磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷精选文档

固相萃取-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐梁英;袁东星;林庆梅【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2005(33)8【摘要】磷钼蓝(PMB)与十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)可生成疏水性的PMB-CTMAB离子缔合物,被Sep-Pak C18小柱萃取富集,基于此建立了SEP-PAK C18小柱固相萃取-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐的新方法.对洗脱液酸度、萃取流速、试剂用量、反应时间与温度等实验参数进行了优化选择,并考察了盐度对测定结果的影响.实验结果表明,PMB-CTMAB在SEP-PAK C18小柱上可被有效地定量萃取;盐度在25～45范围内,对测定结果没有影响.在优化的实验条件下,以盐度为35的人工海水作为基底,方法的线性范围为0.18～4.00 μg/L;平均回收率为98.5%;检出限为0.05 μg/L.对实际海水中痕量活性磷酸盐进行测定,相对标准偏差(RSD)为2.7%～5.6%.与广泛采用的MAGIC法比较,结果无显著差异.新方法具有消耗试样体积少、测定速度快等优点.【总页数】5页(P1053-1057)【作者】梁英;袁东星;林庆梅【作者单位】厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学环科中心,厦门,361005;厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学环科中心,厦门,361005;厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学环科中心,厦门,361005【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.钼锑抗分光光度法测定海水中活性磷酸盐的浓度 [J], 王清华2.海水中活性磷酸盐的导数分光光度法测定—磷钼黄-罗丹明6G体系 [J], 王尊本3.紫外分光光度法测定水中活性磷酸盐的不确定度评定 [J], 刘瑜4.海水中活性磷酸盐的导数分光光度法测定(磷钒钼蓝-罗丹明B-明胶-OP体系) [J], 王尊本;郑朱梓;杜彦梅5.沉淀分离富集-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐 [J], 梁英;袁东星;林庆梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

实验十九海洋沉积物中磷分级提取及生物可利用磷的估算一、实验目的1、掌握海洋沉积物中磷分级提取方法2、学会估算海洋沉积物中生物可利用磷二、实验原理磷是海洋浮游植物生长的重要营养元素，也是引发水体富营养化的重要因素。

近年来，近岸海域由富营养化引起的赤潮灾害爆发频率逐年增加，导致海洋生物系统的退化。

海底沉积物是海水磷的“源”与“汇”，它既可接受来自水体的磷，也可以在适当的条件下向上覆水体释放磷，从而进一步加剧水体的富营养化水平。

沉积物在生源要素磷的循环过程中起着十分重要的作用，从某种意义上，对沉积物中磷的形态研究是进行磷的海洋生物地球化学循环研究的前提，也是预防赤潮发生及进行海域污染治理和保护的保障。

海洋沉积物中磷含量不高，根据沉积物中磷的结合态和化学性质的差异，可将其分为无机磷和有机磷，如下图所示：磷灰石磷（AIP）：Ca-P无机磷（IP）总磷（TP）非磷灰石磷（NAIP）：（Fe+Al）-P有机磷（OP）研究表明，分离和定量测定海洋沉积物中各种形态磷的最理想的方法是化学试剂提取法。

化学试剂提取法是基于给定提取剂对某一结合形式磷选择性的操作性定义，该方法要求样品中磷的含量大于0.005％，精密度可达4％。

本实验采用MgCl2、NaOH和HCl对海洋沉积物中磷进行三步提取，以便估算沉积物中磷的生物可利用性。

第一步用MgCl2提取磷，包括了悬浮物中浮游植物细胞内的磷和吸附于悬浮颗粒物中水合氧化物表面的磷。

第二步用NaOH提取磷，提取的主要是颗粒物中被Fe、Al水合氧化物吸附的磷和一部分铁铝磷酸盐，这部分磷被称为是Fe-P、Al-P。

第三步用HCI提取磷，提取的主要是磷灰石磷，这部分磷难以被生物所利用。

因此，能被生物所利用的磷是MgCl2提取相和NaOH 提取相的磷。

三、实验步骤1.海洋沉积物中总磷（TP）消解平行称取40mg站位3的沉积物三份，分别放入50mL具塞玻璃比色管中，再加入5%K2S2O8 10mL和6mol/L H2SO4 0.83mL,盖上塞子，用保鲜塑料扎紧瓶口(防止高温高压后溶液沸腾溢出)，于120C高压消解0.5h,自然冷却至室温。

水中磷和磷酸盐的测定（二）三、测定办法目前常常检测的项目为溶解性总磷和总磷。

水样中的测定办法有分光光度法、离子色谱法、电感耦合等离子体质谱法等。

分光光度法测定的是正磷酸盐；离子色谱法可在适当的条件下对某些形式的可溶性分离测定；电感耦合等离子体质谱法是对磷元素举行测定，办法敏捷度高，但所用仪器过于复杂昂贵。

应用最多的是分光光度法，按照所用试剂或技术，分光光度法又可分为分光光度法、钒酸铵分光光度法和流淌注射分光光度法及延续流淌分光光度法等数种。

钒酸铵分光光度法挑选性好，干扰少，但敏捷度比较低，多用于高含量磷的分析；目前常用的是钥酸铵分光光度法，它分为钼蓝分光光度法和钼锑抗分光光度法，两者区分主要在于用法的还原剂不同，前者以SnCl2为还原剂，因为SnCI2的还原能力强，反应过程中剩余的SnC12尚能还原钼酸铵，造成显色不稳定；后者是以抗坏血酸为还原剂，在锑盐()存在下发生反应，因为抗坏血酸是中等强度还原剂，克服了SnCl2 的缺点，显色越发稳定。

1．分光光度法 (1)钼酸铵分光光度法(钼蓝光度法)：水中的正磷酸盐在酸性条件下，与钼酸铵反应生成淡黄色的磷钼杂多酸，再用还原剂SnC12还原，生成深蓝色协作物(钼蓝)，一定浓度范围内，其色彩深浅与正磷酸盐含量成正比，于700nm波长测定吸光度，与标准比较定量。

本办法适用于生活饮用水及其水源水或生活污水中总磷的测定，其最低检测质量浓度(以PO43-计)为0.1mg/L，若取50ml水样测定，则最低检测质量为5ug，测定上限为10mg/L。

移取一定体积消解液于比色管中，依次加入钼酸铵-硫酸溶液和氯化亚锡溶液，混合匀称，10分钟后，测其吸光度，标准曲线法定量。

注重事项：①生活饮用水和其水源水组成容易，测定溶解性总磷时，经0.45um滤膜或中速滤纸过滤的滤液无需消解，可挺直测定。

②钼酸铵浓度、还原剂含量、反应温度准时间均对显色产生影响；温度上升1℃，色泽增强1%，因此水样和标准溶液的显色温度应全都，如室温变动显然，需重新制作标准曲线。

磷钼黄分光光度法测定水样中的磷酸盐一、实验目的（1）掌握分光光度计的使用方法（2）学会选择分光光度计测定磷酸盐的条件（3）掌握磷钼黄分光光度法测定水样中的磷酸盐的原理和方法二、实验原理1、在强酸条件下，水样中的磷酸盐与钼酸铵反应，生成淡黄色的磷钼黄。

2、磷钒钼酸可在波长420nm的波长下测定3、通过比色法可测出水样中磷酸盐的含量4、2H3PO4+22(NH4)2MoO4+2NH4VO3+23H2SO4=P2O5・V2O5・22MoO4+23(NH4)2SO4+26H2O三、实验仪器与试剂仪器:分光光度计，分析天平实验试剂：磷酸盐标准溶液（1ml含1mgPO43-）钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色溶液（钼钒酸显色溶液）四、实验步骤1.吸收曲线的绘制吸取0.0mL、1.0mL磷酸盐标准溶液于两个50mL容量瓶→15mL硫酸，摇匀→5mL 钒钼酸显色液→摇匀定容→1cm比色皿→以试剂空白为参比溶液→在340nm-450nm之间，每隔10nm测一次吸光度值→在最大吸收峰处每隔2nm测一次吸光度→记录数据2.显色剂用量的选择取七个50mL的容量瓶→各加入1mL磷酸盐标准溶液→加入15mL硫酸→分别加入0.20mL、0.5mL、1.0mL、3.0mL、5.0mL、7.0mL、9.0mL钒钼酸显色液→摇匀→稀释至刻度线→1cm比色皿→蒸馏水为参比溶液→在最大吸收波长处测定各溶液吸光度→记录数据。

3.标准曲线的绘制：1mL磷酸盐标准溶液→100mL容量瓶→定容→7个50mL的容量瓶中分别加入0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL磷酸盐稀释溶液→钼矾酸显色剂→摇匀稀释→1cm比色皿→试剂空白为参比溶液→最大吸收峰处测各溶液的吸光度→记录数据4．水样的测定：2mL水样→50mL容量瓶→按标准曲线的制作步骤加试剂→以试剂空白作参比→测量吸光度→记录数据五、实验记录及数据处理=V显水=C水。

化验室磷钼蓝分光光度法测定水质总磷酸盐操作规程一、引用标准《GBT6913-2008-锅炉用水和冷却水分析方法磷酸盐的测定》二、方法原理在强酸性溶液中，用过硫酸钾作分解剂，将聚磷酸盐和有机磷转化为正磷酸盐，正磷酸盐与钼酸铵溶液反应生成黄色的磷钼盐锑络合物，在用抗坏血酸还原成磷钼蓝后，于710nm最大吸收波长处用分光光度法测定，适用于总磷酸盐含量为0.05～50mg/L的水样。

二、仪器与试剂1、同无机磷酸盐的试剂。

2、过硫酸钾溶液40g/L：称取20.0g过硫酸钾，溶液500mL的水中，摇匀。

保质期：一个月。

三、分析步骤1、标准曲线的绘制：标准曲线与正磷酸盐标准曲线用法通用。

2、水样的测定：移取10mL的试样于100mL锥形瓶中，加入1.0mL硫酸溶液，使pH值小于1。

5.0mL过硫酸钾溶液，小火煮沸近30min，煮沸时，随时添加水，体积维持在25～30mL之间冷却。

用氢氧化钠溶液将pH值调节至3～10，转移至50mL比色管中，加入2.0mL的钼酸铵溶液，1.0mL抗坏血酸溶液，用水稀释至刻度摇匀，于室温放置10min，在分光光度计710nm处用1cm吸收池测定，以空白调零测吸光度。

四、测定结果计算水样中总磷酸盐(P2)的含量以质量浓度计算:P2=C×50/V式中：a──由标准曲线测得的正磷酸盐的浓度mg/L；V──水样的体积，mL。

水样中有机磷酸盐(P3)的含量以质量浓度计算：P3(mg/L)=P2-P1式中：P1──总无机磷酸盐的含量，mg/L；P2──总磷酸盐的含量，mg/L。

五、注意事项1、如循环冷却水有机物较多，当蒸干冒白烟时，有机物碳化变黑，这时应在加亚硫酸钠微沸后进行过滤。

2、为了避免误差较大，每次操作按8mL取样，若样品的含量超过曲线范围则将样品稀释合适的倍数后进行操作。

六、测定允许差取平行测定结果的算术平均值为测定结果，平均测定结果的绝对差值应符合下表的规定。

分光光度计测定磷的含量〖实验目的〗：掌握抗坏血酸-氯化亚锡显色法测定磷含量的原理。

掌握分光光度计的使用方法。

〖实验用品〗：仪器：721型分光光度计、容量瓶、吸灵管、移液管、滴管。

药品：4%盐酸钼酸铵溶液：称取40克钼酸铵（A.R.）溶于600ml 浓HC1中，慢慢加入400ml 水，混匀。

溶液中HC1的浓度为7.2摩尔每升。

2%抗坏血酸溶液：称取0.5克抗坏血酸（A.R.）溶于25ml 去离子水中（新配）。

0．5% SnCl 2 溶液：称取0.2克SnCl 2 （A.R.），用浓HC1溶解，加去离子水稀释到40ml （新配）。

标准磷溶液：称取KH 2PO 4 （A.R.） 于100ml 烧杯中，用少量去离子水溶解，定量转入250ml 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

此溶液每毫升含P 2O 5 1.0mg 。

吸取上述标准磷溶液5ml 于250ml 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

此溶液为含P 2O 5 20.0mg/L 的标准磷溶液。

材料：待测磷溶液（约1mg ·L -1）。

〖实验原理〗：测定试液中的微量磷，常用钼蓝比色法。

根据所用还原剂的不同，钼蓝法一般可分为氯化亚锡法和抗坏血酸法2种。

氯化亚锡法灵敏度高，室温下可迅速显色，但颜色稳定时间短（仅5分钟到20分钟），且容易受Fe 3+的干扰。

抗坏血酸钼蓝法具有颜色稳定时间长，Fe 3+干扰小等优点，但室温下反应速度慢，且不完全，必须用沸水浴加热，操作步骤繁琐。

若用抗坏血酸-–氯化亚锡比色法，即在加入SnCl 2前，先加入少量抗坏血酸，不但可以消除大量Fe 3+的干扰，增加稳定性，并能在室温下迅速显色。

磷酸盐在酸性溶液中与钼酸铵作用，生成黄色钼磷酸，其反应如下：()[]O H O Mo P H H MoO PO 267272434102712+===+++--该种黄色化合物遇到还原剂，如抗坏血酸、SnCl 2等，可被还原成钼蓝配合物，使溶液呈深蓝色。

磷钼黄分光光度法测定水样中的磷酸盐一、实验目的（1）掌握分光光度计的使用方法（2）学会选择分光光度计测定磷酸盐的条件（3）掌握磷钼黄分光光度法测定水样中的磷酸盐的原理和方法二、实验原理1、在强酸条件下，水样中的磷酸盐与钼酸铵反应，生成淡黄色的磷钼黄。

2、磷钒钼酸可在波长420nm的波长下测定3、通过比色法可测出水样中磷酸盐的含量4、2H3PO4+22(NH4)2MoO4+2NH4VO3+23H2SO4=P2O5・V2O5・22MoO4+23(NH4)2SO4+26H2O三、实验仪器与试剂仪器:分光光度计，分析天平实验试剂：磷酸盐标准溶液（1ml含1mgPO43-）钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色溶液（钼钒酸显色溶液）四、实验步骤1.吸收曲线的绘制吸取0.0mL、1.0mL磷酸盐标准溶液于两个50mL容量瓶→15mL硫酸，摇匀→5mL 钒钼酸显色液→摇匀定容→1cm比色皿→以试剂空白为参比溶液→在340nm-450nm之间，每隔10nm测一次吸光度值→在最大吸收峰处每隔2nm测一次吸光度→记录数据2.显色剂用量的选择取七个50mL的容量瓶→各加入1mL磷酸盐标准溶液→加入15mL硫酸→分别加入0.20mL、0.5mL、1.0mL、3.0mL、5.0mL、7.0mL、9.0mL钒钼酸显色液→摇匀→稀释至刻度线→1cm比色皿→蒸馏水为参比溶液→在最大吸收波长处测定各溶液吸光度→记录数据。

3.标准曲线的绘制：1mL磷酸盐标准溶液→100mL容量瓶→定容→7个50mL的容量瓶中分别加入0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL磷酸盐稀释溶液→钼矾酸显色剂→摇匀稀释→1cm比色皿→试剂空白为参比溶液→最大吸收峰处测各溶液的吸光度→记录数据4．水样的测定：2mL水样→50mL容量瓶→按标准曲线的制作步骤加试剂→以试剂空白作参比→测量吸光度→记录数据五、实验记录及数据处理=V显水=C水。

钼蓝法测磷的方法
钼蓝法是一种常用于测定磷含量的方法。

下面是钼蓝法测磷的步骤：
1. 取适量待测样品并进行预处理。

如果样品中的磷为无机磷，可以进行直接测定；如果样品中的磷为有机磷，则需要将有机磷转化为无机磷，通常采用酸化和氧化等方法进行转化。

2. 将处理后的样品加入酸钼混合液中，酸钼混合液可以通过将酒石酸钠、醋酸钠和硫酸混合而成。

3. 在加入样品后，通常需要加热样品溶液，使其达到适当的温度。

加热可以促进反应的进行。

4. 在反应完成后，可以观察到溶液变为深蓝色，这是由于钼蓝络合物的形成。

5. 使用分光光度计测定溶液的吸光度。

吸光度与磷的浓度成正比。

6. 根据标准曲线或计算公式，计算出样品中磷的浓度。

需要注意的是，钼蓝法可以测定多种样品中的磷含量，但在测定之前，需要根据不同样品的特点进行预处理和适当的改进方法。

此外，钼蓝法有一些局限性，例如在溶液中存在其他干扰物质时可能会影响测定结果。

总的来说，钼蓝法是一种较为常用和简便的方法，可以用于测定不同样品中的磷含量。

磷钼蓝光度法测定磷1 范围本方法适用于合格液中磷的测定。

2 方法提要合格液用硫酸酸化后，使磷生成磷钼酸，用正丁醇萃取，在有机相中，用氯化亚锡使磷钼酸还原为磷钼蓝。

钒浓度高时，干扰磷的测定，将溶液调节至pH=3，用三氯甲烷萃取钒的二乙基二硫代氨基甲酸盐的络合物。

3 试剂3.1 硫酸 (6N)。

3.2 钼酸铵溶液：称取10 g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶于水后，稀释至100 mL。

3.3 正丁醇。

3.4 氯化亚锡溶液：10%的盐酸溶液。

使用新配制的溶液。

3.5 二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液：称取0.5g二乙基二硫代氨基甲酸钠[(C2H5)2NCSSNa·3H2O]溶于水后，用水稀释至100 mL，混匀。

3.6 三氯甲烷。

3.7 磷标准贮存溶液：称取0.4390g磷酸二氢钾[KH2PO4]置于硫酸干燥器中干燥)，置于250mL烧杯中，加入25 mL硫酸(1+1)使之溶解，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度混匀。

此溶液1 mL含0.1 mg磷。

3.8 磷标准溶液：移取50.00mL磷标准贮存溶液(3.10)于250mL容量瓶中用水稀释至刻度，混匀。

此溶液1 mL含0.02 mg磷。

4 试样使用经过过滤后的清液。

5 分析步骤5.1 空白试验随同试料做空白试验。

5.2 测定5.2.1 移取10.00 mL合格液，置于100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

5.2.2 移取20.00 mL稀释后的溶液(5.2.1)置于250 mL分液漏斗中，加入硫酸（3.1）4毫升，加入10 mL二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液（3.5），10 mL三氯甲烷(3.6)，震荡1 min，待二相分离后，弃去有机相。

再重复上述操作二次（每次都要加10 mL二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液（3.5）和10 mL 三氯甲烷(3.6)）。

5.2.3 在水相中加入6 mL硫酸(3.1)，10 mL钼酸铵溶液(3.2)，5mL亚硫酸钠（3.3），摇匀，放置10min，加入5mL正丁醇(3.6)，15毫升三氯甲烷、正丁醇萃取剂，振荡1min，分层后，将有机相移入25 mL比色管中，加入1滴二氯化锡溶液(3.4)，用正丁醇稀释至刻度，混匀。

一、实验目的1. 掌握磷钼蓝分光光度法测定磷酸根含量的原理和操作步骤。

2. 熟悉分光光度计的使用方法。

3. 通过实验，提高对化学分析方法的实际操作能力。

二、实验原理在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成蓝色的磷钼蓝。

蓝色深浅与磷酸根含量成正比，在最大吸收波长处，吸光度与磷酸根浓度呈线性关系。

根据比尔定律，可以计算出样品中磷酸根的含量。

三、实验仪器与试剂实验仪器：1. 分光光度计2. 25mL比色管3. 移液枪4. 容量瓶5. 烧杯6. 量筒7. 移液管8. 滤纸实验试剂：1. 磷酸根标准溶液（1mg/L）2. 钼酸铵溶液（50g/L）3. 抗坏血酸溶液（5g/L）4. 硫酸溶液（1+1）5. 氢氧化钠溶液（1+1）6. 蒸馏水四、实验步骤1. 标准溶液配制：- 取1mL磷酸根标准溶液于100mL容量瓶中，加入少量蒸馏水，用氢氧化钠溶液调至中性，再加入硫酸溶液（1+1）酸化，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀。

此溶液为100μg/mL的磷酸根标准溶液。

2. 样品溶液制备：- 取适量水样于25mL比色管中，加入适量钼酸铵溶液，用氢氧化钠溶液调至中性，再加入硫酸溶液（1+1）酸化，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀。

3. 显色反应：- 取1mL标准溶液和样品溶液于25mL比色管中，依次加入1mL抗坏血酸溶液和1mL钼酸铵溶液，摇匀，放置5分钟。

4. 测定：- 用分光光度计在680nm波长处，以蒸馏水为参比，测定标准溶液和样品溶液的吸光度。

5. 结果计算：- 根据标准曲线，计算出样品中磷酸根的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：- 以磷酸根浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：- 根据标准曲线，计算出样品中磷酸根的含量。

六、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制显色反应时间，以免影响测定结果。

2. 在样品制备过程中，应避免样品污染，以保证测定结果的准确性。

实验十磷钼黄分光光度法测定水样中的磷酸盐一、实验目的引导学生开阔思路，利用已学的理论知识查找资料，设计水样中磷酸根测定的方案，提高分析问题与解决问题的能力。

二、实验仪器及试剂2.1分光光度计2.2磷酸盐贮备溶液（1mL含5mgPO43-）：称取在105℃干燥过的磷酸二氢钾（KH2PO4）7.165g，溶于少量去离子水中，并稀释至1L。

2.3磷酸盐工作溶液（1mL含0.5mg PO43-）：取上述标准溶液，用去离子水准确稀释至10倍。

2.4钼酸铵—偏钒酸铵—硫酸显色溶液（简称钼钒酸显色溶液的配制）：2.4.1称取50g钼酸铵【(NH4)6Mo7O24·4H2O】和2.5g偏钒酸铵（NH4VO3），溶于400mL去离子水中。

2.4.2取195mL浓硫酸，在不断搅拌下徐徐加入到250mL去离子水中，并冷却至室温。

将按此配制的溶液倒入2.4.1配制的溶液中，用去离子水稀释至1L。

三、实验原理在[1/2H2SO4]=0.6mol/LH2SO4的酸度下，磷酸盐与钼酸盐和偏钒酸盐形成黄色的磷钒钼酸。

其反应为：2H3PO4+22（NH4)2MoO4+2NH4VO3+23H2SO4→P2O5·V2O5·22MoO3·nH2O+23(NH4)2SO4+(26-n)H2O磷钒钼酸可在420nm的波长下测定。

本法适用于炉水磷酸盐的测定，相对误差为±2%。

四、实验步骤4.1工作曲线绘制4.1.1根据待测水样的磷酸盐含量范围，按表1中所列数值分别把磷酸盐工作溶液（1mL含0.5mg PO43-），注入一组50mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度。

表1 磷酸盐标准溶液的配制容量瓶编号123456工作溶液体积（mL）012345010********相当于水样磷酸盐含量（mg/L）4.1.2将配制好的磷酸盐标准溶液分别注入相应编号的锥形瓶中，各加入5mL钼钒酸显色溶液，摇匀，放置2min。