博来霉素诱导的肺纤维化动物模型

不同造模方式对博莱霉素所致小鼠肺纤维化的影响1.南京医科大学附属泰州人民医院江苏泰州 2253002. 2.上海交通大学医学院附属新华医院老年科上海200092【摘要】目的建立博莱霉素诱导肺纤维化小鼠模型，比较经鼻腔滴入和经气管内滴入的成模差异。

方法将36只C57BL/6J雄性小鼠采用随机数字表法分成阴性对照组（C组）、鼻腔给药组（N组）和气管给药组（I组），每组12只。

N组和I组分别经鼻腔滴入和气管内一次性滴入博莱霉素5 mg /kg诱导肺纤维化模型，C组经鼻腔滴入5 mg /kg生理盐水。

随机选取各组4只小鼠于造模14天后处死后取肺组织。

计算肺系数；统计小鼠体重变化和生存曲线；HE和Masson染色观察小鼠肺组织病理变化，并进行Szapiel评分。

结果给予博莱霉素造模后，N组和I组小鼠均出现体重增长程度的下降；肺系数较C组上升，其中I组相比N组肺系数上升更明显；HE和Masson染色后N组和I组肺组织炎症和纤维化程度明显加重，并通过评分比较发现I组相比N组肺组织炎症和纤维化程度明显加重。

结论经鼻腔滴入和气管内滴入博莱霉素分别制备肺纤维化小鼠模型，其纤维化程度存在一定程度差异，气管内滴入博莱霉素的纤维化程度更高。

【关键词】博莱霉素；肺纤维化；肺系数特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是肺组织受损后异常修复所致的病理现象，早期以弥漫性肺泡炎、肺间质炎症为主，晚期发展为间质纤维化，表现为成纤维细胞异常增殖和细胞外基质过度沉积，导致肺组织结构破坏、功能受损[1]。

本病预后极差，多数患者确诊后中位生存时间仅2~3年[2]。

博来霉素（Bleomycin，BLM）制备肺纤维化模型是应用最广泛、研究最好的方法[3]，可以诱导出明显的纤维化反应，并且在IPF患者中显示出几种组织学特征[4, 5]。

既往研究表明，博莱霉素的肺纤维化模型中评估肺组织炎症和纤维化的最佳时间是博莱霉素滴入后第14天[6]。

万方数据　万方数据　万方数据陶章．等．不同劫量博蕞霉素致小鼠秭纾维化摸墅的磁较对照组：肺泡形态正常，壁纤细，间质中无炎症细胞浸润，见图１ａ。

２ｍｇ，ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋，小片肺组织实变，其中有炎细胞浸润和少量胶原沉积，见图１ｂ。

３．５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋＋，肺组织中有较多的小片状实变区，实变区间见肺泡壁增厚，间隔增宽，有较多的炎细胞浸润和胶原沉积，见图１ｃ。

５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋＋＋，可见大片的肺实变，大量胶原沉积，见图１ｄ。

２．６各组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的测定见表３。

表３各组小鼠肺组织中羟脯氦酸含量的变化Ｔａｂｌｅ３Ｃｈａｎｇｅｓｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍｉｃｅｉｎｔｈｅｂｌｅｏｍｙｃｉｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ（ｘ－ｔ－Ｓ，ｍｇ／ｇ）Ｇｒｏｕｐ几ＨｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔＣｏｎｔｒ０４１５０。

４４ｆ；±０．００５Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ２ｍｇ／ｋｇ６０．５１２±－－０．０１７．３．５ｍｇ／ｋｇ４０．６２１±－０．００７ａ８Ｐ‘０．０５．临．ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组因小鼠存活数量太少不做统计分析，表３可见，各组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量从高到低依次为５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组（１只小鼠，肺组织羟脯氨酸含量为０．６６０ｒａｇ／ｇ）、３．５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组、２ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组和对照组。

３讨论博莱霉素是从轮生链霉菌中提取的一种抗肿瘤药物，国产平阳霉素是其单体，毒性小于博莱霉素。

它们的毒副作用之一是引起肺纤维化，用博莱霉素制作的肺纤维化模型，其病理组织学和生理学改变与人类肺纤维化近似，因此成为肺纤维化造模的常用药物。

１９７４年，Ａｄａｍｓｏｎ等删首次采用腹腔多次注射博莱霉素的方法，建立了鼠肺间质纤维化动物模型。

此后，一些学者采用不同动物及不同方式建立的模型逐渐增多（包括猴、犬、兔、豚鼠、大鼠、小鼠），采用多种途径（静脉、腹腔、皮下、气管）给药，均可成功建立模型。

医学＊［基金项目］内蒙古自治区人民医院院内基金（编号：２０１６０９６）△［通讯作者］Ｅ－ｍａｉｌ：７７５４５３６９７＠ｑｑ．ｃｏｍＤＯＩ：１０．１６０９６／Ｊ．ｃｎｋｉ．ｎｍｇｙｘｚｚ．２０２０．５２．１１．００４肺功能检查在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的实验研究＊高　丽１，董　润２△（１．内蒙古自治区人民医院呼吸与危重症医学科，内蒙古呼和浩特　０１００１７；２．郑州市中心医院呼吸与危重症医学科，河南郑州　４５００００）［摘要］目的　由于条件限制，在许多大鼠疾病模型中无法检测肺功能的变化情况，检测肺纤维化大鼠的肺功能对实验动物的肺功能应用具有重要意义。

方法　１２只健康ＳＤ大鼠，随机分成正常对照组和博来霉素组，气管注射博来霉素（５　ｍｇ／ｋｇ）复制大鼠肺纤维化模型。

于第２８日腹主动脉放血法处死，比较两组体质量及肺质量，计算肺系数，检测两组大鼠肺功能和肺组织中羟脯氨酸的含量。

结果　与正常对照组比较，博来霉素组大鼠肺系数明显升高，博来霉素组羟脯氨酸的含量明显升高，同时ＨＥ和ＭＡＳＳＯＮ病理染色提示大鼠肺纤维化模型复制成功。

大鼠肺功能检查结果：用力肺活量（ｆｏｒｃｅｄ　ｖｉｔａｌ　ｃａｐａｃｉｔｙ，ＦＶＣ）、５０％肺活量的呼气流速（ｆｏｒｃｅｄ　ｅｘｐｉｒａｔｏｒｙ　ｆｌｏｗ，ＦＥＦ）、最大呼气流量（ｐｅａｋ　ｅｘｐｉｒａｔｏｒｙ　ｆｌｏｗ，ＰＥＦ）均较正常对照组明显降低，且具有统计学意义，另外，博来霉素组ＦＥＶ０．１／ＦＶＣ较正常对照组升高。

结论　大鼠肺纤维化模型中肺功能检测技术基本成熟，可以进一步扩大样本量进行研究。

［关键词］大鼠肺纤维化；博来霉素；肺功能；肺系数 ［中图分类号］Ｒ５６３　［文献标识码］Ａ　［论文编号］１００４－０９５１（２０２０）１１－１２９１－０３Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｌｕｎｇ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　Ｔｅｓｔ　ｉｎ　Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄＰｕｌｍｏｎａｒｙ　Ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎ　Ｒａｔｓ＊ＧＡＯ　Ｌｉ　１，ＤＯＮＧ　Ｙｕｎ２△（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｃａｒｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｉｎｎｅｒ　ＭｏｎｇｏｌｉａＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓ　Ｒｅｇｉｏｎ，Ｈｏｈｈｏｔ　０１００１７　Ｃｈｉｎａ；２．Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｃａｒｅ　ＭｅｄｉｃｉｎｅＡｂｓｔｒａｃｔ，Ｚｅｎｇｚｈｏｕ４５００００　Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｂｅｃａｕｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ；ｉｔ　ｉｓ　ｉｍｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｎｙ　ｒａｔ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｍｏｄｅｌｓ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉ－ｂｒｏｓｉｓ　ｉｓ　ｏｆ　ｇｒｅａｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｔｏ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏ－ｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｈｅａｌｔｈｙ　ＳＤ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｇｒｏｕｐｅｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｒａｎｄｏｍ　ｎｕｍｂｅｒ　ｔａｂｌｅ．Ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎ－ｄｕｃｅｄ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｂｙ　ｉｎｔｒａｔｒａｃｈｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ．Ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ：ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｎａｍｅｌｙ　ｒａｔｓ　ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ　ｉｎｔｒａｔｒａｃｈｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｉｎｅ；ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｎａｍｅｌｙ　ｒａｔｓ　ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ　ｉｎｔｒａｔｒａｃｈｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＢＬＭ；Ｂｙ　ａｎａｌｙｚｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆｔｈｅ　ｒａｔｓ，ｌｕｎｇ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ，ａｎｄ　ｌｕｎｇ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ　Ｈ＆Ｅ　ａｎｄ　Ｍａｓｏｎ＇ｓ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎｊｕｒｙ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｌｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｄｉｓｏｒｄｅｒ　ａｎｄ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｋｉｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＢＬＭ－ｔｒｅａｔｅｄ　ｒａｔｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｆｅａ－ｔｕｒｅｄ　ａｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ，ａｎｄ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐａｒｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｄｉｓｏｒｄｅｒ　ｉｎｔｈｅ　ｌｕｎｇ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ，ｌｕｎｇ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ　ｉｎｔｈｅ　ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ　ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ，ｗｉｔｈ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ．Ｔｈｅ　ｒｅ－１９２１内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ　Ｍｏｎｇｏｌｉａ　Ｍｅｄ　Ｊ　２０２０年第５２卷第１１期ｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：ＦＶＣ（ｆｏｒｃｅｄ　ｖｉｔａｌ　ｃａｐａｃｉｔｙ）、５０％ＦＥＦ（ｆｏｒｃｅｄ　ｅｘ－ｐｉｒａｔｏｒｙ　ｆｌｏｗ）、ＰＥＦ（ｐｅａｋ　ｅｘｐｉｒａｔｏｒｙ　ｆｌｏｗ）ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ａｎｄ　ｉｔ　ｈａｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｔｈｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｉｎ　ｒａｔ　ｐｕｌｍｏ－ｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｍｏｄｅｌ　ｉｓ　ｍａｔｕｒｅ，ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｅｘｐａｎｄ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｓｉｚｅ　ｆｏｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ．［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ；ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ；ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｌｕｎｇ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ 由于条件限制，在许多大鼠疾病模型中无法检测肺功能的变化情况。

微波改良Masson三色法在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中应用林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【摘要】@@ 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病.主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化,最终导致肺脏结构和功能严重破坏,其发病机制尚未明确.研究发现,经气管内灌注博莱霉素(bleomycin, BLM)可以造成大鼠肺纤维化,此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似,因此,对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究,探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度,为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据.本文用显示大鼠肺纤维化的效果来比较微波改良Masson三色法和VG染色法.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2011(027)009【总页数】3页(P1014-1016)【关键词】微波改良Masson三色法;VG染色法;肺间质纤维化;博来霉素【作者】林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【作者单位】广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院附属肿瘤医院ICU,广州,510095;汕头大学医学院附属第二人民医院呼吸内科,汕头,515041;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120【正文语种】中文【中图分类】R446特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病。

主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化，最终导致肺脏结构和功能严重破坏，其发病机制尚未明确。

研究发现，经气管内灌注博莱霉素(bleomycin，BLM)可以造成大鼠肺纤维化，此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似，因此，对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究，探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度，为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据。

第5期邱雨雨，等:抗肿瘤药物博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型-55 -抗肿瘤药物博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型邱雨雨，张港，王鸣尚，杨小龙，董平轩*(德州学院医药与护理学院，山东德州253023)摘要:博来霉素(Bleomycin ,BLM ) 一 有抗肿瘤活性的天然产物，临床中具有导致肺纤维化损伤的副作用o 尝试 鼠肺间质纤维化简单易 实验方法’ C57BL/6小鼠，雌，随机分组° BLM 组一 注 酸博 素200 mg ( kg • bw )，对照组一次性注射相同剂量的生理性盐水’实验第21 d 实验组和对照组的小鼠留取肺组织，观察该实验中的小鼠肺 部 化,体重变化以及 ':与 雌 鼠对比,BLM 鼠肺部病理 主要为典型弥漫性炎、成纤维化部病理性基质 部质沉积 部病理变化特征,雌雄性别无明’ 有小鼠死亡 高，且病理变化不均一的特点’更加优化的肺纤维化 及其分子机制的深 有助于开发治疗肺纤维化 ’关键词:博 素;肺纤维化;尾静脉注射# C57BL/6 /J 、鼠中图分类号:R979C 文献标识码：A 文章编号：1008-021X (2021) 05-0055-03Pulmonary Fibrsis Model Inducee by Tail Vein Injection Bleomycin in MiccQiu Yuyu , Zhang Nang , Wang Mingshang , Yang Xiaolong , Dong Pingxuan *(Medicine and Nursing Department of Dezhou University , Dezhou 253023, China )Abstracc : Bleomycin was antitumor agent employed clinically for the treatment of several types of cancer. Objective of this study isioeipeooeiheopiomaemeihodsoobeeomycon ioonducepuemonaoyooboososon moce.40 C57BLL6 moceweoeoandomeydoeoded onioiwogooups : BLM maeegooup , BLM oemaeegooup , coniooemaeegooup and coniooeoemaeegooup.BLM eipeoomeniaegooup was oneecied woih beeomycon 200 mgL ( kg +bw ) once , whoeeiheconiooegooup wasoneecied woih ihesameamounioonoomaesaeone.Onihe21siday , a e ihemoceweoeko e e d , and iheeungio s uesooihemoceweoeiaken ioobseoeewheiheoihepaihoeogocaesiouciuoeooiheeungiossuewaschanged , and ihenoomaeweoghiand paoed woih iheconiooegooup moce , ihepuemonaoypaihoeogocaechangeson BLM gooup weoechaoacieoozed byiypocaedo o useioacheaepneumonoa ,eocaepaihoeogocaesioomaehypeopeasoaand ooboocyieooooboobeasi , deposoioon ooeiogenoussioomaon eocaepuemonaoyonieosioioumand eocaeaeeeoeaocaeoiy.Seeen BLM modeemocedoed and ihemooiaeoiyoaiewas35%.In ihosmeihod eipeoomeni , iheC57BLL6mousemodeeooeaoeypuemonaoyooboososwasesiabeoshed byoneeciongsongee-eaoge-dosebeeomycon ( 200 mgL ( kg +bw ) ) on iaoeeeon , aeihough iheeaoeydeaih oaieoomoceoseo i eehogh , and showed onhomogeneousooboososon iheeung.Then ihesompeeande o ecioeeiechnocaeioesiabeosh ooboososmodeeand oeseaochesoooismechanosm wo e makeoiheepoueiooeseaoch and deeeeopmenimedoconesooopuemonaoyooboosos.Key words : bleomycin ； pu —nona — fibrosis ； mil vein injection ； C57BL/6 mice博来霉素是从轮生链霉菌(Strep —myces ver/ci/is)培养液 中分离 一 基糖 产物，其结构如图1所示。

腹腔注射博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型的长期稳定性苏敏红;江宁;李洪涛;王振国;谢玉芬;郑晓滨;涂常力;黄瑾【摘要】背景：至今特发性肺间质纤维化尚无特效治疗药物，这与该疾病动物模型尚不能完全模拟特发性肺间质纤维化病理表现有极大关系，因此建立更理想的动物肺间质纤维化模型对研究人类特发性肺间质纤维化的发病机制及研制有效治疗药物显得至关重要。

<br> 目的：建立一种更符合人类特发性肺间质纤维化病理组织特征的小鼠肺纤维化模型。

<br> 方法：雄性C57BL/6小鼠70只，随机均分为两组，博来霉素每周2次组(A组)，腹腔注射博来霉素35 mg/kg，2次/周，共注射8次；博来霉素每周1次组(B组)腹腔注射博来霉素35 mg/kg，1次/周，共注射8次。

分别于注射完第8次博来霉素后2，4，6，8，10周各处死5只小鼠，取肺组织进行羟脯氨酸测定、苏木精-伊红、Masson和免疫组织化学染色。

<br> 结果与结论：①两组在第8次腹腔注射后2，4，6，8，10周均出现不同程度的肺泡炎、肺纤维化。

A组肺泡炎、肺纤维化评分于2周开始逐渐升高，于6-8周达高峰，持续至10周仍无明显降低；B组肺泡炎、肺纤维化评分于2周最高，随后逐渐波动式下降，至6周开始明显比A组评分低(P<0.05)；②兔疫组织化学显示Ⅰ型胶原蛋白主要沉积在胸膜下、血管周围和肺泡间隔，与 Masson染色所见的胶原纤维分布一致；转化生长因子β1和α平滑肌动蛋白在肺泡炎和肺纤维化部位表达增多。

A组小鼠肺Ⅰ型胶原蛋白、a-SMA、转化生长因子β1、羟脯氨酸含量于2周开始持续升高，于6-8周达峰值；B组于2周最高，随后逐渐降低，于4周时肺a-SMA和转化生长因子β1表达明显低于A组(P<0.05)，于6周时肺Ⅰ型胶原蛋白表达和羟脯氨酸含量明显低于A组(P<0.05)；③结果表明，1周2次腹腔注射博来霉素35 mg/kg诱导小鼠肺纤维化模型有极好的稳定性，且操作十分简单，可重复性好，其反复损伤修复过程、病理变化、细胞因子变化都与人类特发性肺间质纤维化类似，对研究人类肺纤维化，尤其是特发性肺间质纤维化有重要意义。

三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较王志超;冯凡超;武琦;顾诚;徐泳;周贤梅【摘要】目的利用腰穿针气管插管、留置针气管插管和气管切开三种不同方法对C57BL/6J小鼠进行气管注射博来霉素诱导肺纤维化,探索腰穿针气管插管造模法、留置针气管插管造模法及气管切开造模法这三种方法对小鼠的影响.方法将120只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组和气管切开模型组,分别利用不同方法气管注射博来霉素,观察小鼠的一般情况(体重变化和存活率)、组织病理学改变(HE和Masson染色)和羟脯氨酸水平.结果腰穿针气管插管模型组、留置针气管插管模型组造模后28 d小鼠体重均高于气管切开模型组,有统计学差异(P<0.01、P<0.001);各组小鼠存活率存在差异,除空白组外,气管切开模型组最低,留置针气管插管模型组最高,空白组和气管切开模型间有统计学差异(P<0.05),其余各组间没有统计学意义;肺组织肺泡炎及肺纤维化程度由高到低依次为气管切开模型组、腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组,且造模后21 d最重;气管切开模型组病灶分布均匀,腰穿针气管插管模型组和留置针气管插管模型组分布不均匀,以气管周围肺组织较重;腰穿针气管插管模型组和气管切开模型组造模后28 d羟脯氨酸水平显著高于空白组(P<0.01、P<0.001).结论综合多种因素,腰穿针气管插管造模法是三种造模方法中的最佳方法.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2019(029)005【总页数】7页(P51-57)【关键词】博莱霉素;肺纤维化;动物模型;气管灌注;小鼠【作者】王志超;冯凡超;武琦;顾诚;徐泳;周贤梅【作者单位】南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏省中医院呼吸科,南京 210029【正文语种】中文【中图分类】R-33特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是特发性间质性肺炎的最常见形式，是一种慢性的、进行性的、不可逆性的和致命性的肺部疾病，主要发生在中老年人(诊断中位年龄为66岁，范围为55～75岁)，局限于肺部，具有典型间质性肺炎的病理学或放射学改变[1]。