人体解剖学实验讲义
制药与生命科学学院
主编：王永录
2008年9月
目录
实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验 (1)
实验二人体解剖学实验 (2)
实验三ABO血型鉴定与交叉配血 (4)
实验四心音听诊 (9)
实验五人体心电图的记录 (12)
实验六人体动脉血压的测量 (16)
实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验
【目的】：掌握小白鼠、大白鼠及兔的基本解剖结构。
【实验对象】小白鼠、大白鼠、兔
【实验器材和药品】乌拉坦、手术台、手术器械（止血钳、手术刀、动脉夹、手术剪、手术镊等）、注射器、手术线、纱布、脱脂棉等【实验步骤及观察项目】
取实验动物，乌拉坦麻醉后固定于手术台，解剖。观察以下组织器官，注意与人体组织结构的区别。
1.神经系统：中枢神经系统：脑：大脑、小脑、间脑、脑干。脊髓。
2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。
3.皮肤：表皮、真皮结构。皮肤的附属器，汗腺、毛发、指甲、皮脂腺。
4.消化系统：口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门，唾液腺、胰腺、肝及胆囊。
5.呼吸系统：鼻、咽、喉、气管、支气管、肺、胸膜及胸膜腔。
6.循环系统：心脏(心壁、心腔、瓣膜、乳头肌、腱索、冠状血管)。
7.泌尿系统：肾、输尿管、膀胱、尿道。
8.生殖系统：雌性生殖系统：卵巢、输卵管、子宫、阴道、雄性生殖系统：睾丸、输精管、精囊、前列腺、射精管。
【思考题】
小白鼠、大白鼠及兔与人体结构的区别？
实验二人体解剖学实验
【目的】：
1.了解人体主要系统器官的概貌。对人体有一个全面的了解。
2.掌握人体各个系统主要器官的基本结构。
3.重点掌握循环系统及神经系统的基本结构和功能。
【实验对象】
1 人体各组织器官模型标本。
2 人体实物标本。
【实验步骤及观察项目】
观察以下组织器官：
1.骨骼系统：骨的基本形态构造，骨连结的形式，关节的基本构造，骨骼组成，颅骨、脊柱、胸廓及骨盆的组成。上肢骨，下肢骨。
2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。肌肉的连结与肌肉的作用。头面肌群、胸腹肌群、腰背肌群、上下肢肌群。
3.皮肤：表皮、真皮结构。皮肤的附属器，汗腺、毛发、指甲、皮脂腺。
4.消化系统：口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门，唾液腺、胰腺、肝及胆囊。
5.呼吸系统：鼻、咽、喉、气管、支气管、肺、胸膜及胸膜腔。
6.循环系统：心脏(心壁、心腔、瓣膜、乳头肌、腱索、冠状血管)、心脏的特殊传导系统、动脉、毛细血管、静脉。体循环、肺循环、淋巴循环。
7.泌尿系统：肾、输尿管、膀胱、尿道。
8.生殖系统：女性生殖系统：卵巢、输卵管、子宫、阴道、男性生殖系统：睾丸、输精管、精囊、前列腺、射精管。
9.神经系统：中枢神经系统：脑：大脑、小脑、间脑、脑干。脊髓。周围神经：脑神经、脊神经、植物性神经。
10.内分泌系统：甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、胰岛、性腺、垂体、下丘脑、松果体。
【思考题】
问题与兴趣是最好的老师。通过本实验，说说你对这句话在科学工作中应用的理解。
实验三ABO血型鉴定与交叉配血
【目的】1．通过学习实验历史更好地理解科学研究的思路和方法。2．学习ABO血型鉴定的原理、方法以及交叉配血的方法。
3．掌握血液的生理作用的基础上，理解临床上输血的重要意义。【原理】血液有重要的生理作用，失血后能不能向心血管系统输送同种动物其它个体的血液以补充失去的血液呢？试验表明，将某个动物的血液输送给同种的另一动物有时会造成受血动物的死亡。后来发现，许多动物的血清能使其它动物的红细胞凝集并溶血，这就是造成受血动物死亡的原因。1901年Karl Landsteiner根据人体红细胞与血清混合后是否凝集，首先发现人类血液中存在着不同的血型。这一发现使输血可以成为安全的医疗措施因而被广泛应用。
血型就是红细胞上特异抗原的类型。红细胞上有抗原，称为凝集原（agglutionogens），在血清中有抗体，称为凝集素(agglutinin)，凝集原与凝集素的反应称为凝集反应(agglutination reaction)，它实际上是一种抗原抗体反应。而血清使均匀混合在血液中的红细胞聚集成团，这便是凝集（agglutination）。Landsteiner根据红细胞膜上存在的凝集原A、B的情况而将血液分为A、B、AB、O四型。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含抗B抗体）与标准B型血清（抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞上有无A或/和B抗原。
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。为确保输血的安全，在血型鉴定后必须再进行交叉配血，如无凝集现象，方可进行输血。若稍有差错，就会影响受血者的生命安全，千万不可粗心大意。
【实验对象】人。
【实验器材和药品】显微镜、离心机、采血针、双凹玻片、滴管、1ml吸管、小试管、试管架、牙签、消毒注射器及针头、棉球、消毒棉签；标准A、B型血清、生理盐水、75%酒精、碘酒。
【实验步骤及观察项目】
ABO血型鉴定
一、玻片法
1．制备红细胞悬液
用75%酒精棉球消毒左手无名指端，用消毒采血针刺破皮肤。滴１滴血于盛有1ml生理盐水的小试管中，混匀，制成红细胞悬液（浓度约5%）。
2．混合血清和血浆
在双凹玻片的两侧，分别标明A与B。用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴于玻片两侧，然后将标准A型与B型血清各一滴，滴在两侧红细胞悬液上，用两支牙签分别混匀（注意严防两种血清接触）。3．观察结果
15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据下表判定血型。
表1 血型
血型红细胞凝集原血清凝集素
O型无抗A（α）、抗B（β）
A型 A 抗B（β）
B型 B 抗A（α）
AB型A、B 无
表2凝集反应
是否凝集受检者的血型Ｂ型标准血清（抗A血清）Ａ型标准血清（抗B血清）
－＋ B
＋－ A
－－O
＋＋AB 二、试管法
取干净小试管2支，分别标明A、B字样。分别加入A、B型标准血清与受试者的红细胞悬液各1滴，混匀后室温放置5min离心1分钟（1000转/min）。取出试管后用手指轻弹试管底，使沉淀物被弹起，在良好的光源下观察结果。轻弹管底时，若沉淀物成团漂起，表示发生凝集现象。若沉淀物之边缘呈烟雾状逐渐上升，最后使试管内液恢复红细胞悬液状态，表示无凝集现象。试管法较玻片法结果准确。
交叉配血
一、玻片法
1．制备红细胞悬液
以碘酒、酒精消毒皮肤后，用消毒的干燥注射器抽取受血者静脉血2ml。取其1滴加入装有1ml生理盐水的小试管中，制成红细胞悬液，其余血液装入另一小试管中，待其凝固后离心出血清备用。
以同样方法制成供血者的红细胞悬液与血清。
2．混匀红细胞和血清
在玻片的两侧分别注明“主”、“次”字样。于主侧分别滴加受血者的血清及供血者的红细胞悬液各一滴；于次侧分别滴加受血者红细胞悬液及供血者的血清各一滴。分别用牙签混匀。15分钟后观察结果。
若两侧均无凝集现象表示血型配合，可以输血。
二、试管法
取试管2支，分别标明“主”“次”字样，各管按玻片法加入相应内容物各1滴，混匀后离心1分钟（1000转/min），取出试管，观察有无凝集。此法比玻片法迅速。
【注意事项】
1．吸A、B型标准血清及红细胞悬液时，应使用不同的滴管；用于混匀红细胞悬液与标准血清的牙签应分开；红细胞悬液滴管尖端（管口）不能接触标准血清液面。
2．肉眼看不清凝集现象时，应在低倍显微镜下观察。
3．红细胞悬液及标准血清须新鲜，因污染后可产生假凝集。
4．红细胞悬液不能太浓或太淡，否则可出现假阴性反应。牙签沾取血液切勿过度。
5．注意区别红细胞凝集和聚集，后者加一滴生理盐水混匀可分散，前者不能分开。
6．判断红细胞是否凝集，要有一定时间（一般要10～15min），尤其是室温低时，凝集所需时间更长，但直接涂血更快凝集。
【思考题】
1．血液有何生理作用？试试了解临床的输血法则。
2．如果有标准A型红细胞和标准B型红细胞，但无标准血清时，能否进行血型鉴定？
3．为什么血型相同的人之间输血仍要做交叉配血试验？
4．先根据实验结果，判定受试者的血型；并讨论受试者在临床输血时能给何型病人输血？能接受何型给血者的血液？为什么？
5．说说你在平时的学习中，是如何应用以问题为基础的学习方法的？谈谈你的经验。
6．Landsteiner发现ABO血型只是消除了输血中主要的危险，仍有部分病人因输同型血而发生溶血，为什么？
实验四心音听诊
【目的】1．学习心音听诊方法。
2．了解正常心音特点及其产生原理。
3．学习听诊器的用法。
【原理】心音（Cardiac sound）是由于心脏瓣膜关闭及血液撞击心室壁引起的振动所产生的声音，可在胸壁的一定部位用听诊器听取。心音有四个，分别为第一心音（S1）、第二心音（S2）、第三心音（S3）和第四心音（S4）。第一心音发生在心缩期，标志着心室收缩的开始，它是由房室瓣关闭、心室收缩时血流冲击房室瓣引起心室振动及心室射出的血液撞击动脉壁引起的振动而产生的。第二心音发生在心室舒张早期，它是由于主动脉瓣何肺动脉瓣迅速关闭，血流冲击大动脉根部及心室内壁振动而形成的。第三心音发生在快速充盈期末，此时血流速度的突然改变可造成心室壁和瓣膜振动，从而产生第三心音。第四心音又称心房音，由于心房收缩使血流进入心室，引起振动而产生。在每一个心动周期中，一般都可听到两个心音S1和S2，在某些健康儿童和青少年也可听到S3，一般听不到S4，如能听到可能为病理性。【实验对象】人。
【实验器材】听诊器。
【实验步骤与观察项目】
一、确定听诊部位
1．受试者多采取仰卧位，检查者站在床的右侧，也可采取坐位，检查者坐在对面，应试者应解开上衣，面向亮处。
2．心脏瓣膜听诊区传统的心脏瓣膜听诊区为四个瓣膜五个区，①二尖瓣区M 位于心尖部，即左侧第五肋间锁骨中线稍内侧②肺动脉瓣区P 在胸骨左缘第二肋间③主动脉瓣区A 在胸骨右缘第二肋间④主动脉瓣第二听诊区E 在胸骨左缘第三肋间⑤三尖瓣区T 在胸骨体下端左缘，即胸骨左缘第４、５肋间。此外，对疑有心脏病的病人还可听诊其他部位（如颈部、肩胛间）。
二、听诊顺序
心脏听诊的规范顺序是按逆时针方向依次听诊，即从二尖瓣区开始→肺动脉瓣区→主动脉瓣区→主动脉瓣第二听诊区→三尖瓣区。
三、区分两个心音S1和S2
检查者戴好听诊器，以右手的拇指、食指和中指轻持听诊器体件，置于受试者胸壁上，用力要适度，听取心音同时，可用手触诊心尖搏动，另外，要根据心音特点（音调、强度、性质、持续时间等）、间隔时间，仔细区分。
区分两个心音的要点是：⑴S1音调较低，持续时间长，在心尖部听得最清楚；S2音调较高，持续时间较短，在心底部听得最清楚。⑵S1 与S2时间间隔小于S2与下一个心动周期的S1之间的间隔。⑶S1与心尖搏动（或几乎与颈动脉搏动）同步。
四、比较不同瓣膜听诊区两个心音的强弱
【注意事项】
1．听诊心脏时，环境要安静，检查者思想要集中，为了更好地辨别心音，有时可让受试者改变体位、暂停呼吸或深呼吸气等。
2．听诊器的耳件方向应与外耳道的方向一致（向前），胶管等勿与他物摩擦，以免产生杂音，影响听诊效果。
【思考题】
1．心音听诊区是否在各瓣膜解剖的相应位置？
2．试述第一心音和第二心音的产生机制。
3．根据听取心音的特点，说明两心音S1和S2分别标志心动周期中的哪个期？
4．描述所听到的心音及不同听诊区两心音各自有何不同。
5．了解心音的临床意义。
实验五人体心电图的记录
【目的】1．学习人体心电图的记录方法。
2．了解人体正常心电图、各波形及间期的生理意义。
【原理】正常人心脏由窦房结发出兴奋，按一定途径和时程，依次传向心房和心室，引起整个心脏的兴奋。因此每一个心动周期中，心脏各部分兴奋过程中出现的电变化的方向、途径、次序和时间都有一定的规律性。心脏兴奋的部位与未兴奋的部位之间形成无数对极性相反的偶极子。这些偶极子具有一定的电量和方向。这种生物电变化通过心脏周围的导电组织和体液，反映到身体表面使身体表面也随心动周期发生有规律的电变化，将测量电极置于人体表面的一定部位通过心电图机记录出来的心脏电变化曲线即为目前临床上常规记录的心电图（electrocardiogram ECG）。因此心电图是整个心脏在心动周期中电活动的综合向量变化。根据电极所置放的位置和导线的连接不同，所测得的心电图波形也不一样。心电图反映心脏兴奋的产生、传导和恢复过程中的生物电变化，与心脏的机械收缩无直接关系。它反映心脏正常机能活动，但心脏发生病态时它的电活动亦发生改变，因而是临床上常用的一种诊断方法。
【实验对象】人。
【实验器材和药品】心电图机（或BL—410生物机能实验系统）；导电膏、分规；棉球、酒精。
【实验步骤及观察项目】
一、心电图机连接电源
心电图机接好地线、导联线和电源线，预热５分钟。
二、电极的安放
受试者安静仰卧，肌肉放松，裸露腕部和踝部，用酒精棉球擦净置放电极处的皮肤，待皮肤干燥后涂上导电膏，再将电极与皮肤固定，保证导电良好，防止肌电干扰和基线漂移。肢体导联电极应安放在前臂屈侧腕关节上方及内髁上方胸导联电极按图6-9所示部位安放。
图6-9 胸导联电极安置部位
三、连接导线
按规定的导联接好导线（有一定的颜色标志）：红色－右手，黄色－左手，绿色－左足，黑色－右足，白色－胸导联导线。
四、心电图的记录
（1）校正输入信号电压放大倍数旋动校正键，１mv标准电压应使描笔振幅恰好为10mm。
（2）描记各导联心电图用导联选择开关分别选择标准肢体导联Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，加压单极肢体导联aVR、aVL、aVF，胸导联V１、V３、V ５等九个导联进行描记。
（3）在记录纸上注明各导联代号，受试者姓名、年龄、性别及记录日期
五、心电图的分析
（1）辨认波形取下心电图记录纸，辨认P波、QRS波群、T波、P-R间期、S-T段以及Q-T间期。
图6-10 Ⅱ标准导联心电图的测量
（2）测量波幅及时间纵坐标表示电压，每小格代表0.1mv（每小格为1mm），横坐标表示时间，每小格代表0.04s（每小格为1mm）。用分规测量。测量波幅值时，凡向上的波均应测量从基线上缘至波峰顶点的距离，凡向下的波，均应测量基线下缘至波谷底点的距离。以标准导联Ⅱ为例，参照图6-10，测量各波电压幅值、P-R间期及Q-T间期，观察S-T段有无移位。
（3）心率的测定测量相邻两个心动周期的R-R间期（或P-P间期），代入下式即可。如心率不齐，应测量5个R-R间期，求其均值，再代入公式
６0
心率＝次／分
R-R间期（秒）
（4）心律的分析包括主导心律的判定；心律是否规则；有无期前收缩或异位节律。分析时，首先要认出P波、QRS波群，根据P波决定基本心律。窦性心律心电图表现为：P波在Ⅱ导联中直立，aVR导联中倒置；P-R间期在正常值范围（0.12～0.20s）。成年人正常窦性心律的心率为51～100次／分。
【注意事项】
1．受试者宜静卧数分钟，肌肉尽量放松，避免大呼吸动作，防止寒冷引起肌紧张，甚至寒战，影响记录。
2．记录心电图时，先将基线调到中央，使图形能在纸的中央描出。防止造成基线不稳和干扰的因素。基线不稳或有干扰时，应排除后再进行描记。
3．在变换导联时，必须将输入开关关上，再转动导联选择开关。4．记录完毕后，将电极和皮肤擦净，心电图各控制旋纽转回关的位置，最后切断电源。【思考题】
1．正常心电图的主要间期各为多少? 有何生理意义?
2．为什么不同导联引导出来的正常心电图波形有所不同？为什么各波形和间期等总是规律的出现？
实验六人体动脉血压的测量
【目的】1．学习间接测定人体动脉血压的原理和方法。
2．掌握确定的人体正常血压及脉压标准。
【原理】血压（Blood pressure, BP）是指血管内的血液对于单位面积血管壁的侧压力，也即压强。血压的单位通常用kPa或mmHg来表示，1mmHg＝0.133kPa。血压的形成是由于心血管内有血液充盈、心脏射血、血液在血管中流动及外周血管对血流的阻力和弹性贮器作用。测量动脉血压的方法有直接法和间接法。生理学实验中测量动物血压的经典方法，是将导管的一端插入动脉、静脉或心腔，将导管的另一端与一个装有水银的U形管相连，U形管上有刻度，读得的U 形管两边水银液面的高度差即为测定部位的血压值。用U型水银检压计测得的压力读数为平均压。这是一种直接测量血压的方法。临床上常采用听诊法间接测量血压，使用血压计、听诊器测量人体动脉血压（Arterial blood pressure）。其原理是，通过血压计的袖带在动脉外施加压力，改变血管口径和血流，产生不同的声音，根据听诊音的变化来判断血压数值。通常血液在血管内流动时没有声音，但当血流经过血管狭窄处，形成涡流，撞击血管壁，发出声音。当缠于上臂的袖带内的压力超过收缩压时，可完全阻了肱动脉内的血流，此时，听诊器听不到声音也，也触不到该侧桡动脉的脉搏。当袖带内压力比肱动脉的收缩压稍低的瞬间血液在动脉压作用下，突破袖带压进入肱动
脉，形成涡流。通过听诊器可听到声音，同时可触得桡动脉脉搏，此时袖带内的压力读数即为收缩压。当袖带内的压力降至等于或稍低于舒张压时，肱动脉内血流恢复，听诊音消失，此时袖带内压力即为舒张压。我国健康成人在安静状态时血压的正常参考值：收缩压为100～120mmHg（13.3～16.0 kPa）；舒张压为60~80mmHg(8.0～10.6 kPa)，脉压为30～40mmHg(4.0～5.3 kPa)
【实验对象】人。
【实验器材】血压计，听诊器。
【实验步骤】
一、受试者准备
受试者静坐5～10分钟，取仰卧位或坐位。裸露被测侧的上肢（常为右上肢），肘部应与心脏同一水平，上臂伸直并轻度外展。
二、绑袖带
检查者松开血压计橡皮球的螺旋阀，将血压计袖带展平，排尽余气后，将螺旋阀旋紧。将袖带气囊部分对准肱动脉，紧贴皮肤缚于上臂，袖带下缘应距肘窝横纹上半部2～3cm。松紧要适度。
三、放置听诊器
检查者戴好听诊器，先于肘窝处触及肱动脉搏动，再将听诊器胸件置于肘窝可触及肱动脉搏动处。轻压听诊器胸件使之与皮肤紧密接触。
四、充气与放气并记录
挤压气球向袖带内充气，边充气边听诊，待肱动脉搏动消失后继
续充气，血压计读数升高20~30mmHg（2.6～4.0Kpa）后，松开气球螺旋阀，缓慢均匀地放气，两眼平视汞柱，仔细听诊。听到第一声时的血压计读数即为收缩压，随着汞柱下降，声音逐渐加强，继而出现吹风样杂音，然后声音突然变小而低沉，最终声音消失，声音消失时血压计读数即为舒张压。收缩压与舒张压之差为脉压。
血压常以收缩压/舒张压的形式记录，例如收缩压为15.6kPa，舒张压为10.4kPa，应记为15.6/10.4kPa。
【注意事项】
1．室内必须保持安静，以利听诊。
2．听诊器胸件置于肱动脉上时不可压得太重，不得与袖带接触，更不可塞在袖带下。
3．发现血压超出正常范围时，应让受试者休息10min后复测。4．血压计用毕，应将袖带内气体驱尽，卷好，放置盒内。将检压计向右略倾斜，使管内水银退回储槽内，然后关闭，防止水银外泄。【思考题】
1．思考哪些因素会影响动脉血压的测定？
2．思考用间接法测得的血压值与直接法测得的是否一样？为什么？3．思考受试者将手臂垂下测量，血压是否有变化？
4．测量血压时，测左侧上肢与测右上肢所得的血压值是否相同？为什么？
血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理包括： 一、血型相容性检测 二、ABO血型正反定型型不一致的原因分析及处理 三、交叉配血中常见问题分析及处理 四、意外抗体筛选的意义和检测方法 五、弱D检测的的意义和检测方法 一、血型相容性检测 1、受血者和供血者AB0血型是否相容。 2、受血者和供血者RhD血型是否相容。 3、主次侧交叉配血是否相容。 4、受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体。 二、ABO正反定型不符的原因分析和处理 （一）原因 1．实验者操作技术的错误： 导致假阴性的有：①未加入抗体或血清。②未识别溶血。③血清与红细胞比例不当 ④离心速度或时间不够。⑤使用失效或错误试剂。⑥实验结果记录或解释错误 导致假阳性的有：①离心速度过大或时间过长、②使用了受到细菌污染的试剂、③试验器皿不干净、④实验结果记录或解释错误 2、红细胞标本问题：①患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞 ②某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集反应 ③红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗－A、抗－B试剂可能与这些异常的红细胞反应
④使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗－A、抗－B 试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应 ⑤患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致 ⑥红细胞表面包被IgG类抗体 3、血清标本的问题：①小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。 ②免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱 ③4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定型 ④血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集 ⑤血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞抗体，如抗－M、抗－I等。 ⑥患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 ⑦患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 ⑧大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗－A、抗－B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原位点，不发生凝集 （二）、分析和处理 基本程序：1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史 3.彻底洗涤标本或试剂红细胞 4.应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞 5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰 6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应 7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰 ABO正反定型型不符的分类：
交叉配血和定血型的注意事项 一、操作技术错误（最常见） 二、红细胞标本问题 1、未加入抗体或血清 2、实验温度（37℃凝集会下降） 3、未识别溶血 4、血清与红细胞比例不当 5、离心速度、时间不够 6、使用失效或错误试剂 7、实验结果记录、解释错误 8、离心速度过大、时间过长 9、使用了受到细菌污染的试剂 10、试验器皿不干净 11、实验结果记录、解释错误 患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞 某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集反应 红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T 多凝集红细胞，人血清抗－A、抗－B试剂可能与这些异常的红细胞反应
使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗－A、抗－B试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致红细胞表面包被IgG类抗体 三、血清标本的问题 小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。 免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO 抗体减弱 4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定 血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集。 血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞抗体，如抗－M、抗－I等。 患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗－A、抗－B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原位点，不发生凝集 四、分析和处理 1、重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2、查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史
ABO血型鉴定和交叉配血实验 [实验目的] 观察红细胞凝集现象。 学习ABO血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。 [实验原理] ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型，存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B 凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素，B型标准血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。 同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集，称为异族血细胞凝集作用。对于动物的天然血型抗体了解不多，而且免疫效价也很低，所以同种动物第一次输血，一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验，才能决定是否能相互输血。 [实验对象] 正常人。 [实验药品] A型B型标准血清。 [仪器器械] 双凹玻片，采血针，竹签，75%酒精棉球，干棉球，玻璃蜡笔（记号笔），尖头滴管，显微镜。 [实验方法与步骤] 1.ABO血型的鉴定： （1）取双凹玻片一块，在两端分别标上A和B，中央标记受试者的号码。 （2）在A端和B端的凹面中分别滴上相应标准血清少许。 图6.9-1 ABO血型鉴定示意图 （3）75%酒精棉球消毒无名指端，用采血针刺破指端，用消毒后的尖头滴管吸取少量血（也可用红细胞悬浮液，见下述），分别与A端和B端凹面中的标准血清混合，放置1～2 min后，能肉眼观察有无凝血现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。 （4）根据凝集现象的有无判断血型（图6.9-1）。
2.交叉配血实验： （1）分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血，制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴，加入装有生理盐水约1 ml的小试管中，即为2%的红细胞悬浮液。加盖备用。 （2）取双凹玻片一块，在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号，分别滴上它们的血清少许。 （3）将供血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴到受血者的血清中（称为主侧配血,图6.9-2）；将受血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（称为次侧配血），混合。放置10～30 min后，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应，说明配血相合，能够输血。如果主侧发生凝集反应，说明配血不合，不论次侧配血如何都不能输血。如果仅次侧配血发生凝集反应，只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。 [注意事项]
ABO血型鉴定与交叉配血 ABO血型鉴定与交叉配血 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A 和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1） 交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。本实验的目的是学习ABO血型鉴定的原理、方法以及交 叉配血方法。 1．仪器显微镜，离心机。 2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。 3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。
（一） ABO血型鉴定 1. 玻片法 （1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别 各滴入A及B标准血清一滴。 （2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相 接触。 （4）竹签两头分别混合，搅匀。 （5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细 胞聚集成团。 （6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。 2. 试管法 （1）取试管2只，分别标明A，B字样，分别加入相应标准血清2滴，各管加入受试者的红
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤 一. 1. 血型鉴定 排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。 2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者 2%-5%红细胞悬液。 3.加样 ABO正定型： 1 滴（ 50ul ）抗 A、抗 B 试剂加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。 ABO反定型： 1 滴（ 50ul ）患者血清加 1 滴（ 50ul ）反定型试剂红细胞。 RhD定型： 1 滴（ 50ul ）抗 D 血清加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。 4. 二. 结果判断 离心（ 2 档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法） 1.排管标记 01、 02、 03 及自身对照管 2. 加样各试管分别加入相应的患者血清 2 滴（ 100ul ）及筛选细胞 1 滴（ 50ul ）。 3.结果观察 离心（ 2 档），观察结果 先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。 各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书） 各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心 先观察上清液有无溶血 弃去上清液，留约，轻轻混匀 肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验） 各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀 肉眼观察凝集是否在1min 内消失 显微镜检查 三. 交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）
1.标本准备 分离供血者血浆与红细胞 三次洗涤，制备供血者 2%-5%红细胞悬液 2.排管标记 排管，主侧、次侧及自身对照管 3.加样 各试管分别加入相应的备检血清 2 滴（ 100ul ）及 2%-5%备检红细胞悬液 1 滴（ 50ul ）4.结果观察 离心（ 2 档），观察结果 先看上清液有无溶血 轻轻混匀，肉眼观察有无凝集 结果判断并记录 各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书） 各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心 先观察上清液有无溶血 弃去上清液，留，轻轻混匀 肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验） 各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀 肉眼观察凝集是否在1min 内消失 肉眼观察阴性者，显微镜检查 记录交叉配血结果 A、 B、O试验红细胞悬液的制备
疑难血型鉴定及交叉配血处 理流程(1)(1) -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程 一、正反定型不一致 1、重复试验（严格正规操作）。 2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。 3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原 抗体活降低引起。） 1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。 2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。 3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型： ①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+ 以上）； ②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。 ③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。 4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。） 5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。 6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。 4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。 二、交叉配血不合 （一）主侧端不相合 1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。 2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。 3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。 4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚 合物的血浆扩容剂引起假阳性。 5、试验系统被污染。 （二）次侧端不相合 1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。 2、病人与供血者的ABO血型不相合。 3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。 4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可 输血）。 （三）配血不合的主要因素 1、血型是否正确。 2、是否有自身抗体。 3、是否有同种异体抗体。
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程 一、正反定型不一致 1、重复试验（严格正规操作）。 2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。 3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。） 1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。 2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。 3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型： ①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）； ②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。 ③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。 4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。） 5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。 6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。 4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。 二、交叉配血不合 （一）主侧端不相合 1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。 2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。 3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。 4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂 引起假阳性。 5、试验系统被污染。 （二）次侧端不相合 1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。 2、病人与供血者的ABO血型不相合。 3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。 4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。 （三）配血不合的主要因素 1、血型是否正确。 2、是否有自身抗体。 3、是否有同种异体抗体。
疑难血型鉴定与疑难交叉配血 1、疑难血型鉴定 疑难血型就是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。而对于不规则抗体筛查与鉴定，主要就是对抗体种类与特性进行研究，尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析与处理：(１)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因，主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。 （2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。 流程图1 疑难血型鉴定流程
2014年１月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P１Pｋ血型系统得ｐ表型，经分子生物学基因测序,初步推断Ａ4GALT 基因第3外显子得９０3Ｃ＞G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。在此之后得工作中，通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B３等血型亚型，形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。 ２014年2月与2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。 2、疑难交叉配血 交叉配血就是确保安全有效输血得最重要环节,只有交叉配血真正相合（相容)才能保障临床输血治疗得安全性。现一般进行供者与受者AＢO、ＲｈD同型配血，只有配血相合时才能输血（特殊情况例外），当出现配血不相合时，则视为“疑难配血"。目前,输血科常用得交叉配血得方法主要包括聚凝胺法、卡式法与抗球蛋白法。当遇到异常得配血实验结果时,应以抗人球蛋白法为准，但任何一种实验方法都存在假阳性或假阴性得可能。因此,需在不同得情况采取不同得检测技术，建立适合本实验室得血液免疫学检测流程。在工作中遇到疑难配血时,可按照以下步骤进行分析与处理： （1）分析可能存在得原因先排除人为操作因素，再通过了解患者临床资料分析可能得原因，交叉配血不合包括主侧配血不合与次侧配血不合，其产生原因主要如下：①主侧配血不合:患者血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素;供着红细胞直抗阳性（相对少见).②次侧配血不合：患者红细胞黏附免疫球蛋白或抗体,直抗阳性，全凝集或多凝集；供着血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素（相对少见）。 (2）设计实验进行配血疑难配血流程见流程图2.
疑难血型鉴定和疑难交叉配血 1.疑难血型鉴定 疑难血型是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）的现象，多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。因此，疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体和特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学和分子生物学研究方法对患者样本进行检测。而对于不规则抗体筛查和鉴定，主要是对抗体种类和特性进行研究，尤其是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确的分析患者血清抗体的特异性。在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析和处理：（1）分析可能存在的原因先排除人为操作因素，再通过了解患者临床资料分析可能的原因，主要包括抗原类影响因素和抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等，抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。 （2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。 流程图1 疑难血型鉴定流程
2014年1月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例，经一系列血清学试验确证该患者为P1Pk血型系统的p表型，经分子生物学基因测序，初步推断A4GALT 基因第3外显子的903C＞G突变是患者p表型形成的分子生物学基础，该研究成果从不同角度和深度撰写论文，先后发表《临床军医杂志》和《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。在此之后的工作中，通过阅读文献自修学习，鉴定出Am、Bm、B3等血型亚型，形成了一套相对完整的疑难血型鉴定思路和流程。 2014年2月和2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗的患者，经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查和鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体的分布特征有了较为清晰的了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》，并形成了一套相对完整的不规则抗体筛查和鉴定流程。 2.疑难交叉配血 交叉配血是确保安全有效输血的最重要环节，只有交叉配血真正相合（相容）才能保障临床输血治疗的安全性。现一般进行供者和受者ABO、RhD同型配血，只有配血相合时才能输血（特殊情况例外），当出现配血不相合时，则视为“疑难配血”。目前，输血科常用的交叉配血的方法主要包括聚凝胺法、卡式法和抗球蛋白法。当遇到异常的配血实验结果时，应以抗人球蛋白法为准，但任何一种实验方法都存在假阳性或假阴性的可能。因此，需在不同的情况采取不同的检测技术，建立适合本实验室的血液免疫学检测流程。在工作中遇到疑难配血时，可按照以下步骤进行分析和处理： （1）分析可能存在的原因先排除人为操作因素，再通过了解患者临床资料分析可能的原因，交叉配血不合包括主侧配血不合和次侧配血不合，其产生原因主要如下：①主侧配血不合：患者血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素；供着红细胞直抗阳性（相对少见）。②次侧配血不合：患者红细胞黏附免疫球蛋白或抗体，直抗阳性，全凝集或多凝集；供着血清中存在同种抗体、自身抗体、冷凝集素、药物抗体、血浆蛋白紊乱等因素（相对少见）。 （2）设计实验进行配血疑难配血流程见流程图2。
人体解剖学实验讲义 制药与生命科学学院 主编：王永录 2008年9月
目录 实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验 (1) 实验二人体解剖学实验 (2) 实验三ABO血型鉴定与交叉配血 (4) 实验四心音听诊 (9) 实验五人体心电图的记录 (12) 实验六人体动脉血压的测量 (16)
实验一小白鼠、大白鼠及兔的解剖实验 【目的】：掌握小白鼠、大白鼠及兔的基本解剖结构。 【实验对象】小白鼠、大白鼠、兔 【实验器材和药品】乌拉坦、手术台、手术器械（止血钳、手术刀、动脉夹、手术剪、手术镊等）、注射器、手术线、纱布、脱脂棉等【实验步骤及观察项目】 取实验动物，乌拉坦麻醉后固定于手术台，解剖。观察以下组织器官，注意与人体组织结构的区别。 1.神经系统：中枢神经系统：脑：大脑、小脑、间脑、脑干。脊髓。 2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。 3.皮肤：表皮、真皮结构。皮肤的附属器，汗腺、毛发、指甲、皮脂腺。 4.消化系统：口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门，唾液腺、胰腺、肝及胆囊。 5.呼吸系统：鼻、咽、喉、气管、支气管、肺、胸膜及胸膜腔。 6.循环系统：心脏(心壁、心腔、瓣膜、乳头肌、腱索、冠状血管)。 7.泌尿系统：肾、输尿管、膀胱、尿道。 8.生殖系统：雌性生殖系统：卵巢、输卵管、子宫、阴道、雄性生殖系统：睾丸、输精管、精囊、前列腺、射精管。 【思考题】 小白鼠、大白鼠及兔与人体结构的区别？
实验二人体解剖学实验 【目的】： 1.了解人体主要系统器官的概貌。对人体有一个全面的了解。 2.掌握人体各个系统主要器官的基本结构。 3.重点掌握循环系统及神经系统的基本结构和功能。 【实验对象】 1 人体各组织器官模型标本。 2 人体实物标本。 【实验步骤及观察项目】 观察以下组织器官： 1.骨骼系统：骨的基本形态构造，骨连结的形式，关节的基本构造，骨骼组成，颅骨、脊柱、胸廓及骨盆的组成。上肢骨，下肢骨。 2.骨骼肌：肌肉的构造和形态。肌肉的连结与肌肉的作用。头面肌群、胸腹肌群、腰背肌群、上下肢肌群。 3.皮肤：表皮、真皮结构。皮肤的附属器，汗腺、毛发、指甲、皮脂腺。 4.消化系统：口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门，唾液腺、胰腺、肝及胆囊。 5.呼吸系统：鼻、咽、喉、气管、支气管、肺、胸膜及胸膜腔。 6.循环系统：心脏(心壁、心腔、瓣膜、乳头肌、腱索、冠状血管)、心脏的特殊传导系统、动脉、毛细血管、静脉。体循环、肺循环、淋巴循环。 7.泌尿系统：肾、输尿管、膀胱、尿道。 8.生殖系统：女性生殖系统：卵巢、输卵管、子宫、阴道、男性生殖系统：睾丸、输精管、精囊、前列腺、射精管。 9.神经系统：中枢神经系统：脑：大脑、小脑、间脑、脑干。脊髓。周围神经：脑神经、脊神经、植物性神经。 10.内分泌系统：甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、胰岛、性腺、垂体、下丘脑、松果体。
疑难血型鉴定及交叉配血处理流程 1 2 一、正反定型不一致 3 1、重复试验（严格正规操作）。 4 2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。 5 3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗6 原抗体活降低引起。） 1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。 7 8 2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。 9 3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型： ①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+ 10 11 以上）； 12 ②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。 13 ③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。 14 4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生15 抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。） 16 5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，17 或用灵敏度更高的血型卡做反定型。 18 6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性19 后再定血型。 4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。 20 21 二、交叉配血不合
22 （一）主侧端不相合 23 1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。 24 2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。 25 3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。 26 4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分27 子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。 28 5、试验系统被污染。 29 （二）次侧端不相合 30 1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。 31 2、病人与供血者的ABO血型不相合。 3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。 32 33 4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通34 过可输血）。 （三）配血不合的主要因素 35 36 1、血型是否正确。 37 2、是否有自身抗体。 38 3、是否有同种异体抗体。 39 （四）交叉配血不合常见原因分析
生理实验二------ABO 血型鉴定 [实验目的] 1.观察红细胞凝集现象。 2.学习ABO 血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。 [实验原理] （一）ABO 血型的分型 血型是指红细胞膜上特异性抗原的类型。ABO 血型系统有两种不同的抗原，即A 抗原、 B 抗原。而血清中还存在对应的两种抗体，即抗A 抗体和抗B 抗体。ABO 血型的分型是根据红细胞膜上是否存在A 抗原和B 抗原将血液分为A 、B 、AB 和O 型四类。 A 抗原与抗A 抗体相遇或 B 抗原与抗B 抗体相遇时，会发生红细胞凝集反应。当给人输入血型不相容的血液时，可发生血管内红细胞凝集和溶血反应，严重时可危及生命。 表1 ABO 血型系统的抗原和抗体 血型 红细胞膜上的抗原 血清中的抗体 A 型 A 抗 B B 型 B 抗A AB 型 A+B 无 O 型 无 抗A+抗B （二）ABO 血型的鉴定---正向定型 常规ABO 血型的定兴包括：正向定型和反向定型。 1.正向定型是用抗A 抗体和抗B 抗体检测未知红细胞上有无A 或B 抗原；反向定型是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗A 或抗B 抗体。 表2 ABO 正向定型 正向定型 血型 B 型血清 （抗A ） A 型血清 （抗 B ） O 型血清 （抗A ，抗B ） - - - O 型 + - + A 型 - + + B 型 + + + AB 型 一般A 型标准血清中含有抗B 抗体，B 型标准血清中含有抗A 抗体，因此可以用标准血清中的抗体与被测者红细胞反应，以确定其血型。 （三）ABO 血型的遗传由三个等位基因控制
人类ABO血型系统的遗传由9号染色体上的A、B和O三个等位基因来控制。在一对染色体上只可能出现上述三个基因的两个，分别由父母双方各遗传给子代。三个基因可组成六组基因型。由于A和B基因为显性基因，O基因为隐性基因，故血型的表现型仅四种。血型相同的人，其遗传基因型不一定相同。见表3 表3 ABO血型的基因型和表现型 思考题：A型、B型的父母，子女可能的血型？ 利用血型遗传的规律，可推知子女可能有的血型和不可能有的血型，可从子女的血型表现型来推断亲子关系。必须注意的是，法医学上依据血型来判断亲自关系时，只能做出否定的判断，而不能做出肯定的判断。 （四）正常人的血量 约占体重的7～8%，可分循环血量和储存血量。 （五）失血量对机体的影响 <10%，不出面明显的临床症状； 20%时，机体代偿功能不足以维持血压，就会出现一些列临床症状。 >30%，可能危及生命。 （六）安全输血的原则 输血是抢救伤员生命和治疗某些疾病的重要手段。输血不当，会给病人造成严重的损害，甚至危及生命。 1.输血前必须鉴定血型，坚持同型输血 要求供血者与受血者的ABO血型相合。对于生育年龄的妇女和需要反复接受输血的病人，还必须使供血者与受血者的Rh血型相合，特别要注意Rh阴性受血者产生抗Rh抗体的情况。 2.即使ABO血型相同，仍必须进行交叉配血试验 为保证输血安全，即使已知ABO血型相同，还必须分别将供血者的红细胞和受血者的血清以及受血者的红细胞与供血者的血清进行混合，观察有无凝集反应，称交叉配血试验。 交叉配血试验主要是检测受血者的血浆有无使供血者的红细胞发生凝集的抗体，
红细胞血型 血型：是指各种血液成分的遗传多态性，它受独立的遗传基因所控制。由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系称血型系统。 目前已发现的红细胞抗原有400余种，被归纳为27个血型系统。其中发现最早，且与人类输血关系最密切的是ABO血型系统，其次是Rh血型系统。 ABO血型系统 现知ABO遗传座位在第9号染色体长臂上，A基因的产物是N-乙酰半乳糖转移酶，它能把α-N-乙酰半乳糖分子接到一个前身物糖蛋白上，产生A抗原决定簇；B基因的产物是半乳糖转换酶，它能把α-D-半乳糖接到前身物糖蛋白上并产生B抗原决定簇；O基因不编码酶，因此是一个无效等位基因，故O型又被称为缺失型(nun type)；AB杂合子分别由A 和B基因产生AB两种酶。 不同个体红细胞膜抗原经上述某种遗传基因作用，形成A、B、O、AB四种正常型别和许多亚型。它们的分型原则是：红细胞上有A抗原，血清中有抗B抗体的为A型，红细胞上有B抗原，血清中有抗A抗体的为B型；红细胞上有A和B两种抗原，血清中不含抗A 和抗B的为AB型；红细胞上没有A和B抗原，血清中却有抗A和抗B抗体者为O型，H 抗原存在于ABO各型红细胞上，称为H物质(基础抗原)，但以O型最多。ABO血型系统的共同特点是红细胞上含有某种抗原，血清中就不存在对应的天然抗体。反之，血清中含有某种天然抗体，红细胞上就不存在其对应抗原，此规律是Landsteiner在1900年首先发现的，故称Landsteiner定律。根据此规律用标准抗血清检测红细胞上的抗原(正定血型)，或用标准红细胞检测被检者血清中抗体(反定血型)来判断血型。 ABO血型鉴定的应用价值主要在于： (1)在输血中寻找合适供体； (2)在皮肤及肾移植上的供体选择； (3)在不孕症和新生儿溶血症病因研究中的应用； (4)ABO血型检测还可用于亲子鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定，以及与某些疾病相关的调查等。 另外，在ABO血型系统中尚存在一些变异型，简称之为亚型。如A型中的A2、A3、Ax、Am等；在B型中的B2、B3、Bx、Bm等。它们共同的规律是红细胞上的抗原较弱，少数个体尚存在有不规则的同种抗体。有些亚型抗原甚至弱到与抗血清的反应难以用肉眼观察的地步，必须用吸收和放散的方法证实其抗原抗体反应的存在。 了解亚型的重要性在于： (1)易造成误定血型，可使配血不合； (2)有额外抗体(如抗A、抗B)者常使同型间配血发生困难； (3)误输入不相合的亚型血(抗原)，可使缺乏此抗原的受血者产生免疫性血型抗体，造成溶血的潜在威胁。 Rh血型系统 Rh血型常见的抗原(又称因子)有5种(理论上推测有6种)，分别是D、C、E、c、e(d 未能证实)。尚有一些变异型，如Du、Cw、En等。目前能识别的Rh系统抗原共4 3种。与ABO系统不同的是此系统很少有天然抗体，大部分抗体均由免疫刺激产生。 Rh系统中D抗原的免疫性最强，正常D阴性受血者接受一次D阳性红细胞输血后，产生抗体的机率>50％。因此，临床上往往以D抗原的存在与否定为Rh阳性或阴性。我国汉族人D阴性的比率较低，约占人群的0.2%～0.4%。因而Rh系统抗D所致的溶血反应与新生儿溶血病的比率远低于白种人，但输血和妊娠中不相合抗原所致的抗E、抗C、抗Ce、抗cE并非少见，应引起临床医生的高度重视。
血型鉴定和交叉配血技术的进展 医学界在输血治疗手段出现之初，曾发生过无数血的教训。1492年，首例输血由于使用的方法很原始，没有成功病人死亡；1667年法国国王御医Jean用羊血治疗精神病患者，偿试将动物血输给人导致死亡，这一严重事故使以后150多年没人再敢尝试输血治疗。1818年，英国产科医生James Blundell首次用人血输治患者，取得一定效果。1900年奥地利维也纳大学科学家Karl Landsteiner发现ABO血型及Rh血型系统，增加了人类对血型系统的认识。直到1907年，Hektoen建议通过献血者和受血者之间的交叉配血才提高了输血的安全性，Reuben Ottenberg完成了首例使用血型和交叉配血的输血实验，开启了现代输血医学的新纪元职称论文。 输血前试验包括血型鉴定、抗体筛选和交叉配血，其中交叉配血是关键[1]。交叉配血是在血型鉴定的基础上，进一步证实血型测定是否有误，以及受血者和供血者之间是否存在血型不合的抗原抗体反应，以保证受血者的输血安全。这一试验对于未进行红细胞血型抗体筛选的患者尤为重要，红细胞血型抗体有完全抗体和不完全抗体。完全抗体为分子量较大的IgM抗体，可在盐水介质的交叉配血中与相应的红细胞发生凝集反应；不完全抗体指ABO系统以外的其他血型抗体，为分子量较小的IgG抗体，在盐水介质中虽然能够结合红细胞上的抗原，但不能使红细胞凝集，必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集。根据红细胞血型抗体的特性，血型鉴定和交叉配血方法在不断产生，其检测技术也在不断发展。 1盐水交叉配血法
盐水法配血时，用生理盐水配制红细胞悬液，红细胞膜上由于唾液酸中的羧基离子而带负电，此负电荷形成的排斥力（Zeta 电位）使单个红细胞之间保持一定的距离，当其与血清相配合时，血清中的大分子完全抗体，能在相应红细胞之间搭桥，使其发生凝集，通过观察凝集或溶血来判断配血结果。盐水法是交叉配血的必做项目，能简便快速的检测IgM型抗体，发现血型是否错误或判断是否发生溶血，但不能检出不完全IgG型抗体[2,3]，不能有效的防止免疫性溶血性和非溶血性输血反应的发生，因此单用盐水法配血存在一定的危险性。 2抗人球蛋白交叉配血法（AGT） 1908年Carlo Moreschi利用分子搭桥的原理记录了抗人球蛋白试验。此法又称Coombs试验，分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验，是最经典、最早用于检查不完全抗体的方法，是目前交叉配血的金标准。本法灵敏，但是传统的抗人球方法，操作繁杂、反应时间较长、结果不易判断和统一、试剂效期短，不能满足输血检测及时准确的要求，因而未被国内广泛采用。 3 酶介质交叉配血法 酶法是采用蛋白水解酶（如菠萝酶、木瓜酶等）进行配血的方法。酶可以破坏红细胞表面带电荷的唾液酸，从而降低红细胞表面电荷，使其得以靠拢，因而能使具有特异性的不完全抗体与经酶处理的具有相应抗原红细胞发生凝集。此法的特点是操作较为简便，经济，但较难质控，时间长，实验重复性较差，而且酶可能部分的改变红细胞结构，使某些隐蔽的抗原得