蛋黄中卵磷脂的提取讲解

蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。

2.更好的理解和利用相似相容原理。

3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。

4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。

[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。

氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。

[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。

薄层色谱法又称薄板色谱法。

薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。

薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。

[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。

抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。

滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。

分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。

干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。

用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。

在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。

2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。

展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。

蛋黄中卵磷脂的提取条件研究肖雪梅王明辉(南昌理工学院，江西南昌330044)摘要:在传统有机溶剂提取蛋黄卵磷脂的基础上，更为深人地研究了乙醇和丙酮这 两种有机溶剂相互作用的结果。

同时研究了酶法提取时，蛋白酶浓度、乙醇浓度、提取时 间、提取温度四个方面，设定单因素实验，以探讨不同提取条件纯化卵磷脂的效果,为实际 生产提供理论依据。

关键词:卵磷脂提取条件纯化卵磷脂（lecithin)属于一种混合物，是存在于动植 物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质。

其 构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三 酸酯以及磷脂。

卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列 的“第三营养素”。

通常卵磷脂就是指磷脂酰胆碱（Phosphatidyl cho-lineS，PC)，为蛋黄中的主要磷脂。

卵磷脂可调节血脂、预防、解除心脑血管等疾病，是肝脏的保护神，促进脂 肪代谢，防治脂肪肝。

磷脂广泛应用于食品、医药、化 妆品等行业[1]。

1材料与仪器市售新鲜鸡蛋煮熟后取蛋黄、纯化卵磷脂标准品；无水乙醇、乙醚、丙酮、甲醇、氯仿等试剂均为分析纯；蛋白酶（上海生物制品有限公司）；超级恒温水浴锅(HWS-12,上海一恒实验仪器公司）、真空干燥箱(DZF- 6050,上海精宏实验设备有限公司）、电动搅拌 器(DW-X，上海卫凯仪器设备有限公司）、抽滤瓶(WI71701，北京科技有限公司）、旋转蒸发器（RE - 201D，上海卫凯科学仪器公司）。

2有机溶剂提取法2.1实验方案1:乙醇提取法称取煮熟的鸡蛋黄于锥形瓶中研碎成粉末状，称 取l〇g蛋黄和不同体积分数的乙醇（100%、95%、90%、85%)各30mL，一起搅拌30min后至蛋黄粉末与提取 液完全互溶，离心操作lOmin，取上层清液，留沉淀加人 乙醇浸提、离心同上，合并2次上滤液，使用旋转蒸发 器蒸发乙醇后浓缩，将浓缩物粗卵磷脂在真空中进行 冷冻干燥，得淡黄固状的卵磷脂。

称重，其产量结果按 公式(2.1)计算：提取率=(提取后卵磷脂重量/蛋黄重量）x100%(2.1)2.2实验方案2:先乙醇后丙酮提取法15mL不同体积分数（100%、95%、90%、85% )的乙醇置于锥形瓶中与5g蛋黄粉搅拌混匀，浸提步骤同上，往减压蒸馏的物品中慢慢加人10mL丙酮，多次浸 洗，至丙酮洗液无色，干燥，得白色稍黄的卵磷脂。

1.设计背景1.1蛋黄卵磷脂的设计背景介绍蛋黄卵磷脂作为一种天然磷脂，具有重要的生理功能和广泛的应用价值。

在我国，随着食品、医药、化妆品等行业的快速发展，对蛋黄卵磷脂的需求日益增加。

目前国内蛋黄卵磷脂的提取技术相对落后[1]，提取效率低、成本高，且产品质量不稳定，严重制约了相关产业的发展。

因此，针对蛋黄卵磷脂提取方案的设计具有重要的现实意义。

蛋黄卵磷脂主要存在于蛋黄中，其含量约为8%-10%。

蛋黄卵磷脂具有独特的分子结构，使其在乳化、分散、稳定等方面具有优异的性能，因此在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用[2]。

在食品工业中，蛋黄卵磷脂可作为乳化剂、稳定剂、润滑剂等，提高产品的质量和口感；在医药领域，蛋黄卵磷脂具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等生理活性，可用于制备药物载体和保健品；在化妆品行业，蛋黄卵磷脂具有良好的保湿、修复和保护作用，可用于护肤品的研发。

近年来，尽管我国在蛋黄卵磷脂提取技术方面取得了一定的进展，但与发达国家相比，仍存在较大差距。

传统提取方法如有机溶剂提取、超声波辅助提取等存在提取效率低、成本高、环境污染等问题[3]。

研究一种高效、环保、低成本的蛋黄卵磷脂提取方案，对于提高我国蛋黄卵磷脂产品的市场竞争力、促进相关产业可持续发展具有重要意义。

1.2卵磷脂主要化学成分和药理作用1.2.1主要化学成分磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine, PC）：这是卵磷脂中最主要的成分，占卵磷脂总量的40%-50%。

磷脂酰胆碱由甘油、两个脂肪酸链、磷酸和一个胆碱分子组成，其分子结构决定了其在细胞膜中的重要作用。

磷脂酰乙醇胺（Phosphatidylethanolamine, PE）：这是卵磷脂中的另一主要成分，含量通常在20%-30%之间。

磷脂酰乙醇胺的结构与磷脂酰胆碱类似，但其所连接的亲水性头部基团是乙醇胺。

磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol, PI）：磷脂酰肌醇在卵磷脂中的含量相对较少，大约占5%-10%。

蛋黄中提取卵磷脂技术人和动物的肾、肝、小肠和其他器官内均有卵磷脂酶存在，卵磷脂首先水解而生成甘油、脂肪酸、磷酸及胆碱，其中胆碱能在肝脏中对脂肪代谢起作用。

最重要的是它能参与合成乙酰胆碱而成为神经系统活动的重要物质。

在药用方面，可作强身滋补剂，又能治疗婴儿湿疹，可配制成注射剂及乳剂应用，又可作生物试剂，用于细菌培养，其中尤以培养固氮菌及磷菌效果很好。

1卵磷脂的特性卵磷脂主要存在于蛋黄中，含量为10%左右。

卵磷脂溶于乙醚、乙醇、甲醇、三氯甲烷等脂肪溶剂中，但不能溶解于丙酮，也不溶解于水，它的亲水性很强，能在水中膨胀而生成乳状液和胶体溶液，卵磷脂也能与酸、碱和其他盐类如氯化镉等相结合。

卵磷脂一般为淡黄色，但由于卵磷脂分子中含有不饱和脂肪酸，所以很容易氧化而逐渐由淡黄色变为棕褐色。

卵磷脂在空气中易被氧化，同时它能与蛋白质及其他物质生成化合物，所以卵磷脂一般很难得到结晶状态，而是无晶性物质。

2卵磷脂的提取2.1原料及其处理鸡蛋或变质发臭的次劣蛋及全蛋粉、蛋黄粉、冰全蛋和冰蛋黄，均可用于提炼卵磷脂。

除已成为干燥状态的全蛋粉和蛋黄粉外，其他原料还要经过一定的处理。

将鸡蛋或变质发臭的次劣蛋放在存器内，送入-10℃冷库内，使蛋的内容物凝固，然后取出，打蛋壳，将蛋黄分离出来，集中在铝质存器或搪瓷盘中。

如果黄白不能分离的变质蛋或打开壳后取出的蛋液，黄白不能分离的，若不及时提炼，存放在搪瓷盘中，也应送入-10℃冷库里贮存备用。

变质发臭的次劣冰蛋，要分装在搪瓷盘或铝质盘里贮存备用。

将上述原料放入烘箱或烘房内，在55℃下烘6h左右便成干燥状态，研磨成粉末，贮存备用。

2.2提炼卵磷脂2.2.1浸提2.2.1.1浸液的配制处理过的原料（即干燥蛋粉）1份，96%乙醇1份，98.5%甲醇1份。

2.2.1.2浸泡将上面配制好的醇浸液放入大釉缸中，徐徐加入干燥蛋粉，边加边搅，蛋粉加完后，再继续不断地搅拌4～5h。

醇浸液的液面务必高出原料面约30cm，搅拌4～5h后放在室温下使其继续浸泡24～48h，甚至更长时间。

卵磷脂的提取、鉴定和应用卵磷脂的提取、鉴定和应用一、引言卵磷脂是甘油磷脂的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱组成。

卵磷脂广泛存在于动植物中，在植物种子和动物的脑、神经组织、肝脏、肾上腺以及红细胞中含量最多；其中蛋黄中含量最丰富，高达8—10%，因而得名。

卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等因而可以利用这些溶剂进行提取。

本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。

通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离心进行分离，下层为卵磷脂。

新提取的卵磷脂为白色蜡准状物，遇空气可氧化成为黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。

卵磷脂的胆碱基在碱性条件下可以分解为三甲胺，三甲胺有特殊的鱼腥味，可以此鉴别之。

卵磷脂在食品工业中广泛应用作乳化剂，抗氧化剂，营养添加剂。

二、实验材料和仪器鸡蛋、花生油。

乙醚、10%NaOH。

磁搅拌器，离心机。

三、实验步骤1.卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄，于150毫升三角锥瓶中加入40毫升乙醚，放入磁搅拌器，室温下搅拌提取15分钟。

然后静置30分钟，上层液用带棉花塞的漏斗过滤，往残渣中再加入15毫升乙醚，搅拌提取5分钟。

第二次提取液通过过滤后，与第一次提取液合并，于60度热水浴中蒸去乙醚，将残留物质倒入烧杯中，放如真空干燥器中减压干燥30分钟以初尽乙醚，约可得5g粗提取物。

粗提取物进行离心，十分钟后，下层为卵磷脂，约得2.5-2.8g。

卵磷脂可以通过冷冻干燥得到无水的产物/2.卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g，于试管内加入10%NaOH溶液2毫升，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼醒味，以确定是否卵磷脂。

3.乳化作用两支试管中各加入3-5毫升水，一只加卵磷脂少许，溶解后滴加5滴花生油。

另一只也滴入5滴花生油，加塞极力振荡试管，使花生油分散。

观察比较两只试管内的乳化状态。

卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言：卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物，存在于生物体细胞膜中，具有重要的生理功能。

本实验旨在通过提取卵磷脂，了解其提取方法和应用。

实验材料与方法：材料：鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器：搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤：1. 取适量鸡蛋，将蛋黄与蛋清分离。

2. 将蛋黄放入搅拌器中，加入适量乙醇，搅拌均匀。

3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心，离心后分为两层，上层为乙醇层，下层为沉淀层。

4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

5. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。

6. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。

7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

8. 加入适量水，摇匀后放置静置。

9. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。

10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

11. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。

12. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。

13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

14. 加入适量水，摇匀后放置静置。

15. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。

结果与讨论：经过多次提取，我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。

实验过程中，通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用，能够有效地分离出卵磷脂。

乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂，而氯化钠则用于调节溶液的渗透压，帮助分离。

氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂，能够与卵磷脂形成复合物，从而实现分离。

卵磷脂作为一种重要的生物大分子，具有多种生理功能。

首先，卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一，能够维持细胞膜的完整性和稳定性。

其次，卵磷脂还参与细胞信号传导，调节细胞功能。

此外，卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能，常被用作食品添加剂和药物载体。

在实际应用中，卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。

例如，可以根据不同来源的卵磷脂进行提取，以获得特定的卵磷脂种类。