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血型鉴定及交叉配血

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血型鉴定及交叉配血 ppt课件

血型鉴定及交叉配血 ppt课件
1min
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性

血型鉴定与交叉配血

血型鉴定与交叉配血

＋表示凝集，－表示无凝集
对抗血清的要求※
①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm2。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
型 （2）立即水平离心1000r/min, 10min. 鉴 定 （3）观察及判断血型结果①阳性：对照管细胞沉
淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中。 ②阴性：对照管和检测管细胞沉淀均在管底。 ③试验失败：对照管细胞在胶上或 胶中，应重新做试验。
（4）报告方式：同生理盐水法。
注意事项
ABO 血 型 鉴 定
【注意事项】
交 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明， 叉 必须使用48h内的标本。 配 血 2.不能使用溶血标本。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
3.配血后，受血者/供血者的全部标本 须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。
交 叉 配 血
（ 盐 水 凝 集 法 ）
【方法学评价】
本法简易、经济、快速，缺点是
仅用于检查ABO血型系统的IgM 血型抗体是否相配，不能检出不 相配的IgG血型抗体。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
查找原因。
②异型配血时，主侧无凝集无溶血，次侧
有凝集无溶血，可以输少量血；如主侧、
次侧均不凝集或主侧凝集，不能输血，
需查找原因
交 叉 （1）受血者xxx（X型）血清＋供血者xxx 配 （X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 血 （ （2）供血者xxx（X型）血清＋受血者xxx
交叉配血试验的注意事项

血型鉴定和交叉配血

血型鉴定和交叉配血
耗材管理
实验耗材应严格筛选，确保质量合格，使用后应进行无害化处理。
实验室安全与防护措施
安全设施
实验室应配备必要的安全设施，如消防器材、应急喷淋装置等。
防护措施
实验室工作人员应佩戴个人防护用品，如手套、口罩、实验服等。
05
血型鉴定和交叉配血的最新研 究进展
血型鉴定技术的创新与发展
生物信息学方法的应用
研究新型输血方法和技术，降低输血并发症和不良反应的发生 率。
血液保护策略的探讨
探讨自体输血、血液回收等策略在临床的应用，降低异体输血的 需求。
公众教育及意识提升
加强公众对输血安全的认知教育型血
含有B抗原，在红细胞上表达，血清中产生 抗A抗体。
O型血
不含A抗原和B抗原，在红细胞上不表达， 血清中产生抗A和抗B抗体。
血型鉴定的原理和方法
原理
基于抗原-抗体的特异性反应，通过检测红细胞上的抗原和血清中的抗体来判 断血型。
方法
玻片法、试管法、微柱凝胶法等，其中微柱凝胶法是目前最常用的方法。
严格的质量控制
实施标准化操作，确保交叉配血结果的准确性和可靠性。
新技术的应用
运用分子生物学技术、基因测序等手段，对血液样本进行深度 分析和比对，提高交叉配血的准确性。
临床应用的拓展
将交叉配血技术应用于其他领域，如器官移植、新生儿的输血 等，扩大其应用范围。
输血安全与血液保护的研究热点
输血安全性的提升
血型鉴定和交叉配血
汇报人：xx 2023-11-04
目 录
• 血型鉴定 • 交叉配血 • 血型鉴定和交叉配血在输血中的应用 • 血型鉴定和交叉配血的实验室质量控制 • 血型鉴定和交叉配血的最新研究进展

血型及交叉配血实训报告

血型及交叉配血实训报告

一、实训目的通过本次实训，了解和掌握血型鉴定的基本原理和方法，熟悉交叉配血的操作步骤和注意事项，提高对输血安全性的认识。

二、实训时间2023年11月15日三、实训地点XX医学院检验科实验室四、实训人员XXX、XXX、XXX五、实训材料1. 血液样本：A型、B型、AB型、O型2. 试剂：抗A、抗B、抗D标准血清，生理盐水，玻片，竹签等3. 仪器：显微镜，离心机等六、实训内容1. 血型鉴定（1）操作步骤1）取玻片一张，用蜡笔将其分为三等份，分别标记为A、B、D。

2）分别加入抗A、抗B、抗D标准血清。

3）分别滴入待测血液样本。

4）用洁净竹签将试剂和血液充分混匀。

5）轻轻连续倾斜转动玻片25分钟，观察并记录。

（2）结果分析根据红细胞凝聚类型，可鉴别出A型、B型、AB型、O型。

2. 交叉配血（1）操作步骤1）取玻片一张，分为三等份，分别标记为主侧、次侧、对照。

2）主侧：分别滴入献血者红细胞和受血者血清。

3）次侧：分别滴入受血者红细胞和献血者血清。

4）对照：分别滴入生理盐水和抗A、抗B、抗D标准血清。

5）轻轻连续倾斜转动玻片25分钟，观察并记录。

（2）结果分析1）主侧、次侧均无红细胞凝聚，为配血相合。

2）主侧或次侧有红细胞凝聚，为配血不合。

七、实训结果1. 血型鉴定结果（1）待测样本1：A型（2）待测样本2：B型（3）待测样本3：AB型（4）待测样本4：O型2. 交叉配血结果（1）献血者A型，受血者B型：配血不合（2）献血者B型，受血者A型：配血不合（3）献血者AB型，受血者O型：配血相合（4）献血者O型，受血者AB型：配血相合八、实训总结1. 血型鉴定和交叉配血是输血安全的重要保障，必须严格按照操作规程进行。

2. 实训过程中，应注意观察红细胞凝聚情况，确保配血准确性。

3. 交叉配血实验结果对输血安全至关重要，必须严格执行。

4. 通过本次实训，加深了对血型鉴定和交叉配血的理解，提高了操作技能。

九、实训建议1. 增加实训次数，提高操作熟练度。

血型鉴定及交叉配血

血型鉴定及交叉配血

严格进行血型鉴定和交叉配血试验， 确保供、受体血型一致。
症状
寒战、高热、腰背酸痛、血红蛋白尿、 黄疸等，严重者出现血压下降、休克 和急性肾衰竭。
非溶血性输血反应
发生机制
与免疫因素有关，如过敏反应、 发热反应等。
症状
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹、咳嗽、 呼吸困难等，严重者出现过敏性
休克。
预防
对有过敏史的受血者进行预防性 用药，输血前仔细询问受血者过
O型血与疾病的关系
O型血人群患心血管疾病的风险 较低，但也有一定的风险。
O型血人群对某些病毒和细菌的 抵抗力较强，如流感病毒、肺炎
球菌等。
O型血人群患某些癌症的风险较 高，特别是结直肠癌和乳腺癌。
04 输血反应
CHAPTER
溶血性输血反应
发生机制
预防
由于供、受体的血型抗原不匹配，导 致红细胞在血液循环中溶解破坏。
A型血人群易感染某 些病毒和细菌，如流 感病毒、幽门螺杆菌 等。
A型血人群患癌症的 风险也相对较高，特 别是消化系统癌症。
B型血与疾病的关系
B型血人群患心血管疾病的风 险较低，但也有一定的风险。
B型血人群患某些自身免疫性 疾病的风险较高，如类风湿性 关节炎、系统性红斑狼疮等。
B型血人群易感染某些病毒和 细菌，如流感病毒、肺炎球菌 等。
敏史。
输血传播疾病
疾病种类
包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等。
传播途径
通过血液中携带病毒的微量红细胞或白细胞传播。
预防
对献血者进行严格的筛选和检测，采用病毒灭活 技术处理血液制品。
05 输血前检查
CHAPTER
输血前检查的内容
01
02
03

实验15 血型鉴定&交叉配血

实验15 血型鉴定&交叉配血
【操作】 正定型 （一）试管法： 1、制备5%RBC被检生理盐水悬液： 1mlN.S+2d末梢血→成大红色 2、取小试管2支，分别标记抗A、抗B 3、在抗A管滴加抗A标准血清1d、 抗B管滴加抗B标准血清1d 4、于两管各滴加1d被检悬液 5、1500r/min离心1min 6、观察结果 轻弹试管底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集， 呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。
一、 ABO血型系统鉴定
（二）玻片法
抗A标准检悬液1d 竹签混匀，静置15min，观察结果： 肉眼与显微镜下观察有无凝集
一、 ABO血型系统鉴定
结果判断： eg： 抗A标准血清+RBC悬液→凝集； 抗B标准血清+RBC悬液→不凝集 结果报告： 血型正定型为： X型
一、 ABO血型系统鉴定
【原理】 ABO血型系统天然抗体（IgM）分子量大， 能在生理盐水介质中与相应RBC抗原结合 发生凝集反应，以标准血清（抗A、抗B） 鉴定红细胞上的抗原（正定型），或用标 准红细胞鉴定被见血清的抗体（反定型）。 当出现凝集时，存在与已知抗体相应抗原 或已知抗原相应的抗体。
一、 ABO血型系统鉴定
｝A型
二、交叉配血试验
【原理】 将受血者的红细胞与血清分别同供血者的 血清与红细胞混合，观察有无凝集现象 ， 来判断受血者与供血者之间配血是否相合。
二、交叉配血试验
【操作】 1、准备：①制备受血者RBC悬液 ②制备供血者RBC悬液 ③制备受血者血清 ④制备供血者血清 2、取小试管2支，分别标记主侧、次侧 3、加血清和细胞悬液： 在主侧管中分别加②和③各1滴， 在次侧管分别加④和①悬液各1滴，混匀。 4、1 000r/min离心1 min。 5、观察结果 同ABO血型正定型试管法。

血型鉴定及交叉配血

血型鉴定及交叉配血

（四）疾病影响 1.白血病或某些其它造血系统恶性疾患 白血病或造血系统恶性疾患可能引起ABO或 RhD血型抗原表达变化，一般是“变弱不变强” 。 2.自身抗体 自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、淋巴瘤、红斑狼疮SLE等患者的自身抗体 干扰血型检定。 3.不规则抗体 输血、妊娠等产生的不规则抗体可能干扰反定型。 4.感染 G-菌感染可导致类B、全凝集或多凝集；某些病毒感染可导致高冷凝集素综 合征, 有时干扰反定型或正定型。 5.急性大量失血 外周血网织红细胞增多, 并出现有核红细胞, 年轻红细胞血型抗原强 度可能比成熟红细胞弱。
（2）输(异型)血 提示:临床3个月内输过异型血，正定型可能呈mf。鉴定:1)直接 抗球蛋白试验(DAT)阳性为有力佐证，但直抗阴性不能排除；2)离心法分离患者红 细胞复检血型；3)DNA鉴定(DNA抽提自外周血中白细胞，供者白细胞在受者外周 血中存活期短，一般不干扰血型鉴定)。 （3）造血干细胞移植 提示：临床ABO血型不同的造血干细胞移植后，如果植入 存活，受者在逐渐转变为供者血型的过程中，可能呈嵌合体状态，如果供者O型， 受者非O型，嵌合体可能呈现“A或B抗原减弱”样。鉴定:1)ABO正定型凝集呈mf； 2)DNA鉴定，这也是移植成功的指标之一。
（三）根据第二步的分类结果，设计针对性试验验证(第三步)
1.红细胞抗原减弱或丢失 （1）ABO亚型 提示:反定型试剂红细胞凝集明显, 正定型被检红细胞凝集弱或呈mf、 或抗-AB与抗-A(或抗-B)的凝集强弱不一致(一般是抗-AB凝集强于抗-A或抗-B)。鉴 定:1)血清学试验, 根据各种ABO亚型的特征, 选择相应的试验验证(吸收/放散试验, 血型 物质检测, 特殊的分型试剂, 如抗-H, 抗-A1, 等)；2)DNA鉴定,有些ABO亚型有DNA分 型试剂盒, 但一些少见或罕见的亚型DNA分型技术还不成熟, 必要时测序。

血型鉴定与交叉配血

血型鉴定与交叉配血

血型鉴定与交叉配血试验（1）ABO血型鉴定：正反定型标准血清+被检者红细胞标准红细胞+被检者血清被鉴定的血型抗A 血清抗B 血清抗AB血清（O型血清）A型红细胞B型红细胞O型红细胞+-+-+-A型-+++--B型+++---AB型---++-O型用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果正定型反定型（2）交叉配血试验：输血前必须进行交叉配血试验，其目的主要是进一步验证供者与受者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定错误导致输血后严重溶血反应。

Ø交叉配血试验常采用试管法进行Ø受血者血清加供血者红细胞悬液相配的一管称为主侧Ø供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为次侧（一）ABO血型系统（一）ABO血型系统交叉配血的结果判断：Ø同型血 主侧管与次侧管均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；不论何种原因导致主侧管有凝集时，则绝对不可输用。

Ø异型血 主侧管无凝集及溶血，而次侧管出现凝集，但凝集较弱，效价<1∶200，可以试输少量（不超过200ml）该型血液。

理论上可以，但实际上不允许这样做，并且做的临床实际价值不大。

配血方法的选择：ABO血型系统 Ø对无输血史及妊娠史者，可只作盐水介质凝集试验。

Ø对有反复输血史及妊娠史者，则应作间接抗球蛋白配血法。

Ø在48小时内输入5L或更多量的大量输血时，因需同时输入多名供血者的血液，因此除了进行受血者与各供血者的交叉配血外，还应坚持作供血者之间的交叉配血试验，只有相互交叉配合完全相合时才能输用。

（一）ABO血型系统一、红细胞血型系统受血者有输血史、妊娠史或短期内要大量输血时按规定要进行意外抗体的筛查4.ABO血型系统的临床意义（1）在输血上的意义Ø输血在临床上的应用颇为广泛，如严重失血或某些手术时，输血常是治疗和抢救的重要措施。

Ø为防止输血反应必须坚持同型输血。

血型鉴定及交叉配血

血型鉴定及交叉配血
理。
血型不符：重新核对血样和 血型鉴定结果，确保准确无 误。
溶血现象：血液中红细胞破 裂导致溶血，需重新进行交源自叉配血试验。交叉配血的注意事项
血型鉴定必须准确无误 受血者与供血者血型要匹配 交叉配血试验中应避免外界干扰因素 输血前必须进行全面检查，确保血液安全
血型鉴定和交叉配血的实 验操作
章节副标题
血型鉴定的重要性：在输血、器官移植和 新生儿溶血病诊断等方面具有重要意义。
血型鉴定的基本原理和方法
血型鉴定的定 义：通过检测 红细胞表面抗 原，确定个体 血型的过程。
血型分类：A 型、B型、AB 型和O型，每 种血型又分为 阳性和阴性两
种亚型。
血型抗原：红 细胞表面的抗 原物质，包括 AB抗原和H抗
原等。
血型抗体：存 在于血清中的 抗体，与红细 胞表面的抗原 发生特异性结
合。
血型鉴定的应用场景
输血：确保受血者血 型与供血者血型相匹 配，避免输血反应
亲子鉴定：通过血型 遗传规律，判断父母 与子女之间的亲缘关 系
法律鉴定：在刑事 案件或民事纠纷中， 通过血型鉴定来辅 助判定身份或亲子 关系
人类学研究：通过血 型分布研究人类迁徙、 种族起源等问题
实验前的准备
实验器材：试管、 注射器、抗A抗B 标准血清等
实验试剂：生理 盐水、A型血和B 型血样本
实验步骤：准备 器材和试剂，进 行交叉配血实验
注意事项：确保 器材和试剂无菌 、无污染，遵循 实验室安全规定
血型鉴定实验操作流程
准备试剂和器 材：确保所需 的试剂和器材 已经准备好， 包括抗A、抗B 血清、血型抗
记录结果：记录交叉配血试验的结果，并进行分析。如果存在凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液 不匹配，不能进行输血。如果未发现凝集反应，则表明供血者和受血者之间的血液匹配，可以进行输血。

血型鉴定与交叉配血

血型鉴定与交叉配血

• 约80%以上Rh阴性受血者在接受Rh 阳性血液后能产生抗体。
• 首次输血不合不发生输血反应,但再 次输血如受血者或者孕妇血浆中含 有Rh抗体时,与含有相应抗原血液相 遇，将引起严重的输血反应 或新生 儿溶血病。
• 输血前须定Rh血型
三、交叉配血、输血原则
1、交叉配血 主侧交叉配血：
受血者血清+献血者红细胞 次侧交叉配血:：
3、抗体
抗A、 抗B、抗AB属IgG 或IgM型，天然性 抗体以IgM为主，免疫性以IgG为主（如 输血、妊娠后）。 O血型血清内抗体属IgG。新生儿溶血与 IgG有关。抗体也终生不变
4、血型鉴定
用已知的标准血清和红细胞与待测的血液进行 特异性反应，根据凝集结果定
正向定型：用已知抗体特异性的血清检查红细 胞的抗原
反向定型：用已知血型的红细胞检查血清中抗 体
5. 意义
输血 辅助诊断新生儿溶血病 与临床意义
1900年发现ABO血型，1940年发现Rh血型 。
抗原有C c D E e五种 ，一般以D定型。
临床上将含有D抗原的红细胞称为Rh阳 性，不含D抗原的为Rh阴性.我国人群汉 族Rh（+）占99.7％， Rh(—)占0.3％。
血型（表型）红细胞上抗原 血浆中抗体 基因型
A
A
抗B
AA、AO
B
B
抗A
BB、BO
O
无
抗A、 抗B、抗AB OO
AB
A、B
无
AB
2、抗原
A、B抗原（含H抗原）在胚胎期已 形成，出生时抗原性不强，故胎 儿、新生儿定血型时凝集性差。
血型抗原终生不变。H抗原属分泌 型物质，存在各组织中，以唾液 为多，可辅助鉴定ABO血型。

实验八血型鉴定及交叉配血试验

实验八血型鉴定及交叉配血试验

17
抗球蛋白方法配血方法
阳
加
性
抗 球 蛋
离心 看结果
白
阴 性
医学ppt
18
酶介质配血方法
患 者
主 侧
次
主次侧
献
侧
均加酶
血
者
医学ppt
19
酶介质配血方法
37 ℃
阳
性
37℃
离心
水浴30分钟
看结果
阴
性
医学ppt
20
二、Rh定型 1、使用盐水介质试剂
用LIM配制的红细胞悬液，可以代替 由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质 试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效果 均相同。
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血 不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
医学ppt
14
交叉配血试验方法
• 盐水介质配血 • 酶介质配血
• 主侧配血
用患者血清与供
主
者红细胞进行试验
侧
次 • 次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
医学ppt
12
交叉配血的要求
• 主侧配血要求：
凝
– 绝对不可以有凝集或溶 血现象。
集
• 次测配血要求：
– 供血者血清加受血者红
细胞在允许范围内，可
不Байду номын сангаас
以有凝集现象，但不可 以有溶血。
凝
集
医学ppt
13
交叉配血的目的
医学ppt

血型鉴定与交叉配血

血型鉴定与交叉配血

结果
-
-+
+
-
O
+
--
+
-
A
-
++
-
-
B
+
+-
-
-
AB
Rh血型鉴定
一、试剂 1、IgM抗-D试剂血清 2、待检红细胞悬液
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红 细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗 体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗 体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→ 从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B 抗原→判断血型。
实验原理
血型不相容的两人血液 混合,则红细胞可凝集成簇
含某种凝 集原的红 细胞
含相应凝
IgG structure
2、 IgM抗体
分子最大的一种Ig，多以五聚体形式存 在。在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，因此又称为 完全抗体。
IgM structure
血型血清学检测的基本原理
Reaction of antibodies
（一）盐水介质法
ABO血型鉴定实验原理
+ 集素的血 清
红细胞凝集反应 (agglutination)
试剂
抗A、抗B试剂血清 5%的A型、B型红细胞悬液 受检者血清 5%的受检者红细胞悬液 取血一滴，加
入含1ml生理盐水的小试管内，混匀， 即得约5％红细胞悬液。
实验步骤

血型鉴定及交叉配血

血型鉴定及交叉配血

加抗D试剂1滴在玻片上， 再加1滴35—45%的被检 红细胞悬液，也可以是 悬浮于自身血浆中的红 细胞。
抗D（IgM）血型定型试剂 （单克隆抗体）
受检者35—45%的被检红细胞悬 液1滴，也可以是悬浮于自身血浆 中的红细胞1滴。
试管法
Rh血型鉴定
加入1滴RhD（IgM）试剂
离心机
抗D
混匀后离心
观察结果
抗-A 抗-A 抗-A 抗-A
抗-B 抗-B 抗-B 抗-B
血型：A型 血型：B型 血型：AB型 血型：O型
ABO 血型 凝集 示意 图
试管法 加入1滴抗A
ABO正定型鉴定
加入1滴抗B
抗
抗
A
B 混匀后离
心
在两支试管中各加入1滴受检者血 2~5%红细胞悬液
离心机
观察结果
检查是否 抗
抗
溶血 A
B
速度和时间选择以下 二种之一
3.临床诊断 1)白血病或某些其它造血系统恶性疾患导致ABO抗原减弱或漏检； 2)引起血浆蛋白紊乱的疾病(肝脏病、代谢性疾病、多发性骨髓瘤、某些慢性消耗性 疾病)导致反定型试剂红细胞非特异性凝集； 3)AIHA、淋巴瘤、SLE等疾病的自身抗体干扰ABO正、反定型； 4)真性红细胞增多症, 红细胞呈钱串状, 干扰ABO正定型; 5)细菌感染可能导致类B，全凝集/多凝集, 病毒感染可能产生病理性冷凝集素干扰 ABO定型； 6)急性大失血，既可能干扰ABO正定型, 扩容治疗又可能干扰ABO反定型。
（二）实验技术原因 1.标本混淆 如采错被检者, 红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。 2.静脉输液处采样 ABO抗体被输液稀释, 干扰ABO反定型。 3.采样不规范 用凝血块洗下红细胞检定血型，其中混有凝集程度不一的红细胞；用 血浆做ABO反定型, 操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。 4.试剂质量问题或漏加试剂 定型试剂过期失效，未达标准，被污染。操作中未遵循 “先加血清后加细胞”的原则，大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。 5.实验操作不规范 被检红细胞未洗涤, 非特异性粘附血浆蛋白, 或被检红细胞悬液过 浓或过稀。

血型鉴定与交叉配血试验

血型鉴定与交叉配血试验
（2） B亚型：B亚型不多见，命名也不统一， 一般称为B亚型或弱B。因其抗原性很弱，故B亚 型的临床意义不大。
3．ABO血型鉴定和交叉配血试验
（1）ABO血型鉴定：ABO血型抗体能在 生理盐水中，与相应红细胞抗原结合而发生凝 集反应。进行ABO血型鉴定时，采用标准的抗A 及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原（BethVincent直接试验），同时用标准的A型及B型红 细胞鉴定被检者血清中的抗体（Simonin反转试 验）。只有被检者红细胞上的抗原鉴定和血清 中的抗体鉴定所得结果完全相符时才能肯定其 血型类别。
用标准血清及标准红细胞鉴定ABO血型结果
标准血清+被检者红细胞 抗A血清 抗B血清 抗AB血清
（O型血清）
+
—
+
—
+
+
+
+
+
—
—
—
标准红细胞+被检者血清 A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞
—
+
—
+
—
—
—
—
—
+
+
—
被鉴定血 的血型
A型 B型 AB型 O型
（2） 交叉配血试验：输血前必须进行交叉 配血试验，其目的主要是进一步严正供者与受 者的ABO血型鉴定是否正确，以避免血型鉴定 错误而导致输血后严重溶血反应。为避免输血
问答题：
1、简述血型系统：
选择题：
1、根据红细胞表面的抗原和血清中的抗体判断血型， 正确的是（）
A、红细胞表面有A抗原，血清中有抗B抗体，为A型 B、红细胞表面有B抗原，血清中有抗A抗体，为A型 C、红细胞表面有A抗原，血清中有抗A和抗B抗体，为

血型鉴定与交叉合血

血型鉴定与交叉合血

• 注意事项： （1）Du 型人经输注D阳性红细胞后可产生抗D抗 体，所以患者为Du 型应作Rh阴性论，应输注Rh阴 性血液;供血者为Du 型，应作Rh阳性论，不应当输 给Rh阴性患者。 （2）Du 型妇女与Rh阳性丈夫生育的婴儿可以产 生新生儿溶血病。 （3）本实验不适合于自身凝集的样本的检查， 因自身凝集的样本容易引起假阳性。 （4）对于检测为弱阳性和阴性的样本，应采用 抗人球蛋白实验检测弱D抗原或不完全D抗原是否存 在，同时做进一步的确认实验。
2)按标记主侧管加受血者血清1滴，加供血者 红细胞悬液1滴。次侧管加供血者血清1滴，加 受血者红细胞悬液1滴，混匀，以1000r/min离 心1min，轻轻侧动试管，观察结果。室温较低 时，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集 反应。
结果判断及报告：
1) ABO同型配血,主侧和次侧均无溶血及凝集表示无 输血禁忌，可以输血。
22改良离子交叉配血试验改良离子交叉配血试验原理红细胞表面带有大量的负电荷当红细胞悬浮在电解质溶液中时阳离子会被红细胞的负电荷所吸引此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕而形成zeta电位zeta电位决定红细胞之间的相互排斥作用
血型鉴定与交叉合血
王炼红
解读
血型的定义及分类
血型是指各种血液成分的遗传多态性标记。血型抗 原不仅存在于红细胞上,也存在于白细胞和血小板上， 还存在于各种组织细胞、多数体液中，甚至不同个体 的血清蛋白间也存在型别的差异。 血型系统主要分类： 1.红细胞血型系统，其中又分为ABO血型系统、 Rh血型系统、MNS血型系统、P血型系统、Kell血型 系统、Kidd血型系统、Duffy血型系统 2.人类主要组织相容性抗原系统（HLA) 3.血小板血型系统（PHA） 4.血清型。血清型按蛋白质可分为免疫球蛋白、血 清酶、血清蛋白、补体等几大类。

血型及交叉配血检验

血型及交叉配血检验

1红细胞血型血型:是指各种血液成分的遗传多态性,它受独立的遗传基因所控制。

由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系称血型系统。

目前已发现的红细胞抗原有400余种,被归纳为27个血型系统。

其中发现最早,且与人类输血关系最密切的是ABO血型系统,其次是Rh血型系统。

ABO血型系统现知ABO遗传座位在第9号染色体长臂上,A基因的产物是N-乙酰半乳糖转移酶,它能把α-N-乙酰半乳糖分子接到一个前身物糖蛋白上,产生A抗原决定簇;B基因的产物是半乳糖转换酶,它能把α-D-半乳糖接到前身物糖蛋白上并产生B抗原决定簇;O基因不编码酶,因此是一个无效等位基因,故O型又被称为缺失型(nun type);AB杂合子分别由A 和B基因产生AB两种酶。

不同个体红细胞膜抗原经上述某种遗传基因作用,形成A、B、O、AB四种正常型别和许多亚型。

它们的分型原则是:红细胞上有A抗原,血清中有抗B抗体的为A 型,红细胞上有B抗原,血清中有抗A抗体的为B型;红细胞上有A和B两种抗原,血清中不含抗A 和抗B的为AB型;红细胞上没有A和B抗原,血清中却有抗A和抗B 抗体者为O型,H 抗原存在于ABO各型红细胞上,称为H物质(基础抗原),但以O型最多。

ABO血型系统的共同特点是红细胞上含有某种抗原,血清中就不存在对应的天然抗体。

反之,血清中含有某种天然抗体,红细胞上就不存在其对应抗原,此规律是Landsteiner在1900年首先发现的,故称Landsteiner定律。

根据此规律用标准抗血清检测红细胞上的抗原(正定血型),或用标准红细胞检测被检者血清中抗体(反定血型)来判断血型。

ABO血型鉴定的应用价值主要在于:(1)在输血中寻找合适供体;(2)在皮肤及肾移植上的供体选择;(3)在不孕症和新生儿溶血症病因研究中的应用;(4)ABO血型检测还可用于亲子鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定,以及与某些疾病相关的调查等。

另外,在ABO血型系统中尚存在一些变异型,简称之为亚型。

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一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
②洗涤：剩余的红细胞中加5ML NS，混 匀，洗涤 3000r/min ，弃上清，此步骤重复3次，
5min
最后一次上清应清亮并全部弃去。 ③配制悬液。（根据要求浓度）
如：5%：洗涤后压积红细胞1滴+19滴NS，混匀
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二、ABO血型鉴定：
（一）、正定型 （二）、反定型
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二、ABO血型鉴定（盐水介质）：
一、正定型 原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有 无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定 血型。
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二、ABO血型鉴定：
一、正定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬 液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
1min
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二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）； 若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
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（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
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二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
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二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
Ps
Ds
Pc
受血者
3%-5% 1%
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Dc
献血者
一、盐水介质法
原理：ABO血型天然IgM类抗体与对应的RBC
抗原特异性结合时，在盐水介质中出现肉 眼可见的凝集。通过判断是否凝集，判断 是否有血型不合的情况
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（一）盐水介质法
操作： 1、取两只小试管，标明主和次侧 2、主侧：受血者血浆2滴，献血者红细胞1滴
集。低离子液可降低可增强抗原、抗体间的吸引
力，促进血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合。
离心后加入再悬液（枸橼酸钠），可中和聚凝胺
的正电荷，正常红细胞表面恢复表面的负电荷， 使非特异性凝集散开，而特异性的抗原抗体结合 引起的凝集仍然存在。
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操作步骤
按照说明书进行
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谢谢！
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次侧：献血者血浆2滴，受血者红细胞1滴 3、混匀，离心，1000r/min,离心1min 4、观察结果：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC
浮起，观察有无凝集或溶血， 如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为
凝集（＋）； 如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
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Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
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Rh（D）血型鉴定
注意事项：
1、按照试剂说明书操作 2、先加血清，后加RBC悬液，可通过视觉判断以
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
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三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
实验十一：血型鉴定及 交叉配血
医学检验学院检验基础实验室
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实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
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临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
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二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
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二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格 注意：1、正反定型一致才能确定结果；
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
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交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
Ps：patient serum
Dc：donor cell
次侧：供血者血浆+受血者红细胞
Ds：donor serum
Pc：patient cell
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2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明 原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
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Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在