第五章预防与控制医院感染 一．??单选题（每题1分） 1.对被特殊感染而无保留价值的物品，最彻底的无菌方法是() A煮沸消毒灭菌法?B高压蒸气灭菌法?C燃烧灭菌法?D熏蒸法 2.乙醇消毒的作用原理是（） A破坏细胞膜的结构B与菌体蛋白的氨基结合使其变性 C使菌体蛋白凝固变性?D干扰细菌酶的活性 3.现有95%的乙醇500ml，预配成70%的，需加入灭菌蒸馏水（） A?159ml?B?169ml?C?179ml??D189ml 4.保管无菌物品哪项是错误的（） A无菌物与非无菌物应分别放置?B无菌包必须注明灭菌日期 C已打开的无菌包未用完，可在48h 5.下列无菌技术操作哪项除外属正确（） A. C.一无菌物品，仅供一病员使用? D. 6.干热灭菌法灭菌条件是() A120～140℃,10～20min?B160℃,10～ 7 C 14．戴无菌手套时评价哪项错误（） A滑石粉末撒落在手套及无菌区??B戴手套时未强行拉扯手套边缘，没有污染 C脱手套时拉扯手指部分????D操作始终在腰或操作台面以上水平进行 15．哪项除外属无菌包的使用评价标准（） A．查看了无菌包名称及灭菌日期??B．一次将包内物品全部取出 C．系带善处理，未吊垂在下??D．关包时系带横向缠绕以示区别 16.下列操作哪项正确（） A.浸泡无菌持物钳的消毒液应浸过无菌钳关节轴? B.关闭容器时，盖子应由前向后覆盖 C.无菌盘铺后应在内4小时内使用?? D.倒无菌溶液时，将未粘有标签的一面握在手中 17..戴无菌手套时哪项不妥（） A.核对手手套包上的手套号码及无菌日期?? B.摊开手套袋，取出滑石粉在其上方擦 C.戴脱时再手套口往下翻转脱下?????D．脱时再手套口往下翻转脱下
第七章微生物的生长及其控制习题 一、名词解释 1．微生物连续培养 2．抗微生物剂 3．抗生素 4．抗代谢物 5．微生物的抗药性 6．灭菌 7．消毒 8．生长曲线 9.深层液体培养： 二、填空题 1．一条典型的生长曲线至少可分为、、和4个生长时期。 2．测定微生物的生长量常用的方法有、、和。而测定微生物数量变化常用的方法有、、和；以生物量为指标来测定微生物生长的方法有、和。 3．获得细菌同步生长的方法主要有（1）和（2），其中（1）中常用的有、和。 4．控制连续培养的方法有和。 5．影响微生物生长的主要因素有、、、和等。 6．对玻璃器皿、金属用具等物品可用或进行灭菌；而对牛奶或其他液态食品一般采用灭菌，其温度为，时间为。 7．通常，细菌最适pH的范围为，酵母菌的最适pH范围为，霉菌的最适pH值范围是。 8．杀灭或抑制微生物的物理因素有、、、、和 等。 9．抗生素的作用机制有、、和。 10．抗代谢药物中的磺胺类是由于与相似，从而竞争性地与二氢叶酸合成酶结合，使其不能合成。 三、选择题 1．以下哪个特征表示二分裂？（） A、产生子细胞大小不规则 B、隔膜形成后染后体才复制 C、子细胞含有基本等量的细胞成分 D、新细胞的细胞壁都是新合成的。 2．代时为0.5h的细菌由103个增加到109个时需要多长时间？（）
A、40h B、20h C、10h D、3h 3．如果将处于对数期的细菌移至相同组分的新鲜培养基中，该批培养物将处于哪个生长期？（） A、死亡期 B、稳定期 C、延迟期 D、对数期 4．细菌细胞进入稳定期是由于：①细胞已为快速生长作好了准备；②代谢产生的毒性物质发生了积累；③能源已耗尽；④细胞已衰老且衰老细胞停止分裂；⑤在重新开始生长前需要合成新的蛋白质（）。 A、1，4 B、2，3 C、2，4 D、1，5 5．对生活的微生物进行计数的最准确的方法是（）。 A、比浊法 B、显微镜直接计数 C、干细胞重量测定 D、平板菌落记数 6．下列哪咱保存方法全降低食物的水活度？（） A、腌肉 B、巴斯德消毒法 C、冷藏 D、酸泡菜 7．连续培养时培养物的生物量是由（）来决定的。 A、培养基中限制性底物的浓度 B、培养罐中限制性底物的体积 C、温度 D、稀释率 8．常用的高压灭菌的温度是（）。 A、121℃ B、200℃ C、63℃ D、100℃ 9．巴斯德消毒法可用于（）的消毒。 A、啤酒 B、葡萄酒 C、牛奶 D、以上所有 10．（）能通过抑制叶酸合成而抑制细菌生长。 A、青霉素 B、磺胺类药物 C、四环素 D、以上所有 11．某细菌悬液经100倍稀释后，在血球计数板上，计得平均每小格含菌数为7.5个，则每毫升原菌悬液的含菌数为( ) A、3.75×107个； B、3.0×109个； C、2.35×107个； D、3.2×109个 四、是非题 1．在群体生长的细菌数量增加一部所需时间为代时。 2．最初细菌数为4个，增殖为128个需经过5代。 3．一般显微镜直接计数法比稀释平板涂布法测定的菌数多。 4．一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶。 5．分批培养时，细菌首先经历一个适应期，所以细胞数目并不增加，或增加很少。 6．特定温度下杀死某一样品中90%微生物或孢子及芽孢所需的时间为热致死时间。 7．巴斯德消毒法不能杀死细菌的芽孢。 8．对热敏感的溶液可采用巴斯德消毒法来灭菌。 9．酸泡菜较鲜肉更易受大肠菌污染而腐败。 10．四环素能抑制细菌细胞壁的合成，青霉素能抑制细菌蛋白质的合成。 五、简答题 1．试述单个细菌细胞的生长与细菌群体生长的区别。
第七章预防与控制医院感染 一、选择题 1．控制医院感染的措施，哪项不妥 A.加强组织管理 B.健全各种制度 C.大量使用抗生素 D.严格消毒灭菌 E. 医院环境布局合理 2．下列哪项不属医院感染 A.入院时处于潜伏期的感染 B. 家属在医院发生的感染 C.工作人员的职业感染 D.患者在住院期间发生的感染 E.患者在门诊发生的感染 3．医院感染最常见的是 A.病毒感染 B.真菌感染 C. 细菌感染 D.支原体感染 E.原虫感染 4．无菌操作过程中持物钳被污染，首先应 A.更换另一把无菌持物钳 B.用煮锅煮沸 C.高压蒸气灭菌 D.消毒液浸泡 E.用无菌生理盐水冲洗继续使用5．物理灭菌法中，灭菌效果最佳的是 A.燃烧灭菌法 B.日光曝晒法 C.煮沸消毒灭菌法 D.高压蒸气灭菌法 E.紫外线消毒灭菌法 6．紫外线杀菌作用最强的波段是 A.200-250 nm B.150-250 nm C.200-275nm D.250-270 nm E.250-290 nm 7．下列哪项不对 A.湿热消毒灭菌所需时间较干热消毒灭菌短 B.煮沸消毒时将水配成含碳酸氢钠1-2%的浓度可增强杀菌作用 C.预真空压力蒸气灭菌时装载不得超过柜室容量的90%
D.紫外线用于物品表面消毒时，有效距离不超过2米，消毒时间为30-60分钟 E.生物监测法是用非致病性嗜热脂肪杆菌芽胞作为指示剂 8．高压蒸气灭菌时，错误的做法是 A.包不宜太大 B.装锅不宜太挤 C.打包不宜过紧 D.布类物品放于金属搪瓷类物品之下 E. 定期监测灭菌效果 9．保护性隔离不适用于 A.严重烧伤 B.白血病 C. 破伤风 D.早产儿 E.脏器移植 10．戊二醛常用的灭菌浓度和时间是 A.2%，10小时 B.2%，1小时 C. 20%，1小时 D.1%，10小时 E.2%，5小时 11．下列哪项不是Ⅱ类环境 A.普通手术室 B.产房 C. 婴儿室 D. 烧伤病房 E.注射室 12．紫外线照射消毒时灯亮多长时间开始计时 A.立即 B. 2～3分钟 C.3～5分钟 D. 5～7分钟 E. 8～10分钟 13．不属于高效消毒剂的药物是 A.过氧乙酸 B. 戊二醛 C.环氧乙烷 D.酒精 E.甲醛 14.铺好的无菌盘有效期不超过 A.2小时 B.4小时 C.12小时 D.24小时 E.8小时 15．使用酒精消毒哪项不正确 A.适用于皮肤、物品表面及手术器械的消毒
第五章预防与控制医院感染 一．单选题（每题1分） 1. 对被特殊感染而无保留价值的物品，最彻底的无菌方法是( ) A 煮沸消毒灭菌法 B 高压蒸气灭菌法 C 燃烧灭菌法 D 熏蒸法 2 .乙醇消毒的作用原理是（） A破坏细胞膜的结构B与菌体蛋白的氨基结合使其变性 C 使菌体蛋白凝固变性 D 干扰细菌酶的活性 3. 现有95%的乙醇500ml，预配成70%的，需加入灭菌蒸馏水（） A 159ml B 169ml C 179ml D 189ml 4.保管无菌物品哪项是错误的（） A 无菌物与非无菌物应分别放置 B 无菌包必须注明灭菌日期 C 已打开的无菌包未用完，可在48h内有效 D 已打开的无菌包，必须注明开包时间 5.下列无菌技术操作哪项除外属正确（） A.衣帽要整齐，口罩遮住口鼻，修剪指甲，洗手 B.无菌物品仅供一病员使用 C.一无菌物品，仅供一病员使用 D.打开无菌容器，将盖内面向下置一于稳妥处。 6.干热灭菌法灭菌条件是( ) A 120～140℃,10～20min B 160℃,10～15min C 180℃,20～30min D 200℃,30～40min 7．取用无菌溶液时，正确的方法是( ) A.打开瓶盖后，应立即倒入无菌容器中所需液 B.可直接在瓶中蘸取 C.倒后的溶液未用可及时倒回瓶中 D.已打开过的溶液瓶，可保存24小时.哪项不是无菌盘评价的标准（） A.无菌中放的位置恰当，放入无菌物品上下两层的边缘对齐 B.无菌巾上物品放置有序，便于使用 C .操作巾无菌巾外面没有被污染 D.无菌巾未被无菌液体打湿 13. 取无菌溶液的评价哪项除外（） A.手未接触瓶口及瓶盖中间部分B．倒溶液时，未引起水珠四溅 C．标签向上D．盖回瓶塞时，手指接接触处对准标签 14．戴无菌手套时评价哪项错误（） A滑石粉末撒落在手套及无菌区 B 戴手套时未强行拉扯手套边缘，没有污染 C 脱手套时拉扯手指部分 D 操作始终在腰或操作台面以上水平进行 15．哪项除外属无菌包的使用评价标准（） A．查看了无菌包名称及灭菌日期B．一次将包内物品全部取出 C．系带善处理，未吊垂在下D．关包时系带横向缠绕以示区别 16.下列操作哪项正确（） A.浸泡无菌持物钳的消毒液应浸过无菌钳关节轴 B.关闭容器时，盖子应由前向后覆盖 C.无菌盘铺后应在内4小时内使用 D.倒无菌溶液时，将未粘有标签的一面握在手中 17..戴无菌手套时哪项不妥（） A.核对手手套包上的手套号码及无菌日期 B.摊开手套袋，取出滑石粉在其上方擦 C.戴脱时再手套口往下翻转脱下D．脱时再手套口往下翻转脱下 18．下列原则哪项除外是正确的（） A．无菌操作环境应清洁，宽阔B．操作者口罩应每4-8小时更换 C．无菌物品与非无菌物品分开D．无菌物品时应面向有菌区，以免无菌物品被污染19．一套无菌物仅供一位病人使用是（） A．节省物品B．方便操作C．防止交叉感染D．防止差错 20无菌盘在何种情况下不得使用（） A．准备好4小时之内B．操作中无菌盘内面污染 C．无菌巾未被无菌液体打湿D．夹取放置无菌物品时，手臂没有跨越无菌区 21．杀死病毒与芽胞的高效消毒剂是（）
常用消毒与灭菌方法 含氯消毒剂 C.10．1 适用范围 适用于物品、物体表面、分泌物、排泄物等的消毒。 C.10.2 使用方法 C.10.2.1 消毒液配制 根据新产品有效氯含量，按稀释定律，用蒸馏水稀释成所需浓度。具体计算方法及配制步骤按C.9.1.2.1进行。 C.10.2.2 消毒方法 C.10.2.2.1 将待消毒的物品浸没于装有含氯消毒剂溶液的容器中，加盖。对细菌繁殖体污染物品的消毒，用含有效氯500mg/L的消毒液浸泡＞10min，对经血传播病原体、分支杆菌和细菌芽孢污染物品的消毒，用含有效氮2000mg/L～5000mg/L消毒液，浸泡＞30min。 C.10.2.2.2 擦拭法大件物品或其他不能用浸泡消毒的物品用擦拭消毒，消毒所用的浓度和作用时间同浸泡法。 C10.2.2.3 喷洒法对一般污染的物品表面，用含有效氯400 mg/L~700 mg/L的消毒液均匀喷洒，作用10min~30min；对经血传播病原体、结核杆菌等污染表面的消毒，用含有效氯2000mg/L的消毒液均匀喷洒，作用＞60min。喷洒后有强烈的刺激性气味，人员应离开现场。
C10.2.2.4干粉消毒法对分泌物、排泄物的消毒，用含氯消毒剂干粉加入分泌物、排泄物中，使有效氯含量达到10000mg/L，搅拌后作用＞2h；对医院污水的消毒，用干粉按有效氯50mg/L用量加入污水中，并搅拌均匀，作用2h后排放。 C10.3 注意事项 C10.3 .1粉剂应于阴凉处避光、防潮、密封保存；水剂应于阴凉处避光、密闭保存。使用液应现配现用，使用时限≤24h。 C10.3.2 配置漂白粉等粉剂溶液时，应戴口罩、手套。 C10.3.3 未加防锈剂的含氯消毒剂对金属有腐蚀性，不应做金属器械的消毒。加防绣剂的含氯消毒剂对金属器械消毒后，应用无菌蒸馏水冲洗干净，干燥后使用。 C10.3.4 对织物有腐蚀和漂白作用，不应做有色织物的消毒。 .16 煮沸消毒 C.16.1 适用范围 适用于金属、玻璃制品、餐饮具、织物或其他耐热、耐湿物品的消毒。 C.16.2 使用方法 将待消毒物品完全浸没水中，加热水沸腾后维持≥15min。
微生物知识及消毒与灭菌知识培训试题答案部门培训试题 培训内容:微生物知识及消毒与灭菌知识 姓名得分 一、填空题(每空2分、共50分) 1( 微生物(microorganism, microbe)是一些肉眼看不见的微小生物的总称。 2( 微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类:真核细胞型、原核细胞型、 非细胞型。 3( 微生物的形态结构:细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、病毒。 4( 微生物的营养:水分、碳源、氮源、无机盐类、生长因子。 5( 对微生物和尘粒进行更加严格的控制对于针剂生产洁净室非常重要。 6( 辐射灭菌法:辐射有两种类型:一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波;一种是 电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、γ射线。 7(过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。 8(高压蒸汽灭菌法:超过一个大气压时，水的沸点高于100?，反之亦然。此法适用于耐 高温和潮湿的物品。 二单项选择题(每题3分、共24分) 1(真菌属于___A__型微生物。 A. 真核细胞型 B. 原核细胞型 C. 非细胞型 D.多核细胞型 2.下列不属于原核细胞型的是____D__
A.细菌 B.衣原体 C. 放线菌 D.病毒 3. 杀灭芽胞最可靠的方法是___C___ A.干热灭菌法 B. 流通蒸汽灭菌法 C. 高压蒸汽灭菌 D. 巴氏灭菌法 4. 下列那个是构成细胞的重要物质__B____ A.水 B.碳源 C. 细胞核 D.无机盐 5. 滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为__A____ A. 0.22μm B.0.36μm C.0.45μm D.0.65μm 6. 低温间隙灭菌:将物品先用___C___加热1h，然后置20~25?保存24h(或常温过夜)，使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。 A.30 ~40? B.45 ~55? C. 60~80? D. 85~95? 7. 新洁尔灭为我们车间常用消毒剂，其浓度为____B__ A. 0.01% B.0.1% C.1% D.10% 8(车间常用乙醇消毒剂的浓度为____A__ A. 70%~75% B.75%~80% C.65%~70% D.70%~80% 我已接受上述培训，理解、掌握本次培训内容。 受训人签名:_______________ 日期:__________________ 三多项选择(每题4分、共16分) 1. 下列哪些是我们常用的消毒剂 ABCD A. 70%~75%乙醇水溶液 B. 37%~40%甲醛溶液 C. 新洁尔灭 D. 过氧乙酸 2. 高压蒸汽灭菌常用条件为:ABC A. 115.5? 30min B. 121.5? 20min C. 126.5? 15min D. 200?45min 3.下列哪些属于微生物的特点ABCD
第七章预防与控制医院感染 [测试题] 一、名词解释 1．医院感染（nosocomial infections） 2.内源性感染（endogenous infections）3. 外源性感染（exogenous infections） 4.感染源（souce of infection ）5.感染(infection) 6.传播途径（mode of transmission）7.生物媒介传播8. 易感宿主（susceptible host） 9.清洁（cleaning）10. 消毒（disinfection）11. 灭菌（sterilization） 12. 预防性消毒（preventive disinfection） 13. 疫原性消毒(disinfection of epidemic focus) 14.终未消毒（terminal disinfection）15. 无菌技术（aseptic technique）16. 隔离（isolation）17．清洁区（cleaning）18．半污染区(cleaning-contaminated area) 19．污染区(contaminated area) 20.保护性隔离(protective isolation) 21.物理消毒灭菌法22. 化学消毒灭菌法23.消毒剂（disinfectant） 二、填空题 1．世界卫生组织提出有效控制医院感染的关键措施为：、、、、、、的效果监测。 2．影响个体抵抗力、免疫功能的主要因素有因素、因素、因素。 3.医院感染的发生必须具备三个基本条件，即、、。 4.病原体传播到宿主后是否引起感染主要取决于病原体的和宿主的。 5.常用的消毒灭菌方法是消毒灭菌法和消毒灭菌法。 6.常用化学消毒灭菌法有、、、。 7．紫外线灯用于空气消毒的有效距离不超过，时间是；用于物品消毒的有效距离是，时间是。 8.取放无菌持物钳时，钳端，使用时钳端，不能触及以免污染。 9．医院感染的主要传播途径有传播、传播、传播、
医院常用消毒与灭菌方法 拖把： 应有明显标识，严格分区使用。 1）一般办公室、病室、治疗室、换药室走廊每次使用后用清水冲洗，悬挂晾干备用。 2）病室、治疗室、换药室等地面有分泌物、血液、排泄物时，先用1000mg/L有效氯适量到在污染地面30min后，用拖把拖干净，再用500mg/L有效氯消毒剂浸泡30min后，清洗干净，晾干备用。 3）传染病区，使用后先消毒，用1000mg/L有效氯消毒液浸泡30分钟，再用水清洗干净，然后用500mg/L有效氯消毒液浸泡30分钟，悬挂晾干备用。 针灸针： 高压蒸汽消毒；一定要消毒彻底，以免交叉感染！ 体温表消毒方法： 1．每周浸泡用肥皂水清洗两次（周一、周四），用75%酒精浸泡,不填加，每周更换两次。 2．遇有传染病人用过的体温表，需用0.05％有效氯消毒半小时，然后用清水洗净晾干，放入酒精浸泡。 3．病人处不可放置体温表，随用随取，及时消毒。 4．每月监测体温表检测，并登记。方法如下：将体温表中的汞柱甩至35℃以下，放入36℃以上、42℃以下水温中浸泡3分钟，取出后体温表中汞柱误差在0.2之间为合格。 血压计终末消毒方法： 1．污染的血压计袖带使用0.05％有效氯即刻消毒，消毒半小时后用清水洗净晾干备用。污染的血压计用0.05％有效氯擦拭消
毒。 2．无法撤掉的要关闭阀门后，再进行消毒。 3．传染病人固定专用血压计，定时每周消毒一次。 4．血压计袖带每周清洁消毒一次，方法如下：用清水或肥皂水清洗后晾干，再用紫外线双面消毒半小时。 简易呼吸器消毒： 1. 接口与面罩用酒精擦拭，球囊污染用肥皂水清洗。 2. 人工呼吸器使用后消毒，避污保存。 3. 气管插管导丝使用后灭菌保存。 呼吸机冷凝水终末消毒： 1．配制0.1%有效氯装在密闭容器中，积水器中冷凝水达1/2满时倾倒，将冷凝水倒入容器中，半小时后倒入卫生间污水系统。 2．呼吸机管路积水瓶处于直立状态，避免冷凝水倒灌 公用水杯、痰杯、拖鞋： 用后使用0.05％有效氯消毒。 便器消毒： 1. 浸泡便器消毒液每日更换，配置成0.1％有效氯完全浸泡再消 毒液中，一小时后清洗晾干备用。 2. 公用便器每次用后消毒，消毒后及时晾干备用。 3. 自备便器每周集中消毒一次。 止血带消毒： 止血带消毒液每日更换，配置成0.05％有效氯，每次使用后完全浸泡在消毒液中，半小时后清洗晾干备用。 雾化器消毒： 1. 使用后用0.05％有效氯擦拭，管道每次使用后用 0.05％效 氯消毒半小时后清洗晾干备用。 2. 一次性雾化管道每次使用后清洁，需60℃以上热水冲洗，面 罩避污保存。
严格的消毒灭菌对细胞与胚胎工程研究与应用工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。 (一)消毒灭菌方法 目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法（消毒剂、抗生素）两大类。 1．干热灭菌法 是利用恒温干燥箱内120 oC～150 oC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。 2．湿热灭菌法 压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1 kg/cm2，维持20～30 min即可达到灭菌效果。 3．射线灭菌法 利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。灭菌时间为30 min。用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。 4．过滤除菌法 是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达
选择题 1. 噬菌体是一种感染______的病毒。 (a)酵母菌 (b)霉菌 (c)放线菌和细菌 (d)原生动物 2. 称为微好氧菌的那些细菌能______生长。 (a)在高浓度盐中 (b)在低浓度氧中 (c)没有ATP或葡萄糖 (d)只在有病毒时 3. 深层穿刺接种细菌到试管固体培养基中______。 (a)提供厌氧菌生长条件 (b)除去代谢废物的一个机会 (c)增加氧气 (d)增加钾和钠离子的数目 4. 微生物分批培养时，在延迟期______ (a)微生物的代谢机能非常不活跃 (b)菌体体积增大 (c)菌体体积不变 (d)菌体体积减小 5. 实验室常用的培养细菌的培养基是______。 (a)牛肉膏蛋白胨培养基 (b)马铃薯培养基 (c)高氏一号培养基 (d)麦芽汁培养基 6.属于病毒界的微生物是 ①放线菌②立克次氏体③噬菌体④藻类 7.中温微生物的最适生长范围是 ①4℃左右②10℃～20℃③25℃～30℃④45℃～60℃ 8.噬菌体属于病毒类别中的 ①微生物病毒②昆虫病毒③植物病毒④动物病毒 9.配制1000ml的固体培养基需加琼脂为 ①0②2～7克③15～20克④50克 10.碳源和能源来自同一有机物的是 ①光能自养型②化能自养型③光能异养型④化能异养型 11.以氧化无机物作为主要能源的营养类型为 ①光能自养型②化能自养型③光能异养型④化能异养型 12.好氧微生物在液体培养基中常表现为 ①菌膜②沉淀③混浊④三者都有 13.高压蒸汽灭菌,常用的温度和时间为 ①70-80℃,30分钟②121℃,30分钟③160-170℃,2小时④100℃,30分钟 14.果汁的消毒或灭菌方法为 ①间歇灭菌②高压蒸汽灭菌③巴氏消毒④干热灭菌 15.干热灭菌法要求的温度和时间为 ①105℃,2小时②121℃,30分钟③160℃,2小时④160℃,4小时 16.噬菌体属于 ①动物病毒②植物病毒③昆虫病毒④微生物病毒 17.微生物细胞的主要元素组成以干物质计最多 ①N②C③O④H 18.下列属于生长因子类物质的是 ①氨基酸②维生素③嘌呤碱基④三者都是 19.营养缺陷型菌株是指 ①有营养不良症的菌株②培养基中缺少某种成分才能生长良好的菌株 ③培养基中营养成分缺少时获得的菌株④丧失了合成某种营养成分能力的菌株 20.制备培养基的最常用的凝固剂为 ①硅胶②明胶③琼脂④纤维素 21.用化学成分不清楚或不恒定的天然有机物配成的培养基称为 ①天然培养基②半合成培养基③合成培养基④加富培养基 22.鉴别培养基是一种培养基，
微生物学习题第四章 至第七章
选择题 1. 噬菌体是一种感染______的病毒。 (a)酵母菌 (b)霉菌 (c)放线菌和细菌 (d)原生动物2. 称为微好氧菌的那些细菌能______生长。 (a)在高浓度盐中 (b)在低浓度氧中 (c)没有ATP或葡萄糖 (d)只在有病毒时 3. 深层穿刺接种细菌到试管固体培养基中______。 (a)提供厌氧菌生长条件 (b)除去代谢废物的一个机会 (c)增加氧气 (d)增加钾和钠离子的数目 4. 微生物分批培养时，在延迟期______ (a)微生物的代谢机能非常不活跃 (b)菌体体积增大 (c)菌体体积不变 (d)菌体体积减小 5. 实验室常用的培养细菌的培养基是______。 (a)牛肉膏蛋白胨培养基 (b)马铃薯培养基 (c)高氏一号培养基 (d)麦芽汁培养基 6.属于病毒界的微生物是 ①放线菌②立克次氏体③噬菌体④藻类 7.中温微生物的最适生长范围是 ①4℃左右②10℃～20℃③25℃～30℃④45℃～60℃ 8.噬菌体属于病毒类别中的 ①微生物病毒②昆虫病毒③植物病毒④动物病毒 9.配制1000ml的固体培养基需加琼脂为 ①0②2～7克③15～20克④50克 10.碳源和能源来自同一有机物的是 ①光能自养型②化能自养型③光能异养型④化能异养型 11.以氧化无机物作为主要能源的营养类型为 ①光能自养型②化能自养型③光能异养型④化能异养型 12.好氧微生物在液体培养基中常表现为 ①菌膜②沉淀③混浊④三者都有 13.高压蒸汽灭菌,常用的温度和时间为 ①70-80℃,30分钟②121℃,30分钟③160-170℃,2小时④100℃,30分钟
物理消毒灭菌法 （一）物理消毒灭菌法 1.热力消毒灭菌法：利用热力作用破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁、细胞膜，导致其死亡，可分为干热法和湿热法。 （1）燃烧法：属于干热法，是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 1)用途：①无保留价值的污染物品②金属器械及搪瓷类物品急用，或无条件消毒时，锐利刀剪除外，以免锋刃变钝。 2)方法：①金属器械可在火焰上烧20秒②搪瓷类容器可倒入少量95%乙醇 (2)干烤法：利用特制的烤箱，热力通过空气对流和介质传导进行灭菌，效果可靠。 （3）煮沸消毒法：属于湿热法，用于耐湿、耐高温的搪瓷、金属、玻璃，橡胶类物品，不能用于外科手术器械的灭菌。从水煮开始计时，5-10分钟可杀灭繁殖体，15分钟可将多数细菌芽胞杀灭，如破伤风杆菌芽胞需煮60分钟才可杀灭，在水中加入碳酸氢钠，配成浓度为1%-2%的溶液时，沸点可达105度，即可增强杀菌作用，又可去除防锈。 注意事项：①物品需全部侵入在水中，物品盖子打开，轴节打开，空腔导管预先灌水，各种大小及形状相同的容器不能重叠②玻璃类物品需用纱布包裹，并在冷水或温水中放入③橡胶类物品需用纱布包好，水沸后放入④如中途加入其它物品，需等再次水沸后开始计时⑤高原地区气压低，沸点低，需适当延长煮沸时间，一般海拔每增高300m，煮沸时间延长2分钟。 （4）压力蒸汽灭菌法：属于湿热法，是一种临床上应用最广泛，效果最为可靠的首选灭菌方法 2.光照消毒法（又称辐射消毒）主要是通过紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白发生光解、变性，导致细菌死亡。 （1）日光暴晒法：利用日光的热、干燥、紫外线的作用来杀菌，将床垫、毛毯、书籍、衣服等放在阳光下直射，暴晒6小时可达到消毒效果，中间要定时翻动。 （2）紫外线灯管消毒法：紫外线属于电磁波辐射，常用于空气、物品表面的消毒，杀菌最强的波长范围250-270nm从灯亮5-7分钟开始计时。①空气消毒：有效距离不超过2m，照射时间20-30分钟②物品消毒：有效距离不超过25-60cm，照射时间20-30分钟。 3)注意事项：①保持室内清洁、干燥，室内温度20-40度，相对湿度40%-60%时，紫外线消毒最为宜 ②保持紫外线灯管清洁，一般每2周用无水乙醇擦拭1次，发现有污洉应随时擦拭③保护眼睛和皮肤：紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用，易引起眼炎、皮炎且臭氧对人体不利，因此一般不在有人的环境中使用，必须使用时应带防护镜，穿防护衣，或用被单遮盖肢体④紫外线穿透力较差，消毒时物品应摊开或挂起，且定时翻动及保证各表面均受到直接照射⑤如需再次开启，应间隔3-4分钟⑥定期检测紫外线灯管照射强度，一般每隔3-6个月1次，或建立登记卡，使用时间超过1000小时应予以更换⑦定期做空气培养检测消毒效果 (3)臭氧灭菌消毒法：利用臭氧强大的氧化作用进行杀菌。 1)用途：主要用于空气、医院污水、诊疗用水、物品表面的消毒。 2)方法:使用时应关闭门窗，人员离开房间，消毒结束后30分钟方可进入。 3．电离辐射灭菌法(又称冷灭菌)适用于不耐热的物品消毒，如橡胶、塑料、高分子聚合物(一次性注射器、输液输血器等)、紧密医疗仪器、生物医学制品、节育用具及金属等。 4．微波消毒灭菌法微波可杀灭细菌繁殖体、真菌、病毒、细菌芽胞、真菌孢子等各种微生物。常用于食品、餐具的处理，化验单据、票证的消毒，医疗药品、耐热非金属材料及器械的消毒灭菌。不能用于金属物品的消毒。 化学消毒灭菌法 化学消毒灭菌法是利用液体或气体的化学药物渗透到菌体内，使菌体蛋白凝固变性，细菌酶失去活性，导致微生物代谢障碍而死亡，或破坏细胞膜结构，改变其通透性，导致细胞膜破裂、溶解，以达到消毒灭菌的目的。 1.化学消毒剂的使用原则 （1）待消毒的物品的物品须先洗净、擦干 （2）根据不同物品的性能及各种微生物的特性，选择恰当的消毒剂。 （3）严格掌握消毒剂的有效浓度、使用方法及消毒时间 （4）消毒液中一般不放置纱布、棉花等物，以免因吸附消毒剂而降低消毒效力。 （5）消毒物品应全部侵没在消毒液内，器械的轴节应打开，套盖应掀开，管腔挂满消毒液。 （6）浸泡消毒后的物品使用前应先用无菌生理盐水冲洗，气体消毒后的物品使用前应待气体散发后，以免残留消毒剂刺激组织。 （7）消毒剂应定期检测，调整浓度，进行更换，易挥发的要加盖。 2.化学消毒剂的使用方法 （1）浸泡法：常用于耐湿、不耐热的物品，如锐利器械、精密器材等的消毒
第五章培养基及设备的灭菌 第一节培养基灭菌的目的、要求和方法 一、定义 1，培养基灭菌的定义 是指从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子，或从中将其除去。工业规模的液体培养基灭菌，杀灭杂菌比除去杂菌更为常用。 2，灭菌与消毒的区别 灭菌：用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子 消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。 二、培养基灭菌的目的 1，在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果 生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力；在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主；杂菌及其产生的物质，使提取精制发生困难；杂菌会降解目的产物；杂菌会污染最终产品，杂菌会污染最终产品；发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。 2，工业上具体措施包括 （1）使用的培养基和设备须经灭菌； （2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理； （3）设备应严密，发酵罐维持正压环境； （4）培养过程中加入的物料应经过灭菌； （5）使用无污染的纯粹种子。 3，培养基灭菌的目的 杀灭培养基中的微生物，为后续发酵过程创造无菌的条件。 4，培养基灭菌的要求 （1）达到要求的无菌程度（10-3） （2）尽量减少营养成分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的： 培养基中不同营养成分间的相互作用；对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。 5，灭菌的方法 （1）化学法 化学药品灭菌法 （2）物理法 干热灭菌法
湿热灭菌法 射线灭菌法 6，湿热灭菌的原理 每一种微生物都有一定的最适生长温度范围。当微生物处于最低温度以下时，代谢作用几乎停止而处于休眠状态。当温度超过最高限度时，微生物细胞中的原生质胶体和酶起了不可逆的凝固变性，使微生物在很短时间内死亡，加热灭菌即是根据微生物这一特性而进行的。 7，湿热灭菌中的相关定义 杀死微生物的极限温度称为致死温度。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。 微生物的热阻：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值。 各种微生物对湿热的相对热阻 微生物 相对热阻 营养细胞和酵母 细菌芽孢 霉菌孢子 病毒和噬菌体 1.0 3×106 2~10 1~5 8，湿热灭菌的优点 蒸汽来源容易，操作费用低，本身无毒；蒸汽有强的穿透力，灭菌易于彻底； 蒸汽有很大的潜热；操作方便，易管理。 2 湿热灭菌的理论基础 一，培养基湿热灭菌需解决的工程问题 1，将培养基中的杂菌总数N 0 杀灭到可以接受的总数N （10-3）， 需要多高的温度、多长的时间为合理。 菌温度和时间的确定取决于： （1）杂菌孢子的热灭死动力学 （2）反应器的形式和操作方式 （3）培养基中有效成分受热破坏的可接受范围 二、微生物的热死灭动力学方程 实验证明，微生物营养细胞的均相热死灭动力学符合化学反应的一级反应动力学，即： N ：任一时刻的活细菌浓度（个/L ） () 1N k dt dN ?=-
在日常生活中或者未来工作中的各种消毒杀菌方式 (1)天然消毒法：利用日光等天然条件杀灭致病微生物，达到消毒目的，称为天然消毒法。 ①日光曝晒法：日光由于其热、干燥和紫外线的作用，而具有一定的杀菌力。日光杀菌作用的大小受地区、季节、时间等因素影响，日光越强，照射时间越长，杀菌效果越好。日光中的紫外线由于通过大气层时，因散热和吸收而减弱，而且不能全部透过玻璃，因此，必须直接在阳光下曝晒，才能取得杀菌效力。日光曝晒法常用于书籍、床垫、被褥、毛毯及衣服等的消毒。曝晒时应经常将被晒物翻动，使物品各面都能与日光直接接触，一般在日光曝晒下4～6小时可达到消毒目的。 ②通风：通风虽然不能杀灭微生物，但可在短时间内使室内外空气交换，减少室内致病微生物。通风的方法有多种，如用门、窗或气窗换气，也可用换气扇通风。居室内应定时通风换气，通风时间一般每次不少于30分钟。 (2)物理灭菌法：利用热力等物理作用，使微生物的蛋白质及酶变性凝固，以达到消毒、灭菌目的，称为物理灭菌法。 ①燃烧法：是一种简单易行、迅速彻底有效的灭菌方法，但对物品的破坏性大，多用于耐高热，或已带致病菌而又无保留价值的物品，如被某些细菌或病毒污染的纸张、敷料，搪瓷类物品如坐浴盆，也可以用火焰燃烧消毒灭菌，应先将盆洗净擦干，再倒人少许90％酒精，点燃后慢慢转动浴盆，使其内面完全被火焰烧到。应用此法时，要注意安全，须远离易燃或易爆物品，以免引起火灾。 ②煮沸法：是一种经济方便的灭菌法，一般等水开后计时，煮沸10—15分钟可杀死无芽胞的细菌。可用于食具、毛巾、手绢等不怕湿而耐高温的物品的消毒灭菌。 ③高压蒸汽灭菌法：利用高压锅内的高压和高热释放的潜能进行灭菌，此法杀菌力强，是最有效的物理灭菌法。待高压锅上汽后，加阀再蒸15分钟，适合消毒棉花、敷料等物品。 (3)化学消毒灭菌法：化学消毒灭菌法是利用化学药物渗透细菌体内，破坏其生理功能，抑制细菌代谢生长，从而起到消毒的作用。家庭常用化学消毒灭菌方法有以下三种。 ①擦拭法：用化学药液擦拭被污染的物体表面，常用于地面、家具、陈列物品的消毒。如用0．5％-3％漂白粉澄清液、84消毒液等含氯消毒剂(现市场都出售，要看好有效期及使用方法)，擦拭墙壁、床、桌椅地面及厕所。 ②浸泡法：将被消毒物品浸泡在消毒液中，常用于不能或不便蒸煮的生活用具。浸泡时间的长短因物品及溶液的性质而有不同。如用1％-3％漂白粉澄清液浸泡餐具、便器需1小时，用0.5％“84”消毒液浸泡需15分钟，而用0.02％高效消毒片浸泡只需5分钟，就可以达到目的。若浸泡呕吐物及排泄物，不但消毒液浓度要加倍，而且浸泡时间也要加倍。 ③熏蒸法：是利用消毒药品所产生的气体进行消毒。常用于传染病人居住过的房间空气及室内表面消毒。 福尔马林(甲醛)+高锰酸钾：每立方米加入福尔马林25—40毫升，高锰酸钾15—30克，两种药放置在一起即产生气体，可达到消毒目的。消毒时，必须将门窗紧闭12-24／小时，消毒后再打开门窗进行通风，此法对各种细菌、病毒引起的传染病均有效。
医院环境、常用物品清洁消毒方法
含氯消毒液配置方法： 1、康威达药片（以每片500作参考）：1片药片+1000ml水=500mg/L。1片药片+500ml水=1000mg/L； 2、金属康威达液（10000mg/L）：1份原液+9份水=1000mg/L； 3、消毒液配置后均应测定浓度，以实际测定浓度为准。
手术室医院感染管管理制度 一、手术室布局合理，符合功能流程和洁污分开的要求。严格划分污染区、清洁区、无菌区，区域间标志明确。天花板、墙壁、地面无裂隙，表面光滑，有良好的排水系统，便于清洗和消毒。 二、手术室设无菌手术间、一般手术间、隔离手术间；隔离手术均应靠近手术室入口处，应有明显标记；每一手术间限置一手术台；各区设施、家具等用物应分别定位放置。 三、凡进入手术室人员必须更换衣、裤、戴帽、戴口罩、换鞋，并要求严格遵守入室规则。室人员应严格遵守消毒灭菌制度和无菌操作技术规程。 四、严格限制手术室人员数量，手术进行中尽量减少人员流动和谈话。严格执行手术室参观制度，每台手术参观人员不超过二人，参观者不得离手术台太近或太高，距离应≥30cm。 五、手术病人进手术室必须穿手术衣、裤、袜套、戴帽。 六、无菌与污染手术分室进行；如接台手术应先行无菌手术，后行污染手术。连台手术之间。手术人员应更换手术衣并执行外科手消毒，地面和用物均用消毒液擦拭，空气用空气消毒机消毒。 七、手术器械及用品必须一用一灭菌，首选采用压力蒸汽灭菌，尽量避免使用化学消毒剂浸泡消毒。灭菌包体积不超过30×30×25 cm，金属包重量不超过7kg。敷料包重量不超过5kg。包放置化学指示卡，包外有化学指示胶带，标签填写完整（名称、消毒灭菌日期、失效期、签名）。包布干净无破损。运载物品的推车应洁污分开，车轮应每次清洁。 八、对外来器械的清洗灭菌质量一律不予承认，必须拆除包装重新予以清洗再打包高压灭菌，同时还必须有生物监测，急诊病人等不及生物监测结果的，可在爬行卡变色符合要求后先放行，如生物监测结果不符合要求则及时与医生沟通，使用抗菌药物弥补。 九、严格执行卫生、消毒制度，每日术前进行湿式清洁，每周设置固定卫生日，对手术室环境、物品进行全面清洁。各室拖布有标记，悬挂晾干；垃圾分类处置符合要求。 十、手术间地面和用物如无明确污染可用清水清洁，如被血液、体液污染，则应用500mg/L含氯消毒液擦拭消毒。接触频繁的仪器、设备表面如按钮、操作面板等，应用75%乙醇擦拭或按照仪器使用说明要求进行保洁、消毒处理。各种管道用后按规定进行清洗、消毒、灭菌。 十一、隔离病人手术通知单上应注明疾病诊断及感染状况。隔离手术间应有隔离标志；工作人员固定，控制出入；凡病人体的物质如血液、体液、呕吐排泄物、已切除的病变脏器与组织、
消毒、灭菌方法的选择原则 一、消毒、灭菌方法 1 根据物品污染后导致感染的风险高低选择相应的消毒或灭菌的方法： a) 高度危险性物品，应采用灭菌方法处理； b) 中度危险性物品，应达到中水平消毒以上效果的消毒方法； c) 低度危险性物品，宜采用低水平消毒方法，或做清洁处理；遇有病原微生物污染时，针对所污染病原微生物的种类选择有效的消毒方法。 2 根据物品上污染微生物的种类、数量选择消毒或灭菌方法： a) 对受到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌和经血传播病原体（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等）污染的物品, 应采用高水平消毒或灭菌。 b) 对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体等病原微生物污染的物品，应采用中水平以上的消毒方法。 c) 对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品，应采用达到中水平或低水平的消毒方法。 d) 杀灭被有机物保护的微生物时，应加大消毒药剂的使用剂量和（或）延长消毒时间。
e) 消毒物品上微生物污染特别严重时, 应加大消毒药剂的使用剂量和（或）延长消毒时间。 3 根据消毒物品的性质选择消毒或灭菌方法： a) 耐热、耐湿的诊疗器械、器具和物品，应首选压力蒸汽灭菌；耐热的油剂类和干粉类等应采用干热灭菌。 b) 不耐热、不耐湿的物品，宜采用低温灭菌方法如环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌或低温甲醛蒸汽灭菌等。 c) 物体表面消毒，应考虑表面性质，光滑表面宜选择合适的消毒剂擦拭或紫外线消毒器近距离照射；多孔材料表面宜采用浸泡或喷雾消毒法。 二、职业防护 1 应根据不同的消毒与灭菌方法，采取适宜的职业防护措施。 2 在污染诊疗器械、器具和物品的回收、清洗等过程中应预防发生医务人员职业暴露。 3处理锐利器械和用具，应采取有效防护措施，避免或减少利器伤的发生。 4不同消毒、灭菌方法的防护如下： a) 热力消毒、灭菌:操作人员接触高温物品和设备时应使用防烫的棉手套、着长袖工装；排除压力蒸汽灭菌器蒸汽泄露
一、常用灭菌消毒方法 1、干热灭菌法 火焰灭菌（灼烧灭菌）、干热灭菌 2、湿热灭菌 巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、实罐灭菌 3、过滤除菌 4、放射线灭菌 二、常用的消毒剂 理想的消毒剂：杀菌力强，使用方便；价廉；对人、畜无害；能长期保存；溶解度大；无腐蚀性等。 消毒剂种类：氧化剂、重金属盐、有机化合物 相对药效： 三、影响灭菌与消毒因素 1、微生物种类 2、培养基 3、消毒剂 4、环境因素 5 节：化学疗剂对微生物作用 能直接干扰病原微生物的生长繁殖并可用于治疗感染性疾病的化学药物。 化学疗剂能选择性地作用于病原微生物新陈代谢的某个环节，使其生长受到抑制或致死。一、抗代谢物 结构上类似，竞争性地与酶结合，只有当正常代谢物量少或不存在时才起作用。 最常用的是磺胺类药物。是氨苯磺胺衍生物，其结构与对氨基苯甲酸（PABA）类似，而PABA 是叶酸分子组成。叶酸是辅酶，在氨基酸、维生素合成中起重要作用，许多细菌需自己合成叶酸，而人和动物利用现成叶酸，因此不受磺胺干扰。 还有异烟肼rimifon，是吡哆醇对抗物。 二、抗生素 作用范围：抗菌谱 作用位点： 1、抑制细胞壁合成：青霉素，多氧霉素 2、影响细胞膜功能：多肽类，多烯类 3、干扰蛋白合成：抑制而非杀死 4、阻碍核酸合成：对细胞有毒 三、微生物抗药性 对药物的适应性即是抗药性。 抗药性主要表现（产生机制） 1、菌体内产生钝化或分解药物的酶 2、改变膜的透性而导致抗药性产生 3、被药物作用的部位发生改变 4、形成救护途径。 五章：微生物遗传 遗传heredity—亲代将其特有的生物学特性传递给子代。 遗传性—子代总保持与亲代相同的生物学特性。 遗传型genotype—生物体所具有的全套遗传物质总称。又称基因型。