精提结果：
烧杯总重71.25g，取出卵磷脂后，净重69.15g，净取得卵磷脂2.1g。
占粗提取比例40.62％，占鸡蛋黄总重比例2.72％。
1.4.3检测结果：
a、三甲胺的检验结果：管口红色石蕊试纸变蓝，于管口围其气味有浓重的鱼腥味
b、脂肪酸的检测结果：脂肪酸碱性水解，成细小颗粒。
c、磷酸的检验结果：加钼氨酸后溶液后显黄色，在水浴锅水浴加热后溶液显蓝色。
d、甘油的检验结果：生成砖红色沉淀。
五．分析讨论
1.1实验注意事项
实验过程中乙醇、氯仿、丙酮和乙醚用量一定要控制好，在使用这些有毒的试剂一定要做好安全准备，防止实验过程中中毒的发生，在做综合实验的所有过程中必须把每一步所用的试剂清晰的列出来，
1.2实验过程中总结
如何改进提取分离的方法让所提取的最终产物的量最多，在实验过程避免试剂的浪费，和所提取的物质的浪费，在工业生产过程中怎么样能大规模的进行生产加工，通过综合实验提高对生产应用的发展有什么促进作用
六．总结（心得体会）
生物学是一门以实验为基础的自然科学，现代生物科学的发展尤其依赖科学实验。
在生物教学中，实验、学习和观察等实践环节对我们掌握生物学知识、科学方法、培养我们的动手能力和形成科学素质都起到了至关重要的作用。
正是因此，从我们开始接触生物这门学科开始，就不断有生物实验课程，锻炼我们各式各样的能力。
但是，也的确是上过各式各样的生物实验课，我才更加深刻的感受到这次做的现代生物技术综合实验对我的影响有多大。
以前做实验，大部分都是照本宣科，很少动脑筋去思考实验的前因后果，对台上老师的讲解也都是一知半解的混着。
但是，这次实验着实让我很费了一番脑子，有深入的去了解每一个原理，实验操作的机理，仪器的使用方法，帮助我纠正和熟练许多操作，同时让我认识到自己以前的迷糊与不负责任，也让我体会到全身心的投入到一件事中，是如此快乐和满足，还得到了好多在课堂上永远无法获得的知识。
还有在我们准备材料及实验步骤过程中遇到很多问题，没有彻底的准备好，在实验过程中有很多的麻烦，比如，试剂的集体浓度没有说明，具体用到的时候才反应过来。
总之我们最好考虑清楚行动时会需要用些什么，做些什么，将准备工作做好，为后续行动铺垫，按其规律列好清单，会使得实验或者任何别的事情做得更加顺利，有条理，排除做过多无用功的可能性，提高了效率的同时还降低错误失误的出现概率，成功率也会增高。
参考文献
1韩轶, 周扬, 等1卵磷脂的提纯、鉴定及应用1氨基酸和生物资源, 2001, 23
(1-2) : 28～31
2 李永安，韩小红卵黄磷脂的提纯［j］应用化工，2003，32 （3）
3 田冰, 刘亚军, 等1高效快速提取蛋黄卵磷脂的新方法1食品科技, 2000,
(6) : 30～32
4 陈南羽, 封禄田1卵磷脂的应用与开发1化学工业与工程技术, 1999, 20 (5) :
21～23
5 李永安，李学超临界 CO2萃取高纯度蛋黄磷脂［J］山西化工，2002 ，22 （7）
生化技术综合实验总结。
