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62原理：当荧光分子受平面偏振光激发时，如果分子在受激发时期(对于荧光素约持续 4纳秒)保持静止，发射光将位于同样的偏振平面。
如果在受激发时期，分子旋转或翻转偏离这一平面，发射光将位于与激发光不同的偏振面。
如果用垂直的偏振光激发荧光素，可以在垂直的和水平的偏振平面检测发射光光强(发射光从垂直平面偏向水平平面的程度与荧光素标记的分子的迁移率有关)。
如果分子很大，激发时发生的运动极小，发射光偏振程度较高。
如果分子小， 分子旋转或翻转速度快，发射光相对于激发光平面将去偏振化。
如图2.图2 荧光偏振检测原理任何物质都处于不断运动当中，液态环境中的荧光分子也不例外。
因此当受到偏振光激发时，荧光分子的运动状态例如旋转、翻转、相互结合、排斥、溶液的粘度、温度等这些因素都有可能对这个荧光因子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。
对此进行分析比较，有可能揭开物质活动的内在规律，达到研究目的，“荧光偏振”。
近年来，以这种物理学现象为基础的技术在生命科学研究的多个领域中扮演着越来越重要的角色。
因此，我们可以看到，以荧光偏振为基础发展的技术可用来研究生命科学中分子之间的相互作用，以及分子与所处环境——“小”至核酸和蛋白结构，“大”至整个细胞——的相互作用。
相对于传统研究方法，荧光偏振技术在溶液中进行，可最大程度的模拟真实生命环境；利用它，可以实时跟踪监测分子间结合/分离的变化，并解决一直以来困扰荧光技术使用者们对于荧光无法定量的烦恼。
最为重要的是，相对于一直被人们使用的放射性同位素研究方法，它更为安全可靠，不会在实验过程中对研究者造成威胁，也不会产生难以处理的具有放射性的废弃物。
此外，荧光偏振所需的样品量少，灵敏度高，重复性好，操作简便。
概述光由微小的波构成，光波可以在任何一个平面上均匀的振动。
当其通过某些平面时，有可能因受到平面的作用将光波的能量分成不均匀的光束，振动平面也就发生了变化，可能在某一个方向的振动强或弱于其他平面，这种光称为偏振光。
荧光偏振与荧光偏振免疫分析法【摘要】本文简单介绍了荧光偏振原理和荧光偏振免疫分析（FPIA）的原理，并就荧光偏振及FPIA在环境、食品安全、医疗卫生和蛋白质研究等方面的实际应用进行了简单介绍和举例。
【关键词】荧光偏振免疫分析应用从1852年，Stokes首次提出“荧光（fluorescence）”一词，人们对荧光现象的研究就不断深入，并发展出了荧光分析技术，荧光分析是指利用一些物质被电磁辐射激发后产生反映该物质特性的荧光而对该物质进行定性定量分析的方法。
随着相关理论和仪器的发展，荧光分析的手段和技术水平也不断发展，现在荧光分析以其高灵敏度、高选择性、低样品用量、方法简便等诸多优点，在化学、医药、环境、信息、生命科学等领域被人们广泛使用。
基于荧光偏振发展的荧光偏振免疫分析法是荧光分析中一个重要的组成部分。
一、荧光偏振原理荧光偏振的原理最初是1920年由Perrin建立的。
溶液中荧光分子受偏振光激发，如激发时分子保持静止，则发射的荧光仍有偏振性，且如分子分子旋转或翻转，发射荧光的偏振平面会不同于激发光偏振平面。
虽然实际测量常得消偏振的荧光，但荧光偏振技术有着重要应用[1]。
荧光偏振光强度P定义为：P=（I⊥-I∥）/（I⊥+I∥）其中，I⊥和I∥表示荧光子被激发后，发射光在垂直和水平方向上的强度。
对于荧光偏振仪器，检测到的荧光强度：P=（Ivv-G×Ivh）/（Ivv+G×Ivh）式中，下标分别代表起偏器和检偏器方向，v为垂直方向，h为水平方向，G 为校正因子，G=Ihv/Ihh。
荧光偏振光强度P与测定体系中各因素的关系可用Perrin方程表示:（1/P-1/3）=1/P0+（1/P0+1/3）（RT/V）(τ/η)其中，P0为极限荧光偏振光强度，R为气体常数，T为绝对温度，V为摩尔分子体积，τ为荧光寿命，η为溶液的粘度。
由上式知当溶液的温度和粘度都固定时，P值主要取决于荧光子的分子体积。
酶标仪酶标仪是什么？⽤来做酶联免疫反应的专⽤仪器。
本质上是⼀台光电⽐⾊计。
按照⽤途可以分为光吸收酶标仪和多功能酶标仪。
光吸收酶标仪，只有光吸收模块，所以只能做光吸收实验，核酸蛋⽩定量，酶学分析，ELISA，细胞分析。
主要型号：F50，SUNRISE。
区别，通道数不同。
F50为8通道，SUNRISE为12通道，包括⼀个参⽐通道。
光源不同，F50为LED冷光源，SUNRISE为卤素灯热光源。
波长范围不同，F50为400～750，SUNRISE为340～750，并且，可配温控模块。
另外，SUNRISE12个通道，检测更快。
有1个参⽐通道，可以开机可以⾃动校准波长。
可配温控模块，温控还是⽐较好的。
不⽤配电脑，集成有触控⾯板，内置Windows ce的系统。
F50体积⼩巧，检测准确，免费升级，免维护，不⽤换灯，卤素灯最多2年就需要更换，不⽤预热，使⽤⽅便。
两款都是经典的光吸收酶标仪。
相当的⽪实，耐⽤，⽽且也够准确。
多功能酶标仪除了光吸收模块，还有温控，⽓体模块，进样器，荧光模块，发光模块，震荡模块。
所以，波长范围200~1000全波长。
还会看到⼀个参数：OD范围：0～4。
在酶标仪上，测量光吸收量⽤OD表⽰样品的吸光度。
典型应⽤，核酸定量，因为核酸在260有特征吸收。
蛋⽩在280有特征吸收，故可以定量蛋⽩。
⽽，两者的⽐值，可以反应样品核酸的纯度。
DNA或RNA的浓度OD260=1.0相当于50 g/ml双链DNA(dsDNA)40 µg/ml单链DNA/RNA20 µg/ml寡核苷酸(Oligos)DNA或RNA的纯度DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0蛋⽩质定量—最常⽤的两种⽅法y Bradford法—考马斯亮蓝染⾊法考马斯亮蓝G-250和蛋⽩结合形成蓝⾊化合物（在595 nm处有最⼤吸收峰）BCA法蛋⽩质的酞胺键在碱性条件下和Cu2+反应⽣成Cu+与BCA结合形成紫⾊复合物（在562 nm处有最⼤吸收峰）因为特征吸收波长的原因，F50，SUNRISE不能做核酸和蛋⽩定量。
光的偏振现象及应用在我们日常生活和科学研究中，光无处不在。
然而，光的奥秘远不止于它的明亮和温暖，其中一个引人入胜的现象便是光的偏振。
光，通常被我们认为是一种电磁波，如同水波一样，在空间中传播。
但与水波不同的是，光的振动方向是多样的。
而当光的振动方向变得有规律，不再是随意的各个方向时，就产生了偏振光。
想象一下，你手中拿着一根绳子的一端，上下抖动，产生的波沿着绳子传播。
如果这时候你给绳子加一个限制，让它只能在一个方向上抖动，那么产生的波就是偏振的。
光的偏振也是类似的道理。
偏振光有几种常见的产生方式。
其中一种是通过反射。
当自然光以特定的角度照射到某些表面时，反射光会变成偏振光。
比如，我们在开车时，有时候会看到路面或者水面反射的强光非常刺眼，这时候如果我们戴上偏振眼镜，就能有效地减弱这种反射光，让我们看得更清晰。
另一种产生偏振光的方式是通过偏振片。
偏振片就像是一个特殊的“筛子”，只允许特定方向振动的光通过。
我们常见的偏振眼镜就是在镜片中加入了偏振片。
那么，光的偏振现象有哪些奇妙的应用呢？在摄影领域，偏振镜可是摄影师们的得力助手。
当拍摄蓝天时，使用偏振镜可以减少大气散射导致的偏振光，让蓝天更加湛蓝，白云更加突出，增强画面的对比度和色彩饱和度。
拍摄玻璃橱窗内的物品时，偏振镜能够消除玻璃表面的反射光，清晰地展现橱窗内的展品。
在 3D 电影中，偏振光也发挥着关键作用。
3D 电影的原理是让观众的左眼和右眼分别看到不同的图像，从而产生立体感。
通过特殊的放映设备和偏振眼镜，让左眼看到一种偏振方向的光，右眼看到另一种偏振方向的光，这样我们就能感受到逼真的 3D 效果。
在科学研究中，偏振光更是不可或缺。
例如，在化学分析中，利用物质对偏振光的吸收特性，可以确定分子的结构和性质。
在天文学中，通过观测来自遥远天体的偏振光，可以了解天体周围的磁场分布和物质的运动情况。
在通信领域，偏振光也有着独特的应用。
由于偏振光的振动方向可以被精确控制和调制，因此可以用于提高光通信的容量和保密性。
光的偏振与偏振光的应用光的偏振是光波在传播过程中振动方向的归属。
光的偏振可以分为线偏振和圆偏振两种类型。
线偏振光是指光波振动方向只在一个平面上的偏振光，而圆偏振光是指光波在空间中呈现出旋转状的偏振光。
光的偏振性质在许多领域有着广泛的应用，本文将探讨光的偏振以及偏振光在科学研究和技术应用中的重要性。
一、光的偏振的起源和特性光的偏振现象最早由法国科学家雅克·布鲁斯特在19世纪初发现。
他发现光在介质界面反射时，发射出的光线呈现出具有特定方向的偏振现象。
进一步的研究发现，光的偏振是由电磁波的振动方向决定的。
根据波动理论，光可以看作是电场和磁场相互垂直并在空间中传播的电磁波。
光波的电场分量在垂直于传播方向的平面内振动，而偏振光则是指光波的电场分量在特定方向上振动的光。
具体而言，线偏振光是指电场分量偏振于一个确定的平面，而圆偏振光则是电场分量绕传播方向旋转形成的。
二、光的偏振的应用领域1. 光学显微镜：光的偏振在生物学和材料科学中有着广泛的应用，特别是在显微镜观察下的样品分析。
通过使用偏振片和偏振镜，可以有效地调节进光的偏振方向，使得只有偏振方向与样品性质相互匹配的光能通过样品，从而获得清晰的图像和更多的细节信息。
2. 偏振光与液晶显示：液晶显示技术中，利用偏振光的特性，通过电场控制液晶分子的排列方向，进而调节光的偏振方向，实现图像的显示和色彩的变化。
这种技术被广泛应用于电子产品中的液晶显示屏和液晶电视中。
3. 偏振光与光学器件：偏振光的应用不仅仅局限于显示技术，还广泛应用于制造各种光学器件中，如偏振片、偏振镜、偏振器等。
这些器件可以选择性地调节和控制光的偏振方向，用于光的分析、光的操控和光的调制等方面。
4. 偏振光与材料科学：光的偏振在材料科学研究中也扮演着重要的角色。
通过研究材料对不同偏振光的吸收、散射和透射特性，可以了解材料的结构、性质以及相互作用方式，为材料的设计和应用提供依据。
5. 光纤通信：光纤通信技术中，偏振保持和偏振控制对于信号传输的稳定性和可靠性具有重要意义。
适配体解离常数测量方法适配体作为一种重要的生物分子识别元素，广泛应用于生物检测、药物筛选等领域。
适配体与目标分子结合的稳定性可通过解离常数来衡量。
本文将详细介绍适配体解离常数的测量方法，以供研究者参考。
一、荧光偏振法荧光偏振法是测定适配体解离常数的一种常用方法。
该技术基于荧光分子与适配体结合后，荧光偏振程度发生变化的原理。
具体步骤如下：1.将荧光标记的适配体与不同浓度的目标分子混合。
2.在一定温度下，测量混合体系的荧光偏振值。
3.通过非线性拟合分析荧光偏振值与目标分子浓度之间的关系，计算出适配体的解离常数。
二、紫外-可见光谱法紫外-可见光谱法是通过监测适配体与目标分子结合后引起的吸光度变化来测定解离常数。
具体步骤如下：1.将适配体与不同浓度的目标分子混合。
2.在一定波长范围内测量混合体系的吸光度。
3.通过分析吸光度变化，计算出适配体的解离常数。
三、等温滴定量热法等温滴定量热法（ITC）是一种直接测量生物分子结合热力学参数的方法。
通过监测滴定过程中体系的温度变化，可以得到适配体与目标分子结合的解离常数。
具体步骤如下：1.将适配体与目标分子混合，在一定温度下进行滴定。
2.记录滴定过程中体系的温度变化。
3.通过分析温度变化数据，计算出适配体的解离常数。
四、表面等离子共振法表面等离子共振法（SPR）是一种基于光学原理的检测技术。
通过监测适配体与目标分子结合过程中引起的表面等离子共振角度变化，可以测定解离常数。
具体步骤如下：1.将适配体固定在传感器芯片表面。
2.将不同浓度的目标分子流过芯片表面。
3.通过分析表面等离子共振角度变化，计算出适配体的解离常数。
五、总结以上四种方法均可用于测定适配体的解离常数。
研究者可根据实验条件、样品特性及设备要求选择合适的方法。
在实际应用中，结合多种方法可以提高测量结果的准确性和可靠性。
偏振发射光谱的原理和应用1. 偏振发射光谱简介偏振发射光谱是指利用偏振光和发射光之间的相互作用来研究材料光学特性的一种分析技术。
通过测量物质发射光在不同偏振方向上的特性，可以获取关于材料结构、电子态和光学特性等方面的信息。
偏振发射光谱在物理、化学、光电子学和材料科学等领域得到广泛应用。
2. 偏振发射光谱的原理偏振发射光谱的原理可以归结为两个主要过程：发射光的产生和偏振光的测量。
2.1 发射光的产生偏振发射光谱的发射光可以是荧光、磷光或其他发射光。
当一个光子激发材料中的电子，电子会跃迁到一个较低的能级上，释放出一个光子，即发射光。
这个发射光的偏振方向和发射光的能量有关，因为电子的跃迁过程中受到不同偏振的激发光的影响。
2.2 偏振光的测量为了测量发射光的偏振性，需要使用偏振器和极化检测器。
偏振器可以选择特定的光偏振方向，并将发射光分为偏振光和未选择的偏振光。
而极化检测器则可以测量这种偏振光的强度。
3. 偏振发射光谱的应用偏振发射光谱在许多领域中都有广泛的应用。
以下是其中一些典型的应用：3.1 材料科学偏振发射光谱在材料科学中的应用非常广泛。
通过测量材料的偏振发射光谱，在材料结构和电子态方面可以获得有关信息。
这对于材料的研究和开发非常重要。
3.2 生物医学偏振发射光谱在生物医学领域也有许多应用。
例如，通过测量荧光偏振光谱可以研究生物分子的结构和动力学。
这对于理解生物体内的生物化学过程和疾病诊断具有重要意义。
3.3 光电子学偏振发射光谱在光电子学领域中扮演着重要角色。
通过测量发射光的偏振性，可以获得关于光电子器件中电子态的信息。
这对于光电子器件的设计和优化非常关键。
3.4 光学在光学领域，偏振发射光谱也有许多应用。
例如，可以通过测量材料的偏振发射光谱来研究材料的光学特性。
这对于开发新型光学材料和光学器件具有重要价值。
4. 结论偏振发射光谱是一种重要的分析技术，可以用于研究材料的光学特性。
它的原理基于发射光的产生和偏振光的测量。
