分光光度法应用实例
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分光光度法应用的例子分光光度法是一种用于测量光的强度和颜色的技术。
它广泛应用于研究、工业和医学等领域。
本文将介绍一些分光光度法应用的例子。
一、药物分析药物的成分分析是药物研制和生产中的重要环节。
分光光度法可以用于分析药物中的化学成分、测定药物的浓度、检测药物是否纯净等。
例如,某种药物中含有多种成分,研究人员可以使用分光光度法来测定这些成分的浓度。
对于一些需要确定浓度的药品,如眼药水、口服液等,分光光度法也可以作为一种快速、准确的测量方法。
二、水质检测水的质量是人们关注的一个重点问题。
分光光度法可以用于测量水的水质指标,如总氮、总磷、COD等。
以测量总氮为例,首先采集样品,然后使用试剂使样品产生化学反应,再使用分光光度法测量样品中反应产物的吸收率,从而求出总氮的浓度。
三、环境检测环境污染问题日益突出,其中大气污染、土壤污染等成为人们关注的重点。
分光光度法可以用于环境检测。
例如,测量大气中的臭氧、氮氧化物等污染物的浓度,可以使用分光光度法。
同时,分光光度法还可以监测土壤中的重金属污染和有机污染物。
四、食品检测食品中的添加剂、防腐剂等成分是人们关注的问题。
分光光度法可以用于测量食品中的各种成分。
以测量甜味剂为例,食品样品首先与一种试剂反应生成色素,然后使用分光光度法测量样品中色素的吸收率,从而得出甜味剂的浓度。
五、生化研究生化研究是分子生物学、基因工程等领域的重要组成部分。
分光光度法可以用于测量DNA、RNA、蛋白质等生物大分子的吸收率和含量。
以DNA测量为例,首先将DNA样品与一种染料反应,然后使用分光光度法测量样品中染料的吸收率,从而求出DNA的浓度。
六、医学诊断在医学上,分光光度法在临床诊断中也有广泛应用。
以测量血红蛋白浓度为例,分光光度法可以用于测量血液中血红蛋白的含量,从而判断贫血症状。
综上所述,分光光度法已经成为各个领域中重要的分析方法之一。
无论是药物分析、水质检测、环境监测、食品检测、生化研究还是医学诊断,分光光度法都发挥了其独特的优势。
紫外可见光分光光度法的应用大家好,今天我们来聊聊一个神奇的科学实验——紫外可见光分光光度法。
这个方法可是大名鼎鼎的,它可以用来测量各种物质的颜色、浓度和化学反应等等。
那么,它到底是怎么工作的呢?别急,我们一步一步来揭开它的神秘面纱。
我们需要准备一些工具和材料。
这里有一把紫外线灯、一台分光光度计和一些待测样品。
别看这些简单的工具,它们可是紫外可见光分光光度法的核心哦!接下来,我们就开始实验吧!第一步,我们需要让紫外线灯发出紫色的光线。
这是因为紫色光线的波长最短,所以能够穿透最厚的物质。
当然啦,如果要测量更深层次的物质,我们就需要使用更长的波长的光线了。
第二步,我们需要将待测样品放在分光光度计上。
这时候,分光光度计会根据样品吸收的光线的强度来计算出样品的浓度。
这个过程就像是我们在做视力检查一样,只不过我们是用眼睛来看,而分光光度计是用光线来看。
第三步,我们需要调整分光光度计的参数。
比如说,我们可以调整波长的范围、增益和零点等等。
这样一来,我们就可以得到更加准确的结果了。
第四步,我们需要重复实验几次。
因为不同的样品可能会有不同的吸收特性,所以我们需要多次测量才能得到一个比较准确的结果。
当然啦,如果你是一个非常有经验的科学家,你可能只需要一次就能够得到完美的结果了。
好了,现在我们已经知道了紫外可见光分光光度法的基本原理和步骤。
那么,它在实际生活中有哪些应用呢?下面就让我来给大家介绍一下吧!紫外可见光分光光度法可以用来检测食品中的有害物质。
比如说,我们可以通过测量食品中某种特定波长的光线的强度来判断它是否含有致癌物质。
这样一来,我们就可以保障家人的健康了。
紫外可见光分光光度法还可以用来研究植物的生长情况。
比如说,我们可以通过测量植物叶子中某种特定波长的光线的强度来判断它是否受到了病虫害的影响。
这样一来,我们就可以及时采取措施保护植物了。
紫外可见光分光光度法还可以用来研究大气中的污染物质。
比如说,我们可以通过测量空气中某种特定波长的光线的强度来判断它是否来自某种污染源。
比色皿分光光度法分光光度法是一种广泛应用于化学分析、环境监测、生物医学等领域的分析技术。
其中,比色皿分光光度法是分光光度法中的一种常用方法。
下面将介绍比色皿分光光度法的原理、实验步骤、应用以及优缺点。
一、原理比色皿分光光度法是基于物质吸收光的特性进行分析的方法。
当待测物质溶液放入透明的比色皿中,并通过特定波长的光源照射时,物质分子会吸收光能,使光通过溶液时发生衰减。
根据比色皿中吸收光强度的变化,可以推断溶液中待测物质的浓度。
二、实验步骤1. 准备工作:清洗比色皿,确保其表面干净无污染。
2. 校准设备:使用已知浓度的标准溶液,测定其光吸收值作为校准曲线。
3. 测定样品:取待测溶液,放入比色皿中,使用分光光度计测定其吸光度。
4. 计算结果:使用校准曲线,将所测得的吸光度值转化为浓度值。
三、应用比色皿分光光度法广泛应用于物质分析和检测中,包括但不限于以下几个领域:1. 化学分析:可用于溶液中金属离子、有机物质、药物等的浓度测定。
2. 环境监测:可以用于水样中重金属、有机物质等的定量分析,用于检测水体污染程度。
3. 生物医学:用于药物代谢产物、生物标志物等的浓度检测,有助于疾病的诊断和治疗。
四、优缺点比色皿分光光度法具有以下优点:1. 灵敏度高:可以测定低至微克甚至纳克级的物质浓度。
2. 简便易行:操作相对简单,不需要复杂的仪器设备。
3. 数据准确:校准曲线的建立和校验,可以保证测得的结果的准确性。
然而,比色皿分光光度法也存在一些不足之处:1. 有机物质的颜色干扰:一些有机物质本身即具有吸收光的特性,会对测定结果产生干扰。
2. 溶液浑浊:如果溶液中存在悬浮颗粒或浑浊物质,会影响光的透过性,从而使结果不准确。
综上所述,比色皿分光光度法是一种基于物质吸收光的原理进行分析的方法。
它具有灵敏度高、简便易行和数据准确等优点,广泛应用于化学分析、环境监测和生物医学等领域。
然而,需要注意有机物质的颜色干扰和溶液的浑浊问题。
紫外可见分光光度计应用案例案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定前处置方式:称取5g(精准至0.01g)制成匀浆的试样,置于50mL烧杯中,加12.5mL 饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中,于滚水浴中加热15min掏出置冷水浴中冷却,并放置至室温。
在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。
加水至刻度,摇匀,放置30min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。
检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表1):表1 测量参数检测界面(见图1):图1 肉制品中亚硝酸盐的检测界面上图标准曲线中,亚硝酸钠标准系列的质量依次为:0.0μg、2.0μg、4.0μg、6.0μg、8.0μg、10.0μg、15.0μg、20.0μg、25.0μg(100mL容量瓶中)。
方式检出限:该方式检出限为1mg/kg,能够知足《GB 5009.33-2020 食物平安国家标准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》的检测要求。
参考标准:《GB 5009.33-2020 食物平安国家标准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》案例2.啤酒中甲醛的测定前处置方式:吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL蒸馏瓶中,加200g/L磷酸溶液20.00mL于蒸馏瓶,接水蒸气蒸馏装置中蒸馏,搜集馏出液于100mL容量瓶中(约100mL),冷却后加水稀释至刻度。
检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表2):表2 测量参数检测界面(见图2):图2 啤酒中甲醛的检测界面上图标准曲线中,甲醛标准系列的质量依次为:0.0μg、0.5μg、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、8.0μg(25mL比色管中)。
方式检出限:该方式检出限为0.8μg,能够知足《GB/T 5009.49-2020 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方式(4.4甲醛)》的检测要求。
傅里叶红外分光光度计应用案例傅里叶红外分光光度计是一种利用傅里叶变换原理来分析物质的光谱仪器,其应用范围非常广泛。
下面列举了一些傅里叶红外分光光度计的应用案例。
1. 食品安全检测傅里叶红外分光光度计可以用于食品中成分的分析和检测,如脂肪、蛋白质、糖类等。
通过对食品样品进行预处理和分析,可以检测食品是否符合国家标准和质量要求,保障人们的食品安全。
2. 药品研发傅里叶红外分光光度计可以用于药品中化学成分的分析和检测,如溶剂和杂质等。
通过对药品样品进行预处理和分析,可以为药品的研发和生产提供重要的参考依据。
3. 化妆品检测傅里叶红外分光光度计可以用于化妆品中成分的分析和检测,如香精、防腐剂、色素等。
通过对化妆品样品进行预处理和分析,可以检测化妆品是否符合国家标准和质量要求,保障人们的健康。
4. 环境监测傅里叶红外分光光度计可以用于环境中有机物的检测,如空气、水、土壤等。
通过对样品进行预处理和分析,可以检测环境中有害物质的含量,为环境保护提供科学依据。
5. 石油化工傅里叶红外分光光度计可以用于石油化工中化学成分的分析和检测,如原油、炼油产品、塑料等。
通过对样品进行预处理和分析,可以检测石油化工中各类化学物质的含量和性质,为石油化工的生产和研发提供重要支持。
6. 农产品质量检测傅里叶红外分光光度计可以用于农产品中成分的分析和检测,如水果、蔬菜、肉类等。
通过对样品进行预处理和分析,可以检测农产品的质量和营养成分,为农产品的生产和销售提供科学依据。
7. 医学诊断傅里叶红外分光光度计可以用于医学中生物分子的分析和检测,如蛋白质、核酸等。
通过对样品进行预处理和分析,可以检测生物分子的含量和性质,为医学诊断和治疗提供重要支持。
8. 纳米材料研究傅里叶红外分光光度计可以用于纳米材料中化学成分的分析和检测,如纳米粒子、纳米管等。
通过对样品进行预处理和分析,可以检测纳米材料的含量和性质,为纳米材料的研究和应用提供科学依据。
傅里叶红外分光光度计应用案例傅里叶红外分光光度计是一种用于分析物质成分和测量样品浓度的重要仪器。
它利用傅里叶变换原理,将样品吸收的红外辐射信号转换为频谱图,从而实现对样品成分的分析和浓度的测量。
傅里叶红外分光光度计在各个领域都有广泛的应用,下面我们列举一些具体的应用案例。
1. 化学分析在化学领域,傅里叶红外分光光度计可以用于分析化学物质的结构和成分。
通过测量样品吸收的红外辐射信号,可以确定样品中不同化学键的存在与数量,从而帮助化学研究人员了解样品的组成和性质。
例如,可以利用傅里叶红外分光光度计对有机化合物进行结构鉴定,对无机物质进行成分分析等。
2. 药物研发在药物研发领域,傅里叶红外分光光度计可以用于药物的质量控制和成分分析。
通过测量药物样品的红外光谱,可以确定药物的成分和纯度,确保药物的质量符合标准。
傅里叶红外分光光度计在药物研发中起着至关重要的作用,可以提高药物研发的效率和成功率。
3. 食品安全在食品安全领域,傅里叶红外分光光度计可以用于检测食品中的有害物质和添加剂。
通过测量食品样品的红外光谱,可以快速准确地检测食品中是否含有农药残留、重金属等有害物质,保障食品安全。
傅里叶红外分光光度计在食品安全监测中具有重要意义,可以帮助监管部门及时发现并处理食品安全问题。
4. 环境监测在环境监测领域,傅里叶红外分光光度计可以用于监测大气中的污染物和地表水中的有害物质。
通过测量样品的红外光谱,可以确定环境中不同化学物质的存在与浓度,帮助监测和评估环境质量。
傅里叶红外分光光度计在环境监测中发挥着重要作用,可以帮助保护环境,维护人类健康。
5. 医学诊断在医学领域,傅里叶红外分光光度计可以用于医学诊断和疾病监测。
通过测量生物样品的红外光谱,可以确定生物体内不同分子的存在与数量,帮助医生进行疾病诊断和治疗。
傅里叶红外分光光度计在医学诊断中具有重要意义,可以提高疾病的早期诊断率和治疗效果。
6. 材料分析在材料科学领域,傅里叶红外分光光度计可以用于分析材料的结构和性质。
分光光度法应用
分光光度法是一种分析化学技术,利用物质对特定波长的光吸收特性来定量分析物质的含量。
它被广泛地应用于食品、药品、环境监测、生物化学等领域。
在食品领域中,分光光度法可以用来检测食品中的添加剂、营养成分和污染物等。
例如,可以利用分光光度法检测食品中的维生素C、铁和锌等营养成分的含量,或者检测食品中的防腐剂、甜味剂和色素等添加剂的含量。
在药品领域中,分光光度法可以用来检测药品中的成分和杂质。
例如,可以利用分光光度法检测药品中的活性成分的含量,或者检测药品中的溶剂残留和重金属等杂质的含量。
在环境监测领域中,分光光度法可以用来检测水、空气和土壤等环境中的污染物。
例如,可以利用分光光度法检测水中的重金属、有机污染物和营养物质等的含量,或者检测空气中的有害气体和颗粒物等的浓度。
在生物化学领域中,分光光度法可以用来检测生物分子的含量和结构。
例如,可以利用分光光度法检测蛋白质和核酸等生物分子的吸收谱,进而推断它们的结构和含量。
总之,分光光度法是一种简单、灵敏、准确、经济和广泛应用的分析化学技术,对于质量控制、环境保护、食品安全和生物科学等领域具有重要的应用价值。
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紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例药物A的含量可以通过紫外可见分光光度法来测定。
下面是一种计算实例,以帮助理解该方法的操作流程以及计算原理。
假设我们有一批药物A的试样,需要测定其中药物A的含量。
我们首先需要准备一定浓度的标准品溶液,用于构建工作曲线。
标准品溶液的浓度可以根据药物A的理论含量来确定。
操作步骤如下:1. 首先,我们准备标准品溶液。
假设药物A的理论含量为100mg/mL,我们可以准备一系列含量递增的标准品溶液,如10mg/mL,20mg/mL,30mg/mL等等。
可以根据需求自行决定浓度的范围和递增量。
2.准备工作曲线。
我们将取一定量的每个标准品溶液,利用紫外可见分光光度计进行测定,测定吸光度值。
通常选择药物A在紫外可见光谱范围内的最大吸收波长(波峰)进行测定。
得到一系列标准品溶液浓度与吸光度值的对应关系。
通过得到的数据,我们可以得到一个工作曲线,在浓度与吸光度之间建立线性关系。
3.测定药物A的样品。
我们将取一定量的待测样品溶液,利用紫外可见分光光度计进行测定,测定样品的吸光度值。
4.根据工作曲线,将样品的吸光度值代入,同时参考工作曲线上对应吸光度值的浓度,可求得样品的浓度。
通过浓度和待测样品溶液的体积,可以计算出药物A的含量。
标准品溶液浓度:10mg/mL,20mg/mL,30mg/mL,40mg/mL,50mg/mL对应的吸光度值:0.5,1.0,1.5,2.0,2.5待测样品溶液吸光度值:1.8根据工作曲线,将待测样品溶液吸光度值代入,找到对应的浓度。
从工作曲线可以看出,吸光度值1.8对应的浓度在30mg/mL和40mg/mL之间,我们可以利用线性插值法来估算浓度。
(1.8-1.5)/(2.0-1.5)=(C-30)/(40-30)C=((1.8-1.5)/(2.0-1.5))*(40-30)+30C = 36mg/mL假设我们测量的样品溶液体积为10mL,根据浓度和体积计算,可得到样品中药物A的含量为 36mg/mL * 10mL = 360mg通过以上计算,我们得到样品中药物A的含量为360mg。
分光光度计的原理及应用1. 分光光度计的介绍分光光度计是一种用于测量样品溶液中光的吸收和透过性质的仪器。
它利用样品对特定波长的光的吸收现象来确定溶液中的物质含量。
分光光度计通常由光源、样品室、透射光检测器和信号处理器组成。
2. 分光光度计的原理分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律,即溶液中被测物质的浓度与吸光度成正比。
光通过样品室时,样品溶液中的物质会吸收特定波长的光。
吸光度的大小与物质的浓度成正比,通过测量吸光度可以确定样品溶液中物质的浓度。
3. 分光光度计的应用分光光度计在许多领域中得到广泛应用,以下是一些例子:•生物化学:在生物化学实验中,分光光度计常用于测量具有特定颜色的物质的浓度,如蛋白质、核酸等。
•环境监测:分光光度计可用于监测环境中的水质、空气中的污染物等。
通过测量特定波长的光的吸光度,可以确定样品中某些特定有害物质的浓度。
•药物研发:分光光度计在药物研发过程中也非常重要。
它可以用于测量某种药物在不同波长下的吸光度,从而确定药物的纯度和浓度。
•食品检测:分光光度计在食品行业中用于检测食品中的添加剂、防腐剂、色素等物质的含量,确保产品的质量和安全。
4. 实际应用例子以下是一些实际应用例子,展示了分光光度计在不同领域的使用:•在生命科学研究中,分光光度计可用于测量蛋白质和核酸的浓度。
科研人员可以通过测量样品在特定波长下的吸光度来确定样品中特定物质的浓度。
•在环境监测中,分光光度计可以用于监测水体中的有害物质浓度。
例如,通过测量水样在紫外光下的吸光度,可以确定水中的硝酸盐含量,从而评估水质状况。
•在药物研发过程中,分光光度计可用于测量药物的吸收特性。
例如,在药物溶液中测量特定波长下的吸光度,可以确定药物的浓度和稳定性。
•在食品检测中,分光光度计可用于检测食品中的添加剂和污染物。
通过测量食品样品在特定波长下的吸光度,可以确定食品中的某些物质的含量,并确保食品的安全性和质量。
5. 总结分光光度计是一种广泛应用于实验室和工业领域的仪器,用于测量溶液中光的吸收和透过性质。
紫外分光光度法应用举例岛津uv-2401紫外分光光度计操作程序操作方法1.1 开启计算机、主机和仪器初始化。
1.1.1 打开主机电源,计算机电源。
1.1.2 进入Windows 桌面,双击“Shimadzu",再双击“UV-2401”,即进入UV-2401操作屏幕。
仪器开始逐项自检,全部通过后,屏幕显示应用窗口。
自检通过后有蜂鸣声提示。
自检全部完成后,方可继续操作。
在自检时,如各项检查均正常,界面在各项检查项后均显示为绿色图标;如存在故障,则该检查项后显示红色图标,此时应排除故障后,方能进行测定。
1.2 光谱扫描操作1.2.1 选择主菜单“Acquire Mode"下子菜单“Spectrum"项,选择主菜单“Configure"项下子菜单“Parameters"项,设置扫描参数:扫描速度,波长范围,测量方式,狭缝宽度,采样间隔。
按“OK”完成参数设定,回到测定界面。
1.2.2 参比池和样品池均盛以空白溶液,置于样品室内,关上样品室门。
1.2.3 选择“Base line”,开始进行扫描,基线校正完毕后,样品池换上供试品溶液1.2.4 按“start”开始扫描,扫描结束,出现文件名对话框,选择“save”保存或“discard”删除数据。
如测多份样品,更换样品溶液后点击“start”即可。
1.2.5 检测峰,选择“manipulate”下“peak pick”,选择“output”下“savetable”保存数据为文本文档。
1.2.6 将光谱图、文本文档(上述保存的文档)、测定参数等打印在一起。
选择“Presentation”菜单下“plot”,在A、B、C、D项后选择要打印内容及文件名,然后在1、2、3、4位置排好版,按“print”即可。
1.3 定量测定操作1.3.1 选择“Acquire Mode”项下“Quantitative”项,设置定量测定参数:定量方法,波长,记录范围,狭缝宽度,重复次数,浓度范围。
紫外可见分光光度法的应用在药物分析中的应用药物分析对于药物质量的检验与控制、生物体液中有关药物含量的测定及药代动力学的研究均起着至关重要的作用。
由于许多药物结构中具有吸收紫外或可见光的基团,或这些基团能与某些试剂、离子等发生颜色反应,从而容易被检测,因此分光光度法在药物分析中得到普遍应用。
常见的方法有:1、直接紫外可见分光光度法例如:布洛芬的测定,可在乙醇溶液中,于291nm处直接进行测定。
安乃近在无水乙醇中与266nm处有强吸收,可用于其制剂的测定。
烟酸在NaOH中于262.5nm处有强吸收,可用于其降脂口服液的测定。
紫草中羟基萘醌类成分本身具有颜色,在可见光区有较强吸收,可直接予以测定。
2、利用显色反应的紫外可见分光光度法一些药物可以与显色试剂进行反应而显色,所以如果显色剂选择适当,且具有专一性,就能避免分析过程中其他成分或杂志的干扰。
在可见区,有机药物分析的显色反应涉及到离子缔合反应、重氮偶合反应、荷移配位反应、氧化还原反应、金属离子作显色剂的显色反应等及大类。
例如:在测定布洛芬时,布洛芬在PH=5.5的醋酸缓冲液中可以和Cu(AC)2反应生成Cu2+--布洛芬的缔合物,用CHCl3萃取该物质,在675nm处测定吸光度可间接测定布洛芬。
可拉明在溶液中可与Cu(N3)2反应,生成1:1形式的缔合物,该物质用CH3Cl提取,在420nm处测定提取物的吸光度可间接测定可拉明的含量。
3、层析分离技术和紫外可见分光光度法的结合使用由于药物成分一般复杂,共存成分的干扰对直接的紫外可见分光光度法产生很大的影响。
传统的紫外可见分光光度法未来解决此类问题,将一些分离技术和紫外可见分光光度法相配合而进行测定。
例如:青霉素烷砜酸钠可在稀NaOH溶液中,37℃置15分钟后直接测定。
采用薄层分离新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮,于330nm处采用紫外可见分光光度法测定其含量为0.37%。
以乙醇提取药材,醋酸乙酯萃取,聚酞胺柱层析分离,于360nm处测定高良姜中总黄酮的含量为3.44%。
分光光度法在食品分析中的应用摘要在科技高速发展的今天,食品营养与安全越来越受到人们的重视。
而准确度高、灵敏度好、方便快捷也成为了食品分析鉴定方法的发展要求。
今天,我们组选择为大家介绍一下分光光度法在食品分析中应用。
文章共分为五部分:选题由来、分光光度法简介、分光光度法在食品分析上的应用总结及实例简介、实验室常用仪器介绍、问题讨论。
有关各部分的具体介绍,详见下文。
关键词分光光度法食品分析有害物质营养成分检测正文一、选题由来:随着科技进步和人们生活水平的提高,食品营养与安全越来越受到人们的重视。
而准确度高、灵敏度好、方便快捷也成为了食品分析鉴定方法的发展要求。
在各类检测方法中,分光光度法的优势具体体现在以下几个方面:(1)用分光光度法可以得到精确细致的吸收光谱曲线。
选择波长,可减小对朗伯-比耳定律的偏离。
分光光度计一般比较精密,分析结果的准确度高;(2)利用吸光度的加和性可以同时测定溶液中两种或两种以上的组分;(3) 扩大了入射光的波长范围。
广泛应用在食品分析中,随着科技进步迈向更先进、简便、准确。
二、分光光度法简介1、概念:分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。
2、基本原理:当一束强度为Io的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:A=abc式中A为吸光度,b为溶液层厚度(cm),c为溶液的浓度(g/dm^3),a为吸光系数。
其中吸光系数与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。
溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,当固定溶液层厚度l和吸光系数时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。
在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长,然后以此波长的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A,作出A~c 工作曲线。