果蝇的培养
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果蝇饲养方案果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常见的实验室模式生物,被广泛用于生命科学领域的研究。
果蝇繁殖迅速且易于饲养,是理想的实验材料之一。
下面将介绍一种简单易行的果蝇饲养方案。
材料准备:1. 玻璃培养皿/果蝇培养皿2. 石蜡纸3. 酵母粉4. 糖粉5. 酒精6. 黄油7. 成熟的果蝇(交叉一型)饲养步骤:1. 准备果蝇培养皿。
将培养皿内壁用酒精擦拭,然后贴上一层石蜡纸,这样可以防止果蝇沿着容器壁面爬行。
2. 第一层培养基的制备。
将约1克酵母粉和2克糖粉混合均匀,并撒在培养皿底部。
3. 取一只成熟的果蝇,用显微镊子将其转移到培养皿中。
注意,果蝇的数量控制在10-20只,过多会导致竞争加剧,而过少则会减缓繁殖速度。
4. 喂养果蝇。
将一小块黄油放在培养皿的边缘,为果蝇提供额外的营养。
5. 培养基的更换。
每2-3天更换一次培养基,避免过度污染。
6. 温度和湿度控制。
果蝇的适宜温度为22-25摄氏度,湿度可以通过添加少量的水分维持在50-70%之间。
定期检查保持适宜的环境条件。
观察果蝇:1. 繁殖观察。
果蝇的生命周期大约为10-14天,从卵到成虫分为卵期、幼虫期、蛹期和成虫期。
注意观察果蝇的繁殖情况、数量、发育和行为等。
2. 实验使用。
果蝇可以用于各种实验,如突变体筛选、发育研究和行为学实验等。
根据不同实验目的,可以进行交配、分离、标记和观察等操作。
饲养注意事项:1. 卫生与消毒。
饲养过程中要保持清洁,及时清理培养皿和更换培养基,避免细菌和霉菌的污染。
2. 食物比例。
酵母粉和糖粉的比例可以根据需要进行微调。
不同目的的实验可能需要不同比例的食物来控制果蝇的发育和繁殖。
3. 温湿度控制。
确保饲养环境的温湿度适宜,以保证果蝇的生长和繁殖。
4. 剔除死亡果蝇。
果蝇死亡后容易滋生细菌,应及时剔除,以免影响到整个培养群体。
总结:通过以上的果蝇饲养方案,我们可以方便地获取到大量的果蝇个体,并利用其进行各种科学研究和实验。
培育果蝇实验报告范文实验报告:果蝇培育实验一、实验目的:1. 学习果蝇的培育方法;2. 观察果蝇的整个生命周期;3. 学习果蝇的繁殖过程。
二、实验材料和器材:1. 成年果蝇;2. 饲养瓶;3. 培养基(香蕉和酵母粉);4. 透明塑料袋;5. 实验台;6. 放大镜。
三、实验步骤:1. 将一只雄性果蝇和一只雌性果蝇放入饲养瓶中;2. 准备适量的培养基,将其放置在饲养瓶的底部;3. 用透明塑料袋将装有果蝇和培养基的饲养瓶密封起来,防止果蝇逃跑;4. 将饲养瓶放置在恒温恒湿箱中,保持温度在25-28摄氏度之间;5. 观察果蝇的生长和繁殖情况,并记录下来。
四、实验结果:在实验过程中,我们观察到了果蝇的整个生命周期。
首先,我们看到了果蝇在培养基上产卵。
随着时间的推移,卵逐渐孵化出幼虫。
幼虫通过吃培养基中的食物成长,经过几次蜕皮后会变成蛹。
在蛹期过后,蛹会孵化成为成蝇,新生的成蝇会爬出饲养瓶,开始寻找食物和繁殖的伴侣。
我们还注意到,果蝇的寿命较短,大约只有2-3周。
五、实验结论:通过本次实验,我们深入了解了果蝇的培育过程和生命周期。
果蝇的繁殖速度很快,一对果蝇可以在短时间内生出很多后代。
果蝇的培育方法相对简单,只需要提供适当的食物和温度条件即可。
果蝇也可以作为实验对象用于其他实验研究。
六、实验总结:通过这次实验,我们不仅学到了果蝇的培育方法,还深入了解了果蝇的生命周期和繁殖过程。
果蝇的繁殖速度很快,这使得果蝇成为实验室中常用的实验动物。
同时,通过观察果蝇的发育过程,我们也对果蝇的遗传和发育等方面有了更深入的了解。
这次实验对我们的科学素养和实验技能的培养起到了积极的促进作用。
实验一:果蝇的培养及果蝇性状形态的观察一、实验目的①、掌握果蝇的饲养方法②、了解果蝇的生活习性③、学习辨认果蝇的雌雄个体④、学会观察果蝇的某些特殊性状二、实验原理果蝇(fruit fly,vinegar fly )广泛存在于全球温带及热带气候区,在果园、菜市场等地皆可见其踪迹,目前已发现1000多种。
果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。
黑腹果蝇(Drosophila ):双翅目,果蝇属。
特点:生活史短,每12天左右即可完成一个世代;饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500个左右;突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。
在25摄氏度的环境下,果蝇从出生到成熟共需要十天。
果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。
最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。
卵:白色,椭圆形,长约 0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。
幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长4-5 mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。
蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。
成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。
三、实验材料及器材培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、搪瓷杯、玻璃棒、培养瓶、海绵塞、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板,电子天平、镊子、解剖镜、显微镜。
乙醚、酒精、4ml丙酸、5.6克酵母粉、6克琼脂、68克玉米粉、52克白糖、600ml水(5人一组)。
三种不同性状的果蝇:三隐型,野生型,黑体型(各数只)。
四、实验方法及步骤培养瓶的清洗及灭菌①、每个人取12个培养瓶,并配上12个松紧度合适的塞子。
将培养瓶清洗干净,沥干水。
(若找不到合适的塞子,则自己用纱布和棉花制作)。
果蝇的培养及果蝇性状形态的观察果蝇(Drosophila melanogaster)是一种被广泛用于实验室研究的模式生物。
其短寿命、高繁殖力和相对简单的基因组构成使其成为遗传学、发育生物学和行为学等领域的重要研究对象。
以下是对果蝇的培养和果蝇性状形态观察的详细描述。
果蝇的培养需要一定的设备和培养基。
首先,需要获得果蝇的培养容器,可以使用普通的玻璃烧杯或塑料培养瓶。
在容器底部放置一层培养基,可以使用富含蛋白质的培养基,如玉米粉、酵母粉和糖的混合物。
培养基上放置一块切成小块的果蝇饲料,作为果蝇的食物。
在培养容器的顶部,打开一个小孔作为果蝇的进出口,并用棉花塞住该孔,以阻止果蝇的逃逸。
在进出口上方放置一块纸巾或纱布,作为果蝇产卵的场所。
将培养容器放置在适宜的环境中,如温度为25℃左右,相对湿度保持在50%-70%之间,并提供适当的光照,如12小时光照和12小时黑暗的循环。
为了培养构建一个繁殖种群,可以在培养容器中加入一对已经交配的果蝇。
交配后的果蝇会在纸巾或纱布上产卵。
果蝇的卵孵化为幼虫,幼虫经历几个蛹期后变成成虫。
成虫会爬到纱布上孵化,然后开始飞翔。
果蝇的性状形态观察是研究果蝇生物学性状和行为的重要方法。
例如,研究影响果蝇行为的基因突变,可以通过观察果蝇的活动水平、飞行模式和觅食行为等来评估其行为差异。
研究果蝇的发育生物学过程,可以通过观察果蝇的不同发育阶段和器官形态的变化,来了解基因在果蝇发育中的作用。
观察果蝇的基因表达可以使用组织染色方法,如免疫组织化学染色和原位杂交。
这些方法可以用来确定果蝇不同器官或组织中一些特定基因的表达模式。
此外,研究果蝇遗传学还可以通过交叉和后代分析来观察果蝇性状的遗传规律。
通过控制果蝇的交配组合,可以观察一些特定基因的遗传行为,如隐性或显性遗传模式、性连锁和交汇等。
总之,果蝇的培养和果蝇性状形态的观察为研究者提供了一个理想的系统,用于研究基因的功能、发育生物学和行为学等方面。
培养果蝇的注意事项
培养果蝇是一种常见的实验动物,并且在教学与研究中有着广泛的应用。
下面是培养果蝇时需要注意的几个方面:
1. 培养条件:果蝇通常需要在恒温、恒湿的环境下进行培养。
适宜的温度范围是18-25摄氏度,相对湿度约为60-70%。
2. 培养容器:果蝇通常使用培养皿或管式装置进行培养。
培养皿应该是透明的,以便观察果蝇的生长和繁殖情况。
3. 食物:果蝇的常规食物是粉状培养基,可以通过添加酵母来增加蛋白质含量。
食物应该保持湿润,但避免过多的水分。
4. 控制菌群:果蝇容易受到细菌和霉菌的污染,因此需要定期更换培养基,保持容器的清洁,并加入抗生素来抑制细菌的生长。
5. 避免交叉杂交:果蝇的繁殖速度很快,为了保持纯种的果蝇群体,需要定期将不同品系的果蝇进行分开。
6. 观察和记录:培养果蝇时,需要经常观察果蝇的生长和繁殖情况,并及时记录相关数据,以便后续的实验或研究使用。
总的来说,培养果蝇需要注意控制温度、湿度和食物的条件,避免细菌污染,定期分离果蝇品系,以及及时观察和记录果蝇的生长繁殖情况。
一、实验目的1. 了解果蝇的生物学特性及其生长发育过程。
2. 掌握果蝇的遗传规律和基因突变方法。
3. 培养实验操作技能,提高观察和分析能力。
二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是一种广泛应用于遗传学研究的模式生物,具有以下特点:1. 生命周期短,易于观察和实验操作。
2. 遗传背景明确,便于基因定位和功能研究。
3. 生长发育过程中形态变化明显,便于观察和记录。
本实验通过观察果蝇的生长发育过程,分析其遗传规律,并利用基因突变方法研究基因功能。
三、实验材料与仪器1. 材料:果蝇、培养基、酵母提取物、果糖、琼脂、显微镜等。
2. 仪器:恒温培养箱、解剖镜、酒精灯、镊子、剪刀、吸管、滴管等。
四、实验步骤1. 果蝇培养(1)将果蝇置于恒温培养箱中,保持温度在25-28℃。
(2)将酵母提取物、果糖和琼脂按比例混合,制成培养基。
(3)将培养基倒入培养皿中,待凝固后放入果蝇。
2. 观察果蝇生长发育过程(1)每天观察果蝇的生长发育情况,记录其形态特征、生长速度等。
(2)通过显微镜观察果蝇的生殖器官、染色体等结构。
3. 基因突变实验(1)利用化学物质或物理方法诱导果蝇基因突变。
(2)观察突变果蝇的表型变化,分析突变基因的功能。
4. 数据分析(1)将实验数据整理成表格,进行统计分析。
(2)分析果蝇生长发育规律、遗传规律和基因突变结果。
五、实验结果与分析1. 果蝇生长发育过程(1)果蝇从卵到成虫的生长周期约为10-12天。
(2)卵孵化后,幼虫期约3-4天,幼虫发育过程中形态逐渐变化。
(3)幼虫化蛹,蛹期约4-5天,蛹形态发生显著变化。
(4)蛹羽化为成虫,成虫交配、产卵,继续繁殖后代。
2. 果蝇遗传规律(1)果蝇具有明显的遗传规律,遵循孟德尔遗传定律。
(2)通过观察果蝇的表型,可以推断其基因型。
(3)基因突变实验表明,某些基因突变会导致果蝇表型发生变化。
3. 基因突变结果(1)通过化学物质或物理方法诱导果蝇基因突变,部分突变果蝇表现出表型变化。
1.把50或100ml的三角瓶(数目根据自己试验确定)洗干净,干燥。
(能够高温灭菌也好,似乎没那必要)2.配培养基。
培养基比例:蔗糖13g,琼脂1.5g,玉米粉17g,水(单蒸水就可以)180 ml。
乙酸2 ml(可少一点),酵母粉至少1.4g培养基配制步骤:(1)称取玉米粉17g装入烧杯1(要大一些的烧杯,如500 ml),量取水90 ml。
先加少量水于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加入其余的水,搅拌均匀。
然后一边在电炉上加热,一边搅拌。
直到完全煮熟。
冒泡泡以后,火小点,免得溢出来。
冒泡泡以后还是要再煮好一会。
要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。
煮好了放在一边。
(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装入烧杯2,量取水90 ml。
加入大半水于烧杯中,一边加热一边搅拌。
完全煮溶。
(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒入烧杯1中,用步骤2剩余的水冲一冲烧杯,也倒入烧杯1中。
(如果烧杯1小,就装不到了。
)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。
(4) 待烧杯1稍凉。
这个时候把干燥好的三角瓶摆放旁边。
将至少1.4g酵母粉加入烧杯1搅匀,将培养基倒入三角瓶中(要用卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。
(按照敬老师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。
因为加入酵母粉后还搅拌,就更凉了。
倒入三角瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。
)(5)把倒好的培养基放到超净工作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的水分挥发。
有水残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。
(我自己的做法是配培养基的时候少加10ml的水,等待一天,没有完全干,但也可以用)由于果蝇是吃里面生长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母生长了就可以接种果蝇了。
(6)我自己收集果蝇的方法:放一点水果在矿泉水瓶子中,至少要四五天才会有很多果蝇。
这几天的时间就赶快去准备其他的东西。
培养基弄好了,就把瓶子收起来,带实验室去接种。
果蝇的培养条件是20-25度,25度以上的温度不好的,不记得原因了。
20度以下生长慢。
一、实验目的通过对链孢霉杂交所产生的子囊孢子的观察,了解分离和交换现象,并进行统计,计算交换值。
二、材料及生活史1.材料:粗糙链孢霉(Neurospore crassa )属于真菌类,子囊菌纲,球壳目,脉孢菌属,又称为红色面包霉。
2.生活史:粗糙面包霉的营养体是由单倍性(n=7)的多核菌丝组成的。
生殖方式有无性生殖和有性生殖两种。
无性生殖是菌丝片段或分生孢子经有丝分裂直接发育成菌丝体。
有性生殖是不同接合型的菌丝产生有性孢子的过程,主要有两种方式:(1)未受精的营养体菌丝上产生灰白色的原子囊果,可以接受另一不同接合型的分生孢子,通过杂交形成合子。
(2)不同接合型的菌丝靠在一起,通过核融合产生异核体。
两种有性生殖方式形成的二倍性合子都可以经减数分裂形成四个子细胞,每个子细胞又经一次有丝分裂形成8个子细胞,进一步发育形成8个子囊孢子,并以一定顺序排列在子囊中,许多子囊又被包在黑色的子囊果中。
若两个亲代菌株有某一遗传性状的差异,那么经杂交所形成的子囊必定有四个子囊孢子属于一种类型,其它四个子囊孢子属于另一类型。
成熟的子囊孢子在适当条件下可发育成菌丝,形成新的一代。
它们的子囊孢子的性状的分离比例是严格的1:1,而且有一定的顺序。
不同接合型的子囊孢子具有黑色、白色两种类型,在子囊中8个子囊孢子常呈4黑4白的排列方式,因此可在显微镜下直接观察基因的分离现象。
当基因发生了互换时,8个子囊孢子又会排列成2黑2白2黑2白或排列成2黑4白2黑或2白4黑2白,因此在显微镜下也可以观察基因的连锁互换现象。
三、材料的优点1.野生型的子囊孢子成熟较早,在一定时期呈现黑色,赖氨酸缺陷型的子囊孢子成熟较晚,在一定时期呈现灰白色。
以上两种接合型的粗糙链孢霉杂交在适当时期可以观察到六种子囊类型。
2.子囊孢子排列的顺序固定,可直接观察到基因的交换。
3.可以计算基因与着丝粒的距离。
4.如果出现A6、a2、A5、a3则表示基因转变。
五、实验步骤1.菌种活化:为使菌种生活得更好,先要进行菌种的活化。
从冰箱中取出保存的野生型和Lys缺陷型的原种,在无菌条件下分别接种在两支完全培养基试管的斜面上,28℃温箱培养5-6天左右。
直至在试管中长成许多菌丝,并且在菌丝上部有许多分生孢子时表明菌种活化成功。
2.杂交:取野生型和Lys缺陷型的少许菌丝接种到同一试管的玉米琼脂培养基上,共接两支试管;或者将两种菌丝分别接种到培养皿中“桥”的两侧。
在25℃恒温箱中培养2-3周,直至在菌丝上有子囊果出现,子囊果为棕黑色,用镊子或解剖针触摸时有坚实感。
3.观察:(1)在长有子囊果的试管中加少量无菌水,摇动片刻,把水倒在空三角瓶中,加热煮沸,以防止分生孢子飞扬。
(2)取一载玻片,滴1-2滴5%次氯酸钠,然后用接种针挑出子囊果放在载玻片上(若附在子囊果上的分生孢子过多,可先在5%次氯酸钠中洗涤,再移到载玻片上),有另一载玻片盖上,用手指压片,将子囊果压破,置显微镜下(10×15倍)检查,即可见30-40个子橐果。
观察子囊中子囊孢子的排列情况。
用载玻片盖上压片而不用盖玻片,是因为子囊果很硬,若用盖玻片压,盖玻片就会破碎。
如发现30-40个子囊果象一串香蕉一样,可加一滴水,用解剖针把子囊拨开。
此过程无需无菌操作,但要注意不能使分生孢子散出。
观察过的载玻片、用过的镊子和解剖针等物都需放入5%石碳酸中浸泡后取出洗净,以防止污染实验室。
附:实验用具及培养基配方实验用具:显微镜、接种针、载玻片、试管、三角瓶培养基:1.基本培养基(又称土豆培养基,供接种野生型菌株)50ml用量A 将土豆洗净削皮,挖去发芽部分,切成黄豆粒大小的碎块,每管放5-6粒。
B 称琼脂1.2克,蔗糖1克,加水到50ml,煮沸溶解。
C 将B分装到A中,每管放3-4ml。
D 做好试管塞,用牛皮纸包好,贴好标签。
8磅条件下高压灭菌30分钟。
2.补充培养基(供接种Lys缺陷型菌株)在基本培养基中加入少许Lys ,其它同上。
3.玉米琼脂培养基(供杂交实验用)将玉米粒在水中浸泡24小时后晾干,每试管放2-3粒,配2%的琼脂放入蒸馏水中煮沸,每试管倒3-4ml,其它方法同基本培养基。
常用染色液的配制1.醋酸洋红染液取45%的醋酸溶液100ml,放入锥形瓶,加入洋红0.5-1g,煮沸约5分钟或加回流煮沸12小时,冷却后进行过滤,再加入1%-2%铁明矾水溶液数滴,直到此液变为暗红色不发生沉淀为止。
也可悬入一小铁钉,过一分钟取出,使染色剂中略具铁质、增进染色性能。
渺茫液放入棕色瓶中盖紧贮存,并避免阳光直射。
2.苯酚品红(石炭酸)品红染液母液A:取3g碱性品红,溶解在100ml的70%洒精(可长期保存)。
母液B:取母液A10ml,加入90ml的5%苯酚水溶液。
苯酚品红染液:取45ml的母液B,加入6ml冰醋酸和6ml 37%甲醛。
改良苯酚品红染液:取2-10ml 苯酚品红染液,加入98-90ml 的45%冰醋酸和1.8g山梨醇(注意山梨醇多了,会呈现结晶,影响制片效果)。
改良苯酚品红染液配成后可立即使用,但着色能力差,一般在配制两周后染色能力显著增加。
3.苏木精染液将苏木精0.5g放入95%洒精10ml 中使其溶解,再加入蒸馏水90ml。
此液须经1-2个月成熟。
瓶口盖以纱布数层或塞一棉塞以保持通气。
临用时过滤。
此液可以直接应用或用蒸馏水稀释一倍后使用,可反复使用数次(每次均需过滤)。
若不能预先配成,在配时可加碘酸钠使其氧化成熟。
苏木精0.5g需加碘酸钠0.1g,溶解后即可使用。
4.Schiff 试剂取碱性品红1g,放入200ml煮沸的蒸馏水中,用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
冷至50℃时过虑,加入1mol/L盐酸20ml于溶液内,冷却到20-25℃,加入偏亚硫酸钠(钾)Na2S2O3(或无水亚硫酸氢钠NaHSO3)1-2g,封闭瓶口,置于暗处12-24小时,液体应成淡黄色或无色,若颜色过深可加适量活性炭,过虑后贮于暗处。
5. Giemsa 染液取0.5gGiemsa粉末,加33ml 纯甘油,在研钵中研细,放在56℃恒温水浴中保温90分钟,再加入33 ml甲醇,充分搅拌,用滤纸过虑,于棕色细口瓶中保存,作为原液。
用时以磷酸缓冲液稀释。
人群中PTC味盲基因频率的分析(3学时)一、实验目的1. 通过对PTC味盲基因频率的分析,了解群体基因频率测算的一般方法。
2. 加深理解遗传平衡定律,了解改变群体平衡的因素。
二、实验原理苯硫脲(PTC)是一种人工合成化合物,不同人对其溶液的苦味有不同的尝味能力。
这种尝味能力是由一对等位基因(Tt)所决定的遗传性状,其中T对t为不完全显性。
正常尝味者的基因型为TT,能尝出1/750,000mol/L~1/6,000,000 mol/L的PTC溶液的苦味;具有Tt基因型的人尝味能力较低,只能尝出1/48,000mol/L ~1/380,000 mol/L的PTC溶液的苦味;而基因型为tt的人只能尝出1/24,000 mol/L以上浓度PTC溶液的苦味。
个别人甚至对PTC的结晶也尝不出苦味来,这类个体在遗传上称为PTC味盲。
三、实验器具、药品PTC溶液及其不同浓度稀释液:称取PTC结晶1.3g,加蒸馏水1000ml,置室温下1-2天即可完全溶解。
其间应不断摇晃以加快溶解过程。
由此配制的溶液浓度为1/750 mol/L,称为原液,也就是1号液。
2-14号溶液均由上一号液按倍比稀释而制成,具体配制方法见表1。
表1PTC溶液的配制方法、浓度和基因型编号配制方法浓度mol/L 基因型1号 1.3gPTC+蒸馏水1000ml 1/750 tt2号1号液100ml+蒸馏水100ml 1/1500 tt3号2号液100ml+蒸馏水100ml 1/3000 tt4号3号液100ml+蒸馏水100ml 1/6000 tt5号4号液100ml+蒸馏水100ml 1/12000 tt6号5号液100ml+蒸馏水100ml 1/24000 tt7号6号液100ml+蒸馏水100ml 1/48000 Tt8号7号液100ml+蒸馏水100ml 1/96000 Tt9号8号液100ml+蒸馏水100ml 1/192000 Tt10号9号液100ml+蒸馏水100ml 1/380000 Tt11号10号液100ml+蒸馏水100ml 1/750000 TT12号11号液100ml+蒸馏水100ml 1/1500000 TT13号12号液100ml+蒸馏水100ml 1/3000000 TT14号13号液100ml+蒸馏水100ml 1/6000000 TT15号蒸馏水四、实验步骤1. 让受试者座于椅子上,昂头张口。