实验二：脂肪碘值的测定

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸（硫酸或盐酸）作⽤下，脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物，后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意：因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下，酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛，后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢，只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原，同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊（颗粒⼤）或黄⾊（颗粒⼩）的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值（价）是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数，可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键，能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼，所含的不饱和脂肪酸越多，与其双键起加成作⽤的碘量就越多，碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+－CH=CH－－CHI－CHI－本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后，⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量，然后计算出待测脂肪吸收的碘量，求得脂肪的碘值。

加成作⽤：IBr+－CH=CH－－CHI－CHBr－剩余溴化碘中碘的释放：IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘：I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题：何谓空⽩溶液和空⽩实验？空⽩实验有何意义？在各种分析⽅法中，为消除⼲扰，⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

② 15％KI溶液：100gKI溶于1000ml水中。
③ 0.1mol/L标准硫代硫酸钠：25gNa2S2O3加入煮沸后的蒸 馏水中，定容至10Байду номын сангаас0ml。 ④ 纯四氯化碳 ⑤1％淀粉溶液 ⑥ 植物油 2、 器材 碘瓶、滴定管（酸、碱各一根）、量筒、天平、移液器 。
四、操作步骤
四个碘瓶编号为1（样品0.2g）、2（样品0.2g）、3、4
六、注意事项
（1）碘瓶必须洁净、干燥，否则油中含有水分，引 起反应不完全。
（2）将近滴定终点时，用力振荡是本滴定成 败的关键之一，否则容易滴加过头或不 足。如震荡不够，CCl4 层会出现紫或红 色，此时应用力振荡，使碘进入水层。 （3）淀粉溶液不宜加得过早，否则滴定值偏 高。
七、 思考题
1、测定碘值有何意义？液体油和固体脂碘 值间有何区别？ 2、滴定过程中，淀粉溶液为何不能过早加 入？ 3、滴定完毕放置一些时间后，溶液应返回 蓝色，否则表示滴定过量，为什么?
溴化碘(IBr)的一部分与油脂的不饱和脂 肪酸起加成作用，剩余部分与碘化钾作用放 出碘，放出的碘用硫代硫酸钠滴定。
①加成反应：
I2+Br2
2IBr (Hanus试剂)
②碘的释放
③滴定
三、试剂与器材
1、试剂 ① Hanus液：储于棕色瓶中，13.20g碘加入1000ml 99.5％ 的冰醋酸溶液，冷却后加入3ml溴。
c( B S ) 126 .9 碘价＝ 100 m 1000
B：滴定空白所消耗Na2S2O3溶液的体积（ml） S：滴定样品所消耗Na2S2O3溶液的体积（ml） 126.9：碘（I）的相对原子质量 1000：毫克数转化为克数（单位换算） 100：碘价是100g脂肪所吸收的碘的质量 m：脂肪质量（g） c：Na2S2O3溶液摩尔浓度（mol/L）

脂肪碘值的测定思考题答案
先准备维伊斯试剂(Wijs reagent，氯化碘溶于醋酸中浓度0.2mol/1L)25ml，油脂样品的数量取决于不饱和度，要使维伊斯试剂有100%～150%的过量。

将样品溶于20ml四氯化碳中，再加入上述试剂，保持温度20～25℃，30min；加入20ml碘化钾溶液[15%(质量)]和100ml水，用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定，以淀粉溶液(10%)为指示剂。

要注意，如油脂分子结构中有两个或两个以上的烯基，则只有这些烯基处于非共轭状态时，碘值才有真实性。

表示有机物质不饱和程度的一种指标。

是样品所能吸收碘的重要百分数。

主要用于油脂、蜡、脂肪酸等物质的测定。

不饱和程度愈大，碘值也愈大。

例如干性油的碘值在130以上；半干性油的碘值在100~130之间；非干性油的碘值在100以下；陆地动物脂肪的碘值在80以下；海洋动物油脂的碘值在100以上。

测定碘值通常所用的方法有：
（1）油脂的四氯化碳溶液以碘和二氯化汞的乙醇溶液滴定；
（2）以氯化碘的冰醋酸溶液滴定；
（3）以含有吡啶、溴和浓硫酸的冰醋酸溶液滴定。

乳油的碘值通常在24～26之间。

目 录1 使用范围 (2)2 方法来源 (2)3 原理 (2)4 试剂与试药 (2)5 仪器与设备 (3)6 分析步骤 (3)7 质量控制 (6)1使用范围本方法适用于动植物油脂、脂肪酸类、醇类、胺类以及由它们制成的表面活性剂等原料的碘值测定。

2方法来源GB/T 5532-2008 动植物油脂碘值的测定GB/T 13892-2012 表面活性剂碘值的测定GB/T 601-2002 化学试剂标准滴定溶液的制备3原理一定量的试样溶解在溶剂中，先加入韦氏（Wijs）试剂反应一定时间后，再加入碘化钾溶液与剩余的氯化碘溶液反应，用硫代硫酸钠溶液滴定析出的碘，接近滴定终点时加入淀粉溶液指示剂，继续滴定直到蓝色刚好消失，即为滴定终点。

主要化学反应式如下：R1CH=CR2+ICl→R1CHI—CHClR2 (1)ICl+ KI →KCl+I2 (2)I2+2NaS2O3→2Na I+ Na2S4O6 (3)4试剂与试药方法所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂。

所用水应符合GB/T6682中三级水的要求。

4.1混合溶剂:将环己烷和冰乙酸等体积混合。

注意：所用冰乙酸不应含有还原性物质。

检查方法：取2mL冰乙酸，加少许重铬酸钾及硫酸，若呈绿色，则证明有还原性物质存在。

4.2韦氏（Wijs）试剂将25 g一氯化碘溶解在1500 mL冰醋酸中，搅拌后置于棕色小口玻璃瓶内，在25 ℃以下保存。

（韦氏试剂稳定性较差，使用器皿必须洁净，干燥，需要做空白试验，也可以直接购买商品化的韦氏试剂）。

4.30.5%淀粉指示剂称取0.5 g淀粉，加30 mL水使成糊状，在搅拌下将糊状物加至100 mL水中，煮沸3 min，淀粉溶液放置4℃冰箱最长不超过五天。

4.410%的碘化钾溶液称取10 g碘化钾加60 mL水溶解，定容至100mL备用（现用现配，碘化钾溶液中不含有碘酸盐或游离碘，且颜色呈黄色了也不可以用）。

4.5硫代硫酸钠标准溶液（可以直接购买商品化的标准试剂）S2O3·5H2O) = 0.1 mol/L，临将24.9 g五水硫代硫酸钠溶于蒸馏水中，稀释至1000 mL，即c(Na2使用前需要标定（见附录）。