总皂苷的检测方法
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【导言】我国药典是国家药典的统称,是指对我国境内生产、流通和使用的药品质量标准的权威性规定,是保障药品质量和使用合理、安全的基本依据。
其中,人参总皂苷含量是人参药材质量的重要评价指标,其测定方法对于保证人参药材的质量具有重要意义。
本文将对我国药典2020版中人参总皂苷含量测定方法进行详细介绍。
【正文】1. 依据依据我国药典是国家药典,是依法规定的药品标准,它规定了符合标准的药品质量要求、规范药品生产、流通和使用。
人参作为一种重要的中药材,在我国药典中有着详细的质量标准,其含有的总皂苷含量是一个至关重要的指标。
2. 人参总皂苷含量的意义总皂苷是人参中的重要有效成分之一,它具有调节免疫功能、提高机体抗氧化能力、增强心肌供血量、预防心绞痛、心肌梗死等保护心脏的作用。
测定人参总皂苷含量不仅有利于评价人参的药用价值,还能为人参的质量控制提供依据。
3. 我国药典2020版中人参总皂苷测定方法我国药典2020版中,人参总皂苷的测定方法主要包括提取、净化、分离和定量测定这几个步骤。
具体操作步骤如下:3.1 溶剂选择:首先选择合适的溶剂,如乙醇、丙酮等,将人参样品粉碎成粉末状,然后用溶剂进行提取,得到提取液。
3.2 净化分离:将提取液进行净化分离,去除杂质,得到待测液。
3.3 定量测定:采用分光光度计或者高效液相色谱仪等仪器,进行人参总皂苷的定量测定,计算出含量结果。
4. 测定方法的操作要点在操作过程中,需严格控制提取温度、时间和溶剂的体积比例,避免提取效果不佳。
净化过程中也需保证分离效果,避免杂质对测定结果的影响。
测定过程中应根据仪器的要求进行参数设置,确保测定结果的准确性。
为了保证人参总皂苷含量的测定结果的可靠性和稳定性,建议重复测定并取平均值。
5. 结论我国药典2020版中的人参总皂苷测定方法,是一种全面、准确的测定方法,可以有效地评价人参药材的质量,并为制定人参制剂的合理使用提供依据。
基于该方法,人们可以对人参药材的质量进行科学评价,保证人参产品的质量和疗效。
A1 总皂苷的测定方法方法来源:《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)保健食品中总皂苷的测定方法(分光光度法)A1.1 试剂Amberlite-XAD-2大孔树脂,Sigma化学公司U.S.A正丁醇分析纯乙醇分析纯中性氧化铝层析用,100-200目人参皂苷Re 购自中国药品生物制品检定所香草醛溶液称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100ml。
高氯酸分析纯冰乙酸分析纯人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0ml,即每毫升含人参皂苷Re2.0mg。
A1.2 仪器比色计、层析柱A1.3 试验步骤A1.3.1 试样处理A1.3.1.1 固体试样:称取1.000g左右的试样(根据试样含人参量定),置于100ml 容量瓶中,加少量水,超声30min,再用水定容至100ml,摇匀,放置,吸取上清液1.0ml进行柱层析。
A1.3.1.2 柱层析:用10mL注射器作层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2大孔树脂,上加1cm中性氧化铝。
先用25ml70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25ml水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0ml已处理好的试样溶液(见3.1),用25ml水洗柱,弃去洗脱液,用25m170%乙醇洗脱人参皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60℃水浴挥干。
以此作显色用。
A1.3.1.3 显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8ml高氯酸,混匀后移入5ml比色管中,塞紧盖子于60℃水浴上加热10min,取出,冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0ml,摇匀后,以1cm 比色池于560nm 波长处与标准管一起进行比色测定。
A1.3.1.4 标准管:吸取人参皂苷Re 标准溶液(2.0mg/ml )100μl 放蒸发皿中,放在水浴挥干(低于60℃),或热风吹干(勿使过热),以下操作从“3.2柱层析……”起,与试样相同。
总皂苷的测定方法(分光光度法)本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。
本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。
一、方法提要样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。
二、仪器1.722分光光度计。
2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。
3.超声波振荡器。
三、试剂1.甲醇(分析纯)。
2.乙醇(分析纯)。
3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。
4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL。
5.高氯酸(分析纯)。
6.冰乙酸(分析纯)。
7.人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。
8.重蒸水。
四、测定步骤1.样品处理:(1)固体样品称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离。
(2)液体样品含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离。
2.柱层析以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。
3显色在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加0.8mL高氯酸,混匀后移入l0mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出,冷却后准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。
三七总皂苷的提取分离和纯化实验方案三七总皂苷是一种具有药用价值的天然产物,其提取、分离和纯化是研究和开发其药用价值的重要环节。
下面是一个关于三七总皂苷的提取、分离和纯化实验方案的简要描述。
1. 原料准备:-采用鲜三七根茎为原料,首先进行清洗和切碎,以便提高提取效率。
-预先准备好一定量的有机溶剂(如乙醇、甲醇等),用于提取和分离。
2. 提取过程:-将切碎的三七根茎置于有机溶剂中,进行浸泡提取。
-选择适当的提取时间和温度,常规条件下可选择30-60分钟的提取时间,在温度范围为50-70摄氏度进行提取。
-可采用超声波辅助提取,以提高提取效率。
3. 过滤和浓缩:-提取液经过滤,去除悬浮物和固体颗粒。
-使用旋转蒸发器或其他适当的浓缩方法,将提取液浓缩至一定体积,以便后续的分离和纯化步骤。
4. 分离步骤:-可采用柱层析技术进行初步分离,选择合适的吸附剂和洗脱溶剂,以使目标化合物与其他杂质分离。
-通过调节洗脱溶剂的极性和流速,可以优化分离效果。
5. 纯化过程:-将初步分离得到的目标化合物溶解在适当的溶剂中,进行再结晶或凝胶柱层析等纯化操作。
-通过重复纯化步骤,可以获得更高纯度的三七总皂苷。
6. 分析与评价:-使用合适的分析方法(如高效液相色谱、质谱等),对提取和纯化得到的样品进行分析和评价,确定三七总皂苷的含量和纯度。
7. 结果记录和数据处理:-记录实验过程中的操作步骤、观察结果和实验数据。
-对实验结果进行统计和数据处理,计算提取率、分离纯度等指标。
8. 结果分析和优化:-对得到的三七总皂苷样品进行分析,如测定其含量、质量和纯度。
-根据结果进行优化,可对提取时间、溶剂比例、温度等参数进行调整,以提高提取和纯化效果。
9. 产品保存:-对纯化得到的三七总皂苷进行适当的保存和储存,避免光照和潮湿等有害因素对其质量的影响。
-建议将样品存放在干燥、密封的容器中,冷藏保存以延长其稳定性和有效期。
10. 安全注意事项:-在实验过程中,注意个人防护,佩戴适当的实验手套、护目镜和实验服。
柴胡提取物中总皂苷测定方法研究陈淑;魏亚琴;索志荣【摘要】[Objective] To set up an optimal method for the determination of total saponins from RADIX BUPLEURI extracts. [Method] The determination method was optimized by single factor test according to the absorbance of total saponin. [Result] The best determination method of total saponin was; 0. 2 ml test solution was added with 0. 1 ml 0.4% p-dimethylaminobenzaldehyde ethanol solution under 70 ℃ thermostat-ic waterbath for 10 minutes, after cooling off, 4 ml phosphoric acid was added under 50℃ thermostatic waterbath for 20 minutes. [ Conclusion] The method is table and practical, and it is applicable to the determination of total saponin from RADXI BUPLEURI extracts.%[目的]考察柴胡提取物中总皂苷的最佳测定方法.[方法]以总皂苷吸光度为评价指标,采用单因素试验优选柴胡总皂苷的测定方法.[结果]总皂苷的最佳测定方法为:供试品溶液0.2 ml,加入0.4%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液0.1 ml在70 ℃反应10 min,放冷后至室温后,加入4ml磷酸在50℃下反应20 min.[结论]该方法稳定可行,适用于柴胡总皂苷的含量测定.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(040)024【总页数】3页(P11998-11999,12002)【关键词】紫外分光光度法;柴胡(RADIX BUPLEURI);总皂苷;测定方法【作者】陈淑;魏亚琴;索志荣【作者单位】西南科技大学分析测试中心,四川绵阳621010;西南科技大学分析测试中心,四川绵阳621010;西南科技大学分析测试中心,四川绵阳621010【正文语种】中文【中图分类】S121中药柴胡(RADIX BUPLEURI)为伞形科(Umbelliferae)植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)或狭叶柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)的干燥根。
总皂苷的测定方法(分光光度法)本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。
本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。
一、方法提要样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。
二、仪器1.722分光光度计。
2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。
3.超声波振荡器。
三、试剂1.甲醇(分析纯)。
2.乙醇(分析纯)。
3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。
4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL。
5.高氯酸(分析纯)。
6.冰乙酸(分析纯)。
7.人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。
8.重蒸水。
四、测定步骤1.样品处理:(1)固体样品称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离。
(2)液体样品含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离。
2.柱层析以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。
3显色在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加0.8mL高氯酸,混匀后移入l0mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出,冷却后准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后以1.0cm 比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色。
虎眼万年青总皂苷的毒理实验研究简介虎眼万年青是一种常见的植物,其总皂苷被广泛用于药物治疗和保健品中。
然而,总皂苷的毒性问题一直受到关注。
本篇文档旨在探究虎眼万年青总皂苷的毒理实验研究,以引发公众对其食用和应用的关注。
实验方法一般来讲,毒理实验分为急性毒性试验和亚慢性毒性试验两种。
下面将详细介绍两种试验的具体方法。
急性毒性试验实验目的:测试总皂苷的急性毒性水平。
实验对象:大鼠(或小鼠、兔子等)实验方法:首先,将根据动物体重确定服药剂量,接着根据皮下注射法或口服法给动物服用总皂苷,然后观察动物的行为、心率、呼吸和死亡率等生理指标,并做统计分析。
亚慢性毒性试验实验目的:测试总皂苷对于长期接触的毒性水平。
实验对象:实验动物(例如小鼠、大鼠)实验方法:分别将实验动物分为不同的组,每组动物给予不同浓度的总皂苷,每日按照给药剂量进行皮下、口服等方式的给药,给药期为数周甚至数月。
在给药期间监测动物的生长、食欲、血压、血糖等生理指标,并根据实验结果进行统计和分析。
实验结果下面将介绍不同实验方法所得出的结论。
急性毒性试验结果总皂苷具有较高的毒性,其半数致死量在1.2~2.3g/kg左右。
急性致死症状表现为呼吸急促、口角渗血、四肢抽搐,最终死亡。
亚慢性毒性试验结果在不同的浓度下,总皂苷对实验动物的毒性不同,并随着给药浓度的增加而增加。
长期接触会对肝肾功能产生损伤,还会引起一些疾病的发生和发展。
风险提示总皂苷的毒性不能忽视。
在应用和食用总皂苷时,必须严格控制剂量,不能超过安全剂量,以免对健康造成不可逆转的伤害。
结论通过毒理实验的研究,总皂苷的毒性问题已经被证实,因此,在使用虎眼万年青总皂苷时,尤其是内服时,必须注意其毒性作用。
同时,对于从事相关行业的人员和从事相关研究的科学工作者,必须加强对总皂苷的研究和监管,提高人们的毒性意识和防范意识。