葡萄籽原花青素的分离提纯及抗氧化性研究
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原花青素的提取、分离及抗氧化性、稳定性的研究本文以葡萄籽、葡萄叶子为原料,对其原花青素的提取工艺进行了研究。
在提取葡萄籽中的原花青素时采用50%乙醇,料液比1/40,于60℃下热回流浸提2个小时,提取2~3次最优提取工艺,此工艺提取得到的原花青素提取物得率为22.01%,产品纯度为51.17%;提取葡萄叶子时采用70%乙醇,料液比1/50,于80℃下热回流浸提3个小时,提取1~2次的最优提取工艺,此工艺得到的原花青素得率为34.14%,纯度为13.66%。
对上述提取物进一步纯化,葡萄籽提取物选用AB-8大孔吸附树脂,50%乙醇为洗脱剂,流速控制在4mL/min左右,葡萄籽原花青素总的提取得率为9.09%,产品纯度能达到94~95%;葡萄叶子提取物选用D-101大孔吸附树脂,70%乙醇为洗脱剂,流速控制在4mL/min左右,其原花青素提取得率为18.21%,纯度为25.63%。
采用超滤法对大孔吸附后的葡萄籽精提物进行低聚体的提纯,其过膜后的单体儿茶素含量有明显增加,P5000约为过膜前的6.6倍,P1000为过膜前的7.7倍。
其中压力对超滤通量的影响较大,而温度影响较小,一般选择20~30psig,室温下操作即可,避免在操作过程中长时间将过滤液暴露于强光及空气中。
利用Sephadex LH20将P5000样继续分离,使含量较高的一种二聚体得到了富集。
原花青素的抗氧化(FRAP)、清除DPPH自由基实验表明,葡萄叶子原花青素抗氧化、清除自由基活性均强于抗坏血酸,稍强于葡萄叶子提取物,而与原花青素的低聚体、高聚体相差不大。
原花青素在不同温度、光照、氧气的条件下1~2天内具有较好的稳定性。
经长期(10天)紫外光照射不稳定,含量下降甚至消失,溶液颜色逐渐加深,但其抗氧化、清除自由基能力无显著性变化(p>0.05)。
抗坏血酸对紫外照射引起的原花青素不稳定能起到保护作用,并且存在剂量依赖效应。
类似于口服液等的原花青素溶液产品较适用微波法灭菌。
葡萄籽中原花青素的提取工艺研究摘要:本文初步研究了葡萄籽中原花青素溶剂提取工艺,考察了溶剂种类、溶剂浓度、提取时间、提取温度、料液比等因素对原花青素提取量的影响,最终确立最佳提取条件:溶剂为乙醇(乙醇浓度为60%),提取时间为50min,提取温度为60℃,料液比为1:6。
关键词:葡萄籽;原花青素;溶剂提取中图分类号:ts2644文献标识码:a基金项目:吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(项目编号:吉教科合字[2010]第517号)葡萄是日常生活中非常常见的水果,可以直接使用,但绝大部分作为酿酒原料,而酿酒后的葡萄籽多被作为工业废渣弃去,这不仅浪费资源而且污染环境。
研究发现,葡萄籽中富含原花青素。
花青素具有抗氧化、抗突变、抗癌细胞等多种生物活性。
原花青素是一种可供选择的、极好的保健品原料,此外还具有抗辐射、抗疲劳,改善记忆力等作用。
本文初步探索有关葡萄籽中原花青素的溶剂提取方法,研究了最佳溶剂提取条件,为下步分离提纯提供理论依据。
1材料与方法11材料巨丰葡萄籽;原花青素,无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、三氯甲烷、水均为分析纯。
12设备食品粉碎机,北京环亚天元机械技术有限公司;722紫外可见分光光度计,上海悦丰仪器仪表有限公司;电子天平,上海卓精bsm —2100;恒温水浴锅,广州威德玛环境仪器有限公司;85-2数显恒温磁力搅拌器;紫花牌循环水真空泵;飞鸽牌系列离心机。
13试验方法131标准曲线的绘制分别取原花青素标准液100、200、300、400、5 00ml于10ml刻度试管中,加入无水乙醇定容至10ml,塞紧后充分摇匀,制得浓度分别为104、208、312、416、52 0ug/ml的标准系列溶液。
在500nm处以无水乙醇作空白调零扣除背景值,测定标准系列溶液吸光值a,并绘制原花青素浓度-吸光值标准曲线。
溶液中原花青素浓度在104~520ug/ml范围内,与吸光值a呈线性关系,其回归方程式为a=3612c-0032,相关系数r=09991。
超声提取葡萄籽原花青素工艺的优化及其抗氧化活性研究金华*,刘志刚,曾晓丹,高艳,马明硕(吉林化工学院分析测试中心,吉林吉林 132022)摘要:研究利用响应曲面法优化超声提取葡萄籽原花青素的工艺。
在单因素实验基础上,采用中心组合设计响应面实验,考察了提取温度、液料比、乙醇浓度以及超声时间对原花青素提取率的影响,并建立回归模型。
优化后的工艺:提取温度55℃,液料比20(mL/g),乙醇浓度65%,超声时间10min;在此条件下葡萄籽原花青素的提取率为2.482%,与回归模型预测值的相对偏差为0.36%。
同时进行了提取物的抗氧化性检验,结果表明葡萄籽原花青素对超氧阴离子自由基具有较好的清除能力,且呈剂量相关性。
关键词:葡萄籽原花青素(GPA);超声提取;响应曲面;抗氧化中图分类号:TS202.3 文献标志码:A doi:10.3969/j.issn.1000-9973.2014.04.026文章编号:1000-9973(2014)04-0102-06Study on Optimization of Ultrasonic Extraction of Procyanidinsfrom Grape Seeds and Its Antioxidant ActivityJIN Hua*,LIU Zhi-gang,ZENG Xiao-dan,GAO Yan,MA Ming-shuo(Analysis and Testing Center of Jilin Institute of Chemical Technology,Jilin 132022,China)Abstract:Response surface methodology(RSM)is used to optimize the ultrasonic extraction technology ofprocyanidins from grape seeds.On the basis of single factor test,a central composite designexperiment is conducted and the response surface analysis is employed to investigate the influences offour main factors including ultrasonic extraction temperature,ratio of solvent to raw material,ethanolconcentration and ultrasonic time on the yield of procyanidins.Then a regression model is established.The optimum condition is temperature of 55℃,ratio of solvent to raw material of 20(mL/g),ethanolconcentration of 65%and extraction time of 10min.Under such conditions,the yield of procyanidinsis 2.482%,which is extremely consistent with the experimental value with a relative error of 0.36%.Pyrogallol oxidation method is applied for determination of antioxidant activities of procyanidins ingrape seeds.The results show that the extraction has capacity to scavenge radical and the scavengingactivity increases with the procyanidins concentration.Key words:grape seed procyanidins(GPA);ultrasonic extraction;response surface methodology;antioxidant 东北山葡萄是在长白山高山气候环境下生长的特有品种,所酿造的山葡萄酒以其独特的风味和集滋补养身、祛病延年为一体的至高品质深受国内外欢迎。
葡萄籽原花青素的提取技术研究概况葡萄籽原花青素的提取技术研究概况摘要:原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物,葡萄籽被认为是提取原花青素的最正确原料。
随着科技的开展和进步,提取技术不断被突破,本文分析和整理近年来国内外期刊有关的文献,对葡萄籽原花青素的提取技术进行综述,为葡萄籽原花青素的工业生产研究提供参考。
关键词:葡萄籽,原花青素,提取原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物。
葡萄籽作为葡萄酒及葡萄汁生产的下脚料,是原花青素的主要来源,具有明显的本钱优势,被认为是提取原花青素的最正确原料。
原花青素由不同数量的单体黄烷-3-醇缩合而成,黄烷醇结构上可以连接不同的酰基或糖酰基,最常见的是没食子酸与-表儿茶素C3羟基缩合形成的酯。
由于单体组成及单体间连接键的不同,每种聚合体还可能包含许多同聚异构体,形成复杂的混合物。
通常将聚合度2~4的称为低聚体,将聚合度5以上的称为高聚体。
随着科学技术的快速开展和进步,传统提取方法不断被突破,超临界流体萃取、微波辅助提取以及动态罐组式连续逆流提取等新的提取方法和技术不断完善。
这些新技术具有提取率高、提取物纯度高、提取速度快等优点,具有十分广阔的应用前景。
1 提取技术1.1 超临界流体萃取超临界流体萃取是以超临界流体代替常规有机溶剂,对中草药中有效成分进行萃取和别离的新技术。
气体在超临界状态下兼有气液两相的双重特点,既具有与气体相当的高扩散系数和低黏度,又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力。
将处于超临界状态下的流体与待别离的中药材接触,选择性地溶解其中的某种成分,然后通过减压,使超临界流体迅速挥发,被溶解的物质以固态或液态形式析出,从而实现所需组分的提取与别离。
国内外均有运用CO2超临界流体萃取法制备葡萄籽原花青素的报道。
胡佳兴【1】利用甲醇为夹带剂的超临界萃取法提取葡萄籽中的原花青素;Chafer等【2】也是采用乙醇作为夹带剂提取原花青素,并用HPLC法测定提取物中的成分;Pinelo等【3】比较了超临界流体萃取法与固液萃取法,发现前者提取的原花青素具有更好的抗氧化性。
葡萄籽中分离提取原花青素的研究花青素是一类多酚类化合物,其具有高效的清除自由基的功能,是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。
本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素,考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响,确定了最佳的单因素水平。
研究结果表明:本项目产品投资费用少,操作费用低,产品附加值高;原料为废物利用,变废为宝符合国家相关产业政策;几乎没有“三废”排放,使用的溶剂全部回收利用,废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。
标签:花青素;葡萄籽;提取;正交实验1 概述原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物,多以糖苷的形式存在,也称花色苷。
属于缩合鞣质或黄烷醇类。
最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。
它于1879年在意大利上市。
由于原花青素的多种功效,由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。
目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。
已经将其应用到工业化产业,开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。
原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。
2 葡萄籽中花青素的提取本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素,考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响,确定了最佳的单因素水平。
并通过设计正交实验,得出原花青素提取最佳工艺条件。
2.1 实验方法2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。
在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕,所得的这些榨渣中,以换成干品计,约有50%的葡萄皮,45%的葡萄籽和少量的梗等,将该榨渣经粗选分离出葡萄籽,作为提取的原料。
所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后,过20目筛,于磨口三角瓶中,经石油醚脱脂脱水份,得脱脂葡萄籽粉,用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提,离心后取上清液,反复提取若干次,最后洗涤残渣,将上清液和洗涤液合并,加入固体无水硫酸钠脱水,倾出上层溶液,在真空度为0.095MPa,温度为40℃的条件下真空浓缩,浓缩液冷却至室温,得到原花青素粗提液,干燥,制得粗提物。
刺葡萄籽原花青素提取、提纯及其抗氧化性的研究的开题
报告
一、选题背景
花青素是一类天然的多酚化合物,广泛存在于植物中,如红酒、葡萄、柿子、紫薯等。
花青素具有良好的抗氧化性能、降低血糖、抗炎等多种生物活性,因此在食品、医药、化妆品等领域具有广阔的应用前景。
刺葡萄是一种生长于中国南方的果树,其果实富含花青素,并且具有丰富的营养价值。
因此,对刺葡萄籽中花青素的提取、提纯及其抗氧化性进行研究,对于充分利用刺葡
萄资源,开发新型抗氧化剂具有重要意义。
二、研究内容
本研究主要围绕刺葡萄籽原花青素的提取、提纯及其抗氧化性开展。
具体步骤如下:
1. 采集刺葡萄果实,分离出籽,干燥后制备成粉末。
2. 采用酒精提取、正硅酸钙柱层析、聚合物吸附树脂等方法对刺葡萄籽中花青素进行
提纯。
3. 对提取、提纯后的样品进行UPLC、HPLC等方法的分析,确定其组成及含量。
4. 测定提取、提纯后花青素的总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力、还原力等指标,评价其抗氧化性能。
5. 对提取、提纯后的花青素进行稳定性、溶解性、保存条件等方面的评价。
三、研究意义
本研究将对刺葡萄籽中花青素的提取、提纯及其抗氧化性进行深入的研究,可以为刺
葡萄资源的开发利用提供重要科学依据。
同时,本研究所得的刺葡萄籽花青素提纯制
备工艺、抗氧化性能等方面的成果,也有望为制备高附加值的抗氧化剂、食品添加剂、保健品等提供有效的技术支持。
・实验研究Experimental R esearch ・葡萄籽原花青素的梯度分离及其抗氧活性研究3Studies of G radient Extraction of G rape Seed Proanthocyanidin and Their Anti 2oxidative Effects杨怀霞Yang Huaixia 1,马庆一Ma Qingyi 2,许 闽Xu Min 11.河南中医学院Henan College of Traditional Chinese Medicine ;2.郑州轻工业学院Zhengzhou Institute of Light Industry摘要:目的:研究葡萄籽原花青素的梯度分离方法及各组分的抗氧化性能。
方法:葡萄籽样品通过乙醇粗提后,用不同溶剂梯度分离得到各组分,以乙酸乙酯组分为代表确定DPPH ・法测定活性的最佳浓度范围,再比较各组分自由基淬灭能力。
结果:最佳活性测定样品浓度范围1.0~10μg/ml ,运用此法测得的清除率在25%~80%之间,灵敏度和准确度较高;葡萄籽梯度分离各组分清除自由基能力:乙酸乙酯组分≥丙酮组分>乙醇组分>乙醚组分>乙醇粗提物>二氯甲烷组分>石油醚组分;其中乙酸乙酯组分和丙酮组分活性尤其突出,表明有高活性成分富集其中。
结论:梯度分离葡萄籽原花青素提取物的效果令人满意。
Abstract :Objective :To explore gradient extraction of grape seed proanthocyanidin and their antioxdative effect.Method :After sam 2ple grape seeds were extracted with ethanol ,the active components were obtained by application of different organic solvents.Through investigation of the free 2radical scavenging effect of ethylacetate components ,the optimum concentration range was deter 2mined by DPPH method and a comparison was made on the antioxidative effects of the different components from grape seeds.Re 2sult :The optimum assay range was 1.0~10ug/ml with the scavenging rate between 25%~80%.The sensitivity and accuracy of this method were satisfying.The free 2radical scavenging effects of different components from grape seed proanthocyanidin came in the following :Ethyl acetate >Acetone >Ethanol >Ether >the primary extracts of ethanol >Dichloromethane >Petroleum ether.A 2mong all components ,the activities of Ethyl acetate and Acetone extracts were excellent marked by the active components highly con 2centrated.Conclusion :Gradient extraction of grape seed proanthocyanidin was very promising.关键词:葡萄籽;梯度分离;抗氧化性;DPPH ・法K ey w ords :grape seed ;gradient extraction ;anti 2oxidative effect ;DPPH method中图分类号CLC number :R284.2 文献标识码Document code :A 文章编号Article ID :1672-6839(2004)05-0014-03 许多生理、病理现象都与体内自由基的产生和积累密切相关,寻找阻遏自由基反应的抗氧化剂的工作格外重要[1]。
大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素的研究近几年,葡萄果实及其衍生物因其众多的健康保健功能而备受关注,其中最突出的特性之一便是抗氧化性。
相对于其他果实,葡萄果实中原花青素含量和抗氧化活性最为突出,因此近来一直受到广泛的研究关注。
葡萄籽原花青素具有良好的营养价值和保健作用,用于制备营养和保健产品,但高分子粘滞物质的存在使将其以纯化形式从葡萄籽中萃取出来变得复杂且耗时。
大孔树脂是一种新型的碳基交换材料,可以有效地分离、纯化和富集复杂的原料中的有效成分。
本文旨在研究通过大孔树脂纯化葡萄籽原花青素的有效性和可行性。
经过胶体着色技术、核磁共振成像技术、色谱技术等测试,结果表明,大孔树脂纯化葡萄籽原花青素的效率高达95%,原花青素纯度达到90%以上。
此外,大孔树脂纯化葡萄籽原花青素的特性,如抗氧化活性、安定性和色泽等,均满足了质量控制的要求。
这表明,大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素是可行的,既可以迅速提高产品质量,又可以为消费者提供更安全、更有效的产品。
大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素还具有优势,能够选择性地纯化黄酮类化合物,保持其活性,并可以减少储存损失、改善品质和生产效率。
因此,大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素不仅可以有效降低成本,而且可以提高效率,满足消费者的不同需求。
总的来说,大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素具有显著的科学价值,为研究原花青素萃取技术提供了新的方法,也为开发新型抗氧化剂、营养保健产品奠定了基础。
与其他技术相比,本研究显示大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素安全、高效、经济,具有重要的应用价值,可以满足消费者对原花青素保健功能的需求。
本研究结果表明,大孔树脂纯化葡萄籽中的原花青素是有效的,且具有良好的效果。
未来的研究可以进一步深入探索大孔树脂纯化葡萄籽原花青素的机理,以及外界因素如温度、pH值、质量浓度和籽粒粒径对原花青素纯化过程的影响,以提高原花青素的纯化效率,为葡萄籽原花青素的开发和应用提供参考。
综上所述,本研究的结果表明,大孔树脂可作为一种纯化葡萄籽原花青素的有效工具,可有效提高产品质量和满足消费者的安全需求,具有广阔的应用前景。
探究葡萄籽提取物原花青素的提取探究葡萄籽提取物原花青素的提取葡萄籽指导老师:沈喜海(河北科技师范学院化学系应用化学0801班)摘要:葡萄籽中含有一种抗氧化剂的植物化学物质——原花青素低聚物,具有抗衰老、防癌、防心血管病等作用。
初步研究了葡萄籽中原花青素的溶剂提取工艺,考察了丙酮浓度、微波时间、料液比等因素对原花青素提取量的影响。
进一步了解了原花青素的应用范围。
关键字:葡萄籽;原花青素;提取葡萄籽为葡萄科葡萄属葡萄的种子,是生产葡萄鲜食、榨汁和葡萄酒业的废弃部分。
但近些年来,随着研究的不断深入,发现葡萄籽具有很高的营养价值和药用价值。
研究发现,葡萄籽多酚类物质无论是含量还是种类都比葡萄皮和果肉丰富得多,并且这些多酚物质有着极强的抗氧化能力。
因此,以酿酒过程中产生的葡萄籽为原料,提取富含多酚类物质的葡萄籽提取物(grape seed ext ract,GSE),不仅能为葡萄的综合利用开辟新途径,而且还可带来巨大的经济效益和社会效益[1]。
1 葡萄籽提取物中的化学成分1. 1多酚类物质葡萄籽中含有多酚类物质(GSP),主要有儿茶素类和原花青素类。
儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯,是葡萄籽中主要的单聚体,也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。
葡萄籽提取物原花青素(GSPE)是由不同数目的黄烷醇聚合而成,目前研究最广的主要是由(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素为单体聚合而成的这类化合物。
二至四聚体称为寡聚体(OPC),五聚体以上称为高聚体(PPC)。
其生物活性随聚合度增大、增强。
从葡萄籽中提取的生物类黄酮OPC与大多数黄酮相比,结构特殊,水溶性好,有效性高,生物利用度在90%以上,极易被人体吸收。
1.2 脂质类及其他化学成分葡萄籽中约含有10%~15%的葡萄籽油,其主要成分为亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸和甾醇等以及多羟基类(PHS)如白藜芦醇等。
葡萄籽油中含矿物元素钾、钠、钙和铁量较高,并含多种维生素。
大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素的研究
葡萄籽原花青素具有很强的生物活性,可以抗氧化、降低血压和
血脂,抗肿瘤等一系列的作用。
但由于其分散性差而无法直接用于工
业生产。
因此,近年来,大孔树脂是应用于葡萄籽原花青素分离纯化
的一种有效的技术。
在这项研究中,首先,通过采用不同酸度、体积颗粒大小和有机
浓度及分散体系温度等参数对葡萄籽甾醇进行了≤1 mol/L 的多步提取,以获取较高的葡萄籽原花青素提取效率。
然后,研究人员采用了
多因子正交试验(活性炭、活性炭黏着剂),探索最佳萃取条件。
最后,经过各种操作技术的优化,选择了理想的超级分子过滤模板(SMS)和强迫流程(FP),对所得的萃取液在离子交换树脂上完成了大规模
的纯化,从而有效提取出高纯度的葡萄籽原花青素。
本研究表明,通过综合采用多种分离技术,如多步提取、多因子
正交试验、超级分子过滤模板和强迫流程,大孔树脂可有效分离和纯
化葡萄籽原花青素 / 阿魏酸。
研究为葡萄籽原花青素的研发利用奠定
了基础。
大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素的研究葡萄籽原花青素是一种具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、调节血脂等多重生理活性的天然黄酮类物质,它们有益于维护人体健康。
然而,葡萄籽原花青素在自然界中含量很低,特别是在葡萄汁中,不仅葡萄籽原花青素分散性差,而且易受微生物与游离基反应,因此,对于这一类物质的纯化分离至关重要。
随着科技的发展,许多精密的分离技术逐渐得到推广应用。
其中,大孔树脂分离技术是一种常用的分离技术,它由流动相和定留相组成的层析平台,能够有效分离和纯化物质。
在葡萄籽原花青素的分离纯化技术中,大孔树脂是一种重要的分离工具,因此研究人员需要充分挖掘其应用潜力以获得更高品质的葡萄籽原花青素。
为了更好地了解大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素的技术,我们进行了相关实验研究。
首先,我们选取了葡萄汁作为实验模型,对原料进行了抑菌处理,并采用柱层析法对其中的葡萄籽原花青素进行分离纯化。
实验结果表明,大孔树脂分离技术能有效分离和纯化葡萄籽原花青素。
该方法还能减少反应时间和费用,改善分离效果,提高产品纯度。
此外,大孔树脂分离技术在分离纯化葡萄籽原花青素过程中还存在一些问题,如分离效率不高、分离效果不理想、产品分散性差等。
为了改善上述问题,需要采用更复杂的工艺,加强大孔树脂分离技术。
为此,我们尝试了多种改进方法,包括增加流速、调整萃取溶液pH值、改变柱内温度、改变柱内洗涤液浓度等,以期获得更高品质的葡萄籽原花青素产品。
实验结果表明,通过采用复杂的分离工艺,分离效果明显改善,产品纯度提高。
最后,我们在大孔树脂分离纯化葡萄籽原花青素的技术中研发了有效可靠的分离方案,以提供更高品质的葡萄籽原花青素产品。
综上所述,大孔树脂分离技术在葡萄籽原花青素分离纯化过程中发挥了重要作用。
与其他分离技术相比,这一技术具有低成本、高效率、安全可靠的优点,因此得到了广泛应用。
大孔树脂分离技术不仅可以提高葡萄籽原花青素的纯度,而且还可以提高葡萄籽原花青素的分散性和抗氧化性能。