果蝇培养基配制
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果蝇饲养方案果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常见的实验室模式生物,被广泛用于生命科学领域的研究。
果蝇繁殖迅速且易于饲养,是理想的实验材料之一。
下面将介绍一种简单易行的果蝇饲养方案。
材料准备:1. 玻璃培养皿/果蝇培养皿2. 石蜡纸3. 酵母粉4. 糖粉5. 酒精6. 黄油7. 成熟的果蝇(交叉一型)饲养步骤:1. 准备果蝇培养皿。
将培养皿内壁用酒精擦拭,然后贴上一层石蜡纸,这样可以防止果蝇沿着容器壁面爬行。
2. 第一层培养基的制备。
将约1克酵母粉和2克糖粉混合均匀,并撒在培养皿底部。
3. 取一只成熟的果蝇,用显微镊子将其转移到培养皿中。
注意,果蝇的数量控制在10-20只,过多会导致竞争加剧,而过少则会减缓繁殖速度。
4. 喂养果蝇。
将一小块黄油放在培养皿的边缘,为果蝇提供额外的营养。
5. 培养基的更换。
每2-3天更换一次培养基,避免过度污染。
6. 温度和湿度控制。
果蝇的适宜温度为22-25摄氏度,湿度可以通过添加少量的水分维持在50-70%之间。
定期检查保持适宜的环境条件。
观察果蝇:1. 繁殖观察。
果蝇的生命周期大约为10-14天,从卵到成虫分为卵期、幼虫期、蛹期和成虫期。
注意观察果蝇的繁殖情况、数量、发育和行为等。
2. 实验使用。
果蝇可以用于各种实验,如突变体筛选、发育研究和行为学实验等。
根据不同实验目的,可以进行交配、分离、标记和观察等操作。
饲养注意事项:1. 卫生与消毒。
饲养过程中要保持清洁,及时清理培养皿和更换培养基,避免细菌和霉菌的污染。
2. 食物比例。
酵母粉和糖粉的比例可以根据需要进行微调。
不同目的的实验可能需要不同比例的食物来控制果蝇的发育和繁殖。
3. 温湿度控制。
确保饲养环境的温湿度适宜,以保证果蝇的生长和繁殖。
4. 剔除死亡果蝇。
果蝇死亡后容易滋生细菌,应及时剔除,以免影响到整个培养群体。
总结:通过以上的果蝇饲养方案,我们可以方便地获取到大量的果蝇个体,并利用其进行各种科学研究和实验。
1.把50或100ml的三角瓶(数目根据自己试验确定)洗干净,干燥。
(能够高温灭菌也好,似乎没那必要)2.配培养基。
培养基比例:蔗糖13g,琼脂1.5g,玉米粉17g,水(单蒸水就可以)180 ml。
乙酸2 ml(可少一点),酵母粉至少1.4g培养基配制步骤:(1)称取玉米粉17g装入烧杯1(要大一些的烧杯,如500 ml),量取水90 ml。
先加少量水于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加入其余的水,搅拌均匀。
然后一边在电炉上加热,一边搅拌。
直到完全煮熟。
冒泡泡以后,火小点,免得溢出来。
冒泡泡以后还是要再煮好一会。
要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。
煮好了放在一边。
(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装入烧杯2,量取水90 ml。
加入大半水于烧杯中,一边加热一边搅拌。
完全煮溶。
(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒入烧杯1中,用步骤2剩余的水冲一冲烧杯,也倒入烧杯1中。
(如果烧杯1小,就装不到了。
)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。
(4) 待烧杯1稍凉。
这个时候把干燥好的三角瓶摆放旁边。
将至少1.4g酵母粉加入烧杯1搅匀,将培养基倒入三角瓶中(要用卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。
(按照敬老师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。
因为加入酵母粉后还搅拌,就更凉了。
倒入三角瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。
)(5)把倒好的培养基放到超净工作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的水分挥发。
有水残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。
(我自己的做法是配培养基的时候少加10ml的水,等待一天,没有完全干,但也可以用)由于果蝇是吃里面生长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母生长了就可以接种果蝇了。
(6)我自己收集果蝇的方法:放一点水果在矿泉水瓶子中,至少要四五天才会有很多果蝇。
这几天的时间就赶快去准备其他的东西。
实验一:果蝇的培养及果蝇性状形态的观察一、实验目的①、掌握果蝇的饲养方法②、了解果蝇的生活习性③、学习辨认果蝇的雌雄个体④、学会观察果蝇的某些特殊性状二、实验原理果蝇(fruit fly,vinegar fly )广泛存在于全球温带及热带气候区,在果园、菜市场等地皆可见其踪迹,目前已发现1000多种。
果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。
黑腹果蝇(Drosophila ):双翅目,果蝇属。
特点:生活史短,每12天左右即可完成一个世代;饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500个左右;突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。
在25摄氏度的环境下,果蝇从出生到成熟共需要十天。
果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。
最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。
卵:白色,椭圆形,长约 0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。
幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长4-5 mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。
蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。
成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。
三、实验材料及器材培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、搪瓷杯、玻璃棒、培养瓶、海绵塞、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板,电子天平、镊子、解剖镜、显微镜。
乙醚、酒精、4ml丙酸、5.6克酵母粉、6克琼脂、68克玉米粉、52克白糖、600ml水(5人一组)。
三种不同性状的果蝇:三隐型,野生型,黑体型(各数只)。
四、实验方法及步骤培养瓶的清洗及灭菌①、每个人取12个培养瓶,并配上12个松紧度合适的塞子。
将培养瓶清洗干净,沥干水。
(若找不到合适的塞子,则自己用纱布和棉花制作)。
果蝇培养基制备与保存注意事项沈妍(果蝇资源与技术平台)果蝇是经典的模式生物,具有生长迅速、繁殖力强、遗传物质简单、突变体多等优点,广泛应用于遗传,发育,生理和行为学等研究领域。
果蝇培养基是一切以果蝇为模式动物开展试验的基础,在果蝇品系保存以及各项果蝇相关试验中,适宜的培养基能达到事半功倍的效果。
本文总结果蝇培养基配制与保存的注意事项。
一培养基制备前注意事项1 原料果蝇培养基的配方主要包含水、玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖、酵母、琼脂、丙酸和苯甲酸钠等。
玉米粉是培养基制备的主要原料。
目前,市场上玉米粉种类繁多,我们需选择糯性玉米粉。
糯性玉米粉制成的培养基蓬松粘稠,更适合幼虫生长。
而非糯性(粳性)玉米粉颗粒粗,制成的培养基较为稀薄,冷却凝结后会出现分层现象。
琼脂粉影响培养基硬度。
每一批次效价不同。
每次新订购的琼脂粉应先做预试验,根据食物硬度确定琼脂粉的用量。
2 培养基制备容器的选择根据培养基制备体积的不同,我们需选择不同的加热工具。
配制少量培养基,1L以下,选用微波炉。
配制1L到5L培养基,选用电饭锅。
配制10L以上的培养基,选用专业的带有搅拌功能的加热容器。
二培养基配制过程中的注意事项1 加热前的准备在加热前,应先将玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖等原材料用冷水搅拌均匀,勿用热水搅拌,热水会使玉米粉、大豆粉结块,溶解不充分。
2 酵母粉发酵温度的控制干酵母粉需要和温水混匀后发酵。
在发酵过程中应注意水温的控制,水温以25℃到30℃为宜,高温会使酵母失活。
发酵时间以十五分钟左右为佳。
3 水位的控制在配制过程中,培养基的体积最多只能加到容器体积的三分之二,必须留出三分之一沸腾的空间。
在培养基接近沸腾时要时刻关注其状态,以免培养基因沸腾过度而漫出容器外,而沸腾不充分会导致培养基分层。
一般100L的锅,我们最多只能配制60L培养基。
4 搅拌培养基不管使用哪种加热工具,在加热过程中,都需要不停搅拌培养基,防止粘锅和结块。
果蝇实验常用培养基配制
1、香蕉培养基将熟透的香蕉捣碎,制成香蕉浆(约50g),把1.6g琼脂加到48ml的水中煮沸,溶解后拌入香蕉浆,继续煮沸3—5分钟。
待稍降温后加入1ml丙酸以防止发霉,充分调匀后分装于培养瓶中。
使用前在培养瓶中加入适量干酵母粉或1—2滴酵母菌液。
若作为临时培养果蝇的培养基,可以直接剥去已熟透且已腐烂的橡胶的皮或苹果的皮,把剥去皮的香蕉或苹果放入培养瓶中即可。
2、玉米粉培养基将1.5g琼脂捣碎放入38ml的水中煮溶后,加入10g白糖,制成琼脂糖混合物,再将9g玉米粉和37ml的水加热搅拌成糊状倾入正在煮沸的琼脂糖混合物中,煮沸3—5分钟。
待稍降温后加入1ml丙酸,或加入溶于95%乙醇的苯甲酸少许以防腐,搅拌调匀后,将配好的培养基倒入经灭菌的培养瓶中(1—1.5cm厚),倾倒时应注意勿将培养基粘到瓶口或瓶壁上。
用灭菌的纱布棉塞塞好瓶口,冷却待用。
暂时不用的培养基应放入4℃冰箱中或清洁阴凉处保存。
使用前在培养瓶中加入适量干酵母粉或1—2滴酵母菌液。
3、米粉培养基将琼脂2g加入到75ml水中,加热煮沸溶解后再加入白糖10g,米粉7g(或麸皮),不断搅拌煮沸数分钟。
稍降温后加入丙酸1ml,调匀后分装到培养瓶中。
使用前加少许酵母液或适量干酵母粉。
以上三种果蝇培养基的配方(100ml)见下表:。
新型果蝇培养基①①:新型体现在红糖代替了蔗糖、全麦粉(麦麸)代替了玉米粉、鲜酵母代替了酵母粉;其优于常用的玉米粉果蝇培养基在于饲养中能充分发挥果蝇的遗传潜力,从而提高应用其进行遗传学研究和实验的准确性。
②:通过实验对比了四种胶(海藻酸钠、明胶、卡拉胶、琼脂)的凝固效果、及对果蝇培养的影响,总结出琼脂的效果最好。
③:实验表明红糖和蔗糖在培养基的效应中不存在质差,完全可用红糖代替蔗糖以降低成本。
同时看出配方中的酵母粉/红糖的配比范围也较宽,在 1/9 一l/7间均有好的效果;而适当提高此比值。
即增加鲜酵母(或在培养基中定期追加酵母液)有增效趋势,这与太多数学者提供的资料分析结果相符。
④:实验证明小麦加工料培养基饲喂果蝇的效果要极显著的优于玉米粉培养基,使用后不但可使果蝇的发育期缩短,繁殖力提高,体重增加,而且麦麸的松软度适宜果蝇幼虫钻洞取食,保湿效果较好;这是由于用前者配制的培养基比较琉松,透气性好,因而能提供充足的氧气使更有利于酵母菌的生长繁殖,从而为果蝇生长繁殖提供较丰富的食源,特别为幼虫发育提供了鞍理想的场所。
⑤:丙酸的作用是防腐、杀菌。
⑥:以往观察发现:配制的干酵母培养基(水溶解煮沸后的)也能满足果蝇的生长需要,但是特别容易发霉。
因此活酵母的培养效果较好。
参考文献:[1]陈宗礼, 延志莲. 果蝇培养基的选择研究[ J] . 生物学杂志, 1994( 3) : 31- 33.[2]LIU Min;GE Kang;WANG Liu.Investigation of new type of melanogasterculture medium[J].China agricultural University ,2011( 3) : 1-6. * :配制过程实验书上有。
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