疑难血型鉴定及交叉配血处理流程(1)(1)

疑难血型检测及混合配血处理流程1. 背景疑难血型检测及混合配血是在某些疑难血型识别或配血过程中的特殊情况下才使用的方法。

这种方法的目的是为了解决无法通过标准血型测试方法得出明确结果的情况。

2. 疑难血型检测流程以下是疑难血型检测的一般流程：1. 收集样本：采集患者的血液样本，并确保样本质量良好，避免污染或血浆过早凝固。

2. 准备试剂：准备用于血型测试的试剂，并确保其有效性和准确性。

3. 进行血型测试：使用适当的实验室技术（如凝集试验、抗体试验等）对血液样本进行血型测试。

4. 结果判断：根据试验结果和已知的血型特性进行判断，确定血型类型。

如果结果无法明确确定，则进行下一步的混合配血处理。

3. 混合配血处理流程以下是混合配血处理的一般流程：1. 确认混合配血需求：确定需要进行混合配血处理的具体情况，并了解患者的血型背景和特殊需求。

2. 寻找合适的供血者：根据患者的血型要求和供血者的血型特性，寻找适合的供血者进行混合配血。

3. 进行混合配血试验：将患者的血液样本与供血者的血液样本进行混合，进行混合配血试验。

这些试验可能包括凝集试验、交叉试验等。

4. 结果评估：根据混合配血试验的结果，评估血液样本的兼容性和相容性。

确定最佳的供血者和血液产品，以满足患者的需求。

5. 安全执行：根据混合配血结果，安全地执行配血程序，并确保血液产品的准确性和质量。

4. 注意事项在进行疑难血型检测及混合配血过程中，需要注意以下事项：- 严格遵循实验室操作规范，确保操作的准确性和安全性。

- 注意样本的质量和储存条件，避免污染或血浆凝固。

- 确保试剂和设备的有效性和准确性，避免误判和错误结果。

- 按照医疗机构的血液管理政策和程序进行操作，确保患者的安全和治疗效果。

5. 结论疑难血型检测及混合配血是在特殊情况下使用的血型测试和配血方法。

通过严格的操作流程和评估，可以获得准确和安全的血型结果以及满足患者需求的血液产品。

为确保操作的准确性和安全性，建议在医疗机构的指导下进行相关操作。

输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者，主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。

3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。

4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。

配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。

5.所需设备和试剂普通离心机，血型血清学专用离心机，水浴震荡仪，普通显微镜等。

6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》，确定ABO血型后，再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。

7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。

7.2.2我院库存血中无相合的血液时，应立即联系临床医生说明情况：①上述实际情况；②应送市血液中心进行“疑难配血”，会产生费用，存在配血不成功的可能：③详细告知家属，决定是否送市血液中心。

7.2.3家属同意后，由医生填写“免疫学申请单”，并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。

7.2.4输血科联系血液中心，并送血样。

7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验：执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集，表示配血相合。

对于AlHA患者，已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又都不相和时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。

交叉配血血标本采集操作流程用物：常规消毒盘一个，采血针头、止血带、试管（浅紫色）、小垫、用血申请单、血型检验报告单、试管标签、医嘱变更单、交叉配血登记表、病历、手套、手消毒液评估着装，洗手。

现在接到医嘱要为30床张丽贫血血色素低至60g/L的病人进行静脉输血。

输血前要先进行交叉配血血标本采集。

双人核对医嘱。

核对内容（用血申请单、血型检验报告单、试管标签、变更单，患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、凝血四项和免疫三项结果均无异常，患者已经签定输血知情同意书）核对完毕。

拿病历到病房评估病人。

进病房后核对床头卡和床号。

护士：阿姨你好，我是你今天的主管护士，我叫XXX，你可以叫我XX。

请问你叫什么名字？病人：张丽。

护士：可以给我看一下你的手腕带吗？病人：可以。

查看病人手腕带.护士：张阿姨你好，请问你现在觉得怎么样了？病人：有点头晕护士：哦，这位是你的家属吧，那我就跟你和你的家属先说一下，头晕是跟你贫血有关，你早上抽血血色素只有60g/L，现在医生开了备血医嘱，准备要给你输血，通过输血可以缓解你的症状，请问你以前输过血吗？病人：没有护士：请问你以前有没有对什么过敏（药物、食物等）病人：没有护士：谢谢。

为了输血安全，每次输血前都要进行交叉配血试验，交叉配血试验就是从你身体抽出2ml的血液和献血者的血液进行配合试验，如果两者无发生凝集反应，就可以输血了。

请问你明白了吗？病人：明白护士：张阿姨，可以先让我检查一下你的肢体及血管吗？病人：可以护士：肘关节这里的皮肤没有破损，无瘀斑。

血管弹性好，血管充盈，待会我就在这个位置给你抽血好吗？病人：好的护士：张阿姨，请问在抽血之前需要我协助你去大小便吗？病人：不用护士：好的。

那请你稍等一下，我先回去准备一下用物。

待会就过来帮你抽血。

病人：嗯。

评估环境，光线充足，清洁安静，适合无菌操作，便于抢救。

回到治疗室，检查用物在有效期内可以使用，洗手，戴口罩。

双人携病人和变更单到病房。

实验七ABO血型鉴定及交叉配血实验一、实验目的通过鉴定实验和配血实验来学习、掌握人类ABO血型的原理和方法。

二、实验原理血型是特指血细胞膜表面抗原的类型。

ABO血型系统是一类常用的血液分型体系。

在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。

A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。

血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。

在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型(表7-1)。

统不同，人群中Rh血型的不匹配非常罕见，尤其在黄种人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型还不到0.3%。

所以在医疗输血中，通常只考虑献血者和输血者之间ABO血型是否匹配。

ABO血型在人群中的分布，存在着地理环境及民族、种族的差异，在我国汉族人群中，各血型的比例由多到少依次是O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。

交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。

输血时，主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。

前者叫交叉配血的主侧，后者称为交叉配血的次侧。

只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”。

如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。

三、实验材料人外周血四、实验器材与试剂(一)器材采血针、尖头滴管、载玻片、1.5ml Eppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球和记号笔。

(二)仪器显微镜、离心机。

(三)试剂标准A血清、标准B血清、生理盐水、碘酒。

五、实验操作（一）ABO血型鉴定1．用记号笔在载玻片两端分别作好标记A、B。

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程一、正反定型不一致1、重复试验（严格正规操作）。

2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。

3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。

）1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。

2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。

3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型：①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）；②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。

③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。

4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。

）5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。

6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。

4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。

二、交叉配血不合（一）主侧端不相合1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。

2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。

3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。

4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。

5、试验系统被污染。

（二）次侧端不相合1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。

2、病人与供血者的ABO血型不相合。

3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。

4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。

（三）配血不合的主要因素1、血型是否正确。

第一部分血型鉴定一、主要流程离心→核收→登记→鉴定→复核→报告二、详细流程及操作步骤1.接收并检查标本是否合格（有无凝块，条码是否清晰完整等），若不合格则联系临床医生处理并登记；2.3000RPM离心5分钟，使红细胞与血浆分离；3.将标本核收入LIS系统中“戴安娜手工合血”项目下，并依次编号；4.登记：在“血型鉴定原始记录本”上登记病人信息和编号；5.检测前准备：(1)红细胞悬液配制：取软管，加入1ML生理盐水，再加入10UL红细胞后混匀待用；(2)反定型准备：取两只软管，分别标记“反A/反B”及编号，并分别加入混匀后的A1\B标准红悬一滴；6.检测：(1)正定型：取正定型鉴定卡片并标记病人姓名，检测日期和编号，撕开铝箔，每孔加入50UL上述制备并混匀好的红悬，卡式离心机离心9分钟后观察结果；(2)反定型：向上述制备并混匀好的“反A\反B”管中每管加入100UL待检者血浆，混匀静置1分钟后，3000RPM离心1分钟后观察结果；7.结果判读：先以反定型判读血型，再以正定型进行验证(1)反定型：于灯光下轻轻摇晃试管，出现絮状物表明有凝集，判定方式与正定型判断相反；(2)正定型：以凝胶柱上端出现红细胞凝集物为阳性，直接判读ABO和RH血型，并注意检查质控是否失效；8.结果登记并签字：将结果登记至“血型鉴定原始记录本”并签字；9.录入并审核发布报告：将结果录入“戴安娜手工合血”项目下，点击保存，最后检查一遍后审核报告。

第二部分临床配血及发血流程（一）主要流程：申请单与标本接收→大血型和抗筛检测→交叉合血→出库收费→发血（二）详细步骤：（1）申请单与标本接收：①接收到临床用血申请单后，首先明确用血类型为常规用血还是紧急用血，如果是紧急用血则需问清楚紧急用血的原因，病人目前全身情况等，并涉及后续交叉配血方法学选用的区别，常规用卡式合血法，紧急用凝聚胺合血法；②核对病人信息并检查标本合格之后，请医生在“标本接收与血袋回收记录本”上签字；大血型和抗筛检测：③检测前准备：1)大血型用标准红悬：取两只软管分别标记A1/B，按照4滴生理盐水：1滴混匀后红悬的比例配制适量的A1/B标准红悬待用；2)抗筛检测用红悬：同样取三支软管，分别标记I/II/III，按照4滴生理盐水：1滴相应抗筛红悬的比例配制适量待用；3)待检者红悬：按1ML生理盐水：10UL红细胞的比例于软管中配制并混匀待用；(2)抗筛检测：取抗筛卡三孔，标记病人姓名/日期及I/II/III编号，按编号分别加入I/II/III型红悬50UL，再向每孔加入25UL待检者血浆，温育器中温育15分钟后，于卡式离心机离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单上；(3)大血型鉴定：取大血型鉴定卡标注病人信息，检测日期后于A\B\C\D\E\Ctl孔每孔加入50ul待检者红悬，A1/B孔分别加入50ul相应的标准红悬和50ul待检者血浆后离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单；(4) 交叉合血根据患者的血型，申请量，病人血色素及全身状况结合库存及效期选择合适的血液品种和血量进行配血→取软管一支，将血袋上标记标签1贴于其上并扯下一段血辫将其内血液转移至软管中离心（3000RPM 3分钟）备用→以1ML生理盐水：10UL红细胞的比例分别配制献血者和受血者红悬备用→将血袋上另一标记标签撕下贴于申请单，同时将“病例备查”和“存档备查”两个标签撕下备用→用小纸片标注病人姓名和血袋号后与血袋一起放回冰箱保存。

ABO、Rh-D血型鉴定操作规程1.目的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采血2ml抗凝血,避免溶血试剂3. 试剂：长春博讯生物技术有限责任公司4.方法原理【原理】:标准血清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表面相应的抗原在盐水介质中发生特异性的凝集反应。

根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:一、玻片法(一般只能做正定型)【正定型】:1、取一张玻片,用蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每一等份左上角标明A、B、D,2、对应加入抗A和抗B抗D标准血清一滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、用洁净竹签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2大小;5、轻轻地连续倾斜转动玻片2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型血;B端凝集为B型血;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,无凝集则为RH阴性。

备注:玻片法可作为ABO血型初筛或复检;不适用于抗体鉴定和交叉配血;不适合检测ABO亚型。

二、试管法(盐水介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者血清(血浆)中相应的抗体发生特异性结合,形成肉眼可见的凝集反应,从而可推断出受检者的血型。

【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可自行新鲜配制);2、受试者血清或血清;3、洁净康氏试管。

【正定型】:1、取二支洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加入抗A和抗B血清1滴;3、分别加入病人红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离心1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型血;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型血;抗A管凝集则为A型血;抗B管凝集则为B型血。

【反定型】:1、取二支试管分别记上AC和BC;2、分别加入病人血清;3、对应加入A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离心1分钟,取出观察结果;【解释】:首先检查上清液有无溶血,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型血;A、B管均不凝集则为AB型血;A管凝集则为B型血;B管凝集则为A型血。