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荧光和化学发光免疫分析方法免疫分析是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即利用抗原与抗体的特异性反应, 应用制备好的抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原.由于免疫的特异性结合，免疫分析方法具有很好的选择性，荧光免疫分析和化学发光免疫分析是其中典型的两种。
本文将对这两种免疫分析方法进行详细的介绍。
一、免疫免疫是指机体免疫系统识别自身与异己物质,并通过免疫应答排除抗原性异物,以维持机体生理平衡的功能。
免疫是人体的一种生理功能，人体依靠这种功能识别“自己”和“非己”成分，从而破坏和排斥进入人体的抗原物质，或人体本身所产生的损伤细胞和肿瘤细胞等，以维持人体的健康.特异性免疫系统，是一个专一性的免疫机制,针对一种抗原所生成的免疫淋巴细胞（浆细胞）分泌的抗体,只能对同一种抗原发挥免疫功能.而对变异或其他抗原毫无作用。
1、抗原1。
1抗原的定义抗原：是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答（免疫原性) ，并能与相应抗体在体内或体外发生特异性结合的物质(免疫反应性)。
抗原一般为大分子物质，其分子量在10kD以上.1。
2抗原的分类完全抗原：同时具有免疫原性和免疫反应性的抗原，如细菌、病毒、异种动物血清等。
半抗原：仅具有与相应抗原或致敏淋巴细胞结合的免疫反应性，而无免疫原性的物质。
如大多数的多糖、类脂及一些简单的化学物质，它们本身不具免疫原性，但当与蛋白质大分子结合后形成复合物，便获得了免疫原性，1。
3抗原的性质决定簇是指抗原分子表面的基团,它直接决定免疫学反映的特异性.抗原通过抗原决定簇与相应淋巴细胞表面抗原受体结合，从而激活淋巴细胞，引起免疫应答，抗原也藉此与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合。
因此,抗原决定簇是被免疫细胞识别的靶结构，也是免疫反应具有特异性的物质基础。
2、抗体2.1抗体的定义抗体：是机体受抗原刺激后，由淋巴细胞合成的一类能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。
2.2抗体的结构抗体是机体受抗原刺激后，由淋巴细胞特别是浆细胞合成的一类能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白，因其具有免疫活性故又称作免疫球蛋白。
荧光偏振免疫法荧光偏振免疫法是一种常用的生物分析技术，可以用于检测和分析样品中的特定分子。
本文将介绍荧光偏振免疫法的原理、应用以及优缺点。
一、原理荧光偏振免疫法是基于荧光技术和免疫学原理的结合。
它利用特异性抗体与目标分子结合的能力，通过荧光标记的抗体来检测和定量目标分子。
荧光偏振免疫法的原理可以简述为以下几个步骤：首先，将样品中的目标分子与特异性抗体进行反应，形成抗原-抗体复合物。
然后，通过加入荧光标记的二抗或酶标记的二抗，使荧光物质或酶物质与抗原-抗体复合物结合。
最后，通过荧光偏振光谱仪或酶标仪来检测和测量荧光强度或酶的活性，进而定量目标分子的含量。
二、应用荧光偏振免疫法在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1. 肿瘤标记物检测：荧光偏振免疫法可以检测和定量血清中的肿瘤标记物，如癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）等，用于早期癌症的筛查和诊断。
2. 免疫组织化学：荧光偏振免疫法可以用于定位和定量组织中的特定蛋白或细胞表面标记物，如免疫组织化学染色和免疫组织化学定位。
3. 免疫荧光显微镜：荧光偏振免疫法可以用于细胞和组织的观察，通过荧光偏振显微镜观察荧光信号的方向和强度，可以获得更多的信息，如蛋白的空间分布、蛋白的定位等。
4. 荧光免疫分析：荧光偏振免疫法可以用于定量检测样品中的特定分子，如激素、细胞因子等。
通过测量荧光强度和方向，可以实现高灵敏度和高特异性的分析。
三、优缺点荧光偏振免疫法具有以下优点：1. 高灵敏度：荧光偏振光谱仪可以测量荧光信号的强度和方向，提高了测量的灵敏度。
2. 高特异性：荧光偏振免疫法利用特异性抗体与目标分子结合，具有高特异性，可以准确检测目标分子。
3. 高通量：荧光偏振免疫法可以同时检测多个目标分子，提高了检测效率。
4. 定量分析：荧光偏振免疫法可以通过测量荧光强度或酶活性来定量目标分子的含量。
然而，荧光偏振免疫法也存在一些缺点：1. 荧光标记的抗体易受到光照和温度的影响，可能导致荧光信号的变化。
2024临床免疫学检验名词解释（第二部分）49、荧光：荧光物质在吸收激发光的能量后，使原来处于基态的电子跃迁到激发态，当其回复至基态时，激发态的电子以发射光的形式释放出能量，这种发射光称为荧光。
so、荧光免疫试验：是以荧光物质标记抗体或抗原，通过与相应抗原或抗体发生特异也绪合反应，以此对待测物进行定位、定性和定量分析的检测技术，具有高度特异性、敏感性和直观性。
51、时间分辨荧光免疫试验：以系元素标记杭原或抗体，并与时间分辨测定技术相结合而建立起来的一种新型非放射性微量分析技术。
52、Stokes位移：选择荧光物质作为标记物时，必须考虑激发光谱和发射光谱的波长差，即Stokes位移。
53、荧光偏振免疫试验：是利用抗原抗体竞争反应原理，根据荧光素标记抗原与荧光素抗原－抗体复合物之间荧光偏振程度的差异测定体液中小分子抗原物质的含量。
54、荧光效率：荧光物质分子将吸收的光能转变成荧光的百分率称为荧光效率。
55、荧光滓灭：荧光物质在某些理化因素（如紫外线照射、高温、苯胺、硝基苯、酚、I－等）作用下，发射荧光减弱甚至消退的现象称为荧光滓灭。
56、酶免疫试验：是继荧光免疫试验和放射免疫试验之后的三大经典免疫标记技术之一，它以酶标记抗体（抗原）作为主要试剂，将酶高效催化反应的专一性和抗原－抗体反应的特异性相结合的免疫检测技术。
57、包被：将抗原或抗体结合在固相载体上的过程称为包被。
58、封闭：由千包被液蛋臼浓度很低，造成包被后固相载体表面会剩余少量未结合位寺，可非特异性吸附标本中的蛋白质和酶结合物，形成非特异性结合导致本底增高。
为消除干扰，包被后的微孔板或膜等还需用1%~5％牛血清白蛋白(BSA),5% ~ 20％小牛血清或2％脱脂乳等再包被一次，此过程称为封闭。
59、均相酶免疫试验：是利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变的原理，可以在不将结合酶标记物和游离酶标记物分离的清况下，通过测定标记酶活性的改变（酶活性增强或减弱），从而确定待测物的含量。
Special Wild Economic Animal and Plant Research特产研究96DOI：10.16720/ki.tcyj.2019.02.023荧光偏振免疫分析技术在病原检测中的应用研究进展张萍，周玉成，程悦宁，程世鹏，杨艳玲※（中国农业科学院特产研究所，长春130112）摘要：荧光偏振免疫分析技术操作简单、易于自动化、适于快速筛选，可根据不同抗原的特异性进行荧光标记，结合特异性抗体，根据荧光偏振值的变化进行定量分析。
目前，荧光偏振免疫分析技术在病原检测方面已经得到了广泛应用，国内已有针对各种病原建立的荧光偏振免疫技术的报道。
本文综述了荧光偏振免疫技术的发展历史、原理、优缺点和应用，概括了近几年国内、外针对各种病原建立的荧光偏振免疫分析方法研究进展。
关键词：荧光偏振；荧光偏振免疫；病原检测；研究进展中图分类号：R446.5文献标识码：A文章编号：1001-4721（2019）02-0096-04ZHANG Ping,ZHOU Yu-cheng,CHENG Yue-ning,CHENG Shi-peng,YANG Yan-ling※(Institute of Special Wild Economic Animals and Plants Science,Chinese AcademyofAgricultural Sciences,Changchun130112,China)：Fluorescence polarization immunoassay(FPIA)technology is simple,easy to automation,and suitable for rapid screening.It can be fluorescently labeled according to the specificity of different antigens,combined with specific antibodies,and quantitatively analyzed ac-cording to changes in fluorescence polarization values.At present,fluorescence polarization technology has been widely used in the detection of pathogens.There have been reports of fluorescence polarization immunoassay established for various pathogens in China.This article re-viewed the development history,principle,advantages,disadvantages and application of fluorescence polarization immunoassay,and sum-marized the research progress of fluorescence polarization immunoassay methods established for various pathogens athome andabroadin recentyears.：Fluorescence polarization;FPIA;pathogen detection;research progress荧光偏振（FP）由于其均匀的格式、速度、准确性和自动化的高通量能力，构成了包括临床、食品和环境[1-2]等各种应用领域对小分子进行常规分析的最有效的技术之一。
