人参总皂苷的含量测定

人参中总皂苷含量测定的研究作者：陈薇薇来源：《食品界》2017年第06期药材与试剂5年生园参，样品经50℃烘干粉碎后（过40目筛），密封保存备用。

甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿；以上试剂均为国产分析纯，实验用水均为蒸馏水。

人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。

仪器与设备TU-1810 型紫外分光光度计（北京普析通用仪器）。

方法对照品溶液的制备。

取人参皂苷 Re 对照品 20mg，精密称定，加甲醇溶解，定容至10ml，摇匀、滤过，即得。

供试品溶液的制备。

取供试品粉末约 1.0g（细粉），精密称定，用中性滤纸包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，弃去乙醚液，供试品药包挥干溶剂，加入甲醇浸泡过夜，次日再加入适量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次数5～6次/h，回流3次，每次2h，以人参皂苷提尽为准（定性鉴别为阴性），合并甲醇提取液，回收溶剂，少量甲醇提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。

蒸馏水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水饱和正丁醇50ml进行萃取，共4次。

取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀、滤过即得。

人参总皂苷提取定性鉴别。

供试品回流提取3次以后，取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液，用10%硫酸乙醇显色，将薄层板置通风橱内，喷10% 硫酸乙醇溶液，105℃加热。

标准曲线的绘制。

精密吸取人参皂苷Re对照品10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中，水浴挥干甲醇。

分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml，72%硫酸试液 5ml，充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min，立即用冰水冷却10min，摇匀。

以试剂做空白，照分光光度法于544nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。

稳定性考察。

精密吸取样品溶液20μl，按3.4项下方法显色，并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。

人参片的鉴定实验报告实验目的：本实验旨在通过对人参片的鉴定，了解其化学成分和药理作用，以及评价其质量。

实验原理：人参片是以生晒、砂炒或红参为原料，经过处理和加工而制得的片状制剂。

人参片含有多种活性成分，如人参皂苷、人参多糖、挥发油和人参酮等。

其中，人参皂苷是药理活性最为明显的成分，具有兴奋中枢神经、增强机体免疫功能、抗氧化、改善记忆力和抗肿瘤等作用。

实验步骤：1. 人参片外观检查：观察人参片的形状、颜色和气味，记录其外观特征。

2. 酸不溶性灰分测定：取一定量的人参片，将其加热至灰烬并在550℃±25℃下灼烧2小时，冷却后称重，计算酸不溶性灰分的含量。

3. 总皂苷含量测定：按照适当的方法，提取人参片中的总皂苷，并用紫外分光光度法测定总皂苷的含量。

4. 薄层色谱鉴别：取一定量的人参片，进行薄层色谱检测，比较色谱图与标准品的相似度。

5. 老年式药材指纹图谱鉴别：采用高效液相色谱和质谱技术，建立人参片的指纹图谱，并与标准品进行比对。

6. 药理效应观察：利用适当的方法，评价人参片的药理效应，如中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。

实验结果及分析：根据人参片的外观特征和气味，清晰地观察到片状、棕黄色且具有独特的人参味道。

经过酸不溶性灰分测定，测得其酸不溶性灰分的含量为X%。

通过紫外分光光度法测定，得到人参片中的总皂苷含量为X mg/g。

经过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别，证实人参片的组成与标准品相似度高。

在药理效应观察中发现，人参片具有明显的中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力。

结论：通过本实验的鉴定，可以得出以下结论：1. 根据外观特征和气味，判断人参片为片状、棕黄色且具有人参味道。

2. 经过酸不溶性灰分测定，确定人参片的酸不溶性灰分含量。

3. 利用紫外分光光度法测定了人参片中的总皂苷含量。

4. 通过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别，验证了人参片的质量。

5. 在药理效应观察中，人参片表现出中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。

【导言】我国药典是国家药典的统称，是指对我国境内生产、流通和使用的药品质量标准的权威性规定，是保障药品质量和使用合理、安全的基本依据。

其中，人参总皂苷含量是人参药材质量的重要评价指标，其测定方法对于保证人参药材的质量具有重要意义。

本文将对我国药典2020版中人参总皂苷含量测定方法进行详细介绍。

【正文】1. 依据依据我国药典是国家药典，是依法规定的药品标准，它规定了符合标准的药品质量要求、规范药品生产、流通和使用。

人参作为一种重要的中药材，在我国药典中有着详细的质量标准，其含有的总皂苷含量是一个至关重要的指标。

2. 人参总皂苷含量的意义总皂苷是人参中的重要有效成分之一，它具有调节免疫功能、提高机体抗氧化能力、增强心肌供血量、预防心绞痛、心肌梗死等保护心脏的作用。

测定人参总皂苷含量不仅有利于评价人参的药用价值，还能为人参的质量控制提供依据。

3. 我国药典2020版中人参总皂苷测定方法我国药典2020版中，人参总皂苷的测定方法主要包括提取、净化、分离和定量测定这几个步骤。

具体操作步骤如下：3.1 溶剂选择：首先选择合适的溶剂，如乙醇、丙酮等，将人参样品粉碎成粉末状，然后用溶剂进行提取，得到提取液。

3.2 净化分离：将提取液进行净化分离，去除杂质，得到待测液。

3.3 定量测定：采用分光光度计或者高效液相色谱仪等仪器，进行人参总皂苷的定量测定，计算出含量结果。

4. 测定方法的操作要点在操作过程中，需严格控制提取温度、时间和溶剂的体积比例，避免提取效果不佳。

净化过程中也需保证分离效果，避免杂质对测定结果的影响。

测定过程中应根据仪器的要求进行参数设置，确保测定结果的准确性。

为了保证人参总皂苷含量的测定结果的可靠性和稳定性，建议重复测定并取平均值。

5. 结论我国药典2020版中的人参总皂苷测定方法，是一种全面、准确的测定方法，可以有效地评价人参药材的质量，并为制定人参制剂的合理使用提供依据。

基于该方法，人们可以对人参药材的质量进行科学评价，保证人参产品的质量和疗效。

林下山参片人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量测定陈金鸾;孟繁玉;王振洲;张浩;朱海林;赵炳林;刘金平;李平亚【摘要】目的测定林下山参片中人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量. 方法采用以水为溶剂的加热回流法提取林下山参片中的总皂苷,经大孔吸附树脂纯化,采用香草醛-浓硫酸比色法测定人参总皂苷含量,检测波长540nm. 采用二极管阵列检测器高效液相法(HPLC-PDA)测定林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、Ro、F1、Rb2、Rb3、Rd、20 (S)-Rg3、20 (R)-Rg3、PPT、F2、Rh2、齐墩果酸和PPD共19种单体皂苷(元)的含量,用Unitary C18色谱柱( 4.6mm×250 mm,5μm) ,以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,流速为1.3mL·min-1,柱温为30℃,检测波长203nm.结果:比色法测定人参总皂苷,在42.8~171.2μg(r=0.999)范围内线性关系良好.测得样品中人参总皂苷含量为2.78%. 林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1+Rg2、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd、20(S)-Rg3、20 (R)-Rg3、F2、PPD的含量分别为0.32%、0.12%、0.09%、0.06%、0.62%、0.15%、0.15%、0.13%、0.02%、0.20%、0.10%、0.11%、0.01%、0.40%、2.48%;未检出人参皂苷F1、PPT、Rh2、齐墩果酸.结论:首次对林下山参片中的人参总皂苷及19种单体人参皂苷进行含量测定, 为林下山参片新产品的开发提供了科学依据.%OBJECTIVE:To determine the contentsof total ginsenosides and 19 monomer ginsenosides or aglycones in tablets of Panax ginseng C.A.Meyer cv. Silvatica. METHODS: The total ginsenosides were extracted through thermal reflux method by water and purified by macroreticular resin. The content of total ginsenosides was determined by vanillin - sulfuric acid colorimetry method under 540 nm. HPLC-PDA was chose to separate and detect monomer ginsenosides oraglycones Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Ro, F1, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, PPT, F2, Rh2, oleanolic acid and PPD . They were separated by Unitary C18 chromatographic column ( 4.6mm × 250 mm,5 μm), acetonitrile-0.05%phosphoric acid aqueous was chose as moving phase, flow velocity was 1.3 mL·min-1, column temperature was 30℃. The ginsenosides were detected by PDA under 203nm. RESULTS: The linear range of the colorimetric method for determination was 42.8~192.6μg(r=0.999), the content of total ginsenosides was 2.783%. The contents of ginsenosides or aglycones Rg1, Re, Rf, Rh1+Rg2, Rb1, Rc, Ro, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, F2, PPD were0.3179%,0.1243%,0.0890%,0.0576%,0.6221%,0.1518%,0.1529%,0.1285%,0.0 174%,0.2047% ,0.1020% ,0.1057% ,0.0110% ,0.3981% and 2.4830% respectively. Ginsenosides or aglycones F1, PPT, Rh2, oleanolic acid had not been detected from the sample. CONCLUSION: It is the first time to determine the contents of total ginsenosides and to determine the contents of ginsenosides or aglycones Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Ro, F1, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, PPT, F2, Rh2, oleanolic acid, PPD through HPLC-PDA, and provides scientific basis for development of new products of Panax ginseng C.A.Meyer cv. Silvatica.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P2-5)【关键词】林下山参片;人参总皂苷;单体人参皂苷;含量测定;HPLC-PDA法【作者】陈金鸾;孟繁玉;王振洲;张浩;朱海林;赵炳林;刘金平;李平亚【作者单位】吉林大学药学院,长春 130021;吉林敖东延边药业股份有限公司,敦化133700;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021;吉林省抚松县关东绿色生态参茸有限公司,抚松 134500;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021【正文语种】中文林下山参是模拟山参的生态环境，把园参籽撒到或者参苗栽到原始森林里，不进行任何人工管理，自然生长，具有和野山参相似的生长环境，无农药、化肥等残留，其质量和价值均可与野山参媲美。

红参中总皂苷及人参皂苷Rg1.Re.Rb1含量的测定刘春霖，谢强胜，李启艳，高天阳，刘慧香，蒋慧(山东省食品药品检验研究院，山东省食品药品安全检测工程技术研究中心，山东济南250101)摘要：目的测定不同产地的26批红参药材中总皂苷及人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量。

方法采用紫外可见分光光度法测定红参中总皂苷的含量，高效液相色谱法测定红参中人参皂苷Rg1、Re、Rh的含量。

结果26批红参药材中总皂苷含量为1.2%〜3.0%，人参皂苷Rg1、Re含量之和为0.17%〜0.61%，人参皂苷Rb〔含量为0.21%〜0.81%o结论不同产地的红参药材总皂苷及人参皂苷Rg1,Re.Rb1的含量存在差异,提示应进一步规范红参药材的种植、加工炮制及标准的建立。

关键词：红参;总皂苷;人参皂苷Rg〔、Re、Rb〔；含量测定中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号：2095-5375(2021)02-0087-004doi：10.13506/ki.jpr.2021.02.005Determination of total ginsenosides,ginsenosides Rg i,Re and Rb i in red ginsengLIU Chunlin,XIE Qiangsheng,LI Qiyan,GAO Tianyang,LIU Huixiang,JIANG Hui(Shandong Research Center of Engineering and Technology for Safety Inspection of Food and Drug, Shandong Institute for Food and Drug Control, Jinan250101,China)Abstract:Objective The contents of total ginsenosides,ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔in26batches of red ginseng from different habitats were determined.Methods The contents of total ginsenosides in red ginseng were determined by uv-visible spectrophotometry and ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔in red ginseng were determined by high performance liquid chromatography.Results The contents of total ginsenosides in26batches of red ginseng were1.2%~3.0%,the sum of gin­senosides Rg[and Re were0.17%~0.61%,and ginsenosides Rb〔were0.21%~0.81%.Conclusion The contents of total ginsenosides,ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔of red ginseng from different habitats were different.It is suggested that the planting, processing and establishment of standard should be further regulated.Key words:Red ginseng;Total ginsenosides;Ginsenosides Rg〔,Re,Rb〔；Determination红参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A. Mey.)的栽培品经蒸制后的干燥根和根茎。

一测多评法测定几种人参产品中人参皂苷的含量李冀;项峥;窦德强【摘要】目的建立一种简单的一测多评方法同步计算测定三种人参产品(人参茎叶总皂苷、人参皂苷三醇组、血塞通注射液)中多种皂苷成分.方法:测定人参总皂苷的指纹图谱,以人参皂苷-Rb1为基准峰,分别计算人参皂苷-Rg1、-Rb1、-Rc、-Rb2、-Rd与其的相对校正因子(RCF),外标法测定人参皂苷-Rg1、-Re、-Rb1、-Rc、-Rb2及-Rd的含量,用校正因子计算总皂苷的含量；一测多评法结果,RCF为1的结果与外标法测定结果进行比较.测定不同批号的血塞通注射液,以验证方法可行性和科学性.并对不同品牌填料及不同长度的色谱柱进行考查,评价一测多评法在复方制剂中应用的准确性和科学性.结果建立了人参总皂苷含量的简便测定方法,以一测多评法计算含量,结果与外标法结果之间的变异系数分别为0.07％、0.32％、0.14％,另外以人参皂苷-Re的RCF值为1计算测定含量,结果与外标法测定结果之间的变异系数分别为1.53％、3.87％、2.11％,三种方法无显著性差异.三种方法测得9个不同批号的血塞通注射液的总皂苷含量无明显差别,RSD＜5％.结论用本法只采用人参皂苷-Re对照品即可同时控制多种成分的含量,又能节约对照品的使用,适合中药的多指标质量评价模式的要求.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2012(024)004【总页数】6页(P2-7)【关键词】一测多评法;相对校正因子;HPLC;人参皂苷;人参【作者】李冀;项峥;窦德强【作者单位】辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600;辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600;辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600【正文语种】中文人参作为名贵中药材广泛应用于临床[1]，皂苷类化合物是其主要有效成分，目前从人参中分离鉴定的人参皂苷已有40余种，可以分为原人参二醇型和原人参三醇型。

编号:FZD0111 人参提取物中总皂甙(Total ginsenoside)含量测定方法一、试剂1%香草醛溶液：称取香草醛 1.0g加高氯酸溶解定容至100mL。

此溶液需临用新制。

77%硫酸溶液：量取77ml浓硫酸在不断搅拌下加到23ml水中冷却至室温。

二、溶液制备对照品溶液：精密称取约10mg人参皂甙Rb1对照品（或已知含量标准样品适量）于50ml容量瓶中，用甲醇溶解定容（必要时过滤取续滤液）。

样品溶液：精密称取约15mg人参提取物于50ml容量瓶中，加约30ml甲醇超声20min溶解，放至室温后以甲醇定容，过滤取续滤液。

三、样品测定与结果计算
分别精密吸取0.2ml、0.4ml、0.6ml对照品溶液、0.5ml样品溶液0.5ml甲醇于10ml具塞试管中，真空加热挥干溶剂，精密加入1%香草醛溶液0.5ml，混匀后于60℃水浴中加热15min，取出并立即放入冰水中冷却2min，随后加入77%硫酸溶液5ml，摇匀，待气泡消失后以试剂空白液（甲醇管）为参比，于550nm测吸光度。

以对照品管中皂甙绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线，由工作曲线计算样品管中皂甙绝对量(mg)。

人参总皂甙含量(%) =（C×50）/（W×0.5）×100%
式中：C为由工作曲线计算的样品管绝对量；W为样品称样量(mg)。

注：除甲醇外，其余均需平行显色两份。

人参皂苷国际标准
人参皂苷是一种天然产物，是从人参中提取的一种活性成分。

人参皂苷具有多种药理活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用，因此在药物和保健品领域有广泛的应用。

目前，人参皂苷的国际标准是根据其化学结构和含量进行评估的。

以下是人参皂苷国际标准的详细内容：
1. 化学结构：人参皂苷是一种三萜类化合物，其结构由糖基和萜环组成。

主要的人参皂苷包括Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rg3等。

2. 含量测定方法：人参皂苷的含量可以通过高效液相色谱法（HPLC）进行测定。

该方法可以同时测定多种人参皂苷的含量，并且具有高灵敏度和准确性。

3. 含量标准：根据不同的人参品种和用途，人参皂苷的含量标准有所差异。

一般来说，人参皂苷的含量应在人参总皂苷中占比较高，且主要成分Rg1和Rb1的含量应符合一定的比例关系。

4. 质量控制：人参皂苷的质量控制包括原料药的选择和加工工艺的控制。

合格的人参皂苷应采用优质的人参作为原料，并且在提取和纯化过程中要控制温度、时间、溶剂等因素，以保证人参皂苷的质量和稳定性。

需要注意的是，人参皂苷的国际标准可能会因不同国家或
地区的法规和标准而有所差异。

因此，在具体应用中，需要根据当地的法规和标准进行评估和判定。

1176　环球中医药2015年10月第8卷第10期　Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.10 and ginsenoside Rb1in ginseng.Methods　Four factors including extraction method,extraction solvent,solvent volume and extraction time were studied through single⁃factor test method.And HPLC method wasadopted to analyze the determination results of ginsenoside Rg1,ginsenoside Re and ginsenoside Rb1.Results　The best sample preparation conditions for the content determination of ginsenosides were50times70%methanol,reflux extraction and duration of2.5h.Conclusions　The improved method issimple,accurate,and reproducible which could supply a better method for the content determination of gin⁃senosides.【Key words】　Ginsenosides;　Determination;　Improvement 人参为五加科植物人参Panax gineseng C.A. Mey的干燥根和根茎,为常用名贵药材㊂人参具有大补元气㊁复脉固脱㊁补脾益肺㊁生津养血和安神益智的功效,临床上用于体虚欲脱,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,气血亏虚㊂人参中主要含有皂苷㊁多糖㊁挥发油等化学成分[1],‘中华人民共和国药典“(一部)[2]中,以人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re㊁人参皂苷Rb1为含量测定指标性成分,对其进行质量控制㊂在‘中华人民共和国药典“(一部)人参 含量测定”项下供试品溶液制备方法中,人参药材粉末采用氯仿连续回流提取,药渣挥去氯仿,再用水饱和正丁醇浸泡,放置过夜后超声处理提取皂苷类成分㊂‘中华人民共和国药典“(一部)中规定人参中人参皂苷含量限度为含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量不得少于0.30%,人参皂苷Rb1不得少于0.20%㊂在采用人参含量测定项下方法进行供试品溶液制备时,发现该方法存在以下问题:(1)该方法中,氯仿回流提取的目的是为了除去脂溶性杂质,而实际工作中发现,人参药材粉末采用氯仿连续回流提取后,氯仿提取液几乎无色,且蒸干后残渣量很少,此步骤未除去脂溶性杂质;(2)采用水饱和正丁醇提取人参皂苷时,先放置过夜(约12小时),再超声处理,此过程所需时间太长,且无实际意义,故 放置过夜”步骤可以省略;超声处理提取皂苷类成分时,发现所得正丁醇提取液颜色较浅,溶液蒸干后,所得残渣量较少,且平行操作两份差距较大㊂综合分析实验现象和结果,并结合文献[3⁃5]中方法推测,采用正丁醇作为提取溶剂进行超声处理,未能把人参中皂苷类成分提取完全,故导致含量测定结果偏低且误差较大㊂其原因可能在于正丁醇为脂溶性有机溶剂,在提取过程中,不能有效穿透细胞膜,因而不能将皂苷类成分完全溶出㊂中药指标性成分含量测定方法的正确性㊁合理性是中药质量控制和开发应用的基础㊂针对人参中人参皂苷类成分含量测定方法中供试品溶液制备过程的不合理问题,本文拟对人参中皂苷类成分含量测定中供试品制备方法进行优化,以保证人参含量测定结果的真实可靠,结果可信㊂改进后人参中皂苷类成分含量测定方法中供试品溶液制备方法简单㊁适用,结果准确可靠,重复性好,为人参科学的质量控制与评价及进一步开发应用提供科学依据㊂1　材料与仪器1.1　药材与试剂人参药材购自河北安国药材市场(三批样批号分别是1:140201CP390,2:301002041,3:20140416,经北京中医药大学生药系张贵君教授鉴定为人参Panax ginseng C.A.Mey),甲醇㊁三氯甲烷㊁正丁醇㊁乙醇(分析纯,北京化工试剂厂),乙腈(色谱纯,塞默飞世尔科技有限公司),水(娃哈哈纯净水),人参皂苷Rg1对照品(中国食品药品检定研究院,批号: 110703⁃201529),人参皂苷Re对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110754⁃201324),人参皂苷Rb1对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110704⁃201424)㊂1.2　仪器Waters1525⁃2489高效液相色谱系统,Breeze2色谱工作站(美国Waters公司),Sartorius BT25S型十万分之一电子分析天平(北京赛多利斯仪器有限公司),EQ⁃100DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),HH⁃S2二孔智控水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)㊂2　方法与结果2.1　色谱条件参照‘中华人民共和国药典“(一部)中人参含量测定项下方法色谱条件㊂SunFireC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长:203nm,流速:1.0mL/min,流动相A为乙腈,B为水,按表1中环球中医药2015年10月第8卷第10期　Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.101177规定进行梯度洗脱,理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000㊂表1　流动相梯度洗脱表时间(min)流动相A(%)流动相B(%)0~35198135~5519→2981→7155~70297170~10029→4071→602.2　对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品7.89mg,人参皂苷Re对照品8.03mg和人参皂苷Rb1对照品8.61mg,分别置于10mL量瓶中,甲醇溶解㊁稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液㊂分别精密量取人参皂苷Rg1对照品储备液2.5mL,人参皂苷Re对照品储备液2.5mL和人参皂苷Rb1对照品储备液2.3mL,置于同一10mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,摇匀,即得㊂2.3　供试品溶液制备方法的建立2.3.1　提取方式考察　(1)药典方法[2]:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷,加热回流3小时,弃去三氯甲烷,药渣挥干溶剂,连同滤纸筒移入100mL锥形瓶中,精密加入水饱和正丁醇50mL,密塞,放置过夜,超声处理30分钟,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂(2)回流提取:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂(3)超声处理:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,超声处理1小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂依上述色谱条件,精密吸取对照品溶液10μL 和上述供试品溶液20μL,分别进样分析,测定色谱峰峰面积,计算含量㊂由表2可见,采用回流提取方式,所测人参皂苷Rg1,人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量最高,故确定提取方式为回流提取㊂表2　提取方式考察结果提取方法人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)药典方法0.410.190.37回流提取0.960.53 1.60超声处理0.770.46 1.04 2.3.2　提取溶剂考察　取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具锥形瓶中,分别精密加入甲醇㊁70%甲醇㊁50%甲醇和乙醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2小时,取出,补足减失的重量,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣分别加甲醇㊁70%甲醇㊁50%甲醇和乙醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂由表3可见,以70%甲醇作为提取溶剂,所测人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1含量高于其他提取溶剂结果,故选择提取溶剂为70%甲醇㊂表3　提取溶剂考察结果提取溶剂人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)甲醇0.900.50 1.61 70%甲醇 1.260.54 2.18 50%甲醇 1.260.54 2.06乙醇0.760.45 1.22 2.3.3　提取时间考察　取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入70%甲醇50mL,称定重量,加热回流1小时,1.5小时,2小时,2.5小时,3小时,取出,放冷,补足减失的重量,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加70%甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂由表4可见,加热回流2.5小时后人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量基本不再增加,故选用2.5小时作为提取时间㊂表4　提取时间考察结果提取时间人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%) 1小时 1.350.66 1.98 1.5小时 1.350.67 2.122小时 1.370.65 2.23 2.5小时 1.360.67 2.553小时 1.360.67 2.591178　环球中医药2015年10月第8卷第10期　Global Traditional Chinese Medicine,October2015,Vol.8,No.10 2.3.4　溶剂倍量考察　取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别精密加入70%甲醇30mL(30倍量),40mL(40倍量),50mL(50倍量),60mL(60倍量),称定重量,加热回流2.5小时,取出,补足减失的重量,过滤,分别取续滤液15mL㊁20mL㊁25mL㊁30mL置蒸发皿中蒸干,残渣加70%甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂表5数据说明,采用50倍和60倍70%甲醇提取,所测人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量基本相当,故选择50倍作为提取倍量㊂表5　溶剂倍量考察结果溶剂倍量(ml/g)人参皂苷Rg1含量(%)人参皂苷Re含量(%)人参皂苷Rb1含量(%)30 1.370.66 2.1640 1.370.66 2.1850 1.380.65 2.2760 1.400.66 2.24综上,人参中皂苷类成分含量测定供试品溶液制备最佳方法为:取人参药材粉末(过4号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流2.5小时,取出,密塞,放冷,补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液25mL,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解,转溶至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得㊂2.4　样品测定取市售三批人参药材样品,按样品供试品溶液制备方法制备,测定色谱峰峰面积,计算含量㊂结果见表6㊂表6　三批样品测定结果(n=3)批号人参皂苷Rg1含量(%)RSD(%)人参皂苷Re含量(%)RSD(%)人参皂苷Rb1含量(%)RSD(%)1 1.39 2.440.70 2.70 2.22 2.082 3.05 1.09 1.480.86 4.12 1.393 1.110.900.800.38 1.53 1.303　讨论3.1　提取方式选择通过比较药典方法㊁回流提取和超声处理的含量测定结果,发现药典方法测定结果明显偏低㊂采用回流提取不仅可以缩短样品处理时间,省去氯仿除杂环节,节省有机溶剂,减少实验步骤,同时可以提高人参皂苷提取率,保证实验结果的准确度和重复性㊂3.2　提取溶剂选择比较甲醇溶液提取与乙醇溶液提取的含量测定结果,乙醇提取率明显较低㊂进一步研究发现70%甲醇提取率略高于50%甲醇溶液提取率,且在实验中发现,采用50%甲醇作为提取溶剂,提取得到的水溶性杂质较多,故选择提取溶剂为70%甲醇溶液㊂3.3　提取时间选择比较1小时㊁1.5小时㊁2小时㊁2.5小时和3小时回流提取含量测定的结果,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量基本不变,人参皂苷Rb1的含量随时间延长明显增加,2.5小时后基本不再增加,故选2.5小时作为提取时间㊂3.4　溶剂倍量选择实验中采用50倍量和60倍量70%甲醇提取时,人参皂苷Rg1㊁人参皂苷Re和人参皂苷Rb1总含量大致相同,考虑节省成本,本实验采用50倍量70%甲醇提取㊂此外,研究过程中还发现采用本方法处理样品,人参皂苷提取率会明显增加,若以此法测定人参中人参皂苷的含量,其含量限度的制订尚待进一步深入研究㊂参考文献[1]　徐静,贾力,赵余庆.人参的化学成分与人参产品的质量评价[J].药物评价研究,2011,34(3):199⁃203.[2]　国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:8.[3]　曲帅.人参有效活性成分的提取分离及含量测定[D].长春:吉林大学,2013.[4]　杨雨,郑斯文,金银萍,等.人参皂苷的提取分离方法研究进展[J].江苏农业科学,2014,42(5):214⁃217.[5]　乔雪,李月茹.黑参中7种人参皂苷含量测定[J].人参研究,2012,24(1):10⁃12.(收稿日期:2015⁃05⁃28)(本文编辑:董历华)。

人参总皂苷Renshen ZongzaoganTOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT本品为五加科植物人参JPanaa: ginseng C. A. Mey. 的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。

【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2 小时，第二次1. 5 小时，煎液滤过，合并滤液，通过D 1 0 1型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用6 0 %乙醇洗脱，收集60% 乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06?1.08(80°C)的清膏，干燥，粉碎，即得。

【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，昧苦;具吸湿性。

本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙米或石油米中几乎不溶。

【鉴别】（1)取本品O.lg，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。

(2)取本品O.lg，加甲醇10ml使’溶解，作为供试品溶液;另取人参对照药材lg，加水100ml煎煮2 小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1cm，柱高为15cm) ,用水洗至无色，弃去水液，再用6 0 %乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残淹加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。

再取人参皂苷R b i对照品、人参皂苷R gl对照品与人参皂苷R e对照品，加甲醇溶解制成每lml各含2 m g 的混合溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(通则0502)试验'，吸取上述三种溶液各2M1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15 : 40 : 22 : 10) 1 0 1以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 0 %硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365mn)下检视。

供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

【检査】粒度依法检查（通则0982第二法），能通过1 2 0目筛的粉末不少于95% 。

紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量
田健;朱凯
【期刊名称】《吉林中医药》
【年(卷),期】2016(036)008
【摘要】目的用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量.方法采用超声提取法对人参进行提取,再采用水饱和正丁醇对人参提取溶液进行萃取,用紫外可见分光光度法测定其吸光度值.结果测得的最大吸收波长为540 nm,人参皂苷Re在7.287～80.16 μg/mL范围内的线性关系良好.精密度RSD值为0.44％,平均回收率为104.33％.结论用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量,简便易行,精确度高,测定速度快.
【总页数】3页(P832-834)
【作者】田健;朱凯
【作者单位】长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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人参总皂苷含量测定方法嘿，咱今儿就来唠唠人参总皂苷含量测定方法这档子事儿！你说人参，那可是好东西呀，从古至今都被人们看重。

那要怎么知道这人参里总皂苷含量有多少呢？这可就有讲究啦！咱先说说常见的一种方法，比色法。

就好像咱挑苹果，得看看它红不红，甜不甜。

比色法就是通过一些特定的试剂和人参提取液反应，然后根据颜色的变化来判断总皂苷的含量。

你想想，这就像给人参做了个特别的“体检”，能让咱清楚知道它里面的宝贝有多少呢！还有高效液相色谱法，这就好比是给人参总皂苷做了个精准的“画像”。

它能把各种不同的皂苷都分得清清楚楚，然后准确地告诉你每种的含量。

就像是把一个大拼图给完整地拼出来了，多厉害呀！再说说香草醛-硫酸法，这就好像是给人参总皂苷来了一场特别的“显色派对”。

通过香草醛和硫酸的作用，让总皂苷显现出来，然后咱就能根据颜色的深浅来判断含量啦。

每种方法都有它的特点和适用情况呢！就像咱出门穿衣服，不同场合得穿不同的衣服。

测定人参总皂苷含量也得根据具体情况选择合适的方法呀！比如说，如果样品比较复杂，那可能高效液相色谱法就更合适；要是想要快速简单地测一下，比色法可能就派上用场啦。

那咱为啥要这么在意人参总皂苷的含量呢？这还用问吗？就像咱买东西得知道它值不值那个价呀！知道了含量，才能更好地了解人参的品质和价值。

这对那些研究人参的科学家们，对那些想用好人参的人来说，可太重要啦！你说要是没有这些测定方法，咱不就像在黑暗中摸索吗？那可不行！这些方法就像是我们了解人参的“眼睛”，让我们能看清人参的真面目。

总之，人参总皂苷含量测定方法可是个大学问呢！咱得好好研究，好好利用，才能让这神奇的人参发挥出它最大的作用呀！你说是不是这个理儿呢？。

人参皂苷测定及其药理作用的研究概况摘要：人参(P anax g inseng C. A. M eyer) 为五加科人参属植物, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等作用〔1〕。

现代药物学研究证明: 人参皂苷(ginsenoside) 是人参中重要的活性物质, 因此人参皂苷含量的多少评价人参内在质量的重要指标之一。

迄今为止, 人们已从人参各部位(人参根、芦头、茎叶、花、花蕾及参果) 共分离得到20 多种人参皂苷, 可分为20S2原人参二醇(p rotopanaxadiol) 类、20S2原人参三醇(p rotopanaxatriol) 类和齐墩果酸(oleanolic acid)类三类。

对于人参中人参皂苷的含量测定, 国内外研究的都比较多, 常用的测定方法主要有: 高效液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法及重量法等。

本文主要讨论这些方法测定的结果, 即不同采收期和不同年限的人参中人参皂苷的含量变化, 以及人参各部位人参皂苷的含量变化等, 以期为综合利用人参资源, 扩大人参药用部位, 合理进行人工种植和炮制提供一定参考。

关键词：人参皂苷人参总皂苷八种主要皂苷含量测定药理作用1、人参总皂苷的测定1.1 样品的制备取人参粉（40目）1g，置50ml磨口圆底烧瓶中，精密加入甲醇25ml与沸石少许，摇匀，称重，放置过夜后于水浴中保持微沸回流6小时，添加甲醇至原重离心分离，精密吸取上清液5或10ml（视含量而定），挥去甲醇，将提取物残渣仔细移入1ml容量瓶中，容器用少量甲醇洗涤，洗液合并，精密稀释至刻度。

1.2 总皂苷的测定用微量注射器吸取上述样品溶液10至20μl（视皂苷含量而定），在硅胶薄层上点成线状，用氯仿-甲醇-水（70:55:10）展开，依溶剂达到顶端，将板取出，使溶剂然全挥去，置碘蒸气中数秒，待色点刚显出，立即取出，画出斑点位置，用冷风将碘完全吹尽，用小刀将色点刮入10ml磨口带塞试管中，精密加入5%香荚醛-冰醋酸溶液0.2ml与高氯酸0.8ml，混匀，密塞置60℃水浴中加热15分钟，立即冷却，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，离心，取上清液在波长560nm处比色测定，同时取与色点同样大小的空白硅胶加显色剂显色，作为空白对照。

人参总皂苷含量标准一、皂苷种类本标准所指的人参总皂苷，主要由以下几种皂苷组成：1.人参皂苷Rg12.人参皂苷Re3.人参皂苷Rb14.人参皂苷Rb25.人参皂苷Rc6.人参皂苷Rd二、含量要求人参总皂苷的含量要求如下：1.最低含量：每克人参总皂苷应至少包含上述六种皂苷中的任何一种，且其含量不得低于0.2%。

2.含量比例：在满足最低含量的前提下，各种皂苷的含量比例应符合以下要求：o人参皂苷Rg1：0.5%-15%o人参皂苷Re：0.5%-15%o人参皂苷Rb1：0.5%-20%o人参皂苷Rb2：0.5%-10%o人参皂苷Rc：0.5%-10%o人参皂苷Rd：0.5%-10%三、质量标准1.外观：人参总皂苷应为淡黄色或类白色粉末。

2.纯度：通过HPLC（高效液相色谱法）检测，应显示单一的皂苷峰，纯度不低于90%。

3.溶解度：在常温下，人参总皂苷应能完全溶解在水中。

4.含水量：含水量应不超过5%。

5.重金属含量：重金属含量应不超过0.001%。

6.微生物限度：应符合相关卫生标准。

四、安全性评估1.无毒性：在规定的使用剂量下，人参总皂苷应无急性毒性反应。

2.长期毒性：在长期使用的情况下，应无慢性毒性反应。

3.致畸、致突变性：应无致畸、致突变性。

4.过敏性：应无过敏性反应。

五、生产工艺控制1.提取工艺：应采用安全、环保的提取工艺，如水提、醇提等。

在提取过程中，应尽量避免使用化学试剂。

2.分离纯化工艺：应采用高效的分离纯化工艺，如高速离心、膜过滤等，以确保产品质量。

3.干燥工艺：应采用适当的干燥工艺，如真空干燥、喷雾干燥等，以防止产品质量下降。

4.生产环境：生产环境应符合相关卫生标准，防止产品受到污染。

5.批次管理：应对每批产品进行批次管理，以确保产品质量的一致性。

6.生产记录：应对每批产品的生产过程进行详细记录，以便于追踪和查找问题。

六、储存运输要求1.储存条件：人参总皂苷应储存在阴凉、干燥、通风、避光的地方，储存温度应保持在25℃以下。