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探究葡萄籽提取物原花青素的提取葡萄籽指导老师：沈喜海（河北科技师范学院化学系应用化学0801班）摘要：葡萄籽中含有一种抗氧化剂的植物化学物质——原花青素低聚物，具有抗衰老、防癌、防心血管病等作用。
初步研究了葡萄籽中原花青素的溶剂提取工艺，考察了丙酮浓度、微波时间、料液比等因素对原花青素提取量的影响。
进一步了解了原花青素的应用范围。
关键字：葡萄籽；原花青素；提取葡萄籽为葡萄科葡萄属葡萄的种子，是生产葡萄鲜食、榨汁和葡萄酒业的废弃部分。
但近些年来，随着研究的不断深入，发现葡萄籽具有很高的营养价值和药用价值。
研究发现，葡萄籽多酚类物质无论是含量还是种类都比葡萄皮和果肉丰富得多，并且这些多酚物质有着极强的抗氧化能力。
因此，以酿酒过程中产生的葡萄籽为原料，提取富含多酚类物质的葡萄籽提取物（grape seed ext ract，GSE），不仅能为葡萄的综合利用开辟新途径，而且还可带来巨大的经济效益和社会效益[1]。
1 葡萄籽提取物中的化学成分1. 1多酚类物质葡萄籽中含有多酚类物质（GSP），主要有儿茶素类和原花青素类。
儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯，是葡萄籽中主要的单聚体，也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。
葡萄籽提取物原花青素（GSPE）是由不同数目的黄烷醇聚合而成，目前研究最广的主要是由（+）-儿茶素、（-）-表儿茶素为单体聚合而成的这类化合物。
二至四聚体称为寡聚体（OPC），五聚体以上称为高聚体（PPC）。
其生物活性随聚合度增大、增强。
从葡萄籽中提取的生物类黄酮OPC与大多数黄酮相比，结构特殊，水溶性好，有效性高，生物利用度在90%以上，极易被人体吸收。
1.2 脂质类及其他化学成分葡萄籽中约含有10%～15%的葡萄籽油，其主要成分为亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸和甾醇等以及多羟基类（PHS）如白藜芦醇等。
葡萄籽油中含矿物元素钾、钠、钙和铁量较高，并含多种维生素。
酚酸类主要包括原儿茶酸、香豆酸、没食子酸、咖啡酸和丁香酸等[2]。
天津大学硕士学位论文葡萄籽中葡萄籽油和原花青素的提取分离工艺研究姓名：姚方耀申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：李淑芬20040101摘要葡萄籽中含有丰富的葡萄籽油和原花青素。
葡萄籽油富含对人体健康有益的不饱和脂肪酸，广泛的应用于食品、化妆品以及医药工业等领域；原花青素具有抗氧化等一系列多种生物活性，作为世界最受欢迎的十大植物药之一，已被广泛的用作药品、保健品和化妆品等。
因此，从酿酒过程中产生的废弃葡萄籽中提取葡萄籽油和原花青素具有重要的经济价值和社会效益。
本论文在课题组其他成员的研究基础上分别对超临界ｃＯ：萃取葡萄籽中葡萄籽油和原花青素的工艺进行了放大实验，并且对采用絮凝工艺进一步提高原花青素产品的质量进行了研究。
另外，对采用水提醇沉法从去油葡萄籽中提取原花青素也做了研究。
最后对采用人工神经网络模拟超临界ｃＯ。
萃取原花青素的研究进行了尝试。
实验首先采用２５Ｌ超临界ｃ０。
萃取设备对超临界ｃＯ：萃取葡萄籽油工艺进行了放大研究。
在萃取压力为３０ＭＰａ、萃取温度为５５。
Ｃ的条件下，葡萄籽油的收率为１３．８７％，和小试中１３．５１％的收率基本接近。
实验过程中，使用１Ｌ超临界ｃ０２萃取设备，对动态夹带剂超临界ｃＯ：萃取、静态夹带剂超临界ＣＯ。
萃取、动静结合夹带剂超临界ｃＯ。
萃取从葡萄籽中提取原花青素的三种工艺进行了探讨。
实验对静态夹带剂超临界ＣＯ，萃取原花青素的放大工艺进行了正交实验研究。
研究结果表明在３５ＭＰａ，萃取温度为６５℃时产品纯度达到９５％以上，达到了出口要求，收率达到８．３８％。
为了解决原花青素产品的水溶性问题，进一步提高产品质量，本文对原花青素租提物进行了絮凝工艺操作。
实验考察了药液浓度、絮凝温度、絮凝剂用量等对产品水中不溶物百分含量的影响，得出了合适的絮凝条件。
在该条件下，絮凝后的产品纯度保持在９５％以上，并且水中不溶物的百分含量为２．８１％，原花青素产品达到了水不溶物质小于５％的质量要求。
生研1002班姚远学号：2010001225葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化一、原花青素简介原花青素是一种水溶性色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。
花青素(Anthocyanins)是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一。
花青素为植物二级代谢产物，在生理上扮演重要的角色。
花瓣和果实的颜色可吸引动物进行授粉和种子传播。
常见于花、果实的组织中及茎叶的表皮细胞与下表皮层。
花青素属于酚类化合物中的类黄酮类(Flavonoids)。
基本结构包含二个苯环，并由3碳的单位连结(C6-C3-C6)。
花青素经由苯基丙酸路径和类黄酮生合成途径生成，由许多酵素调控催化。
以天竺葵色素(Pelargonidin)、矢车菊素(Cyanidin)、花翠素(Delphinidin)、芍药花苷配基(Peonidin)、矮牵牛苷配基(Petunidin)及锦葵色素(Malvidin)六种非配醣体(Aglycone)为主。
花青素因所带羟基数(-OH)、甲基化(Methylation)、醣基化(Glycosylation)数目、醣种类和连接位置等因素而呈现不同颜色。
[9]颜色的表现因生化环境条件的改变，如受花青素浓度、共色作用、液胞中pH値的影响(Clifford)。
橙色和黄色是胡萝卜素的作用。
1910年在胡萝卜中发现了β-胡萝卜素，以后共发现另外2种胡萝卜素异构体，分别是：α、β、γ三种异构体。
1958年β-胡萝卜素获得专利，目前主要从海洋中提取，也可人工合成。
[1]食品中几种重要花青素的结构自然界有超过300种不同的花青素。
他们来源于不同种水果和蔬菜如紫甘薯、越橘、酸果蔓、蓝莓、葡萄、接骨木红、黑加仑、紫胡罗卜和红甘蓝、颜色从红到蓝。
这些花青素主要包含飞燕草素（Delchindin）、矢车菊素（Cyanidin）、牵牛花色素（Petunidin）、芍药花色素（Peonidin）。
花青素颜色随PH值发生变化，从当PH值为3时的覆盆子红到当PH值为5时的深蓝莓红。
葡萄籽原花青素的提取技术研究概况葡萄籽原花青素的提取技术研究概况摘要：原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物，葡萄籽被认为是提取原花青素的最正确原料。
随着科技的开展和进步，提取技术不断被突破，本文分析和整理近年来国内外期刊有关的文献，对葡萄籽原花青素的提取技术进行综述，为葡萄籽原花青素的工业生产研究提供参考。
关键词：葡萄籽，原花青素，提取原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物。
葡萄籽作为葡萄酒及葡萄汁生产的下脚料，是原花青素的主要来源，具有明显的本钱优势，被认为是提取原花青素的最正确原料。
原花青素由不同数量的单体黄烷-3-醇缩合而成，黄烷醇结构上可以连接不同的酰基或糖酰基，最常见的是没食子酸与-表儿茶素C3羟基缩合形成的酯。
由于单体组成及单体间连接键的不同，每种聚合体还可能包含许多同聚异构体，形成复杂的混合物。
通常将聚合度2～4的称为低聚体，将聚合度5以上的称为高聚体。
随着科学技术的快速开展和进步，传统提取方法不断被突破，超临界流体萃取、微波辅助提取以及动态罐组式连续逆流提取等新的提取方法和技术不断完善。
这些新技术具有提取率高、提取物纯度高、提取速度快等优点，具有十分广阔的应用前景。
1 提取技术1.1 超临界流体萃取超临界流体萃取是以超临界流体代替常规有机溶剂，对中草药中有效成分进行萃取和别离的新技术。
气体在超临界状态下兼有气液两相的双重特点，既具有与气体相当的高扩散系数和低黏度，又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力。
将处于超临界状态下的流体与待别离的中药材接触，选择性地溶解其中的某种成分，然后通过减压，使超临界流体迅速挥发，被溶解的物质以固态或液态形式析出，从而实现所需组分的提取与别离。
国内外均有运用CO2超临界流体萃取法制备葡萄籽原花青素的报道。
胡佳兴【1】利用甲醇为夹带剂的超临界萃取法提取葡萄籽中的原花青素；Chafer等【2】也是采用乙醇作为夹带剂提取原花青素，并用HPLC法测定提取物中的成分；Pinelo等【3】比较了超临界流体萃取法与固液萃取法，发现前者提取的原花青素具有更好的抗氧化性。
葡萄籽中分离提取原花青素的研究花青素是一类多酚类化合物，其具有高效的清除自由基的功能，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。
本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
研究结果表明：本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。
标签：花青素；葡萄籽；提取；正交实验1 概述原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。
属于缩合鞣质或黄烷醇类。
最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。
它于1879年在意大利上市。
由于原花青素的多种功效，由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。
目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。
已经将其应用到工业化产业，开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。
原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。
2 葡萄籽中花青素的提取本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
并通过设计正交实验，得出原花青素提取最佳工艺条件。
2.1 实验方法2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。
在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕，所得的这些榨渣中，以换成干品计，约有50%的葡萄皮，45%的葡萄籽和少量的梗等，将该榨渣经粗选分离出葡萄籽，作为提取的原料。
所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后，过20目筛，于磨口三角瓶中，经石油醚脱脂脱水份，得脱脂葡萄籽粉，用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提，离心后取上清液，反复提取若干次，最后洗涤残渣，将上清液和洗涤液合并，加入固体无水硫酸钠脱水，倾出上层溶液，在真空度为0.095MPa，温度为40℃的条件下真空浓缩，浓缩液冷却至室温，得到原花青素粗提液，干燥，制得粗提物。
生研1002班姚远学号：2010001225葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化一、原花青素简介原花青素是一种水溶性色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。
花青素(Anthocyanins)是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一。
花青素为植物二级代谢产物，在生理上扮演重要的角色。
花瓣和果实的颜色可吸引动物进行授粉和种子传播。
常见于花、果实的组织中及茎叶的表皮细胞与下表皮层。
花青素属于酚类化合物中的类黄酮类(Flavonoids)。
基本结构包含二个苯环，并由3碳的单位连结(C6-C3-C6)。
花青素经由苯基丙酸路径和类黄酮生合成途径生成，由许多酵素调控催化。
以天竺葵色素(Pelargonidin)、矢车菊素(Cyanidin)、花翠素(Delphinidin)、芍药花苷配基(Peonidin)、矮牵牛苷配基(Petunidin)及锦葵色素(Malvidin)六种非配醣体(Aglycone)为主。
花青素因所带羟基数(-OH)、甲基化(Methylation)、醣基化(Glycosylation)数目、醣种类和连接位置等因素而呈现不同颜色。
[9]颜色的表现因生化环境条件的改变，如受花青素浓度、共色作用、液胞中pH値的影响(Clifford)。
橙色和黄色是胡萝卜素的作用。
1910年在胡萝卜中发现了β-胡萝卜素，以后共发现另外2种胡萝卜素异构体，分别是：α、β、γ三种异构体。
1958年β-胡萝卜素获得专利，目前主要从海洋中提取，也可人工合成。
[1]食品中几种重要花青素的结构自然界有超过300种不同的花青素。
他们来源于不同种水果和蔬菜如紫甘薯、越橘、酸果蔓、蓝莓、葡萄、接骨木红、黑加仑、紫胡罗卜和红甘蓝、颜色从红到蓝。
这些花青素主要包含飞燕草素（Delchindin）、矢车菊素（Cyanidin）、牵牛花色素（Petunidin）、芍药花色素（Peonidin）。
花青素颜色随PH值发生变化，从当PH值为3时的覆盆子红到当PH值为5时的深蓝莓红。
《科技论文写作》结课论文葡萄籽中原花青素的研究现状学生姓名陶敏学号 7051212219所属学院生命科学学院专业食安班级16-2指导教师奚倩日期2015年4月塔里木大学生命科学学院葡萄籽中原花青素的研究现状陶敏（生命科学学院食品质量与安全16-2班）摘要：本文探究葡萄籽中原花青素的提取试剂、提取浓度、提取时间、提取温度，以及葡萄籽的化学性质、原花青素的保健功效，主要包括清除自由基、抗氧化抗衰老、预防心脑血管疾病、抗肿瘤等。
探究原花青素目前在食品、化妆品、食品营养强化剂中的应用。
本文还对原花青素未来的发展趋势做出一定预测。
关键词：原花青素、提取方式、保健功能The current research status of grape seed procyanidine extractstaomin(college of life science food quality and safety of 16-2 class )Abstract: this article explores the extraction of grape seed grape seed procyanidine extracts reagent, extraction and concentration, extraction time, extraction temperature, and chemical property, grape seed procyanidins health care efficacy, mainly including scavenging free radicals, anti-oxidation, anti-aging, prevent disease of heart head blood-vessel, antitumor, etc.Explore procyanidins present application in the food, cosmetic, food nutrition fortifier.This paper also to the trend of the development of procyanidins to make certain predictions.Keywords: procyanidins, extraction method, the health care function前言：我国葡萄资源产量丰富，种植面积达828万亩，产量近843万吨，近年来用于制作葡萄酒及相关葡萄产品约80万吨，但葡萄酿酒产业每年产生大量的工业废渣，其中葡萄籽的年产量约为4万吨。
葡萄籽中分离提取原花青素的研究
花青素是一类多酚类化合物，其具有高效的清除自由基的功能，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。
本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
研究结果表明：本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。
标签：花青素；葡萄籽；提取；正交实验
1 概述
原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。
属于缩合鞣质或黄烷醇类。
最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。
它于1879年在意大利上市。
由于原花青素的多种功效，由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。
目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。
已经将其应用到工业化产业，开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。
原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。
2 葡萄籽中花青素的提取
本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。
并通过设计正交实验，得出原花青素提取最佳工艺条件。
2.1 实验方法
2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取
本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。
在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕，所得的这些榨渣中，以换成干品计，约有50%的葡萄皮，45%的葡萄籽和少量的梗等，将该榨渣经粗选分离出葡萄籽，作为提取的原料。
所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后，过20目筛，于磨口三角瓶中，经石油醚脱脂脱水份，得脱脂葡萄籽粉，用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提，离心后取上清液，反复提取若干次，最后洗涤残渣，将上清液和洗涤液合并，加入固体无水硫酸钠脱水，倾出上层溶液，在真空度为0.095MPa，温度为40℃的条件下真空浓缩，浓缩液冷却至室温，得到原花青素粗提液，干燥，制得粗提物。
测
定原花青素含量，计算提取率。
其提取流程：
葡萄籽→粉碎过筛（20目）→石油醚浸泡脱脂，脱水→有机溶液提取→离心→上清液+洗涤液→减压浓缩→真空干燥→粗产品。
2.1.2 原花青素含量的测定
采用硫酸-香草醛法。
原花青素在500nm处吸光度最大。
標准曲线的绘制：利用花青素对照品配制浓度为0.00、0.04、0.08、0.12、0.16、0.20mg/ml的标准系列溶液，500nm波长下，测定吸光值，绘制标准曲线（Y=1.9786x-0.0052，R=0.999）。
样品原花青素含量的测定：样品用蒸馏水溶解，定容至50ml。
取其1ml稀释50倍，测定其吸光值，计算出原花青素的得率。
2.2 产品分析方法
对原花青素的含量的主要测定方法：原花青素粗提物紫外扫描，对原花青素粗提物在200nm～600nm波长范围内进行扫描，原花青素的最大吸收峰在280nm～290nm之间，根据与标准品的hmax280nm的差异的多少来确定其含量。
3 葡萄籽中原花青素的提取结果分析
3.1 影响因素优化
影响提取率的主要因素有提取所用的溶剂、溶剂浓度、提取温度、时间和料液比等。
对于影响因素进行正交设计优化实验。
在单因素实验的基础上，选取乙醇体积分数（A）提取温度（B）、提取时间（C）及料液比（D）作为考察因素，以提取率为衡量指标进行正交实验，因素水平选取如表1所示，正交设计实验结果如表2所示。
3.2 结果分析
各单因素对原花青素提取效果的影响大小顺序为：提取温度（B）>提取时间（C）>料液比（D）>乙醇体积分数（A），由正交实验得出乙醇回流浸提法提取葡萄籽原花青素的最优方案为：A2B2C3D2。
综合单因素实验和正交实验结果，可以得出最佳工艺条件为：乙醇体积分数为60%，提取温度为40℃，料液比为1：7（g/ml），提取时间为30min。
植物材料中原花青素的提取率与材料的状况和提取条件密切相关。
植物材料
的贮存、干燥、粉碎度，提取溶剂、温度等都能导致原花青素化学结构的变化和提取率的改变，从而改变原花青素的理化性质和生物活性。
同时样品中的水分含量也会导致测定结果降低。
样品提取前一般要经过粉碎，通常较细的粉末有利于提取，但过细时提取率反而会降低。
提取剂的选择也是影响提取率的关键因素。
因此原花青素的提取剂，要求对其有很好的溶解性。
因此有机溶剂和水的复合体系（有机溶剂占总体积的50%～70%）最适合提取。
4 结束语
原花青素是多酚类物质，。
具有高效的清除自由基的能力，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。
葡萄籽作为葡萄酒工业的副产物，每年大量被遗弃，造成资源的大量浪费。
因此，从葡萄籽中提取原花青素，进行葡萄籽的综合利用，开发高附加值产品具有非常重要的使用价值。
生产成本是原花青素价格的主导支柱。
而葡萄酒业的下脚料葡萄籽大部分做为废弃品丢弃，因此将其做为原花青素提取的主要原料成本是低廉。
另外，在生产工艺上，主要采用溶剂浸提和萃取以及干燥的工艺，其溶剂全部回收利用，生产过程中可根据实际情况采用人工操作或者自动化控制，操作费用低。
本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。
研究结果表明：本项目符合国家产业发展政策，对提高企业经济效益有着积极的意义。
参考文献
[1]王忠合，朱俊晨，陈惠音.葡萄籽原花青素提取物的保健功能与应用[J].食品科技，2006（4）：135-139.
[2]王辉宪，姜晖霞，王仁才，等.葡萄子油及原花青素研究与开发利用[J].果树学报，2005，22（5）：542-547.
作者简介：姜霞（1981-），女，工作单位：甘肃农业职业技术学院，研究方向：食品化学及工艺。
