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以原花青素B2标定葡萄籽提取物中原花青素含量

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以原花青素混合物做标准品其原花青素含量标 准不统 一， 无法让人信服的 问题 ， 测定结果能准确反 映葡萄籽提取 其
物 中的原 花青素的真 实含量 ， 可用作质控 方法 。 关键词 ： 原花青素 Ｂ ； ２ 原花青素 ； 萄籽提取物 葡
Ｄｅｅ ｍｉ ｏ ｎｔ ｃ ａ ｉ ｎ ｎ Ｇｒ ｐ ｅ ｔ ａ ｔｗｉｈ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｄ ｎ Ｂ２ Ｓ ａ ａ ｄ ｔ ｒ ｎｅＰｒ ａ ｈｏ ｙ ｎ ｄｉｓｉ ａ ｅＳｅ ｄ Ｅｘ ｒ ｃ ｔ Ｐｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎｉ ｉ ｔ ｎｄ ｒ Ｗ Ｕ ｅ ，ＣＨＥＮＧ ｕ ｆ ｎ Ｗ ｉ Ｘｉ－ ｅ ｇ，ＷＡＮＧ ｕ — ｕｉ Ｃｈ ｎ ｈ ，ＣＵＩＷ ｅ —ｘ ，ＦＵ ｎ — ｉ ｇ ｎ ｉ Ｙｉ ｇ ｙｎ
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原 花青 素是 一类 物质 ， 它们 是 由儿 茶素 、 表儿 茶 素 及其没食 子酸酯 通过 ｃ 一 ６或 Ｃ 一 ８ ４Ｃ ４ ｃ 键共 价相 连
的原花青素对照仍是混合物 ，如何确定其对照样 的含
量仍然是无法让人信服 。为此 ， 采用原 花青素 Ｂ ２纯品
组成 的多 聚体 ， 葡萄 籽提取物 中的最 主要 成分 就是原
ｂ ｙＨＰＬ ｔ ａｉ ｒ ｔ ｒ ａ ｔｏ ｙ ｎ ｄ ｎ ． ｅ ｏｖｎ ｅｐ ｏ ｌ ｍ ａ ｈ ｔｎ ｒ ｏ ｔ ｎ ｏ ｄ ｎ ｉａ ｎ ａ Ｃ ｏｃ ｌｂ ａ ｅｐ ｏ ｎｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｓ ｒ ｓ ｌ ｉｇｔ ｒ ｂｅ ｔ ｔｔｅ ｓａ ｄａｄ ｃ ｎｅ ｔｓｎ ｔ ｅ ｔｃ ｌ ｄ ｃ ｎ ｈ ｈ ｉ ｉ ａ ｎ ｔ ｏ ｖｎ ｅｗｈ ｎｕｓｎ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄｎ ｃ ｍｐ ｕ ｄ ｓａ ｄ ｒ Ｔｈ ｔ ｏ ａ ｅｂ ｔｅ ｉｅ ｒｔ ｎ ｏ ｎ ｉ ｃ ｅ ｉ ｇｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉｉ ｏ ｏ ｎ ｔ ｎ ａｄ． ｅｍｅｈ ｄ ｈ ｖ ｅｔｒｌ ａ ｉ ａ ｄ ｃ ｎ ｙ ｒ ｐ ａ ａ ｉ ｔ ， ａ ｅｅ ｔ ｒｐｅｓ ｅ ｘｒ ｃ ＇ ｐ ｏ ｎｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｓｅ ａ ｔ ． ｅ ｅ ｔｂ ｌ ｙ ｃ ｎ ｄ ｔｃ ａ ｅ ｄ ｅ ｔａ ｔｓ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄ ｎ ｘ ｃｌ ｉ ｇ ｙ Ｋｅ ｒ ｓ ｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉｉ ； ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄ ｎ ｇ ａ ｅｓ ｅ ｘ ｒｃ ｙ ｗｏ ｄ ： ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎｄ ｎ Ｂ２ ｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ； ｒ ｐ ｅ ｄｅ ｔａ ｔ
素 Ｂ 通 过 Ｂ ｔ— ｍｔ ２ ａｅＳ ｉ ｈ法反 应 后 的 吸 光度 与 浓 度 成 良好 线 性 关 系 ，其 线 性 范 围 为 ２ ． 咖 Ｌ ｌ４５￣／ Ｌ ｒ０ ９ ０ ２９ ８ ～ ｌ．Ｉ ｍ ， ． ９ ２ ｇ － ＝９
（＝ ） 回收率：７９ ｎ５ 。 ９． ９％， Ｓ ：０ Ｒ ＤＩ ２％（＝ ） 该 法以通过 Ｈ Ｌ ． ｎ ６。 Ｐ Ｃ标定的原花青素单一成分 Ｂ ２做为标准品 ， 解决 了过 去
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花青 素 ， 各种聚合程度的原花青素在其 中混合存在着 ， 测 定其 中总 原花 青素 的含 量是 衡量 其质 量 好坏 的 主 要指标之 一 。然而 目前 原花青素 的测定存在着一些 问 题 。首先 ， 虽然 测定原 花青素方法 的细节各不相 同 ， 但
检 测 ｃ ｄＤｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｏ ｄ Ｒｅｅ ｒ ｈＡｎ ｖ ｌｐ ｎ
２１ ０ １年 ４月 第３ ２卷第 ４期
１ ４１ ＝ ＝ ＝一
以原花青素 Ｂ 标定葡萄籽提取物中 ２ 原花青素含量
吴 巍 ， 秀凤 ， 程 王春辉 ， 崔文熹 ， 傅荧荧 （ 天津 市尖峰天然产物研究开发有 限公司 ， 天津 ３０ ５ ） ０４ ７
摘 要 ：建 立以原花青 素 Ｂ ２办标 准品测 定葡萄籽提取 物 中原 花青素含量 的方法 。以含量 ＞９ １ ９％的原花青 素 Ｂ ２
（ Ｐ Ｃ标定 ） ＨＬ 做标准品 ， 参照 Ｂ ｔ— ｍ ｔ ， ５ ６ｑ ａｅＳ ｉ ｈ法 在 ４ ｌ ｍ处测 定吸光度 ， 来标 定葡萄籽提取物 中原花青素含量 。原花青

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葡萄中活性物质研究进展

葡萄中活性物质研究进展

摘要：葡萄皮、梗、籽中含有一定的蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维素等成分，其总酚含量(以没食子酸GAE 相当物计算)分别为1.82%、1.79%、4.85%，原花青素含量分别为0.85%、0.72%、3.05%(以湿基含水10%计算)，具有很大的开发利用价值。

研究结果表明：选择130~150 目的葡萄葡萄是世界上产量最大的水果之一，年产量约为 6500 万 t，其中 80%用于酿酒、13%作为鲜果食用、7%用于加工果汁及其它葡萄产品。

我国葡萄年产量约有 200 多万 t，其中 40%作为鲜果食用，40%用于酿酒，20%用于加工葡萄干、果汁等制品。

葡萄加工过程中产生的废弃物(皮、籽、梗)约占鲜果总重的20%左右，其中葡萄籽约占鲜果总重的7%~10%。

目前，我国酿酒葡萄废弃物(俗称葡萄皮渣)大部分作为肥料、饲料或烧材，利用率很低，而法国、意大利、西班牙等葡萄酒大国，其70%以上的葡萄籽都得到了很好的利用。

研究表明[1]：葡萄废弃物中含有大量以植物多酚为主的生物活性物质，如白黎芦醇、酚酸、黄酮、儿茶素、表儿茶素、原花青素等，具有抗氧化、清除自由基、降血压、降血脂、消炎、抗癌、治疗心血管疾病等功效[2-3]。

1995 年，从葡萄籽中提取的原花青素被美国公众评为最受欢迎的十种植物药之一。

1997 年，美国《Whole Food》杂志对美国200家草药零售商(或称天然食品店)销售情况进行了调查，葡萄籽提取物(主要成分为原花青素)的年销售额为997 万美元。

在欧洲、东南亚一带(韩国、日本、台湾)，原花青素越来越受到了人们的重视。

每年，我国葡萄废弃物高达十几万吨，如何对葡萄废弃物进行有效的综合利用一直是食品科技工作者极为关注的问题。

研究和解决酿酒葡萄皮渣利用问题，不仅有利于防止环境污染，而且能生产出附加值高的产品，因而具有一定的经济效益和社会意义。

3.1 以 130~150 目的葡萄籽粉为原料，采用90%甲醇提取，在温度20℃、搅拌时间为40min 时，多酚提取率最高为100.02%；同样条件下，用70%丙酮提取，原花青素提取率最高，为99.11%。

葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化

葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化


富含原花青素的刺葡萄
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一、原花青素的介绍
原花青素抗氧化机理的介绍
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二、原花青素提取纯化具体方法

OPC纯化
OPC初步分离提取
①溶剂提取法 ②微波法 ③超临界C02萃取法
①大孔树脂吸附法
②超过滤法
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二、原花青素提取纯化具体方法
1、原花青素的初步分离提取 ①溶剂提取法 ●溶剂提取法是提取葡萄籽中原花青素的最常用的方法 ●方法：石油醚脱脂---乙醇粗提---调节pH---乙酸乙酯萃取 ●青葡萄籽产物纯度和得率达67.35％和7.86％；红葡萄籽产物纯度 和得率达55.20％和5.36％
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二、原花青素提取纯化具体方法
2、原花青素的提纯 ②超过滤法 ●原理：超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分 子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透 过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。
●最后纯度可达到99.9%
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三、综合讨论
对于原花青素(OPC)的分离纯化工艺的选择没有明确的标准，根据 具体情况可以分为以下几种： ●对于花青素的初步分离提取，溶剂法明显更适合，原由它剂毒性小、 副作用小、提取率较高。如对产品纯度有进一步要求，微波提取法便 更合适。 ●对于花青素纯度要求很高的工艺，超临界CO2萃取和超滤法相结合便是 最好选择。 ●大孔树脂分离技术是当前分离纯化研究重点，应用于大多数分离纯化 工艺中，具有远大前景。
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二、原花青素提取纯化具体方法
1、原花青素的初步分离提取 ②微波法 ●原理：利用磁控管所产生的每秒24.5亿次超高频率的快速震动， 使植物内分子间相互碰撞、挤压，从而有利于其有效成分的浸出 ●方法：以70％乙醇水溶液为介质，葡萄籽整粒料液比(g:mL)l:11， 微波功率180 w处理10 s，然后在50℃水浴浸提30 min ●提取率达到38％，超过传统水煮法。
原花青素简介

原花青素简介


原花青素（Proantho Cyanidins，PC），又名缩合鞣质，可视作花青素( cyanidin)类物质的聚合物，是自然界中广泛存在的一类多酚类化合物。通常将从植物中分离得到的一切无色的、在无机酸存在和加热处理下能产生红色花青素( cyanidin)的一类多酚化合物统称为原花青素（赵平2011）。最初是在20世纪40年代从花生仁的包衣中提取出来，在50年代又被法国科学家从海松树皮中发现并提取出来，并将其提取率提高到达85%。近来，研究证明原花青素是很强的抗氧化剂，可以清除自由基，其抗氧化、清除自由基的能力是维生素E的50倍、维生素C的20倍，能防治80多种因自由基引起的疾病，包括心脏病、关节炎等，还具有改善人体微循环功能（张长贵2009）。目前，原花青素作为营养强化剂、天然防腐剂、天然抗氧化剂、DNA保护剂等，被广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。
4.3 pH示差法
pH示差法是利用原花青素在不同pH下呈色不同的性质进行检测。pH 1.0时，原花青素颜色最深; pH 4.5时，以无色的半缩酮形式存在。pH示差法是基于此反应来快速准确地测量花青素含量的方法（Clifford et al 2000）。pH示差法是一种简便的测定原花青素含量的方法，能很好地消除溶液中杂质对测定结果的影响,可信度较高。
2化学结构及分类
原花青素是以黄烷-3-醇为结构单元通过C-C键聚合而形成的化合物，起初称为黄烷醇类或归于缩合鞣质。其结构分类主要取决于五方面：（1）黄烷-3-醇单元的类型；（2）单元之间的连接方式；（3）聚合程度（组成单元的数量）；（4）空间构型；（5）羟基是否被取代（如羟基的酯化、甲基化等）。根据原花青素的聚合程度可分为单倍体（monomer）、寡聚体（oligomer）和多聚体（polymer）（Alan et al 2008）。其中单倍体是基本结构单元，寡聚体由2～10个单倍体聚合而成，多聚体则由10个以上的单倍体聚合而成（张慧文2015）。
紫外分光光度法测定葡萄籽提取物中的原花青素含量

紫外分光光度法测定葡萄籽提取物中的原花青素含量

紫外分光光度法测定葡萄籽提取物中的原花青素含量作者：傅武胜， 赵道辉， 黄剑锋作者单位：傅武胜,赵道辉(福建省卫生防疫站,福州,350001)， 黄剑锋(南京市卫生防疫站,南安,360001)刊名：食品研究与开发英文刊名：FOOD RESEARCH AND DEVELOPMENT年，卷(期)：2002，23(6)被引用次数：27次1.Vanhaelen M.Vanhaelen-Fastrer TLC-densimetric determination of 2 3-procyanidin monomer and oligomers from hawthorn (crataegus Laevigata and C.monogyna) 1989(12)2.傅武胜铁盐催化比色法测定葡萄籽提取物中原花青素的研究[期刊论文]-食品与发酵工业 2001(10)wrence J Porter.Liana N Hrstrichm.bock G查看详情 1986(01)4.David M I Mcmurrough.Malcom R Smyth Determination of proanthocyanidins and catechins in beer and barley by high-performance liquid chromatography with dual-electrode electrochemical detection 19945.Toshiko Shoji.Akio Yanagida.Tomomasa Kanda Gel permeation Chromatography of nathocyanin pigments from rose cider and red wine 1999(07)6.Yanagida nda T.Shoji Fraction of Apple Procyanidins by Size-exclusion Chromatography 19991.期刊论文马红江.王莹.葛彬.唐慧芬.李予霞.任雪艳吐鲁番地区常见品种葡萄籽中原花青素和脂肪含量的测定-安徽农业科学2008,36(8)[目的]测定吐鲁番地区常见葡萄品种葡萄籽中活性成分的含量.[方法]以吐鲁番地区常见的13个葡萄品种的葡萄籽为材料,测定并比较各品种葡萄籽中原花青素和脂肪的含量.[结果]在各品种葡萄籽中.和田红葡萄籽的脂肪含量最高,达21.5%;玛奶子葡萄籽次之,为21.0%;星浦一号葡萄籽最少,仅12.5%.原花青素含量最高的葡萄籽是黑提,达9.150%;赤霞珠次之,为8.790%;哈什汉最少,仅3.800%.[结论]该研究为吐鲁番地区葡萄籽的综合开发利用提供了理论依据.2.期刊论文任其龙.魏冠红.金米聪.苏宝根.黄梅.Ren Qilong.Wei Guanhong.Jin Micong.Su Baogen.Huang Mei 反相高效液相色谱-电喷雾质谱法鉴定葡萄籽低聚原花青素-食品与发酵工业2006,32(3)建立了采用LC-ESI-MS对葡萄籽提取物中的多种低聚原花青素进行分析鉴定的方法.原花青素用体积分数60%乙醇水溶液从葡萄籽中提取并用聚酰胺柱层析精制后,以乙腈-1%醋酸水溶液为流动相在ZORBAXSB-C18柱上进行梯度洗脱分离,在电喷雾电离负离子模式下采用选择离子监测模式(SIM)将几种低聚体进行了选择性的分离.结果所检葡萄籽提取物中共含有(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素和(-)-表儿茶素没食子酸酯3种单体、8种非酯型和4种没食子酸酯型共12种二聚体及4种非酯型三聚体等.建立的方法可以较好地解决葡萄籽中各种低聚原花青素的定性检测,了解提取物中原花青素的成分.同时文中还对原花青素二聚体的质谱碎裂途径进行了讨论.3.学位论文李春阳葡萄籽中原花青素的提取纯化及其结构和功能研究2006葡萄是世界上经济价值较高的一种水果，为葡萄科(Vitaceae)葡萄属(Vitis)植物。