鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。

2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。

3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。

4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。

二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。

本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。

2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。

四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。

（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。

（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。

2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。

（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。

3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。

（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。

（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。

（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。

五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。

2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。

3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质；2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法；3.通过提取和鉴定，初步了解卵磷脂的含量。

二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类，具有良好的亲水性和亲油性能。

卵磷脂是细胞膜的组成成分之一，并参与了许多生命过程的调节和控制。

由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基，因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上，形成磷双层结构和微乳液，从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。

2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄，用盐水洗净表面的蛋白质，然后压成泥，称取25g，加入160 ml乙醇和70 ml氯仿，振荡提取24h，滤去蛋黄泥，得到提取液。

用氮气吹干提取液，再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上，加热显色，可以看到卵磷脂的蓝色斑点。

通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点，可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。

三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器：薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。

药品：鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。

三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通；2.对于采用氮气吹干的提取液，需要注意气压和吹干时间，以免造成温度过高或时间过长的现象；3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制，避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常；4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间，尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定；5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。

四、实验结果分析通过本实验，我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量，并通过对标准试剂和实验结果的对比，也可以得到质量较好的卵磷脂含量。

通过初步检测，我们可以确定卵磷脂含量的多少，并初步判断蛋黄的质量。

实验申请实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。

辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。

实验目的：1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。

2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。

3. 巩固抽滤等基本操作。

4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。

实验原理：卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。

可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。

吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。

在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。

在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。

参考文献： 刘宝全，所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。

2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。

3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。

4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。

用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。

5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。

6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。

实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的：熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。

实验原理：卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子，其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。

卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能，在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。

卵磷脂的提取方法：材料：鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。

1.取足够多的鸡蛋黄，用纯净水洗净后晾干备用。

2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出，剥去蛋壳并取出蛋黄，用刀将其压成泥状。

3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中，加入适量的乙醇，不断搅拌，使其混合均匀。

4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后，将其倒入滤布中，将滤液与滤涤液分离开来。

5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷，用250ml分液漏斗进行振荡后，取出下层酒精分离液。

6.将酒精中的卵磷脂析出，将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解，即可得到卵磷脂。

卵磷脂的鉴定：1.磷钼酸法：将标本加入一定量的磷钼酸试剂，加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解，此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。

其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应，生成黄色的磷钼酸沉淀。

2.碱水解法：将标本与氢氧化钠混合，使卵磷脂水解产生酰基胆碱。

然后加入硫酸和琼脂，沉淀下来的物质即为卵磷脂。

3.利用质谱法进行鉴定：该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征，通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定，进行卵磷脂的鉴定。

实验步骤：1.取少量卵磷脂样品溶于水中。

2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁，然后加入磷钼酸试剂。

3.待磷钼酸在样品中完全溶解后，使用分光光度计测定溶液中吸收光谱，从而得出样品中卵磷脂的质量。

实验结论：通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法，我们可以成功地得到卵磷脂，并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。

这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。

实训卵磷脂的提取及其组成鉴定一、实验目的1、加深了解磷脂类物质的结构和性质2、学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法2、掌握卵磷脂的组成鉴定的原理和方法二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多（10%左右）。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。

卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。

通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

卵磷脂分离提取的流程如下：三、仪器和试剂仪器研钵、布氏漏斗、蒸发皿、水浴锅（沸水）、玻璃漏斗、玻棒、小烧杯、试管、纱布、酒精灯。

试剂1、熟鸡蛋黄2、红色石蕊试纸3、95%乙醇4、20%氢氧化钠溶液5、钼酸铵试剂：将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中，加入5mL浓氨水，另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后使用。

6、丙酮7、氯仿8、10%溴的四氯化碳溶液9、硝酸10、1%硫酸铜溶液11、10%醋酸铅溶液四、操作步骤（一）卵磷脂的提取1、取熟鸡蛋蛋黄一只，于研钵中研细，先加入10ml 95％乙醇研磨，再加入20ml 95％乙醇充分研磨，减压过滤(应盖满漏斗)，滤干后，如浑浊可再过滤一次，将澄清滤液移入蒸发皿内。

2、将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干，得到黄色油状物。

3、冷却后，加入5ml氯仿，搅拌使油状物完全溶解。

4、在搅拌下慢慢加入15ml丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其尽量析出，将氯仿丙酮溶液倒掉，取沉淀。

（二）卵磷脂的组成鉴定1、水解及三甲胺的检验取一支干燥大试管，加入提取的卵磷脂，并加入5ml 20％氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热10分钟，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。

卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的：了解卵磷脂的提取方法，并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。

实验原理：卵磷脂是一种磷脂类物质，具有重要的生物学功能。

卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。

具体步骤如下：1. 取鸡蛋黄1个，加入乙醇5ml，充分混匀。

2. 加入醋酸10ml，再次充分混匀。

3. 将混合液过滤，得到固体物质。

4. 将固体物质溶解在氯仿中，得到卵磷脂样品。

通过卵磷脂的紫外吸收光谱，可以鉴定卵磷脂的纯度。

卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区，主要吸收波长为206nm和223nm。

卵磷脂的纯度越高，吸收峰越尖锐，吸收强度越大。

实验仪器和试剂：乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。

实验步骤：1. 取鸡蛋黄1个，放置室温下1小时。

2. 用清水清洗后风干。

3. 取鸡蛋黄5g，磨碎成细末。

4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml，充分混匀。

5. 加入醋酸10ml，再次充分混匀。

6. 将混合液倒入漏斗中，过滤掉固体物质。

7. 将固体物质溶解在氯仿中，摇匀，得到卵磷脂样品。

8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。

实验结果：卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区，主要吸收波长为206nm和223nm。

经过检测，本次实验制备的卵磷脂纯度较高，吸收峰尖锐，吸收强度较大。

实验结论：本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法，并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。

实验结果表明，利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂，并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。

实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测
实验原料：鲜鸡蛋、纯化卵磷脂
实验试剂：
实验仪器：旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵
辅助器材：毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml量筒、50ml量筒、烧杯，圆底烧瓶等
操作步骤： 操作说明及结果纪录：
取10.0g 鸡蛋黄
蛋黄用30ml 丙酮（
pH8）搅拌1h
过滤
后，滤渣用丙酮洗2-3次 用30ml 乙醇-石油醚（3:1）混合试剂搅拌浸 提1h 抽滤 旋转蒸发（40℃） 收集产品，进行检测 TLC 检测 制板 称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用 45mL 1- 1mol ·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。

点样
用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。

展开
将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。

显色
将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现。

卵磷脂的提取、鉴定和应用实验指导书一、实验目的通过实验，进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解，掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。

二、实验原理卵磷脂是甘油磷脂中的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成：其中，R1为硬脂酸或软脂酸；R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。

卵磷脂广泛分布于动植物中，在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多；蛋黄中含量最丰富，高达8~10%，因而得名。

卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等，因而可以利用这些溶剂进行提取。

本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。

通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离心进行分离，下层为卵磷脂。

新提取的卵磷脂为白色蜡状物，遇空气即氧化变成黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。

卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺，三甲胺有特异的鱼腥臭味，可以此鉴别之。

卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂，抗氧化剂和营养添加剂。

三、实验材料、试剂和仪器鸡蛋；花生油；乙醚；10%NaOH；磁力搅拌器；离心机等。

四、实验内容1、卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄（通常含水50%，脂类32%，蛋白质16%，灰分2%），于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚，放入磁力搅拌器，室温下搅拌提取15分钟，然后静置30分钟，上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤，往残渣中再加入15mL乙醚，搅拌提取5分钟。

第二次提取液过滤后，与第一次提取液合并，于60o C热水浴蒸去乙醚，将残留物倒入烧杯中，约可得5g粗提取物。

粗提取物进行离心（4000转/分）10分钟，下层为卵磷脂，约得2.5~2.8g。

卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。

2、卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g，分为两份于试管内加入10% 氢氧化钠溶液2mL，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼腥味，以确定是否为卵磷脂。

3、乳化作用在两支试管中各加入3~5mL水，一支加卵磷脂少许，溶解后滴加5滴花生油；另一支也滴入5滴花生油，加塞极力振摇试管，使花生油分散。