下载文档原格式
酶联免疫吸附（ELISA）法在食品微生物检测中的应用【摘要】食品微生物检测中，酶联免疫吸附（ELISA）法具有一定作用，其以显色为依据实现检测，形成了具有特殊性的分析方法。
本文主要从ELISA的原理及方法出发，分析ELISA检测法在食品细菌、真菌毒素、介导病毒检测方面的应用。
【关键词】食品微生物；检测；ELISA；应用酶联免疫吸附（ELISA）法以免疫酶技术为发展基础，将放射免疫测定法、免疫荧光法之优点结合，围绕抗体和酶复合物相结合的中心，依据显色进行检测，形成具有特殊性的试剂分析方法[1]。
目前化学分析领域中，ELISA已成为前沿课题，其作为新型免疫测定技术，具有检测成本低、反应灵敏、适用范围广、可定量、检测速度快等特点。
本文主要以ELISA的原理方法为切入，探讨食品微生物检测中ELISA的应用。
1 ELISA的原理及方法1.1原理以既不损坏抗原或抗体免疫活性又留存酶的活性为基础，使抗原或抗体与某种固相载体表面相结合，与某种酶相连接，使之成其为酶标抗原或抗体[2]。
测定时，对受检标本进行抗原或抗体的测定，使其与酶标抗原或抗体在步骤各异的情况下产生和固相载体表面抗原或抗体的反应。
通过洗涤，完成固相载体抗原或抗体相关物质的分开，将酶量（固相载体所含）与标本受检量形成比例。
酶反应相关底物加入后，在酶催化作用下，底物形成有色产物，其产物含量直接相关于标本受检量，以显色为根据，即可完成定量或定性的分析。
具有高催化频率的酶可将反应效果放大化，故可完成高敏感度的测定。
1.2方法ELISA测定方法有直接与间接之分，直接法主要在于酶标计抗体和样本（待检测）固相抗原的直接作用，底物加入后，显色；间接法主要在于固相载体带有已知抗原的依附并与样本（待检测）中抗体发生作用，再使酶标记抗抗体加入，与特异抗原抗体复合物中的抗体发生作用，予以酶底物的加入，显色。
ELISA通过改良，形成了多种方法，主要有双抗体夹心法、间接法、竞争法等等。
酶联免疫检测方法在食品安全检测中的应用近几十年来，随着科技的发展，检测技术也发展得很快，出现了许多新的检测技术，酶联免疫检测方法就是其中之一。
酶联免疫检测方法是以免疫学原理为基础的一种检测技术，它检测特征物质的浓度，并用酶来增加检测灵敏度，能快速、准确地检测出检测物质在体内的存在，由此，酶联免疫检测方法受到了业内的广泛关注，并发挥着重要的作用。
目前，酶联免疫检测方法已经广泛应用于食品安全检测中。
首先，酶联免疫检测方法能够检测出一些有害物质，如有毒重金属、污染物、抗生素、药物残留等，这些有害物质在食品中时常会存在，但往往微量存在，不易被检测出，而酶联免疫检测方法由于具备较高的检测灵敏度，能够快速准确地检测出这些有害物质，从而有效确保食品安全。
其次，酶联免疫检测方法能够快速准确检测一系列蛋白质，比如，牛奶中的蛋白质，以及肉类中的内质网、肌动蛋白等。
由于以上蛋白质的浓度差异都很小，在传统检测方法中往往难以检测出，而酶联免疫检测方法由于具有较高的检测灵敏度，能够快速准确地测出其中的差异，从而有效地保障食品安全。
此外，酶联免疫检测方法还具有一些特殊的优势。
首先，操作简便，原料易获取，适于大规模的生产检测。
其次，可以采用实验室中常用的仪器设备，操作简单，测试有效。
此外，它的检测灵敏度高，在极低浓度的检测物质中也可以检测出，使得它在食品检测中具备了更大的优势。
总之，酶联免疫检测方法是一种新兴的检测技术，它具有操作简便、灵敏度高等优点，能够快速准确地检测出一系列有害物质，被广泛应用于食品安全检测中，发挥着重要的作用。
但酶联免疫检测方法也存在一些不足，比如成本高、受抗体特异性影响等，因此，需要进一步改进和优化，以满足更高的检测要求。
未来，酶联免疫检测方法将在食品安全检测中发挥更大的作用。
随着科技的发展，酶联免疫检测方法将会得到更好的改进和优化，其可靠性和灵敏度将会大大提高，参与更多的食品安全检测，为确保食品安全做出积极贡献。
酶联免疫吸附技术在食品安全检测中的应用侯瑾;李迎秋【摘要】Enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA) is a simple method with advantages of low detection cost and large analysis capacity,etc..It is suitable for trace analysis of components in complex matrices and it attracts more and more people.Outline the ELISA technology briefly.The application of this technology in food safety testing is introduced detailedly from aspects of pesticide residues,veterinary drug residues,illegal additives,pathogenic microorganisms,biological toxins as well as the safety of genetically modified food and otheraspects.Furthermore,mention the technical problems and corresponding solutions of ELISA,and prospect the technology in the future.%酶联免疫吸附法(ELISA)具有方法简捷、检测成本低、分析容量大等优点,适合于复杂基质中的微量成分分析,受到越来越多人的青睐.简单概述了ELISA技术,并从农药残留、兽药残留、违禁添加物、病原微生物和生物毒素以及转基因食品安全性等方面,对该技术在食品安全检测中的应用进行详细的介绍,提出了ELISA技术存在的问题和相应的解决方法,并对该技术进行了展望.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2017(042)006【总页数】5页(P165-169)【关键词】酶联免疫吸附;原理;食品安全检测;应用【作者】侯瑾;李迎秋【作者单位】齐鲁工业大学食品科学与工程学院,济南 250353;齐鲁工业大学食品科学与工程学院,济南 250353【正文语种】中文【中图分类】TS207.3酶联免疫吸附法(简称ELISA)是将现代检测手段与免疫技术相结合建立的具有高敏感性和特异性的一种超微量的实验检测技术，它是一种以免疫酶为核心且用特殊试剂分析的免疫检测方法。
酶联免疫吸附技术分析及其在食品安全检测中的应用【摘要】食品安全关系重大，近年来食品安全检测技术迅速发展，其中以酶联免疫吸附法（ELISA）的发展最为迅速。
文章从食品安全现状入手分析食品安全检测的重要性，并对ELISA的原理和分类进行了简述，最后对该法在食品安全检测的各个方面应用情况进行了综述以期为保障食品安全，促进社会健康发展提供参考。
【关键词】酶联免疫吸附法；技术分析；食品安全；检测1.食品安全现状随着人们生活水平的提高，对食品的要求不再局限于味道鲜美，营养合理，而是更多的关注食品安全。
当然，造成这种现象的原因与近几年来全球范围内的各类食品安全事故频发密不可分，诸如“瘦肉精事件”，“苏丹红事件”等向食品中添加违禁物质的报道屡见报端也刺激了人们敏感的神经，使人们对食品安全问题更加重视。
食品安全问题关系到身体健康、社会发展及经济发展，因此寻找一种能够快速准确的检测食品中违禁物质的方法很有必要。
酶联免疫吸附法因其成本较低，操作简单，灵敏度高，所需设备简单等优点越来越多的被用于食品安全检测。
因此，对酶联免疫吸附技术进行分析并对其在食品安全检测方面的应用情况进行总结，对推动食品安全检测技术的普及、保障食品安全，促进社会健康发展有重要意义。
2.酶联免疫吸附法（ELISA）简介2.1原理酶联免疫吸附法（ELISA）是一种免疫学方法，起源于上世纪70年代，近年来快速发展，目前已被成功应用于食品中多种药物，生物毒素，病原微生物以及转基因食品的检测。
它是一种以抗原和抗体之间的特异性反应为基础，借助于酶的高效性实现快速准确测定特定物质的方法。
随着近些年单克隆抗体技术的发展成熟及ELISA试剂盒的商品化，该技术在食品安全方面的应用更加广泛。
它的基本原理就是利用具有免疫活性的抗原或抗体与某种固相载体结合，检测时加入受检样品（含抗体或抗原）和特异性酶标记的抗原或抗体进行反应形成复合物，反应终止时被结合的酶标抗原或抗体的量与样品中待测抗原或抗体的量有一定的比例，之后洗涤除去其他物质，再向其中加入酶所催化反应的底物，底物经酶的催化形成有色产物，通过对该有色产物进行定量或定性分析即可对该物质进行定性或定量，从而达到检测食品中某种物质的目的。
经验交流空酶联免疫吸附技术在饲料及食品安全检测中的应用史艳艳(天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心300402)摘要：酶联免疫吸附技术是一种应用于饲料和食品安全检测的快速检测技术，可对农兽药残留、违禁药物使用、有害微生物、生物毒素和转基因食品安全等进行定量和定性检测，由于酶联免疫吸附技术既可以检测样本中的抗原，也可以检测抗体，因此，选择性高，检测结果的特异性和灵敏度也较高，其在饲料和食品安全检测应用前景广阔。
本文从技术原理、试验类型和技术优缺点对酶联免疫吸附技术进行系统概述，介绍酶联免疫吸附技术在饲料和食品安全检测中的应用，以期更好地普及和推广酶联免疫吸附技术应用。
关键词：ELISA；饲料安全；食品安全；应用酶联免疫吸附技术(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是基于抗原抗体反应的一种新型、快速的免疫测定技术。
由于ELISA检测技术的灵敏度高、特异性强、选择性好、实用性强，且不需要大型仪器设备，对工作人员的专业技能要求不高，被广泛应用于分析化学、生物药学、临床医学和食品安全等领域的检测。
ELISA检测技术不仅可以对饲料和食品中的药物残留、有害微生物和生物毒素等物质进行定性和定量分析，还能应用于转基因食品的安全检查，为饲料及食品安全提供参考依据。
1酶联免疫吸附技术概述1.1技术原理ELISA是基于抗原-抗体的特异性结合反应建立起来的一种快速检测技术，即首先通过固相状态的载体吸附已知的抗原或抗体，待测样本中对应的抗体或抗原与之结合形成特异性的抗原抗体复合物，通过洗涤的方法区分固相载体上的抗原抗体复合物和其他物质，再加入酶标记的抗原或抗体，也会岀现抗原和抗体特异性结合反应结合在固相载体上，加入酶反应的底物后，底物由酶催化为带颜色的产物(颜色变化为定性检测)，通过吸光度值计算待测样本的抗原(或抗体)量。
由于产物的量与标本中受检物质的量直接相关，ELISA还可以进行定量分析。
快、效率高、特异性强等诸多优点，现已被广泛应用于食品行业中的食品药物残留检测、食品微生物检测、食品毒素检测及转基因食品检测。
酶联免疫吸附法在食品农药残留检测中的应用
食品农药残留是指农药使用后残留于食品原材料中，导致食品成品含有微量的农药原体及其相关降解物的总称。
对于食品药物残留的检测方法，我国应用较多的是气相色谱技术及其联用技术、高效液相色谱技术及其联用技术，但是这两种方法检测相关设备价格形态观察来检测食品中具有危害性的微生物，或利用化学反应通过测定食品微生物相关代谢产物来对食品中微生物进行检测。
应用显微镜技术检测食品微生物需要观察微生物菌落，不仅导致检测周期较长，还经常会碰到不同微生物但菌落形态却极其相似，导致无法对食品微生物进行定性。
利用酶联免疫技术检测食品中的微生物，相比传统的检测技术表现出诸多优点，酶联免疫技术检测周期短、
特异性强等，使酶联免疫技术在食品微生物检测领域具有较大的发展空间。
酶联免疫吸附测定法在食品微生物快速检测中的应用摘要对酶联免疫吸附测定法( ELISA) 在食品微生物检测中的应用进行了分类论述，主要包括双抗体夹心法、间接法测抗体和竞争法在食品微生物检测中的应用，对其应用前景作出了展望。
关键字微生物；快速检测；ELISA食品的安全性是食品必需具备的基本要素，然而在食品科技高度发展的今天，在世界各地仍不断发生各种各样的食品安全事故，食品安全问题再度成为人们关注的热点。
近几年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况进行了连续的动态监测，结果表明，微生物源性食物中毒占居首位，高达39.62%[1]。
随着食品工业的发展以及对食品安全的重视，传统分析方法已经远不能满足食品检测的需要，迫切需要灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法。
因此，近年来世界各国的许多机构和学者都致力于快速检测技术和方法的研究，改进和开发了一些快速的检测技术和方法。
快速检测及其自动化则是通过综合引用微生物学、化学、生物化学、生物物理学、免疫学以及血清学试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定和计数。
近年来，常用的微生物快速检测技术主要有6大类：一、载体法：包括快速测试片法、螺旋板系统法和滤膜法；二、代谢学技术：包括电阻抗法、微热量计技术和放射量技术；三、免疫学技术：包括免疫荧光技术( IFT)、酶联免疫吸附技术( EL ISA)和酶联荧光免疫吸附技术(V IDAS)；四、LAMP方法；五、分子生物检测方法：包括分子杂交、PCR和基因芯片；六、分析化学技术：包括高效液相色谱(HPLC) 、气相色谱( GC) 、气相色谱-质谱联用( GC-MS) 、液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS) 等。
其中酶联免疫吸附测定(ELISA)以其简便、快速、灵敏、成本低、检测谱广等特点在食源性致病菌检测方面的应用也越来越受到人们的青睐。
1．酶联免疫吸附测定法的原理和特点酶联免疫吸附测定法(Enzyme- linked Immunosorbent Assay，简称ELISA)是将抗原、抗体的免疫反应和酶的高效催化反应有机结合起来的一种综合性技术。
