分光光度计的种类
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基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,称为吸光光度法。
根据物质对不同波长范围的光的吸收,吸光光度法包括比色分析,可见与紫外分光光度法以及红外吸收光谱分析等。
包括比色分析和分光光度法的吸光光度法(简称光度法),历史悠久,应用十分广泛。
它是现代分析化学中的“ 常规武器” 。
其主要特点为:1 、灵敏度高:与滴定分析和重量法相比,光度法具有很高的灵敏度,测定物质的浓度下限(最低浓度)一般可达10-5~10-6 mol?L-1,相当于含量低于0.01 ~0.001 %的微量组分。
2 、准确度较高:分光光度法的相对误差一般为2 ~5 %,但对微量组分的测定是允许的。
例如测定试样中含量为0.02 %的杂质,即使相对误差为±5 %,则测定的结果为0.019 ~0.021 %,这样的结果应该认为是很准确的。
3 、操作简便、快速、应用广泛:比色分析和分光光度法无需复杂,昂贵的仪器设备,操作也比较简便,分析速度快。
例如钢铁中Mn 、P 、Si 三元素的快速比色分析,一般在 3 -4min 内可报出结果。
几乎所有无机离子和许多有机化合物都可直接或间接地用光度法测定。
本章主要讨论比色分析和可见光区的吸光光度法。
1 物质对光的选择性吸收1.1 光的基本性质比色分析和分光光度法的依据是物质对光的选择性吸收。
为此,必须对光的基本性质有所了解。
我们知道,光是一种电磁辐射,具有波动性和微粒性。
光在传播时表现了它的波动性,例如光的折射、衍射、偏振和干涉等现象。
描述波动性的主要物理量是波长(λ )、频率(ν )和速度(с ),它们的关系是:λν =с式中с 为光速,在真空中约等于3×108 m ·s-1;ν 为光的频率,以Hz 表示;λ 为光的波长,在紫外和可见光区,以纳米(1nm=10-9 m )为单位。
波长在400 ~760 nm 范围内的电磁辐射,人眼可以看见,称为可见光;波长在10 ~400 nm 是紫外光区。
分光光度计的种类
分光光度计是一种用来测量各种物质的发射、消光和透射能力的仪器。
它可以帮助我们分析物质的结构和其它性质,以便更好地了解科学问题。
目前,市场上有许多不同类型的分光光度计,主要分为三大类:紫外-可见分光光度计、近红外分光光度计和流式分光光度计。
紫外-可见分光光度计是最常见的分光光度计,它使用一台光源,如紫外线灯或可见光灯,将光照射到样品上,然后通过检测器测量样品的反射或消光强度。
它可以用来测定各种物质的紫外-可见光谱,从而分析物质的结构、含量和比例。
此外,在食品、环境监测以及生物医药等领域,紫外-可见分光光度计也有广泛应用。
近红外分光光度计是结合了传统分光光度计和近红外分析仪的仪器,它可以测量不同物质的近红外光谱,从而进行结构分析。
此外,近红外分光光度计还可以用来研究影响近红外光谱的各种因素,如温度和PH值。
流式分光光度计是近年来发展起来的新型数据收集仪器,可以测量高流量液体中各种物质的紫外-可见光谱。
它的优势是可以每秒钟同时测量几万个点的信息,可以用于快速分析流体成分的组成和变化,在液体检测、分类识别、过滤等应用中发挥着重要作用。
紫外分光光度计设备介绍培训考核一、选择题(每题5分,共10题,共50分)。
1.紫外-可见分光光度计的类型包括()。
(多选) *A.单光束分光光度计(正确答案)B.双光束分光光度计(正确答案)C.比例双光束分光光度计(正确答案)D.比例单光束分光光度计2.在紫外可见分光光度法测定中,使用参比溶液的作用是〔 D )。
[单选题] *A.调治仪器透光率的零点(正确答案)B.吸取入射光中测定所需要的光波C.调治入射光的光强度D.除掉试剂等非测定物质对入射光吸取的影响3.摩尔吸光系数的单位为〔 B )。
[单选题] *A.mol·cm/L(正确答案)B.L/(mol·cm)C.mol/(lL·cm)D.cm/(mol·L)4.下述操作中正确的选项是〔 C )。
[单选题] *A.比色皿外壁有水珠(正确答案)B.手捏比色皿的磨光面C.手捏比色皿的毛面D.用报纸去擦比色皿外壁的水5.一束()通过有色溶液时,溶液的吸光度与浓度和液层厚度的乘积成正比。
[单选题] *A.平行可见光B.平行单色光(正确答案)C.白光D.紫外光6.双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于()。
[单选题] * A.光源的种类及个数B.单色器的个数(正确答案)C.吸收池的个数D.检测器的个数7.下列哪种方法属于分光光度分析的定量方法()。
[单选题] *A.工作曲线法B.直接比较法C.校正面积归一化法(正确答案)D.标准加入法8.紫外-可见光分光光度计的单色器有()。
(多选) *A.棱镜(正确答案)B.氚灯C.光栅(正确答案)D.汞灯9.在有杂散光存在下测量样品的吸光度值时,所测量的值总是()真实值。
[单选题] *A.高于B.等于C.低于(正确答案)10.目视比色法中常用的标准系列法是比较() [单选题] *A.入射光的强度B.透过溶液后光的强度C.透过溶液后吸收光的强度(正确答案)二、判断题(每题5分,共10题,共计50分)。
第十三章 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法(atomic absorption spectrophotometry, AAS)又称为原子吸收光谱法。
它是本世纪60年代后期迅速发展和广泛应用的一种较新型的仪器分析方法。
1955年澳大利亚物理学家瓦尔西(A.Walsh)在墨尔本展出了由他设计的第一台原子吸收分光光度计。
原子吸收分光光度法是基于物质产生的原子蒸气对特征谱线的吸收,测量原子蒸气对光辐射的吸收,即通过测量基态原子对特征谱线吸收程度,进行定量分析方法。
AAS法同UV法同属于吸收光谱法,因此在基本原理和仪器基本组成等方面有某些相似。
然而UV法研究对象是溶液中化合物的分子吸收,分子吸收的谱带较宽(在几nm以上),为带状吸收光谱,而原子吸收分光光度法研究对象是原子蒸气,气态原子吸收是窄带吸收,即线吸收,线宽仅为千分之几纳米(约为10-3 nm,极窄吸线)。
由于这种区别,致使它们的仪器装置和分析方法都有不同,由图比较,就可以看出二者的主要区别:(1)原子吸收分光光度法采用原子化器代替了吸收池;(2)用空心阴极灯(锐线光源)代替了连续光源;(3)单色器位置放在原子化系统之后。
原子吸收分光光度法具有如下特点:(1)灵敏度高。
火焰原子吸收法灵敏度高达可测到10-6~10-9g/ml,用无火焰原子吸收光谱法可没到10-9mg/ml数量级。
1(2)干扰少,且易于消除。
由于原子吸收光谱法是根据原子蒸气对待测元素特征谱线的吸收来进行分析的。
特别是同族元素,不需预分离,就可以直接测定。
(3)分析速度快。
由于选择性好,化学处理的测定操作简便。
近年来,微机的广泛应用以及智能化仪器的出现,与自动进样器、荧光显示屏的打印机等相配合,可在30分钟内分析50个样品中6元素。
(4)准确度高。
±1~3%误差。
(5)应用范围广。
几乎全部金属元素和一些准金属元素,目前用原子吸收分光光度法可测定元素已达70多种。
缺点:通常每个元素都要有自已的灯作为光源,因而附件多。
分光光度计的种类
分光光度计是用来测量光的强度的仪器,这种仪器可以测量波长
在可见光段的幅值,精度可以达到千分之一以上。
它通常分为三种类型:近红外分光光度计、可见光/紫外分光光度计和全光谱分光光度计。
1. 近红外分光光度计:使用基于近红外技术的专业仪器,可以检
测室内温度、湿度、光照度、环境压力、天气状况和污染物含量等参数,也可以测量星系中光频率的变化。
2. 可见光/紫外分光光度计:主要用于测量波长范围在
400nm~750nm之间的可见光和紫外光,精度可达到百分之一以上,常见
的紫外分光光度计可以用来测量测试光照度、紫外线强度、激发源的
能量分布和其他用于传感的实验检测等。
3. 全光谱分光光度计:这是一种将光的波长分解成不同区段的分
光光度计,可以用来测量宽幅度的光谱,测试当前样本中所有可见光
和紫外光含量,也可以用来测量源光光谱,从而推断样本的性质和含量。
分光光度计一.分光光度计基本结构简介能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。
分光光度计因使用的波长范围不同而分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。
无论哪一类分光光度计都由下列五部分组成,即光源、单色器、狭缝、样品池,检测器系统。
(1)光源要求能提供所需波长范围的连续光谱,稳定而有足够的强度。
常用的有白炽灯(钨比灯、卤钨灯等),气体放电灯(氢灯、氘灯及氙灯等),金属弧灯(各种汞灯)等多种。
钨灯和卤钨灯发射320-2000nm连续光谱,最适宜工作范围为360-1000nm,稳定性好,用作可见光分光光度计的光源。
氢灯和氘灯能发射150-400nm的紫外结,可用作紫外光区分光光度计的光源。
红外线光源则由纳恩斯特(Nernst)棒产生,此棒由ZrO2:Y2O3=17:3(Zr为锆,Y为钇)或Y2O3,GeO2(Ge为铈)及ThO2(Th为钍)之混合物制成。
汞灯发射的不是连续光谱,能量绝大部分集中在253.6nm波长外,一般作波长校正用。
钨灯在出现灯管发黑时应及更换,如换用的灯型号不同,还需要调节灯座的位置的焦距。
氢粘及氘灯的灯管或窗口是石英的,且有固定的发射方向,安装时必须仔细校正接触灯管时应戴手套以防留下污迹。
(2)分光系统(单色器)单色器是指能从混合光波中分解出来所需单一波长光的装置,由棱镜或光栅构成。
用玻璃制成的棱镜色散力强,但只能在可见光区工作,石棱镜工作波长范围为185 ̄4000nm,在紫外区有较好的分辩力而且也适用于可见光区和近红外区。
棱镜的特点是波长越短,色散程度越好,越向长波一侧越差。
所以用棱镜的分光光度计,其波长刻度在紫外区可达到0.2nm,而在长波段只能达到5nm。
有的分光光系统是衍射光栅,即在石英或玻璃的表面上刻划许多平行线,刻线处不透光,于是通过光的干涉和衍射现象,较长的光波偏折的角度大,较短的光波偏折的角度小,因而形成光谱。
科技论文写作期末作业西北民族大学生命科学与工程学院11级生物技术(1)班符朝方学号:P112114841紫外可见分光光度计及其应用李诗哲西北民族大学生命科学与工程学院兰州730100摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一,几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。
下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点,并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业,紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。
2原理:紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法【1】是根据物质分子对波长为200~760nm 的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长的光线能量小,波长短的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱【2】有机化合物的电子跃迁与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4],即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。
跃迁类型有:σ→σ*、n→σ*,π→π*、n→π四种。
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*,n→σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。
分光光度计的种类
分光光度计是一种用于测量各种液体、气体、固体等物质的光吸收度的科学仪器。
通过不同波长的光以及样品对光的不同吸收,分光光度计能够分析出样品中所含的化学物质浓度、反应动力学等信息。
在生化、医学、环境等领域,分光光度计是不可或缺的工具之一。
本文将介绍分光光度计的种类及其特点。
一、单波段分光光度计
单波段分光光度计指的是在一定的波长范围内进行测量的光度计。
这种光度计的原理是:当样品中的化合物吸收入射光时,光强减弱,根据比例关系,可以推算出物质的浓度。
例如,在DNA分子的260nm波长处测量吸光度,可以用来测定DNA浓度。
单波段分光光度计测量精度高,而且便于使用,但对于多个化合物的混合物无能为力,对于样品的预处理和纯化也有严格的要求。
二、双波长分光光度计
双波长分光光度计则是指在两个不同波长下进行测量的光度计,从而减小了背景干扰及样品浓度变化等因素的影响。
这种光度计通常是具有408nm和550nm两种波长的双信道光度计。
双波长分光光度计能够同时测量两种化合物的吸光度,适用于多成分混合物的测量,测量精度相对于单波段分光光度计有所提高。
三、分光比色计
分光比色计是指在两个不同波长下,比较样品与标准溶液的吸光度差异,同时进行测量的光度计。
这种技术可以测量非色谱性物质,如蛋白质和其他生化大分子的浓度,其测量精度非常高。
分光比色计的优点是不受背景的影响,例如色素、脂肪和杂质等。
四、荧光分光光度计
荧光分光光度计是一种测量荧光的强度和特征的分光光度计。
荧光分光光度计可以用来定量测量样品中含有的荧光物质,如荧光染料、 DNA、 RNA、蛋白质等。
荧光分光光度计的测量原理是样品吸收紫外线,激发荧光物质分子,当分子从高能态退回到激发态时,会辐射出一定波长的光谱,被荧光探测器记录下来。
荧光分光光度计具有高的灵敏度和选择性,广泛应用于医学、环境科学、材料科学等领域。
综上所述,不同应用领域中需要不同的光度计种类。
在进行测量前应根据需要选用适当的光度计。
随着科学技术的不断发展,分光光度计也在不断的创新发展,例如多光束分光光度计、激光光度计等。
对于研究人员来说,善于选择和使用适当的仪器、设备,对于他们开展相关研究具有非常重要的意义。