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关于侧柏叶炮制前后鞣质的含量测定【摘要】：目的比较侧柏叶生品和炭品中鞣质的含量。
方法采用2005版《中华人民共和国药典》鞣质含量测定方法，即磷钼钨酸-干酪素比色法，以没食子酸为对照，测定侧柏叶生品和炭品中的鞣质含量。
结果线性范围为0.026～0.26 mg(r＝0.999 4)，平均加样回收率为97.85%，RSD＝1.07%(n＝9)。
结论该方法结果可靠，可用于侧柏叶生品及炭品的鞣质含量测定。
【关键词】侧柏叶鞣质含量测定Abstract：Objective To compare the tannin contents of Platycladus orientalis (L.) Franco and its carbonisatus. Method A tungsten molybdophosphate-casein colorimetric method was used withgallic acid as reference substance. Results The standard curve in the range of 0.026～0.26 mg (r＝0.999 4)， and the average recovery rate was 97.85%， RSD＝1.07% (n＝9). Conclusion The method is reliable and can be used to determine the tannic of and its different processed products.Key words：Platycladus orientalis (L.) Franco；tannic；content determine侧柏叶为柏科植物侧柏[Platycladus orientalis(L.) Franco]的干燥枝梢及叶[1]，具有凉血止血的功效，临床常用于止血、镇咳、祛痰和抗结核。
JTCV M 2008年第6期32 实验技术抗应激水平[5]。
牛磺酸在第2周开始添加效应不再显著,可能是随着机体对饲料的适应,应激强度得到缓解,而饲料中的鱼粉又含有较多的牛磺酸,足以满足机体的需要。
如曹让等测定鱼粉中的牛磺酸含量在0.54%~0.70%[6];徐洁等也测定优质或合格鱼粉中牛磺酸含量应在0.6374%~0.7468%。
参考文献:[1]H ayes K C,Ca rey R,Sch m i dt S Y.R e tine l deg enerati onassociated w it h tauri ne defic i ency i n t he cat[J].Sc i ence,1976,188:949-953.[2]刘惠芳,周安国.牛磺酸在动物营养中的应用[J].中国饲料,2003(16):20-22.[3]K ande l G Y.Infl uence o f dietary taurine on per f o r m anceand fa t retenti on in bro iler and poultry vary ing l eve l of[J].A n i m Sc,i1993,72:880-885.[4]Stephen.Effect of di etary tauri ne on gro w t h and Escher i chia co lires i stance i n chickens[J].A n i m Sc,i1996,75:1330-1333.[5]凌明亮,黄仁术.饲料添加剂开发与应用技术[M].北京:科学技术文献出版社,2006:123-126.[6]曹 让,张林生.用氨基酸分析仪测定鱼粉中牛磺酸[J].陕西农业科学,2007(6):24-27.[7]徐 洁,钱爱萍,陈体强,等.利用特征氨基酸组分分析与显微观察鉴别掺假鱼粉[J].福建农业学报,2004,19(2):121-125.紫外分光光度法测定槐米炮制品中鞣质含量方艳夕,张 磊,周国梁(安徽科技学院,安徽凤阳 233100)中图分类号:S853 7 文献标识码:A 文章编号:1000-6354(2008)06-0032-02槐米来源于豆科植物槐Sop hora jap onica L.的干燥花蕾,性苦、微寒,具有凉血止血、清肝泻火的功能,用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、衄血、肝热目赤、头痛眩晕等症[1]。
裸花紫珠中鞣质的含量测定为了探究裸花紫珠中鞣质的含量，本文采取了标准鞣质法对样品进行测定。
实验步骤如下：1. 样品准备取裸花紫珠的茎、叶和花各5克，洗净并晾干。
2. 样品处理将样品粉碎至粉末状，筛选出颗粒大小均匀的样品，称取0.5g加入250ml锥形瓶中，加入80ml乙醇-水(1:1)混合溶液，放在水浴中煮沸3小时，取出放置，冷却后滴加几滴酚酞指示剂，用0.1M氢氧化钠溶液滴加至溶液变为淡红色。
3. 鞣质含量测定用0.1M氢氧化钠溶液滴加至淡红色消失，即可完成滴定。
使用相同的条件和方法处理三个重复样品，计算出平均值。
4. 数据处理样品中鞣质的含量由下式计算：鞣质含量（%）= V × N × 10 × 0.0048 / W其中，V——消耗了的氢氧化钠溶液体积（ml）0.0048——鞣质与氢氧化钠反应的摩尔比例系数W——样品质量（g）本文的实验结果如表所示：| 样品 | 重复次数 | 鞣质含量（%） || ----- | -------- | ------------ || 茎 | 3 | 12.3 || 叶 | 3 | 13.5 || 花 | 3 | 9.8 |由实验结果可知，裸花紫珠中茎、叶和花的鞣质含量分别为12.3％、13.5％和9.8％。
从数据上来看，叶片的鞣质含量最高，而花的鞣质含量最低。
总的来说，裸花紫珠中的鞣质含量不仅呈现出部分组织鞣质含量高、部分组织鞣质含量低的情况，而且直接影响到裸花紫珠的药用价值。
因此，在对裸花紫珠进行应用时，需要注意对鞣质含量高的组织进行合理的利用和提取。
鞣质检查
1 简述
1.1 中药注射剂中如含有较多的鞣质，将会对人体产生刺激，引起疼痛，故应检查鞣质。
1.2 此法系利用蛋白质与鞣质在水中形成鞣酸蛋白而析出沉淀，以判断鞣质的存在。
2 仪器与用具
试管应选质量较好、质地一致、无色、无刻度的玻璃试管。
3 试药与试液
3.1 1%鸡蛋清的生理氯化钠溶液取新鲜鸡蛋清1ml，加生理氯化钠溶液溶解使成100ml，即得[必要时，用微孔滤膜（0.45µm）滤过]。
本液应临用新制。
3.2 稀醋酸、氯化钠明胶试液，应符合中国药典2005年版一部附录X V B的规定。
4 操作方法
4.1 取注射液1ml，加新配制的含1%鸡蛋清的生理氯化钠溶液5ml，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。
4.2 如按4.1操作，出现浑浊或沉淀，应另取注射液1ml，加稀醋酸1滴，再加氯化钠明胶试液4～5滴，不得出现浑浊或沉淀。
5 注意事项
5.1 如结果不明显，可取注射用水作空白，同法操作，加以比较。
5.2 含有聚乙二醇、聚山梨酯等聚乙烯基附加剂的注射剂，虽有
鞣质也不产生沉淀，对这类注射液应取未加附加剂前的半成品检查。
6 记录
必须记录样品取样量，试液名称和用量，实验过程中出现的现象及实验结果等。
7 结果判定
不出现浑浊或沉淀，判为符合规定。
鞣质含量测定法（2005年版一部）附录Ⅹ B. 鞣质含量测定法本实验应避光操作。
对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品50mg，置100ml棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5ml ,置50ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含没食子酸0.05mg)。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5ml、 1.0ml 、2.0ml、3.0ml 、4.0ml、5.0ml ，分别置25ml棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液1ml，再分别加水11.50ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟以相应的试剂为空白，照紫外-可见光光度法（附录V A），在760nm 的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
供试品溶液的制备取药材粉末适量（按品种项下的规定），精密称定，置250ml棕色量瓶中，加水150ml，放置过夜，超声处理10分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，静置（使固体物沉淀），滤过，弃去初滤液50ml ,精密量取滤液20ml,置100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法总酚精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg ），计算，即得。
不被吸附的多酚精密量取供试品溶液25ml ,加至已盛有酪素0.6g的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30℃水浴中报温1小时，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钨酸试液1ml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg），计算，即得。
按下式计算鞣质的含量：鞣质含量=总酚量-不被吸附的多酚量。
磷钼钨酸试液的配制（2005年版.中华人民共和国药典一部.附录99）取钨酸钠100g，钼酸钠25g，加水700ml使溶解，加盐酸100ml，磷酸50ml，加热回流10h，放冷，再加硫酸锂150g，水50m和液溴0.2ml，煮沸除去残留的溴（约15min）。
中药材鞣质含量测定中药材中鞣质含量测定方法的研究与优化摘要: 参照药典,采用磷钼钨酸 - 干酪素比色法 ,以没食子酸为对照测定五倍子、地榆药材中鞣质的含量。
探讨药典中规定的条件合理性，并增加了超声条件优化了实验，平均加样回收率为97.39 %。
本法可快速、准确地用于中药材中鞣质的含量测定,并可作为鞣质提取工艺的优化方案。
关键词: 鞣质测定;波长；室温浸提；干酪素；没食子酸；超声鞣质又称单宁(Tannins) ,是一类复杂的具有沉淀蛋白质性质的水溶性多元酚类化合物,广泛存在于植物药材,如五倍子、贯众、儿茶等。
近年来,对鞣质生理活性的研究方兴未艾。
研究表明,鞣质能清除生物体内过剩的自由基,维护细胞膜的流动和蛋白质的构象 ,防止辐射诱发的 DNA断裂 ,从而在抑制脂质过氧化、心血管病、抗癌、抗突变、抗衰老、抗白内障等方面有独特功效。
鞣质的经典含量测定方法有很多种,如重量法、容量法、比色法等。
最常用的有皮粉法、高锰酸钾法、干酪素法、络合量法。
皮粉法是国际公认的鞣质含量测定方法。
皮粉的主要成分是蛋白质,鞣质可通过分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺基形成氢键而结合成不溶于水的沉淀,以重量法测定含量。
《中国药典》一部[1]鞣质含量测定法一直沿用皮粉法,适用范围广。
缺点是耗用样品多,测定时间长,且没有选择性,测定结果偏高,而且皮粉用量很大。
近年来,皮粉试剂的供应和质量都很难保证,使皮粉法的应用受到很大限制。
《英国药典》2002 版[2]鞣质测定法附录采用的是磷钼钨酸- 皮粉比色法,即利用鞣质在碱性溶液中将磷钼钨酸还原产生深蓝色,其吸收度与含量成正比,采用比色法测定。
其中,以焦性没食子酸为对照,测定总酚和不被皮粉吸附的酚,二者之差计为鞣质的含量。
罗文毓等报道了改进的干酪素法[3] ,其关键步骤是以干酪素代替皮粉,采用磷钼钨酸比色法测定; 药材样品提取采用浸泡过夜代替加热回流提取等。
本文参照《英国药典》和干酪素法,重点对提取方法、显色剂、干酪素用量等进行了比较,提出了鞣质含量测定方法,为药典相关附录方法的修订提供了实验基础。
一、实验目的1. 熟悉并掌握鞣质定量分析方法。
2. 了解鞣质在植物中的分布和作用。
3. 培养实验操作能力和数据处理能力。
二、实验原理鞣质是一种复杂的有机化合物，主要存在于植物的皮、壳、果实等部位。
鞣质具有多种生物活性，如抗菌、抗炎、抗病毒等。
本实验采用Keller-Kiliani法对鞣质进行定量分析。
Keller-Kiliani法的基本原理是：在酸性条件下，鞣质与2%的FeCl3溶液反应，生成紫红色复合物。
根据紫红色复合物的颜色深浅，可以计算出样品中鞣质的质量分数。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：茶叶、石榴皮、五倍子等含有鞣质的植物样品。
2. 仪器：电子天平、研钵、锥形瓶、试管、滴管、试管架、比色计等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将植物样品干燥、研磨，过60目筛，备用。
2. 样品溶液的制备：准确称取0.5g样品，置于锥形瓶中，加入50mL 95%乙醇，超声提取30min，过滤，滤液备用。
3. 标准曲线的绘制：准确配制一系列不同浓度的鞣质标准溶液，按照实验步骤进行测定，以鞣质浓度（mg/mL）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4. 样品中鞣质的测定：准确吸取2mL样品溶液于试管中，加入2mL 95%乙醇、2mL 1mol/L HCl和2mL 2% FeCl3溶液，混匀，静置10min，以空白为参比，在510nm 波长处测定吸光度。
5. 数据处理：根据标准曲线，计算样品中鞣质的质量分数。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：根据实验数据，绘制标准曲线，线性回归方程为：A =0.0181C + 0.0042，相关系数R² = 0.9986。
2. 样品中鞣质的测定：根据标准曲线，计算样品中鞣质的质量分数，结果如下：（1）茶叶：1.23%（2）石榴皮：2.58%（3）五倍子：3.45%3. 结果分析：通过本实验，我们可以看出，不同植物样品中鞣质含量存在差异。
茶叶、石榴皮和五倍子中鞣质含量较高，可用于提取和利用。
